Mit mutat az enzim immunoassay vérvizsgálat? Enzim immunoassay vérvizsgálat: értelmezés, módszerek

ELISA vagy enzim immunoassay - modern módon számos patológia, köztük a fertőző patológia meghatározása. A vizsgálatot laboratóriumi körülmények között végzik. A technika fő célja az antitestek azonosítása, jelenlétük jelzi a kórokozók behatolását a szervezetbe. A modern orvostudomány ELISA-elemzést használ számos betegség diagnosztizálására és harmadik felek vegyületeinek azonosítására.

ELISA elemzés: mikor és hogyan kell elvégezni

Az ELISA módszerrel a szakemberek képesek kimutatni a specifikus antitestek (immunglobulinok) jelenlétét a vérszérumban és azonosítani az antigéneket. Az immunglobulinok komplex idegi folyamatok eredményeként keletkeznek védelmi funkciók test. Ezek az immunrendszer természetes reakciója az idegen anyagok behatolására. Mindegyik típushoz patogén mikroorganizmus specifikus antitestek termelődnek.

Fontos: bizonyos komplexek jelenléte alapján az enzim immunoassay technika lehetővé teszi, hogy azonosítsuk a kórokozó típusát az emberi szervezetben.

Az ELISA-val történő diagnózis a következő betegségek kimutatására szolgál:

• herpesz;
• hepatitisz A vírusos típus;
• Epstein-Barr vírus (4-es típusú herpesz);
• citomegoalovírus.

A vérvizsgálat feltárhatja a fő patogén baktériumok, provokálja a szifilisz, az ureaplasmosis és a trichomoniasis kialakulását. Az elemzések révén a szakemberek 600 típusú allergén elleni antitesteket határoznak meg. Az enzimes immunoassay végrehajtása megfelelő a szervátültetés előkészítéséhez.

Fontos: bizonyos esetekben az ELISA kiegészítő módszer az onkológia meghatározására az emberi szervezetben.

Az elemzést kizárólag laboratóriumi körülmények között végezzük. A vizsgálathoz vénás vért vesznek az ulnaris vénából. Az elemzés eredménye másnap lesz elérhető. A megbízható információk megszerzése érdekében a szakértők azt javasolják, hogy kövesse az ELISA-ra való felkészülés szabályait:

• egy nappal a vizsgálat előtt abba kell hagynia a fűszeres és füstölt ételek fogyasztását;
• az alkohol tilos;
• véradás reggel éhgyomorra;
• a vizsgálat előtt ki kell zárni minden fizikai és érzelmi stresszt;
• Célszerű leszokni a dohányzásról.

Milyen patológiákat mutat ki az enzim immunoassay?

Az enzim immunoassay módszerével a szakember meghatározza az immunglobulinok különböző osztályait, amelyek jelenléte a szervezetben kóros folyamatok kialakulását jelzi. Így az ELISA fő mutatói az IgM és az IgG. Az IgM immunglobulin jelenléte akut betegség kialakulását jelzi kóros folyamat. A vér IgG szintje a gyógyulási szakaszra jellemző.

Fontos: ELISA-tesztet írnak elő a szifilisz megerősítésére, ha pozitív eredményt kapnak véradás RV-nek.

Az időben történő diagnózis lehetővé teszi a terápia hatékonyságának nyomon követését, és szükség esetén annak módosításait.

Az elemzés dekódolása: pozitív és negatív válasz

Az ELISA eredmények értelmezését szakember végzi a kapott adatok alapján. A válasz lehet pozitív vagy negatív.

Pozitív ELISA

Az eredmény akkor tekinthető pozitívnak, ha a vizsgálat során IgG és IgM osztályba tartozó immunglobulinokat mutattak ki a vérben. A bemutatott komponensek jelenléte a következő betegségek kialakulását jelzi:

• szifilisz;
• vírusos hepatitisz;
• CMV (citomegalovírus);
• herpesz;
• bárányhimlő;
• staphylococcusok és streptococcusok által okozott betegségek;
• chlamydia.

A szifilisz kialakulásával a fertőzés után 14 nappal specifikus antitesteket mutatnak ki a vérben. Számuk alapján a szakember meghatározza a betegség súlyosságát. A szifilisz aktív terápiája 6 hónap után megszünteti az összes baktériumot. Ha nincs kezelés, teljes felépülés a test legalább 1,5 évig tart.

Az ELISA elemzés már a vírusos típusú hepatitist kimutatja lappangási időszak, az első tünetek megjelenése előtt.

A CMV egy gyakori patológia, amely minden harmadik személynél előfordul. A lakosságra nem jelent veszélyt, a fertőzés az anyaméhben történik.

Normális esetben az emberi szervezetben nincsenek antitestek a herpeszvírus ellen. Amikor észlelik, szokás diagnosztizálni a betegség akut fázisát.

A bárányhimlő kialakulásával specifikus IgM immunglobulinok. A patológia teljes megszüntetése után 2 évig képesek a szervezetben maradni.

A streptococcusok és a staphylococcusok okozta betegségeket kétszeri ELISA teszt elvégzésével lehet megállapítani. Ismételt vizsgálat során a specifikus antitestek szintje gyorsan megemelkedik.

A chlamydia kialakulását jelzi magas szint immunglobulin - 1: 8 és magasabb. A mutató a betegség progressziójától függően változhat.

