A HIV laboratóriumi diagnózisa. A HIV laboratóriumi diagnózisának módszerei. Mi az a retrovírus

Egy magasan szakosodott laboratóriumban a következőket végzik:

A) a vérben keringő antitestek, antigének és immunkomplexek meghatározása; a vírus tenyésztése, genomi anyagának és enzimeinek azonosítása;

B) az immunrendszer sejtes részének funkcióinak felmérése. A főszerep a szerológiai diagnosztikai módszereké, amelyek célja az antitestek, valamint a kórokozó antigének meghatározása a vérben és a szervezet más biológiai folyadékaiban.

A HIV-ellenanyag-vizsgálatot a következőkre kell elvégezni:

A) a vérátömlesztések és transzplantációk biztonsága;

B) megfigyelés, tesztelés a HIV-fertőzés prevalenciájának nyomon követése és egy bizonyos populációban előfordulásának dinamikájának tanulmányozása érdekében;

C) HIV-fertőzés diagnosztizálása, azaz gyakorlatilag egészséges emberek vagy HIV-fertőzéshez vagy AIDS-hez hasonló klinikai tünetekkel rendelkező betegek vérszérumának önkéntes vizsgálata.

A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztikájának rendszere háromlépcsős elven épül fel. Az első szakasz a szűrés, amelynek célja a HIV-fehérjék elleni antitestek jelenlétének elsődleges vérvizsgálata. A második szakasz referencia - lehetővé teszi speciális módszertani technikák alkalmazásával a szűrési szakaszban kapott elsődleges pozitív eredmény tisztázását (megerősítését). A harmadik szakasz a szakértői szakasz, amely a laboratóriumi diagnosztika korábbi szakaszaiban azonosított HIV-fertőzés markerek jelenlétének és specificitásának végső ellenőrzésére szolgál. A laboratóriumi diagnosztika több szakaszának szükségességét elsősorban gazdasági megfontolások indokolják.

A gyakorlatban számos tesztet használnak, amelyek lehetővé teszik a HIV-fertőzöttek megfelelő megbízhatósági fokának meghatározását:

Az első szint kimutatására szolgáló ELISA teszt (enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat) nagy érzékenységgel jellemezhető, bár az alábbiaknál kisebb specifitás;

Immunblot (Western-blot), egy nagyon specifikus és leggyakrabban használt teszt a HIV-1 és a HIV-2 megkülönböztetésére;

Antigenemia p25 teszt, hatékony a fertőzés kezdeti szakaszában;

Polimeráz láncreakció (PCR).

A vérminták tömeges szűrése esetén ajánlatos alanyok egy csoportjából származó szérumkeverékeket úgy összeállítani, hogy az egyes minták végső hígítása ne haladja meg az 1:100 arányt. Ha a szérumok keveréke pozitív, a pozitív keverékben lévő minden szérumot tesztelnek. Ez a módszer nem vezet az érzékenység elvesztéséhez sem ELISA, sem immunoblott esetén, de 60-80%-kal csökkenti a munkaerőköltséget és a kezdeti vizsgálat költségeit.

Immunológiai módszerek

1. T segítők száma,

2. T4 és T8 aránya,

3. túlérzékenységi állapot,

4. a T-sejtrendszer kompenzációs funkciója.

Az immunglobulinok túltermelésében nyilvánul meg, alacsony affinitásúak, és a szervezet anyagai még többet fogyasztanak.

Hátrányok: későn jelennek meg, egyes immunológiai mutatók más fertőzéseknél is jelen lehetnek.

Klinikai módszerek – m.b. hasonlóak más betegségekhez, a legjellemzőbb megnyilvánulásokat a későbbi szakaszokban rögzítik, így a klinikai diagnózis nem túl hatékony

A fő módszer – szerológiai – 2 lépésben valósul meg:

1 – szűrővizsgálat – mintavétel az immunoassay összes fehérjével szembeni összes antitestre. Ez a szakasz 95%-ban igaz és 5%-ban hamis pozitív eredményt ad.

2 – megerősítő módszer – minden mintát megerősítő módszerrel vizsgálnak. Ez a technika lehetővé teszi a vírusfehérje elleni antitestek kimutatását. Pozitív eredmény, ha legalább 3 vírusfehérje ellen kimutatható antitest, ha 1 vagy 2 esetében az eredmény megkérdőjelezhető és további vizsgálatot igényel.

A HIV-fertőzés elsődleges szerodiagnózisa során a teljes antitesteket szűrővizsgálatokkal – ELISA-val és agglutinációs reakciókkal – határozzák meg. A második (arbitrációs) szakaszban összetettebb tesztet alkalmaznak - immunblotot, amely nemcsak a kezdeti következtetés megerősítését vagy elutasítását teszi lehetővé, hanem a vírus egyes fehérjéivel szembeni antitestek meghatározásának szintjén is.

A HIV antitest teszt eredményeinek értelmezése

Meglehetősen nagyszámú különböző tényező befolyásolja a HIV-ellenanyag-teszt eredményét, és ezek közül fontos az esetleges fertőzés utáni vizsgálat időpontja.

A legtöbb esetben a HIV-ellenes antitestek a fertőzés után 6-12 héttel kimutathatók. Ezt az időszakot, amely a vírusnak a szervezetbe jutásától a kimutatható mennyiségű antitest megjelenéséig tart, a pozitív szerokonverzió időszakának vagy „ablak” periódusnak nevezzük. Ritkán előfordulnak olyan esetek, amikor a fertőzés után 6 hónappal antitestek jelennek meg, és az antitestek kimutatásáról szóló jelentések csak 1 év után nem mutatnak bizonyítékot. Jelenleg a diagnosztikai szolgálat az ELISA módszerek új generációit használja, amelyek lehetővé teszik a HIV elleni antitestek kimutatását a fertőzés után 3-4 héttel, és ezeknek a módszereknek bizonyos kombinációi, az úgynevezett tesztelési stratégiák az „ablak” időszakot 2-re csökkentik. 3 hét, azaz . lehetővé teszik a HIV elleni antitestek kimutatását, amint azok termelődni kezdenek a szervezetben.

A negatív eredmény azt jelenti, hogy a vizsgált személy vérében nem mutattak ki HIV-ellenes antitesteket. Ezt az állapotot szeronegativitásnak nevezik, és általában azt jelenti, hogy a személy nem fertőzött.

A negatív eredmény nem jelent garanciát a jövőre nézve. Csak a vizsgálatkor fennálló állapotot közli. Kis esély van arra, hogy a felmérés az ablak időszakában történt. Ezért, ha egy személy korábban HIV-fertőzésnek volt kitéve, és a teszt negatív lett, legalább 6 hónappal a kockázati esemény után újra meg kell vizsgálni.