Figyelem: egy bizonyos kóros folyamat kialakulásának megerősítésére a szakember további laboratóriumi és hangszeres tanulmányok. Egy átfogó vizsgálat lehetővé teszi, hogy hatékony kezelési rendet írjon elő.

Negatív ELISA

Nál nél negatív eredmény, specifikus immunglobulinok nem találhatók az emberi vérben IgM osztály. IgG jelenléte lehetséges, az antitestek ezután is a szervezetben maradhatnak múltbeli betegségek, bakteriális és vírusos típus. Egyes esetekben jelenlétük a vérszérumban évtizedekig fennáll.

Figyelem: csak egy tapasztalt szakember tudja helyesen megfejteni az elemzési eredményeket.

A válaszok független tanulmányozása a legtöbb esetben a diagnózis felállítására és a helytelen kezelés előírására irányuló kísérletekhez vezet, orvos részvétele nélkül. Az ilyen expozíció ideálisnak tekinthető a kóros folyamat további progressziójához.

Az enzimes immunoassay vérvizsgálat rendkívül hatékony és modern technika klinikai diagnosztika számos betegség. Ennek a technikának a lényege bizonyos antitestek aktivitásának kimutatása. A vér ELISA-t nem csak a meglévő patológiák meghatározására használják emberi test, és közben kísérleti kutatás, ahol különleges pontosságra van szükség a vegyületek százalékos koncentrációjának meghatározásakor a biológiai anyagokban.

Az enzimes immunoassay a specifikus antitestek kimutatása bio segítségével kémiai reakciók. Ha egy személy megbetegszik, és idegen anyag (antigén) kerül a szervezetébe, az immunrendszer aktívan elkezd speciális fehérjéket vagy antitesteket termelni, amelyek elpusztítják az antigéneket. „Ütközésük” eredményeként antigén-antitest vegyületek keletkeznek.

Ez a mennyiségi és kvalitatív elemzés enzim immunoassay vizsgálatokat végeztek. Például, ha a diagnosztikai folyamat során egy adott vírust kell azonosítani a páciens vérének bioanyagában, akkor antitesteket adnak hozzá, amelyeket a vírusra specifikusnak tekintenek.

Ezzel szemben az ELISA-reakció az antitestek kimutatására abból áll, hogy bizonyos antigéneket viszünk be a vérmintákba. Speciális ELISA reagenseket használnak a diagnosztikában A biokémiai reakció egyértelműbb.

Az emberi testet is jellemzik nem specifikus tényezők védelem. A nem specifikus antitestek olyan fehérjék, amelyek káros hatással vannak a nagyszámú káros mikroorganizmusok. ELISA-vizsgálat során nem használják őket.

Használati javallatok

• A fertőző patológiák meghatározása, amelyek elsősorban szexuális érintkezés útján jutnak be a páciens testébe. A fertőzések pontos diagnózisa, mint pl., ill.
• A hormonok elemzése a vérszérumban. A tesztek leggyakrabban tesztoszteront, progeszteront, pajzsmirigy-stimuláló hormont, prolaktint határoznak meg. Ez vonatkozik az endokrin rendszer betegségeinek diagnosztizálására is.
• A ráktípus markereinek azonosítása.
• Különféle vegyületek azonosítása és a kígyómarás vagy mérgezés okozta emberi mérgezés okának megállapítása.
• In lokalizált fertőző betegségek diagnosztizálása különböző szervekés a testrendszerek, megállapítva a kóros folyamat súlyosságát és stádiumát. Az ELISA elemzés olyan betegségeket határoz meg, mint az összes csoport, a Helicobacter pylori fertőzés.

Lehetőségek

A modern gyógyászatban az enzim immunoassay-t két változatban használják: szilárd fázisú és hisztokémiai. Ez utóbbi lehetőséget rendkívül ritkán használják a diagnosztikában. A kutatás anyaga ebben az esetben lehet ELISA kenet, sejtcsoportok, paraffin metszetek vagy a diagnosztizált szervek lenyomata.

A szilárd fázisú ELISA egy olyan elemzési módszer, amelyben a reakcióban részt vevő komponensek egyikét (akár antitestet, akár antigént) speciális szilárd hordozón rögzítik. Ezek lehetnek golyók, mikropanelek vagy polisztirol rudak. Ez az immunkémiai módszer az antigén azonosításának és kimutatásának garanciája. A diagnózis során lehetőség nyílik a jellegzetes antitestek azonosítására és titerük izolálására is a vérszérumban.

A szilárd fázisú kutatásnak létezik közvetlen és közvetett módszere is. Az antigének laboratóriumi azonosítására közvetlen módszert alkalmaznak, amelyet szendvics módszernek is neveznek. Ennek végrehajtásához a kimutatott antigénre specifikus antitesteket veszünk. A mikropanel üregeibe helyezik őket, ahol később magát az antigént is hozzáadják. A tartalom felmelegszik 37 °C-igés elviselni pontos idő az enzimmel jelölt antitestek bevezetéséig.

Kénsav oldat hozzáadása kémiai reakciót vált ki. Ha az eredmény pozitív, akkor a minták narancssárgára, ill sárga. Az antitestek jelenlétének elemzését és titerük meghatározását közvetett szilárd fázisú ELISA-val végezzük.

Az elemzés által meghatározott immunglobulinok típusai

Az osztályozás a humán immunglobulinok 5 fő típusát tartalmazza: IgA, IgG, IgE, IgM és IgD. Gyógyszernek kiváló gyakorlati jelentősége csak néhány van belőlük (A, G, M) Az A osztályú immunglobulin (vagy IgA) a nyálkahártya, a gyomor-bélrendszer, a húgyúti és a légzőrendszer fertőzései elleni védelem funkcióját látja el. A betegség kezdetén ezeket az immunkomplexeket nem lehet azonosítani, csak megnyilvánulnak 2 hetesen betegség vagy később.

Az IgM immunglobulinok jellemzik a kóros folyamat akut fázisát a szervezetben. Már vérből is azonosíthatók a betegség 5. napján. A terhesség alatt végzett ELISA teszt bizonyos esetekben túlbecsült IgM szintet eredményez, ami nem mindig jelzi a fertőzést.

Az immunglobulin IgD a limfocitákban lokalizálódik. Kis koncentrációban mindenki vérében megtalálható egészséges ember. Ennek a komponensnek a mennyisége meredeken növekszik a terhesség alatt, ezért a terhesség alatti ELISA tesztnek vannak eltérései. Az IgD szintje emelkedett az asztmás és immunhiányos betegeknél.

Diagnosztika elvégzése

Az ELISA anyaga az oxigénmentesített vér, amelyet a páciens ulnaris vénájából vesznek ki. Javasolt térfogat: 5-10 ml. Az anyag összegyűjtése után diagnosztikai laboratóriumba kerül.

Ha minden szabályt betartanak, az eredményt másnap közöljük.

Annak érdekében, hogy az ELISA eredménye megbízható legyen, az orvosok határozottan javasolják a következő előkészítési szabályok betartását:

1. ELISA-tesztet csak éhgyomorra szabad elvégezni.
2. Az utolsó étkezést néhány órával lefekvés előtt kell megtenni (a zsíros, füstölt és húskészítményeket ki kell zárni).
3. Néhány nappal a laboratóriumi látogatás előtt abba kell hagynia a gyógyszerek szedését.
4. Az eljárás előtt nem szabad dohányozni és alkoholt fogyasztani.
5. A véradás előestéjén tilos a testet fizikai aktivitással kimeríteni.

A kvalitatív ELISA módszer eredményeinek értelmezése

Válaszul az ELISA-ra kvalitatív módszer Két lehetséges eredmény van:

• a negatív azt jelenti, hogy nem mutattak ki antitesteket az összegyűjtött vérrészben (nincs fertőző folyamat);
• pozitív – antitestek kimutatását jelzi (nagy a valószínűsége kóros betegség fertőző kórokozó okozza).

Ha a minta vizsgálata negatív értéket mutatott az M, G és A csoport immunglobulinjaira, akkor azt mondhatjuk, hogy nincs betegség, vagy kezdeti szakaszban annak fejlődését. Ugyanez az eredmény következik be a betegeknél a végső gyógyuláskor, amikor már elég sok idő telt el.

Emelkedett pozitív titer IgM IgA-val és IgG-értékek „-” jellel jelzik a páciens testében való előfordulást akut fázis Ha az eredmény mindhárom típusú immunglobulin (M, G és A) pozitív értéket mutatott, akkor ez a fertőző betegség visszaesését jelzi, amely a fejlődés akut vagy krónikus fázisában van.

A kvantitatív ELISA módszer eredményeinek értelmezése

A kvantitatív módszer meghatározza a kérdéses anyagok koncentrációját egy vérmintában. A kapott eredmény a következő mértékegységekben fejezhető ki:

1. OD – az optikai denzitás mértékegységei az egységnyi térfogatra jutó antitestkoncentráció szintjét jellemzik. Minél magasabb, annál több immunglobulin van a bioanyagban.
2. Az alkalmazott ELISA-módszerek egy része megköveteli egy ilyen indikátor, mint pozitivitási index jelenlétét az elemzésben. A pozitivitási arány a minta sűrűségéhez hasonló elnevezés.
3. Az antitestkoncentráció paramétereit milliliterben, nanogrammban (vagy ng/ml-ben) fejezzük ki.
4. A jelenlévő karakterek formájában: „-”, „+”, „?” (+, ++, +++ és így tovább).

Ne felejtse el, hogy megbízhatóan felméri a talált és felhelyezett immunglobulinok mennyiségét végső diagnózis csak egy tapasztalt orvos tudja.Minden tesztrendszernek megvannak a maga referenciaértékei. Különböző változatai vannak a normának és a kóros eltéréseknek.

A módszer előnyei

• Kényelem és gyorsaság biokémiai reakciók diagnosztikához;
• A módszer magas szintű pontossága és érzékenysége (legalább 90%);
• Diagnosztika lehetősége még a kóros folyamatok fejlődésének legkorábbi szakaszában is;
• A diagnosztikai eljárás költségszintje elérhetővé teszi a lakosság számára;
• Képes nyomon követni a fertőző folyamat dinamikáját;
• Abszolút biztonság és viszonylagos fájdalommentesség;
• Megszerzéséért megbízható eredmény elegendő a kutatáshoz szükséges anyag minimális mennyisége;
• A válaszűrlap a lehető leghamarabb megérkezik;
• Lehetőség van a folyamat részleges vagy teljes automatizálására (a teljes ELISA ciklust a Lapis lazuli analizátor végzi).

Az egyetlen hátránya, hogy az ELISA tartozik közvetett típusok diagnosztika

Vagyis csak az emberi szervezetnek a kórokozó jelenlétére adott immunválaszának meghatározását teszi lehetővé, magát a kórokozót nem.