A pozitív eredmény azt jelenti, hogy a páciens vérében HIV-ellenes antitesteket találtak. Ezt az állapotot szeropozitivitásnak nevezik – egy személy HIV-fertőzött. Fontos megérteni, hogy a pozitív eredmény csak a HIV-fertőzést jelzi, az AIDS-et nem. Rendkívül fontos azonban, hogy a pozitív eredmény megérkezése után orvoshoz forduljon tanácsért, és szükség esetén orvosi segítségért, amely lehetővé teszi, hogy életminőségét hosszú ideig jó szinten tartsa.

Bizonytalan eredmény. Ritka esetekben a HIV-ellenanyag-teszt eredménye nem egyértelmű. A laboratórium nem tudja megválaszolni, hogy egy személy szeropozitív vagy szeronegatív. Ilyen körülmények között orvoshoz kell fordulni, és ismételten vizsgálatot kell végezni.



A HIV-fertőzés időben történő diagnosztizálása rendkívül fontos intézkedéssé válik, mivel a kezelés korai megkezdése nagymértékben meghatározhatja a betegség további fejlődését és meghosszabbíthatja a beteg életét. Az elmúlt években jelentős előrelépés történt e szörnyű betegség azonosításában: a régebbi tesztrendszereket fejlettebbek váltják fel, a vizsgálati módszerek egyre hozzáférhetőbbé válnak, pontosságuk pedig jelentősen nő.

Ebben a cikkben a HIV-fertőzés diagnosztizálásának modern módszereiről fogunk beszélni, amelyek ismerete hasznos a probléma időben történő kezeléséhez és a páciens normális életminőségének fenntartásához.

HIV diagnosztikai módszerek

Oroszországban standard eljárást végeznek a HIV-fertőzés diagnosztizálására, amely két szintből áll:

• ELISA tesztrendszer (szűrőelemzés);
• immunoblot (IB).

A diagnózishoz más módszerek is használhatók:

• gyorstesztek.

ELISA tesztrendszerek

A diagnózis első szakaszában a HIV-fertőzés kimutatására szűrőtesztet (ELISA) alkalmaznak, amely laboratóriumokban létrehozott HIV-fehérjéken alapul, amelyek a szervezetben a fertőzésre válaszul termelődő specifikus antitesteket rögzítik. A tesztrendszer reagenseivel (enzimeivel) való kölcsönhatás után az indikátor színe megváltozik. Ezután ezeket a színváltozásokat speciális berendezéssel dolgozzák fel, amely meghatározza az elvégzett elemzés eredményét.

Az ilyen ELISA-tesztek a HIV-fertőzés bejutását követő néhány héten belül mutathatnak eredményt. Ez a teszt nem állapítja meg a vírus jelenlétét, hanem kimutatja a vele szembeni antitestek termelését. Előfordul, hogy az emberi szervezetben a HIV-ellenes antitestek termelése a fertőzés után 2 héttel kezdődik, de a legtöbb embernél később, 3-6 hét után termelődnek.

Az ELISA-teszteknek négy generációja létezik, változó érzékenységgel. Az utóbbi években egyre gyakrabban alkalmazzák a harmadik és negyedik generációs tesztrendszereket, amelyek szintetikus peptideken vagy rekombináns fehérjéken alapulnak, és nagyobb specificitással és pontossággal rendelkeznek. Használhatók a HIV-fertőzés diagnosztizálására, a HIV-prevalencia nyomon követésére és a biztonság garantálására az adományozott vér tesztelésekor. A III és IV generációs ELISA tesztrendszerek pontossága 93-99% (a Nyugat-Európában gyártott tesztek érzékenyebbek - 99%).

Az ELISA teszt elvégzéséhez 5 ml vért vesznek a páciens vénájából. Az utolsó étkezés és az elemzés között legalább 8 órának kell eltelnie (általában reggel, éhgyomorra). Javasoljuk, hogy egy ilyen tesztet legkorábban 3 héttel a fertőzés gyanúja után végezzen (például új szexuális partnerrel való védekezés nélküli szexuális kapcsolat után).

Az ELISA teszt eredményei 2-10 napon belül érhetők el:

• negatív eredmény: HIV-fertőzés hiányát jelzi, és nem szükséges szakemberhez fordulni;
• hamis negatív eredmény: megfigyelhető a fertőzés korai szakaszában (legfeljebb 3 hétig), az AIDS későbbi szakaszában az immunrendszer súlyos szuppressziójával és nem megfelelő vér-előkészítéssel;
• hamis pozitív eredmény: egyes betegségeknél és nem megfelelő vérkészítés esetén is megfigyelhető;
• pozitív eredmény: HIV-fertőzést jelez, IB-t kell végezni, és a betegnek kapcsolatba kell lépnie az AIDS-központ szakemberével.

Miért adhat hamis pozitív eredményt az ELISA teszt?

Hamis pozitív HIV ELISA teszteredmények fordulhatnak elő helytelen vérfeldolgozás miatt, vagy a következő állapotokban és betegségekben szenvedő betegeknél:

• myeloma multiplex;
• az Epstein-Barr vírus által okozott fertőző betegségek;
• állapot után ;
• autoimmun betegség;
• a terhesség hátterében;
• vakcinázás utáni állapot.

A fent leírt okok miatt a vérben olyan nem specifikus, keresztreagáló antitestek lehetnek jelen, amelyek termelődését nem HIV-fertőzés váltotta ki.

Az elmúlt években jelentősen csökkent az álpozitív eredmények gyakorisága a III. és IV. generációs tesztrendszerek alkalmazása miatt, amelyek érzékenyebb peptid- és rekombináns fehérjéket tartalmaznak (in vitro génsebészettel szintetizálják). Az ilyen ELISA tesztek bevezetése után a hamis pozitív eredmények gyakorisága jelentősen csökkent, és körülbelül 0,02-0,5%.

A hamis pozitív eredmény nem jelenti azt, hogy a személy HIV-fertőzött. Ilyen esetekben a WHO újabb ELISA-teszt elvégzését javasolja (szükségképpen IV generációs).

A páciens vérét referencia- vagy választott laboratóriumba küldik „ismétlés” jelzéssel, és IV generációs ELISA tesztrendszerrel tesztelik. Ha az új elemzés eredménye negatív, akkor az első eredményt hibásnak (hamis pozitívnak) kell tekinteni, és az IS nem kerül végrehajtásra. Ha az eredmény pozitív vagy megkérdőjelezhető a második teszt során, a betegnek 4-6 hét után IB-n kell átesnie a HIV-fertőzés megerősítésére vagy cáfolatára.

Immunblotozás

A HIV-fertőzés végleges diagnózisát csak pozitív immunblot (IB) eredmény megszerzése után lehet felállítani. Ennek végrehajtásához nitrocellulóz csíkot használnak, amelyre vírusfehérjéket visznek fel.

Az IB vérmintavétele vénából történik. Ezt követően speciális feldolgozáson esik át, és a szérumában lévő fehérjéket töltésük és molekulatömegük szerint speciális gélben választják el (a manipulációt speciális berendezéssel, elektromos mező hatására végzik). A vérszérum gélre nitrocellulóz csíkot helyeznek, és egy speciális kamrában blottolást („blotolást”) végeznek. A csíkot feldolgozzák, és ha a felhasznált anyagok HIV-ellenes antitesteket tartalmaznak, akkor azok az IB antigén sávjaihoz kötődnek, és vonalként jelennek meg.