Amikor egy tesztet írnak elő a szifilisz ELISA-tesztjének elvégzésére. Mód laboratóriumi diagnosztika. Elemzési eredmények - hogyan lehet meghatározni a normát és az eltéréseket. Az enzim immunoassay költsége.

Általános szabály, hogy minden alkalommal, amikor egy klinikára megy, az orvosok különféle vizsgálatokat írnak elő. Ez lehetővé teszi számukra, hogy azonosítsák azokat a fertőzéseket és betegségeket, amelyekben egy személy szenved. Az ELISA, vagy az úgynevezett enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat kiváló módszer a szervezet immunrendszerének értékelésére, valamint a fertőzés és a betegség stádiumának azonosítására az antitestek jelenléte alapján.

Szóval, kinek írják fel ezt a tesztet, és mi az enzim immunoassay? Az orvosok akkor írják elő ezt a vizsgálatot, ha egy személy a következő betegségekben szenved:

• A kiütés a testen allergiás reakció.
• Vírusok - herpesz, citomegalovírus.
• Szexuális úton terjedő betegségek - szifilisz, trichomonas.
• Rákkal kapcsolatos patológia.
• Neurosyphilis.

Kivéve felsorolt ​​betegségek, a tesztet a vér hormonszintjének meghatározására írják elő. Az eredmények alapján értékelik a terápia minőségét. Valószínűleg mindenki tudja, mi a szifilisz, de fogalma sincs annak mértékéről, és arról, hogy hány fertőzött jár körülöttünk.

Jelenleg a szifilisz a leggyakoribb betegség. Ez egy treponoma, amely az emberi testet érinti. És ennek eredményeként mindenki érintett. belső szervek beteg.

Laboratóriumi diagnosztikai módszer

Az orvostudomány nem áll meg, a modern tesztek jelentősen eltérnek a test vizsgálatának régi módszereitől. Bár tökéletesen ellátták szerepüket, néha heteket, hónapokat kellett várni az eredményekre. Ez természetesen nem volt előnyös a fertőzött személy számára. Mi vár eredményre?Egy beteg ember maga is tapasztalta.

A klasszikus tesztek - a szifilisz kimutatása Wasserman módszerrel, Kahn módszerrel - kezdték elveszíteni pozíciójukat, és helyükre olyan tesztek léptek, mint az ELISA.

Ez a legtöbb modern módszer fertőzés kimutatása emberben. Az eredmény visszafejtése számítógép segítségével történik. Ez lehetővé teszi a pontosabb meghatározást pozitív eredmény vagy negatív teszt.

A dekódolás során bizonyos betegségek elleni antitestek keresése történik. És az elemzés eredményeként lehetséges volt a fertőzés azonosítása, amikor az eredmény pozitív volt. Az ELISA használata a szifilisz kimutatására az immunglobulinok három osztályba sorolását jelenti:

• G, M, A – a diagnózis szempontjából ezek a legfontosabbak.
• Egy fertőzött személyben szigorúan meghatározott sorrendben termelődnek.
• A fertőzés stádiuma gyorsan meghatározható.

ELISA eredmények - normál és pozitív elemzés

Ha a szifilisz ELISA-tesztjéről beszél, akkor ebben az esetben nehéz megmondani, hogy mi a normális vagy kóros. Az eredmény általában negatív vagy pozitív. Ezenkívül vannak olyan titerek, amelyek meghatározzák az antitestek mennyiségét a vérben.

Az elemzés megfejtésekor sok finomság van, ha pozitív eredményt mutat, akkor is többször meg kell ismételni az elemzést, hogy kizárjuk a hamis pozitív reakció módszerét.

Amint már írtuk, az elemzés megfejtésekor sok finomság van, és csak a kezelőorvos tudja meghatározni az eredményt. Adjunk példákat a táblázatban arra, hogy milyen eredményeket mutathatunk ki az enzim immunoassay során:

Ne essen kétségbe, ha az elemzés pozitív eredményt mutat. Általános szabály, hogy további elemzéseket és teszteket végeznek, különböző utak, a pontosabb diagnózis érdekében.

Az enzim immunoassay költsége

Általános szabály, hogy ennek az elemzésnek a költsége közvetlenül függ magától az elemzéstől és egy adott fertőzés kimutatásától. A fertőzés markereinek meghatározása különféle típusok költségek 200-350 rubel. És egy ilyen elemzést két napon belül végeznek.

Az ELISA a test diagnosztizálásának legnépszerűbb és legmodernebb módszere. A módszer hatékonynak bizonyult a fertőzés kimutatásában és a fertőzés pontos időtartamának meghatározásában.

Az árazási politikát figyelembe véve elmondhatjuk, hogy az elemzés bármilyen költségvetéssel mindenki számára elérhető. Lehetővé teszi a kezelőorvos számára, hogy megkapja teljes kép emberi fertőzés. Akcióban bizonyított, és nem okozott csalódást az orvosoknak. Ugyanakkor, miután megkapta az elemzést, a kezelőorvos azonnal reagálhatott, és időben előírhatja a kezelést.

Az olyan rokon tudományok fejlődésével, mint a genetika, molekuláris biológia, kémia, valamint a technológiai fejlődés növekedésével, modern orvosság innovatív diagnosztikai módszerekkel büszkélkedhet leginkább különféle betegségek személy. Az eredmények nagy pontossága és a biztonság jellemzi őket. Az egészségügyi problémák azonosításának egyik ilyen módja az enzim immunoassay. Az elmúlt évtizedben széleskörű népszerűségre tett szert, és már a betegségek megjelenése előtt is rendkívül hatékony, megbízható és betegbiztos módszerként szerzett hírnevet. külső tünetek. Világosan elmagyarázzuk, mi ez a fajta diagnosztika, mi a működési elve, megjegyezzük az előnyeit, és útmutatást adunk egy ilyen elemzés költségeihez.

A szervezet válasza a patogén flórára

Annak érdekében, hogy megértsük, hogyan diagnosztizálnak a laboratóriumi technikusok az enzim immunoassay-nek köszönhetően különféle betegségek, meg kell érteni élettani folyamat, amely fertőzés során jelentkezik a szervezetben. Amikor egy kórokozó mikroorganizmus belép a véráramba, az emberi immunrendszer védőreakciót mutat bizonyos anyagok - antitestek - felszabadulásának formájában. Felveszik a kapcsolatot a sejttel, és megvizsgálják, hogy az a test része-e, vagy kívülről támadják meg. Ha az immunrendszer megállapította, hogy a sejt idegen, akkor az antitestek száma növekedni kezd a kórokozó mikroorganizmus elleni küzdelem érdekében.

Vannak antitestek különböző típusok, megvannak a saját jellemzőik. Egyes anyagok közvetlenül a fertőzés időszakában jelennek meg, mások az egész életen át az emberi szervezetben maradnak, és ezeknek köszönhetően alakul ki stabil immunitás egy adott betegséggel szemben. A fehérjeszerkezeteket a következő típusokra osztják: A, D, E, M, G. Az orvostudományban az antitesteket immunglobulinoknak nevezik. Ezért szokás ezeknek az anyagoknak a mutatóit kijelölni latin betűkkel Ig.

Az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat (ELISA) kifejezetten orvosi ismereteken alapul. Speciális antigének segítségével laboratóriumi körülmények között meg lehet határozni bizonyos antitestek jelenlétét vagy hiányát a biológiai anyagokban. Az ilyen elemzés eredményei alapján az orvos diagnózist készíthet, és nemcsak a patológia jelenlétét, hanem azt is meghatározhatja, hogy milyen régen keletkezett, és meghatározhatja a beteg veszélyének szintjét. Az enzim immunoassay során leggyakrabban M és G csoportba tartozó antitestek jelenlétét vizsgálják.

Mi az ELISA?

Valójában az enzim immunoassay nem újítás modern társadalom. Még a 80-as években találták fel. Az ilyen kutatásokhoz azonban terjedelmes, drága berendezésekre volt szükség. Ezért ezt a módszert csak speciálisan felszerelt tudományos laboratóriumokban használták: sejtek és szövetek tipizálására használták. De a diagnosztikai gyógyászatban akkoriban még nem alkalmazták széles körben, technikailag nehéz volt és rendkívül költséges volt a használata. Az ELISA csak a technológia fejlődésével és a biopolimer anyagok feltalálásával fejlődött. Ezt követően a módszer népszerűvé vált és bizalmat kapott az orvosi körökben.

Fent említett, ez a módszer magában foglalja a kimutatást bioanyagban - vérben, magzatvízben, üvegtestben vagy agy-gerincvelői folyadékban - bizonyos csoportok immunglobulinok.

Vannak olyan vizsgálatok, amelyekben nem alkalmazzák az antigént a felületre, és enzimhez kötött immunszorbens vizsgálatot végeznek, amely magában foglalja a reakció végrehajtását speciális lyukakban. Utolsó módszer Megvan nagyobb érzékenységés a megbízhatóság, ezért az elemzés így történik orvosi laboratóriumok emberi betegségek kimutatására.

Az enzim immunoassay fázisai

A feltételezett betegségtől függően az enzim immunoassay kitből felhasználják a szükséges antigént, amely fertőzés jelenlétében egy kémiai reakció során kapcsolatba lép a kórokozó flórával. Ezt a folyamatot immunválasz lebonyolításának nevezik.

Ezután a vizsgálat eredményének vizuális meghatározása érdekében enzimatikus ELISA fázist végzünk. Ez magában foglalja az anyag színezését speciális reagensekkel. BAN BEN ez a tanulmány Enzimeket, például alkalikus foszfatázt, peroxidázt és avidint használnak. A kémiai reakciók során keletkező színtől függően meghatározzák az enzim immunoassay eredményét.

Mi az a kolorimetria?

Az enzimatikus diagnosztikai fázis elemzése a „kolorimetria” nevű módszerrel történik. Az a helyzet, hogy nem csak az anyag színe ad információt a fertőzésről, hanem a kémiai reakciókból adódó színsűrűség is. Ez a mutató határozza meg a kórokozó mikroorganizmus koncentrációját. Ha a régi módon manuális diagnosztikai módszert alkalmaznak, akkor egy speciális kalibrációs grafikont építenek a jelzett mutatók meghatározására.

A modern laboratóriumokban ma ritkán alkalmazzák a kézi módszert. Az ELISA elemzés elvégzéséhez egy speciális eszközt használnak - egy kolorimétert, amelyben csak a kutatási paraméterek manuálisan vannak beállítva, majd az összes munkát, beleértve az ábrázolást is, automatikusan elvégzi a készülék.