Az IB pozitívnak tekinthető, ha:

• az amerikai CDC-kritériumok szerint - két vagy három sor van a gp41, p24, gp120/gp160 csíkon;
• az amerikai FDA kritériumok szerint a csík két p24, p31 és egy gp41 vagy gp120/gp160 vonalat tartalmaz.

Az esetek 99,9%-ában a pozitív IB eredmény HIV-fertőzést jelez.

Ha nincsenek vonalak, az IB negatív.

A gr160, gr120 és gr41 vonalak azonosításakor az IB kétséges. Ez az eredmény akkor fordulhat elő, ha:

• onkológiai betegségek;
• terhesség;
• gyakori vérátömlesztés.

Ilyen esetekben ajánlatos megismételni a vizsgálatot egy másik cég készletével. Ha további IB után az eredmény kétséges marad, akkor hat hónapig kell megfigyelni (az IB-t 3 havonta kell elvégezni).

Polimeráz láncreakció

A PCR teszt képes kimutatni a vírus RNS-ét. Érzékenysége meglehetősen magas, és lehetővé teszi a HIV-fertőzés kimutatását a fertőzést követő 10 napon belül. Egyes esetekben a PCR álpozitív eredményt adhat, mivel nagy érzékenysége más fertőzések elleni antitestekre is reagálhat.

Ez a diagnosztikai technika drága, speciális felszerelést és magasan képzett szakembereket igényel. Ezek az okok nem teszik lehetővé a populáció tömeges tesztelését.

A PCR-t a következő esetekben alkalmazzák:

• HIV-fertőzött anyáktól született újszülötteknél a HIV kimutatása;
• HIV kimutatására az „ablakidőszakban” vagy kétes IB esetén;
• a HIV koncentrációjának szabályozása a vérben;
• donorvér vizsgálatához.

A PCR-teszt önmagában nem állítja fel a HIV diagnózisát, hanem kiegészítő diagnosztikai módszerként végzik el a vitás helyzetek megoldására.

Expressz módszerek

A HIV-diagnosztika egyik újítása a gyorstesztek, amelyek eredménye 10-15 percen belül értékelhető. A leghatékonyabb és legpontosabb eredményeket a kapilláris áramlás elvén alapuló immunkromatográfiás tesztek adják. Ezek speciális csíkok, amelyekre vért vagy más vizsgálati folyadékot (nyál, vizelet) visznek fel. Ha HIV-ellenes antitestek vannak jelen, 10-15 perc elteltével színes és kontrollcsík jelenik meg a teszten - pozitív eredmény. Ha az eredmény negatív, csak a kontrollcsík jelenik meg.

Az ELISA-tesztekhez hasonlóan a gyorstesztek eredményeit IB-analízissel kell megerősíteni. Csak ezt követően lehet diagnosztizálni a HIV-fertőzést.

Vannak gyors otthoni tesztelő készletek. Az OraSure Technologies1 teszt (USA) az FDA által jóváhagyott, vény nélkül kapható, és HIV kimutatására használható. A vizsgálat után, ha az eredmény pozitív, a betegnek ajánlatos vizsgálatot végezni egy speciális központban a diagnózis megerősítésére.

Más otthoni használatra szánt teszteket még nem hagyott jóvá az FDA, és eredményeik nagyon megkérdőjelezhetőek lehetnek.

Annak ellenére, hogy a gyorstesztek gyengébbek, mint az IV generációs ELISA-tesztek, széles körben használják őket a populáció további tesztelésére.

A HIV-fertőzés kimutatására szolgáló teszteket bármelyik klinikán, központi körzeti kórházban vagy speciális AIDS-központban elvégezheti. Oroszország területén abszolút bizalmasan vagy névtelenül hajtják végre. Minden páciens orvosi vagy pszichológiai konzultációra számíthat a vizsgálat előtt vagy után. A HIV-tesztekért csak a kereskedelmi egészségügyi intézményekben kell fizetni, míg az állami klinikákon és kórházakban ingyenesen elvégzik.

Olvassa el, hogyan fertőződhet meg HIV-vel, és milyen mítoszok léteznek a fertőzés lehetőségeivel kapcsolatban.

Jelenleg az új diagnosztikai technológiák lehetővé teszik számos betegség etiológiai és patogenetikai okainak azonosítását, és radikálisan befolyásolják a kezelés eredményeit. Ezeknek a technológiáknak a klinikai gyakorlatba történő bevezetésének talán leglenyűgözőbb eredményeit az immunológia és a fertőző betegségek diagnosztikája területén érték el.

Az enzimkapcsolt immunszorbens és kemilumineszcenciás immunvizsgálatokon alapuló tesztrendszerek különböző osztályú antitestek kimutatására képesek, ami jelentősen növeli a fertőző betegségek diagnosztizálására szolgáló klinikai és analitikai érzékenységi és specificitási módszerek információtartalmát. Meg kell jegyezni, hogy a fertőzések diagnosztizálásában a legjelentősebb előrelépés a polimeráz láncreakciós módszer laboratóriumi gyakorlatba történő bevezetésével kapcsolatos, amely „arany standardnak” tekinthető számos fertőző betegség diagnosztizálásában és a kezelés hatékonyságának értékelésében. betegségek.

A kutatáshoz különféle biológiai anyagok használhatók: szérum, vérplazma, kaparás, biopszia, mellhártya- vagy cerebrospinális folyadék (CSF). Mindenekelőtt a fertőzések laboratóriumi diagnózisának módszerei olyan betegségek azonosítására irányulnak, mint a vírusos hepatitis B, C, D, citomegalovírus fertőzés, szexuális úton terjedő fertőzések (gonorrhoea, chlamydia, mycoplasma, ureaplasma), tuberkulózis, HIV-fertőzés stb.

A HIV-fertőzés a humán immundeficiencia vírus (HIV) által okozott betegség, amely hosszú ideig fennmarad a limfocitákban, makrofágokban és idegszöveti sejtekben, és ennek következtében a szervezet immun- és idegrendszerében lassan progresszív károsodások alakulnak ki, amelyek megnyilvánulnak. másodlagos fertőzések, daganatok, szubakut encephalitis és egyéb kóros elváltozások.

A fertőzés kórokozói - az 1-es és 2-es típusú humán immundeficiencia vírusok (HIV-1, HIV-2) - a retrovírusok családjába, a lassú vírusok alcsaládjába tartoznak. A virionok gömb alakú részecskék, amelyek átmérője 100-140 nm. A vírusrészecskének van egy külső foszfolipid burka, amely bizonyos molekulatömegű glikoproteineket (strukturális fehérjéket) tartalmaz, kilodaltonban mérve. A HIV-1-ben ezek a gpl60, gpl20, gp41. A vírus belső héját, amely a magot borítja, szintén ismert molekulatömegű fehérjék képviselik - p17, p24, p55 (a HIV-2 tartalmaz gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).