ELISA módszerek

Vannak közvetlen és indirekt módszerek enzim immunoassay. Az első típus kevesebb időt vesz igénybe, mivel csak 3 végrehajtási szakasza van. Először specifikus antitesteket adnak a vizsgált anyag antigénjeihez, speciális lyukakba helyezve. Ezután a felesleges mennyiséget eltávolítjuk, és az analízis enzimatikus fázisát végrehajtjuk, így megkapjuk az eredményt.

Az indirekt módszert sokkal gyakrabban alkalmazzák, mivel nagyobb érzékenységgel rendelkezik a direkt diagnosztikai módszerhez képest. Lefolytatása során kettős vizsgálatot alkalmaznak. Ugyanis az antigén először egy jelöletlen, majd egy jelölt ellenanyaghoz kapcsolódik. Ez a folyamat hosszabb ideig tart, de az eredmény a legpontosabb.

Reagenskészletek

Az enzimes immunoassay készleteket különböző gyártók állítják elő, különféle konfigurációkban. Oroszországban a „Soyuz Medical-Biological” céget ismerik el. Ez a gyártó reagenskészleteket gyárt ELISA-vizsgálatra a szélességi köreinken szinte minden ilyen módon elemezhető fertőzésre. A reagenseken kívül a készletek további anyagokat is tartalmaznak, ami biztosítja az elemzés biztonságát, kényelmét és gyorsaságát. Ezenkívül a vegyi anyagok színeződnek különböző színek, ami csökkenti annak valószínűségét, hogy a laboratóriumi asszisztens tévedjen a reagens kiválasztásában.

A kémiai és biológiai kiteket relatív elérhetőségük különbözteti meg, ami közvetlenül befolyásolja az enzim immunoassay eloszlását és elérhetőségét a lakosság számára.

A diagnosztikai módszer előnyei

Kétségtelen, hogy az enzim immunoassay számos előnnyel rendelkezik a többi diagnosztikai módszerhez képest:

1. Segítségével a kórokozó szervezetek csekély jelenlétét is meghatározhatja, ami a teszt nagy érzékenységét jelzi.
2. Legfeljebb a betegség felismerésének képessége korai szakaszaiban, ami jelentősen növeli a sikeres gyógyulás esélyét.
3. A biológiai anyag felvételének egyszerűsége és kényelme. Ezt az elemzést magán- és állami laboratóriumokban is elvégzik. Szükség esetén az anyagot a beteg otthonából ápoló veheti át.
4. Az elemzéshez nagyon kis mennyiségű bioanyagra van szükség.
5. Gyors eredmény elérése. A modern orvosi berendezések lehetővé teszik az elemzés 24 órán belüli elvégzését.
6. A rejtett felismerés képessége tünetmentes formák fertőzések.
7. A tanulmány elérhetősége.
8. Szükség esetén lehetőség van tömeges vizsgálatok elvégzésére ezzel a módszerrel.
9. Lehetőség van a betegség lefolyásának és az előírt kezelés eredményességének nyomon követésére, hiszen az ELISA teszt többször is elvégezhető, teljesen biztonságosan a beteg számára.
10. Az elemzési szakaszok automatizálása, amely kiküszöböli az emberi tényezőt és növeli az eredmények megbízhatóságát.
11. Az ELISA reagenseit meglehetősen hosszú ideig - körülbelül egy évig - tárolják.
12. Az elemzés akkor lehetséges, ha a környezeti hőmérséklet ingadozik.

M csoportba tartozó immunglobulinok

Az M csoportba tartozó antitestek termelődnek immunrendszer közvetlenül a felfedezés után idegen antigén. Következésképpen, ha az enzim immunoassay ilyen anyagok kimutatását eredményezte a bioanyagban, akkor ez azt jelzi, akut stádium a betegség lefolyása, elsődleges fertőzés. Az M csoportba tartozó immunglobulinok a fertőzés típusától függően akár egy hónapig is a szervezetben maradhatnak. Ezután számuk csökken, amíg teljesen eltűnnek.

G csoport immunglobulinok

Az M csoportba tartozó immunglobulinokat G típusú fehérjeszerkezetek váltják fel. Ezek az anyagok stabil, a legtöbb esetben egész életen át tartó immunitást hoznak létre a betegséggel szemben. Az IgG fehérjeszerkezetének meghatározása a vizsgálati anyagban azt jelzi, hogy a szervezet korábban találkozott a kórokozóval, és védekező reakciót mutat az újrafertőződés ellen.

A diagnózis indikációi

Az enzimes immunoassay vérvizsgálatot használják a különböző fertőző betegségek, hormonális állapotok, végezzen allergia vizsgálatokat. Ugyanis:

• meghatározza a hormonszintet pajzsmirigy;
• reproduktív hormonális panel mutatók;
• tumormarkerek;
• a fertőző betegségek, például a citomegalovírus, a hepatitis, a toxoplazma, a rubeola, a kanyaró, a tuberkulózis, a chlamydia, a szifilisz, a mycoplasma, az ureplasma, a candida, a lamblia és még a HIV kórokozóinak kimutatása;
• autoimmun betegségeket diagnosztizálnak. Többek között az enzim-immunoassay-t gyakran használják a pajzsmirigyhormonok vizsgálatára: TSH, TG, T3 és T4.

Az enzim immunoassay módszert a diagnosztikai célok mellett az orvosi kutatási tevékenységben is alkalmazzák.

Hogyan történik az anyaggyűjtés?

A legtöbb esetben vénás vérvétel javasolt elemzéshez. Az anyag feldolgozása és kutatásra való előkészítése után a vérszérum vagy plazma enzimhez kötött immunszorbens vizsgálatát végezzük.

A hormonpanel tanulmányozása különös figyelmet igényel, mivel ebben az esetben rendkívül fontos figyelembe venni az anyaggyűjtés jellemzőit. Például a legtöbb hormon diagnózisa szaporító rendszer nőknek vénás vérvételre van szükségük bizonyos napokon menstruációs ciklus. Számos más hormonra hat külső tényezők: szezonalitás, napszak, pszichológiai állapot türelmes és még sok más. A konkrét tényezők figyelembevétele nélkül hamis eredményt kaphat, ami a betegség súlyosbodásához vagy helytelenül előírt kezeléshez vezet.

Egyes, gyakrabban bonyolult esetekben elemzésre lehet szükség gerincvelői folyadék, üveges ill magzatvíz terhes nő. Ezen biológiai anyagok begyűjtésének eljárásai bizonyos kockázattal járnak, ellenjavallatokkal és felépülési időszak. Ezért az ilyen enzimes immunoassay-t csak az orvos jelzése szerint és szakmai felügyelete mellett szabad elvégezni. A megfejtés ebben az esetben speciális orvosi ismereteket igényel, és eltarthat egy ideig.

Felkészülés az elemzésre

Az enzim immunoassay-t minden ajánlásnak megfelelően kell elvégezni, mivel a vizsgálat eredményeit külső tényezők befolyásolják. Például fontos, hogy reggel (11 óra előtt) éhgyomorra adjon vénás vért. 2 héttel a tervezett anyaggyűjtés előtt abba kell hagynia a gyógyszerek, különösen a hormonális gyógyszerek szedését. A vizsgálat előtt néhány napig tartózkodnia kell az alkoholfogyasztástól és zsíros ételek, és azt is kizárják a fizikai aktivitás, tapasztalatok és stressz.

Az eredmények dekódolása

Az enzim immunoassay eredményeinek megfejtéséhez speciális ismeretekre van szükség a fehérjeszerkezetek (antitestek) fentebb leírt jellemzőiről (IgG és IgM). Ezekkel az adatokkal összhangban a kutatási mutatókat elemzik. A táblázat az elemzés során elérhető lehetőségeket írja le:

A bemutatott táblázatot elemezve arra a következtetésre juthatunk, hogy a legtöbb esetben további vizsgálatokra lesz szükség a diagnózis megerősítéséhez. Az enzim immunoassay önmagában nem ad határozott választ. A normának ebben az esetben nincsenek egyértelmű határai: a G csoport kimutatott fehérjéi csak azt jelzik, hogy a szervezetet korábban megfertőzték egy azonosítható kórokozóval. De ugyanez az eredmény az akut fázis jelenlétét is jelezheti - fontos, hogy sok tényezőt és mutatót összehasonlítsunk a helyes diagnózis felállítása érdekében.

Kockázati tényezők

Az ELISA 90%-os pontosságú. Ennek ellenére vannak olyan kockázati tényezők, amelyek befolyásolják a diagnosztikai eredmény torzulását: berendezés meghibásodása, nem megfelelő anyaggyűjtés, tárolás és szállítás, egyéb külső tényezők figyelmen kívül hagyása.

Az elemzés költsége

Ár diagnosztikai tanulmány széles körű, és az analízis típusától és a meghatározandó antigéntől függ, mivel ezen tényezők alapján számítják ki a reagenskészletek költségét és határozzák meg az elemzés összetettségét. De a legtöbb esetben az enzim immunoassay sok beteg számára elérhető. Az ára 300 rubeltől kezdődik. legfeljebb 2000 rubel.

Az ELISA megfizethető, gyors és rendkívül hatékony módszer számos betegség diagnosztizálására. De csak szakképzett egészségügyi szakembernek van joga az eredmények értelmezésére és a diagnózis felállítására.

A szervezet belső környezete sokat elárul állapotáról. A vér ebben a tekintetben különösen informatív - tanulmánya szinte mindent elmondhat az emberről: hogyan és mit eszik, hogyan működnek a belső szervei, rossz szokások vagy különféle fajták betegségek. Ez utóbbiak nagy érdeklődésre tartanak számot a diagnosztika területén különféle fertőzések, végül időben történő felismerés akut és krónikus patológiák lehetővé teszi az emberi élet minőségének jelentős javítását, és ennek következtében annak időtartamának növelését.

Hogyan működik az ELISA teszt?

A laboratóriumi ELISA analízis egy többlépcsős vérvizsgálat a jelet adó komponensekre kóros elváltozások. Ennek a diagnosztikai módszernek a pontossága körülbelül 99% - az ELISA-t joggal nevezik a létező legpontosabb elemzésnek. Ez annak köszönhető, hogy a vér makrokomponensei (hemoglobin, glükóz, leukociták stb.) mellett minőségi ill. mennyiségi mutatók specifikus antitestek, antigének és enzimek.

Ismeretes, hogy bizonyos kórokozók szervezetbe kerülésére válaszul antitestek képződnek. Ők viszont szintetizálnak antigéneket - fehérje patogén ágenseket. Ez az antigén-antitest kombináció, amelyet az enzim immunoassay módszerrel végzett vérvizsgálat során elemeznek. A diagnózis során figyelembe veszik azon enzimek jellemzőit is, amelyek a kóros ágensek semlegesítésében vesznek részt.