A HIV-genom RNS-t és reverz transzkriptáz (revertáz) enzimet tartalmaz. Annak érdekében, hogy egy retrovírus genomja kapcsolódjon a gazdasejt genomjához, először a DNS-t szintetizálják egy virális RNS-templáton, reverz irányú eljárással. A provirális DNS ezután beépül a gazdasejt genomjába. A HIV kifejezett antigén variabilitással rendelkezik, ami jelentősen meghaladja az influenzavírusét.

Az emberi szervezetben a HIV fő célpontja a T-limfociták, amelyek felszínükön a legtöbb CD4 receptort hordozzák. Miután a HIV reversease segítségével bejut a sejtbe, a vírus RNS-mintája alapján DNS-t szintetizál, amely beépül a gazdasejt genetikai apparátusába (CD4 limfociták), és egy életen át ott marad provírus állapotában. A T-limfocita segítőkön kívül a makrofágok, a B-limfociták, a neurogliasejtek, a bélnyálkahártya és néhány más sejt is érintett. A T-limfociták (CD4 sejtek) számának csökkenésének oka nemcsak a vírus közvetlen citopátiás hatása, hanem a nem fertőzött sejtekkel való egyesülésük is. A T-limfociták károsodásával együtt a HIV-fertőzött betegek a B-limfociták poliklonális aktivációját tapasztalják, az összes osztályba tartozó immunglobulinok, különösen az IgG és az IgA szintézisének növekedésével, majd az immunrendszer ezen részének kimerülésével. Az immunfolyamatok szabályozási zavara az α-interferon, a β2-mikroglobulin szintjének növekedésében és az IL-2 szintjének csökkenésében is megnyilvánul. Az immunrendszer működési zavara következtében, különösen, ha a T-limfociták (CD4) száma 400 sejtre csökken 1 μl vérben vagy annál kevesebbre, a HIV kontrollálatlan replikációjának feltételei alakulnak ki, a virionok számának jelentős növekedésével a különböző testekben. a test környezetei. Az immunrendszer számos részének károsodása következtében a HIV-fertőzött személy védtelenné válik a különféle fertőzések kórokozóival szemben.

A fokozódó immunszuppresszió hátterében olyan súlyos, progresszív betegségek alakulnak ki, amelyek normálisan működő immunrendszerű embernél nem fordulnak elő. Ezek olyan betegségek, amelyeket az Egészségügyi Világszervezet (WHO) AIDS-jelző vagy AIDS-meghatározó betegségként definiált.

AIDS-meghatározó betegségek

Az első csoport - csak súlyos immunhiányos betegségek (CD4 szint<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

A második csoport olyan betegségek, amelyek súlyos immunhiány hátterében és bizonyos esetekben anélkül is kialakulhatnak.

Ezért ezekben az esetekben a diagnózis laboratóriumi megerősítése szükséges.

Első csoport:

• a nyelőcső, légcső, hörgők candidiasisa;
• extrapulmonális cryptococcosis;
• cryptosporidiosis hasmenéssel több mint 1 hónapig;
• a májon, a lépen vagy a nyirokcsomókon kívüli különböző szervek citomegalovírusos elváltozásai 1 hónaposnál idősebb betegeknél;
• herpes simplex vírus okozta fertőzés, amely 1 hónapnál hosszabb ideig fennálló fekélyek formájában nyilvánul meg a bőrön és a nyálkahártyán, valamint bármilyen időtartamú hörghurut, tüdőgyulladás vagy nyelőcsőgyulladás, amely egy hónaposnál idősebb beteget érint;
• generalizált Kaposi-szarkóma 60 év alatti betegeknél;
• agyi limfóma (elsődleges) 60 év alatti betegeknél;
• limfocitás intersticiális tüdőgyulladás és/vagy tüdő limfoid diszplázia 12 év alatti gyermekeknél;
• atípusos mikobaktériumok (a M. aviumintracellulare komplex mikobaktériumai) által okozott disszeminált fertőzés, extrapulmonális lokalizációval vagy lokalizációval (a tüdőn kívül) a bőrben, a nyaki nyirokcsomókban, a tüdőgyökerek nyirokcsomóiban;
• Pneumocystis tüdőgyulladás;
• progresszív multifokális leukoencephalopathia;
• agyi toxoplazmózis 1 hónaposnál idősebb betegeknél.

Második csoport:

• kombinált vagy visszatérő bakteriális fertőzések 13 év alatti gyermekeknél (2 év alatti megfigyelés alatt több mint két eset): szepszis, tüdőgyulladás, agyhártyagyulladás, csont- vagy ízületi károsodás, Haemophilus influenzae által okozott tályogok, streptococcusok;
• disszeminált kokcidioidomikózis (extrapulmonális lokalizáció);
• HIV encephalopathia (HIV demencia, AIDS demencia);
• több mint 1 hónapig tartó hasmenéssel járó hisztoplazmózis;
• izosporózis több mint 1 hónapig tartó hasmenéssel;
• Kaposi-szarkóma bármely életkorban;
• agyi limfóma (elsődleges) bármely életkorú embereknél;
• egyéb B-sejtes limfómák (a Hodgkin-kór kivételével) vagy ismeretlen immunfenotípusú limfómák: kissejtes limfómák (például Burkitt limfóma stb.); immunoblasztos szarkómák (immunoblasztos, nagysejtes, diffúz hisztiocitás, diffúz differenciálatlan limfómák);
• disszeminált mycobacteriosis (nem tuberkulózis), a tüdőn kívül a bőr, a nyaki vagy a nyirokcsomók károsodásával;
• extrapulmonális tuberkulózis (a tüdőn kívüli belső szerveket is érint);
• Szalmonella szeptikémia, visszatérő;
• HIV-dystrophia (soványodás, hirtelen fogyás).

Az 1. táblázat (lásd a fenti forráslinket) felsorolja az AIDS-meghatározó betegségeket és azok etiológiai ágenseit.

Az AIDS-nek számos osztályozása létezik.

Az USA Betegségellenőrzési Központja által javasolt új besorolás szerint (2. táblázat – lásd a fenti forrásra mutató hivatkozást) az AIDS diagnózisát a 200/μl-nél kisebb CD4 limfocitaszámmal rendelkező személyek esetében állapítják meg, még AIDS-meghatározó betegségek hiánya.

A B kategóriába különféle szindrómák tartoznak, melyek közül a legfontosabbak a baciláris angiomatosis, oropharyngealis candidiasis, recidiváló vulvovaginális candidiasis, nehezen kezelhető, cervicalis dysplasia, cervicalis carcinoma, idiopathiás thrombocytopeniás purpura, listeriosis, perifériás neuropathia.

HIV-1 és HIV-2 elleni antitestek a vérben

A HIV-1 és HIV-2 elleni antitestek általában hiányoznak a vérszérumból.

A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztizálásának fő módszere a HIV-ellenes antitestek meghatározása. A módszer egy enzimhez kötött immunszorbens vizsgálaton (ELISA) alapul - az érzékenység több mint 99,5%, a specificitás több mint 99,8%. A HIV-ellenes antitestek a fertőzöttek 90-95%-ánál a fertőzést követő 1 hónapon belül, 5-9%-ban - 6 hónap múlva, 0,5-1%-ban - későbbi időpontban jelennek meg. Az AIDS-stádiumban az antitestek száma csökkenhet, amíg teljesen eltűnnek.

A vizsgálat eredményét minőségileg fejezik ki: pozitív vagy negatív.

A negatív teszteredmény azt jelzi, hogy a vérszérumban hiányoznak a HIV-1 és HIV-2 elleni antitestek. A laboratórium azonnal negatív eredményt ad ki, amikor elkészül. Ha pozitív eredményt kapunk - HIV-ellenes antitestek kimutatása - a hamis pozitív eredmények elkerülése érdekében a laboratóriumban, az elemzést még kétszer megismételjük.

Immunoblot a HIV-vírusfehérjék elleni antitestek kimutatására a vérszérumban

A HIV-vírusfehérjék elleni antitestek általában hiányoznak a vérszérumból.

A HIV-ellenes antitestek meghatározására szolgáló ELISA módszer egy szűrési módszer. Ha pozitív eredményt kapunk, annak specifitásának megerősítésére immunblot módszert alkalmazunk - Western-blot - ellenprecipitációt a páciens vérszérumában lévő antitestek géljében különböző vírusfehérjékkel, majd elektroforézissel molekulatömeg alapján elválasztjuk és alkalmazzuk. a nitrocellulózhoz. Meghatározzuk a gp41, gpl20, gpl60, p24, pi8, p17 stb. vírusfehérjék elleni antitesteket.

Az Orosz AIDS Megelőzési és Ellenőrzési Központ ajánlásai szerint a gp41, gpl20, gpl60 glikoproteinek egyike elleni antitestek kimutatását pozitív eredménynek kell tekinteni. Ha más vírusfehérjék elleni antitesteket észlelnek, az eredmény kétségesnek tekinthető, az ilyen beteget kétszer - 3 és 6 hónap elteltével - meg kell vizsgálni.

A specifikus HIV-fehérjék elleni antitestek hiánya azt jelenti, hogy az enzim immunoassay módszer hamis pozitív eredményt adott. Ugyanakkor a gyakorlati munkában, az immunoblot módszer eredményeinek értékelésekor be kell tartani a cég által az alkalmazott „Immunblot készlethez” mellékelt utasításokat.

Az immunblot módszert a HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztizálására használják.

A p24 antigén a vérszérumban

A p24 antigén általában hiányzik a vérszérumban.

A p24 antigén a HIV nukleotid falfehérje. A HIV-fertőzés utáni elsődleges megnyilvánulások szakasza a replikációs folyamat megindulásának következménye. A p24 antigén a fertőzés után 2 héttel jelenik meg a vérben, és ELISA-val 2-8 héten belül kimutatható. A fertőzés pillanatától számított 2 hónap elteltével a p24 antigén eltűnik a vérből. Ezt követően a HIV-fertőzés klinikai lefolyása során a p24 fehérje szintjének második növekedése figyelhető meg a vérben. Az AIDS kialakulása során esik. A p24 antigén kimutatására szolgáló meglévő ELISA tesztrendszereket használják a HIV korai kimutatására véradóknál és gyermekeknél, meghatározzák az AIDS lefolyásának prognózisát és figyelemmel kísérik a terápiát AIDS-ben szenvedő betegeknél. Az ELISA nagy analitikai érzékenységgel rendelkezik, amely lehetővé teszi a HIV-1 p24 antigén kimutatását a vérszérumban 5-10 pkg/ml koncentrációban és a HIV-2 - 0,5 ng/ml-nél kisebb koncentrációban, valamint a specificitást. Meg kell azonban jegyezni, hogy a p24 antigén szintje a vérben egyéni eltérések függvénye, ami azt jelenti, hogy ezzel a teszttel csak a betegek 20-30%-a mutatható ki a fertőzést követő korai időszakban (Rose N.R. et al., 1997).

Az IgM és IgG osztályba tartozó p24 antigén elleni antitestek a 2. héttől jelennek meg a vérben, 2-4 héten belül elérik a csúcsot, és különböző ideig ezen a szinten maradnak: IgM osztályú antitestek - több hónapig, egy éven belül eltűnnek. fertőzés, és az IgG antitestek évekig fennmaradhatnak.

A HIV-fertőzés diagnosztizálásának algoritmusa a betegség fázisától függ, és a különböző osztályokba tartozó antitestek kimutatásának dinamikájában bekövetkezett változások jellemzik (1. ábra, 2 - lásd a fenti forrásra mutató hivatkozást).

A vizsgálat eredményét minőségileg fejezik ki - pozitív vagy negatív. A negatív teszteredmény azt jelzi, hogy a vérszérumban hiányoznak a HIV-1 és HIV-2 és p24 antigén elleni antitestek.

A laboratórium azonnal negatív eredményt ad ki, amikor elkészül. Ha pozitív eredményt kapunk - HIV-1 és HIV-2 és/vagy p24 antigén elleni antitestek kimutatása - annak érdekében, hogy elkerüljük a téves pozitív eredményeket a laboratóriumban, az elemzést még kétszer megismételjük.

A vizsgálat eredményétől függetlenül a beteg vérmintáját és 3 vizsgálat eredményét a laboratórium elküldi a regionális AIDS-központba, hogy megerősítse a pozitív eredményt, vagy ellenőrizze a határozatlan eredményt. Ilyen esetekben a végső választ erre a tanulmányra a regionális AIDS-központ adja ki.

A HIV kimutatása polimeráz láncreakcióval (kvalitatív)

A HIV kimutatása polimeráz láncreakcióval - PCR (kvalitatív) a következő célokból történik:

• megkérdőjelezhető immunoblot-eredmények megoldása;
• a HIV-fertőzés korai diagnosztizálására;
• a vírusellenes kezelés hatékonyságának ellenőrzése;
• az AIDS stádiumának meghatározása (a fertőzés betegséggé való átmenete).

Az elsődleges HIV fertőzés során a PCR módszerrel a fertőzés után 10-14 nappal kimutatható a HIV RNS a vérben.

A vizsgálat eredményét minőségileg fejezik ki: pozitív vagy negatív. A negatív teszteredmény azt jelzi, hogy nincs HIV RNS a vérben.

A pozitív eredmény - a HIV RNS kimutatása - azt jelzi, hogy a beteg fertőzött.

HIV kimutatása polimeráz láncreakcióval (kvantitatív)

Általában nincs HIV a vérben.

A HIV-RNS PCR-rel történő közvetlen kvantifikálása lehetővé teszi az AIDS kialakulásának pontosabb előrejelzését HIV-fertőzötteknél, mint a CD4 sejtszám meghatározása, és ezáltal pontosabban felmérni túlélésüket. A vírusrészecskék magas szintje általában súlyos immunkárosodással és alacsony CD4-sejtszámmal korrelál. A vírusrészecskék alacsony szintje általában jobb immunállapottal és magasabb CD4-sejtszámmal korrelál. A vírus RNS-tartalma a vérben lehetővé teszi, hogy előre jelezzük a betegség átmenetét a klinikai stádiumba. Ha a HIV RNS-1 tartalom >74 100 kópia/ml, szinte minden betegnél kialakul az AIDS klinikai képe (Senior D., Holden E., 1996).

Az AIDS kialakulásának valószínűsége 10,8-szor nagyobb azoknál a személyeknél, akiknél a HIV-1 vérszintje meghaladja a 10 000 kópia/ml-t, mint azoknál, akiknek a vérszintje HIV-1<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

Amerikai szakértők egy csoportja javallatokat dolgozott ki a HIV-fertőzött betegek kezelésére. A kezelés olyan betegek számára javasolt, akiknek a vérében alacsony a CD4 sejtszáma<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20 000 másolat/ml (PCR). A HIV-fertőzött emberek antiretrovirális terápiájának eredményeit a szérum HIV RNS szintjének csökkentésével értékelik.

Hatékony kezelés mellett a virémia szintjének 10-szeresére kell csökkennie az első 8 hét során, és a módszer érzékenységi határa (PCR) alatt kell lennie.<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.

Így ma már számos kutatási módszert vezettek be és alkalmaznak a klinikai gyakorlatban a HIV-fertőzés diagnosztizálására, mint minden más vírusfertőzés esetében. Közülük a szerológiai vizsgálatoké a vezető szerep. A HIV-fertőzések diagnosztizálásának fő módszereit a 3. táblázat mutatja be (lásd a fenti forráshivatkozást), ahol négy szintre vannak osztva attól függően, hogy az egyes módszerek mennyire fontosak a vírusok kimutatására:

• A - tesztet általában a diagnózis megerősítésére használnak;
• B - teszt bizonyos körülmények között hasznos a fertőzés bizonyos formáinak diagnosztizálására;
• A C - tesztet ritkán használják diagnosztikai célokra, de nagy jelentőséggel bír az epidemiológiai felméréseknél;
• A D-tesztet a laboratóriumok általában nem használják diagnosztikai célokra.

Mivel a vírusfertőzések diagnosztizálásához az optimális elemzési módszer megválasztása mellett a bioanyag helyes azonosítása és kutatási célú gyűjtése is ugyanolyan fontos, a 4. táblázat (lásd a fenti forrás hivatkozását) ajánlásokat ad a tanulmányozáshoz optimális bioanyag kiválasztásához. HIV fertőzés.

A HIV-fertőzöttek megfigyeléséhez ki kell használni az immunállapot átfogó vizsgálatának lehetőségeit - minden kapcsolat kvantitatív és funkcionális meghatározását: humorális, celluláris immunitást és általában a nem specifikus rezisztenciát.

Modern laboratóriumi körülmények között az immunológiai állapot felmérésének többlépcsős elve magában foglalja a limfociták és a vér immunglobulinjainak alpopulációjának meghatározását. A mutatók értékelésekor figyelembe kell venni, hogy a HIV-fertőzést a CD4/CD8 T-sejt arány 1-nél kisebb csökkenése jellemzi. Az 1,5-2,5 közötti CD4/CD8 index normergikus állapotot jelez, a 2,5 feletti érték a hiperaktivitás, kevesebb 1,0 - immunhiányt jelez. Ezenkívül a CD4/CD8 arány 1-nél kisebb lehet a gyulladásos folyamat súlyos eseteiben.

Ez az arány alapvető fontosságú AIDS-es betegek immunrendszerének értékelése során, mivel a HIV szelektíven fertőzi és pusztítja el a CD4 limfocitákat, aminek következtében a CD4/CD8 arány jelentősen 1-nél kisebb értékekre csökken.

Az immunológiai állapot értékelése a celluláris és humorális immunrendszer általános vagy „durva” hibáinak azonosításán is alapul: hipergammaglobulinémia (megnövekedett IgA, IgM, IgG koncentráció) vagy hypogammaglobulinémia a terminális stádiumban; a keringő immunkomplexek fokozott koncentrációja; csökkent citokinek termelés; a limfociták antigénekre és mitogénekre adott válaszának gyengülése.

A B-limfociták általános készletében lévő populációk arányának megsértése a humorális immunitás elégtelenségére jellemző. Ezek a változások azonban nem specifikusak a HIV-fertőzésre, és más betegségekben is előfordulhatnak. Számos egyéb laboratóriumi paraméter átfogó értékelése során figyelembe kell venni, hogy a HIV-fertőzést a következők is jellemzik: vérszegénység, limfo- és leukopenia, thrombocytopenia, megnövekedett β2-mikroglobulin és C-reaktív fehérje szint, valamint megnövekedett transzaminázszint. aktivitás a vérszérumban.

A szerzett immunhiányos szindróma több mint negyven éve a modern társadalom egyik kulcsproblémája. Ezért a HIV-diagnosztika ma már sok figyelmet és forrást vonz. Végtére is, minél hamarabb észlelnek egy vírust, amely tönkreteszi a szervezet immunrendszerét, annál nagyobb az esély a halál elkerülésére.

A probléma lényege

A HIV rövidítés alatt egy meghatározás található – a jelenleg létezők közül az egyik legveszélyesebb. Hatása alatt a test összes védő tulajdonsága mélyen elnyomódik. Ez viszont különféle rosszindulatú daganatok és másodlagos fertőzések előfordulásához vezet.

A HIV-fertőzés különböző módon fejlődhet. Néha a betegség 3-4 év alatt tönkreteszi az embert, de bizonyos esetekben akár 20 évnél is tovább tarthat. Érdemes tudni, hogy ez a vírus instabil és gyorsan elpusztul, ha a gazdaszervezeten kívül van.

A HIV mesterségesen, vérrel való érintkezés útján és biokontaktus mechanizmuson keresztül terjedhet.

Ha egyszeri érintkezés történt a vírus hordozójával, akkor a fertőzés kockázata alacsony lesz, de állandó interakció esetén jelentősen megnő. A HIV-fertőzés diagnosztizálását nem szabad figyelmen kívül hagyni, különösen a szexuális partnerek megváltoztatásakor

Érdemes odafigyelni a fertőzés parenterális útjára. Előfordulhat fertőzött vér vérátömlesztése, HIV-fertőzöttek vérével szennyezett tűvel történő injekciózás során, valamint nem steril orvosi eljárások során (tetoválás, piercing, fogászati ​​beavatkozások nem megfelelően kezelt műszerekkel) .

Ugyanakkor érdemes tudni, hogy nem kell tartani a vírus érintkezésétől és háztartási átvitelétől. De a tény továbbra is fennáll: egy személy nagyon fogékony a HIV-fertőzésre. Ha pedig egy 35 év feletti alany megfertőződik, akkor az AIDS kialakulása lényegesen gyorsabban megy végbe, mint azoknál, akik még nem lépték túl a harminc éves határt.

Fő tünetek

Természetesen a probléma vagy annak hiánya azonosításának legjobb módja a HIV-diagnózis. De milyen okai lehetnek annak, hogy egy egészséges életmódot folytató ember elmenjen és ellenőriztesse magát fertőzése szempontjából? Természetesen egy ilyen kezdeményezést valamilyen módon indokolni kell. Ezért fontos tudni, hogy milyen tünetek utalhatnak az immunrendszert elnyomó destruktív folyamatokra.

Nem valószínű, hogy a vírus inkubációs szakaszát vérvizsgálat nélkül lehet azonosítani, mivel a szervezet ebben az időben még semmilyen módon nem reagál az ellenséges elemekre.

A második szakasz (elsődleges megnyilvánulások) orvos segítsége nélkül is észrevétlen marad. De néha előfordul a vírus aktív replikációja, és a szervezet reagál erre - láz, különféle polimorf kiütések, lineáris szindróma és pharyngitis. A második szakaszban másodlagos betegségek, például herpesz, gombás fertőzések, tüdőgyulladás stb.

A harmadikat az immunhiány fokozatos növekedése jellemzi. Mivel a védőrendszer sejtjei elpusztulnak, termelésük dinamikája megnő, és ez lehetővé teszi a jelentős veszteségek kompenzálását. Ebben a szakaszban több különböző rendszerhez tartozó nyirokcsomó is begyulladhat. De erős fájdalmas érzések nem figyelhetők meg. Átlagosan a látens időszak 6-7 év, de akár 20 évig is eltarthat.

A szekunder betegségek stádiumában, amely a negyedik, egyidejűleg gombás, bakteriális protozoon, vírus eredetű fertőzések, valamint rosszindulatú képződmények jelennek meg. Mindez súlyos immunhiány hátterében történik.

A HIV-fertőzés diagnosztizálásának módszerei

A szervezet védekező mechanizmusainak a vírusnak való kitettség miatti mély elnyomásáról beszélve érdemes megjegyezni, hogy a beteg jövője ebben az esetben közvetlenül függ az időszerű és pontos diagnózistól.

Erre a célra a modern orvostudomány különféle tesztrendszereket alkalmaz, amelyek immunkemilumineszcens és enzimkapcsolt immunszorbens vérvizsgálatokon alapulnak. Ezek a technikák lehetővé teszik a különböző osztályokhoz tartozó antitestek jelenlétének meghatározását. Ez az eredmény jelentősen növeli a fertőző betegségekkel végzett munka során az analitikai, klinikai specifitás és érzékenység módszereinek információtartalmát.

Érdekes az is, hogy a polimeráz láncreakciós módszer tette lehetővé a HIV-diagnosztika alapvetően új szintre emelését. Különféle biológiai anyagok alkalmasak kutatásra: vérplazma, biopszia, kaparás, szérum, agy-gerincvelői vagy pleurális folyadék.

Ha laboratóriumi kutatási módszerekről beszélünk, azok elsősorban több kulcsbetegség azonosítására irányulnak. HIV-fertőzésről, tuberkulózisról, minden szexuális úton terjedő fertőzésről és vírusos hepatitisről beszélünk.

Az immunhiányos vírus azonosítására molekuláris genetikai és szerológiai teszteket is alkalmaznak. Az első esetben a vírus RNS-ét és a provírus DNS-ét határozzák meg, a második esetben a HIV elleni antitestek elemzése és a P24 antigén kimutatása történik.

Azokon a klinikákon, ahol úgymond klasszikus diagnosztikai módszereket alkalmaznak, főleg a standard szerológiai vizsgálati protokollt alkalmazzák.

A HIV korai diagnózisa

A fertőzés tényének ilyen típusú meghatározása azért szükséges, hogy a lehető legkorábban azonosítsák az immunrendszer károsodásának veszélyét. Ez egyrészt lehetővé teszi a fertőzés terjedésének elkerülését, másrészt a betegség kezdeti szakaszában történő befolyásolását.

Ha figyelembe vesszük Oroszország példáját, az Orosz Föderáció hadseregében és haditengerészetében bevezették a HIV-fertőzés klinikai osztályozását. Ez pozitív eredményeket hozott: a korai klinikai diagnózis folyamata sokkal könnyebbé vált.

Az immunrendszer lehetséges károsodására utaló gyakori tünetek közé tartozik a fejfájás, az éjszakai izzadás és a motiválatlan fáradtság. Lehetséges továbbá a mandulagyulladás jeleivel járó láz kialakulása is. Ez azt jelenti, hogy a hőmérséklet 38 fokra vagy magasabbra emelkedik, és ezzel egyidejűleg a mandulák megnagyobbodnak, nyelés közben fájdalom jelentkezik. Mindezt gyors fogyás egészíti ki. Ráadásul ezek a tünetek gyakran összetettek.

Egyes esetekben a HIV-fertőzés korai szakaszában a bőr állapotának különböző változásaiban nyilvánulhat meg. Foltokról, roseolákról, pustulákról, furunculosisról stb. beszélünk. A HIV korai diagnózisa magában foglalja az olyan tünetekkel való munkát is, mint a perifériás nyirokcsomók általános vagy korlátozott megnagyobbodása.

Ha több nyirokcsomó egyidejű, három hónapig vagy tovább tartó növekedése van, és különböző csoportokban, kivéve az ágyék környékét, akkor minden okunk van az emberi immunrendszer vírusára gyanakodni.

Ha a későbbi diagnózisról beszélünk, figyelni kell a másodlagos immunhiány megnyilvánulására, amely gyakran különböző klinikai tünetek leple alatt fordul elő. A következő megnyilvánulásokról beszélünk:

• motiválatlan generalizált perifériás lymphadenopathia;
• ismeretlen etiológiájú ízületi fájdalom, amely hullámos lefolyású;
• ARVI (ARI), a tüdő és a légutak gyulladásos elváltozásai, amelyek gyakran érezhetők;
• ismeretlen eredetű láz és hosszan tartó alacsony fokú láz;
• általános mérgezés, amely motiválatlan gyengeségben, fáradtságban, letargiában stb.

A HIV késői diagnosztizálása magában foglalja egy olyan betegség kivizsgálását, mint a Kaposi-szarkóma, amely többszörös daganat megjelenésében nyilvánul meg, fiataloknál gyakran a test felső részében, amit dinamikus fejlődés és metasztázis követ.

Polimeráz láncreakció

A HIV-fertőzés diagnosztizálására szolgáló különféle módszerek mérlegelésekor erre érdemes különös figyelmet fordítani. Azonnal meg kell jegyezni, hogy ez a vérvizsgálat mennyiségi és minőségi jellemzőkre irányulhat.

A vírus kimutatására szolgáló módszer célja a következőképpen határozható meg:

• a HIV-fertőzés korai diagnosztizálása;
• megkérdőjelezhető eredmények jelenlétének tisztázása immunblot vizsgálat eredményeként;
• a betegség meghatározott szakaszának azonosítása;
• a vírus elnyomását célzó kezelés hatékonyságának ellenőrzése.

Ha elsődleges fertőzésről beszélünk, meg kell jegyezni, hogy ez a technika lehetővé teszi a HIV RNS meghatározását a páciens vérében a fertőzés pillanatától számított 14 nap elteltével. Ez nagyon jó eredmény. Ebben az esetben magának a vizsgálatnak az eredménye minőségi kifejeződése lesz: vagy pozitív (a vírus jelen van), vagy negatív.

Kvantitatív PCR expresszió

Ezt a típust az AIDS lehetséges fejlődési ütemének meghatározására és a beteg várható élettartamának előrejelzésére használják.

A HIV RNS-sejtek mennyiségi meghatározása a vérben lehetővé teszi annak megértését, hogy a betegség mikor lép be a klinikai stádiumba.

Érdemes odafigyelni arra, hogy a HIV laboratóriumi diagnosztikai módszerei pontosabb eredményt adnak, ha az elemzéshez szükséges bioanyagot helyesen határozzák meg, és gyűjtését szakszerűen végzik.

A fertőzött emberek magas színvonalú monitorozása érdekében (ha lehetséges) integrált megközelítést kell alkalmazni a páciens immunállapotának tanulmányozására. A védekező rendszer minden részének mennyiségi és funkcionális meghatározottságáról beszélünk: a sejtes, humorális immunitásról és a nem specifikus rezisztenciáról mint olyanról.

Laboratóriumi diagnosztika

A modern laboratóriumi körülmények között egyre gyakrabban alkalmaznak többlépcsős módszert az immunrendszer állapotának felmérésére. Ez a technika gyakran magában foglalja az immunglobulinok és limfociták alpopulációjának meghatározását a vérben. Ez azt jelenti, hogy az arányt veszik figyelembe, ha az eredmény 1,0-nál kisebb értéket mutat, akkor van ok immunhiányra gyanakodni.

A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnózisának tartalmaznia kell ezt a tesztet, mivel ezt a vírust a CD4 limfociták szelektív károsodása jellemzi, ami a fent említett arány (1,0 alatti) észrevehető megsértéséhez vezet.

Az immunológiai állapot felmérése érdekében az orvosok vizsgálatot végezhetnek a humorális és celluláris immunrendszer „durva” vagy általános hibáinak jelenlétére. Hipogammaglobulinémiáról vagy hipergammaglobulinémiáról beszélünk, valamint a citokinek termelésének csökkenéséről, a keringő immunkomplexek koncentrációjának növekedéséről, valamint a limfociták mitogénekre és antigénekre adott válaszának gyengüléséről.

Érdemes odafigyelni arra a tényre, hogy a HIV laboratóriumi diagnózisának két kulcsfontosságú szakasza van:

1. Szűrőlaboratórium. Ha az ELISA (enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat) pozitív eredményt ad, akkor azt még kétszer megismételjük ugyanabban a rendszerben a szérum megváltoztatása nélkül. Abban az esetben, ha a három vizsgálat közül kettő a vírus hatásának kimutatásához vezet, a szérumot további vizsgálatra referencialaboratóriumba küldik.
2. A második szakasz, amely magában foglalja a HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztikai módszereit, az immunrendszer állapotának meghatározása. Ezt a fent említett referencialaboratóriumban végzik. Itt ismét ELISA-ban tesztelik a pozitív szérumot, de egy másik tesztrendszerrel, amely az antigének, antitestek összetételében vagy maguk a tesztek formátumában különbözik az előzőtől. Negatív eredmény esetén egy harmadik tesztrendszerben ismételt vizsgálatot kell végezni. Ha a vírus hatását végül nem észlelték, akkor a HIV-fertőzés hiányát rögzítik. De ha az eredmény pozitív, a szérumot lineáris vagy immunoblottal vizsgálják.

Végső soron egy ilyen algoritmus pozitív, semleges vagy negatív eredményekhez vezet.

Minden állampolgárnak tudnia kell, hogy elérhető a HIV-diagnosztika. Az AIDS a magán-, önkormányzati vagy állami egészségügyi ellátórendszer intézményeiben azonosítható.

Kezelés

Természetesen a vírus azonosítása nem sok hasznot hoz a fertőzés befolyásolására szolgáló különféle módszerek hiányában. És bár jelenleg még mindig nincs vakcina, amely teljesen semlegesítené a vírust, a kompetens diagnózis, a HIV kezelése és az azt követő megelőzés jelentősen javíthatja a beteg állapotát, meghosszabbítva ezzel az életét. Ezt a tézist megerősíti, hogy a HIV-kezelést időben megkezdett férfiak átlagos várható élettartama 38 év. Azok a nők, akik elkezdik a harcot az immunhiányos vírussal, átlagosan 41 évig élnek.

A diagnózis felállítása után a HIV-kezelés több technikát alkalmaz. Az egyik leggyakoribb az aktív antiretrovirális terápia, más néven HAART. Ha ezt a fajta kezelést azonnal és helyesen alkalmazzák, jelentősen lelassíthatja vagy teljesen megállíthatja az AIDS kialakulását.

A HAART lényege, hogy egyidejűleg több gyógyszert alkalmaznak, amelyek célja az immunhiányos vírus különböző fejlődési mechanizmusainak befolyásolása.

Miután a különböző HIV-diagnosztikai módszerek meghatározták a fertőzés tényét, a következő hatásokkal rendelkező gyógyszerek alkalmazhatók:

• Immunológiai. Az immunrendszer stabilizálódik, a T-limfociták szintje emelkedik, és helyreáll a különféle fertőzésekkel szembeni védelem.
• Klinikai. Megakadályozzák az AIDS kialakulását és bármely megnyilvánulását, meghosszabbítják a betegek életét, miközben minden testfunkció megmarad.
• Virológiai. A vírus replikációja blokkolva van, ennek eredményeként csökken, és ezt követően alacsony szinten rögzül.

Nehéz túlbecsülni az olyan intézkedések fontosságát a betegség befolyásolására, mint a HIV-fertőzés diagnosztizálása, kezelése és megelőzése. Ezért a legjobb, amit a fertőzésre vonatkozó pozitív teszteredmény után tehetünk, az, hogy azonnal megkezdjük a betegség elleni küzdelmet. Egy másik módszer, amely segíthet ebben, a virológiai kezelés.

Ebben az esetben olyan gyógyszerek alkalmazásáról beszélünk, amelyek nem engedik, hogy a vírus a T-limfocitához kapcsolódjon és bejusson a szervezetbe. Ezeket a gyógyszereket penetráció-gátlóknak nevezik. Konkrét példa a Celsentry.

A vírusproteáz inhibitorok használhatók a HIV elnyomására. Ennek a gyógyszercsoportnak az a célja, hogy megakadályozza az új limfociták fertőzését. Ezek olyan