Az ELISA lehetővé teszi, hogy tájékozódjon a rákról

Ezzel a diagnosztikai módszerrel a következő betegségek azonosíthatók:

Ezenkívül az ELISA módszerrel végzett vérvizsgálat segítségével meghatározhatja az immunhiányt és azonosíthatja a 600 típusú allergén elleni specifikus antitesteket. Az elemzést kiegészítőként is használják diagnosztikai eszköz a rákos sejtek azonosításakor.

Hogyan történik az elemzés?

Az elemzés elvégzéséhez körülbelül 5 ml vénás vérre van szükség. A vizsgálat napján gyűjtik össze. Az elemzés során kiszámítják a biológiai anyagban jelenlévő több csoport immunglobulinjainak (antigénjeinek) listáját és koncentrációjukat:

A teszt kimutatja bizonyos antitestek jelenlétét a vérben

Ezenkívül létezik egy külön típusú IgD immunglobulin, amelyet a terhes nők és az alanyok más kategóriáiban szintetizálnak - asztmások, valamint a mozgásszervi rendszer betegségeiben szenvedők. Ezek az antitestek gyermekekben is megtalálhatók, míg maximális koncentráció ez az immunglobulin eléri, amikor elérik a 10 éves kort. Pontos célja továbbra is tisztázatlan.

Az ELISA megfejtésekor figyelmet fordítanak az immunglobulin komplex koncentrációjára, aminek köszönhetően nemcsak a kórokozó típusa, hanem a betegség fejlődési szakasza, formája is azonosítható.

Elemzés elvégzése

Az elemzés három szakaszban történik:

1. Egy enzim „tag” biokémiai, géntechnológiai vagy immunológiai rögzítése az antitest-antigén komplexhez.
2. Az antitest-antigén komplex kialakulása laboratóriumi körülmények között.
3. A kapott komplex vizuális vizsgálata az antitestek és antigének koncentrációjának kiszámításával különféle csoportokés az eredményt táblázatban jeleníti meg.

A kapott teszteredmények többféleképpen értelmezhetők.

Szinte minden laboratóriumnak megvannak a saját kritériumai az ELISA-teszt eredményeinek értékelésére. Ez annak köszönhető, hogy az eljárás során különféle laboratóriumi berendezéseket és reagenseket használnak.

ELISA értelmezés és elemzés eredménye

Az ELISA vérvizsgálati eredmények űrlapon a dekódolás táblázat formájában jelenik meg, amely jelzi a bizonyos fajok antitestek. Az eredmény értelmezése a szervezetben lévő különböző immunglobulinok kombinációin alapul:

IgA	IgM	IgG	IgE	Eredmény
Határozatlan	Negatív	Határozatlan	-	Felépülés
Negatív	Negatív	Negatív	-	A fertőzésekkel szembeni immunitás hiánya
Negatív	Pozitívan	Pozitívan	-	A fertőzés akut stádiuma
Negatív	Negatív	Pozitívan	-	A fertőzésekkel szembeni természetes vagy vakcinázás utáni immunitás megléte
	Negatív	Pozitívan	-	A fertőző folyamat kronitizálása
Pozitívan	Pozitívan	Pozitívan	-	Krónikus fertőző betegség súlyosbodása
Pozitív vagy negatív	Pozitívan	Negatív	Pozitívan	Akut helminthiasis
Negatív	Negatív	Pozitívan	Pozitívan	Hosszú távú helminthiasis

A táblázatban megadott „pozitív” és „negatív” értékek relatívak - ha az egyik laboratóriumban normálisnak tekinthető, akkor egy másikban normál jelző különbözni fog numerikus érték. Éppen ezért, ha szükséges újra tanulni Javasoljuk, hogy ugyanabban a laboratóriumban vegye fel a kapcsolatot.

Mi befolyásolhatja az eredményt

Annak ellenére, hogy az ELISA-t korunk egyik legpontosabb tesztjének tartják, álnegatív vagy álpozitív diagnózist adhat. A hibás eredmények szerencsére nagyon ritkák, de a valós mutatóktól való kis eltérések az esetek körülbelül harmadában fordulnak elő.

Az elemzés pontosságát a következők befolyásolhatják:

• az elemzéshez szükséges vérmintavételi normák megsértése;
• a kutatási szabványok laboratóriumi alkalmazottja általi megsértése;
• reuma vagy más, az anamnézisben nem említett reumás betegség jelenléte (az ilyen patológiák mindig szerepelnek egyfajta „stoplistán”);

A gyógyszerek szedése befolyásolhatja a vizsgálati eredményeket

• az anyagcsere folyamatok kifejezett zavara;
• a HIV akut vagy bonyolult lefolyása.

Jelentős hibák léphetnek fel, ha a beteg nem tartja be az elemzésre való felkészülés szabályait. Így a mutatók változásai olyan betegek eredményeiben figyelhetők meg, akik hosszú idő elfogad gyógyszereket. A különféle immunglobulinok koncentrációja is kissé megváltozik, ha a véradás előestéjén nem tartják be az étrendi ajánlásokat.

A hamis eredmények elkerülése érdekében ajánlatos mindenről tájékoztassa kezelőorvosát krónikus betegségek, valamint azokról a gyógyszerekről, amelyeket a vizsgálat során nem lehet visszautasítani. A vérvétel előtti napon javasolt az alkohol, a zsíros ételek és a dohányzás elhagyása. A vizsgálatot éhgyomorra kell elvégezni.

A következő videó a vérvizsgálatokról szól: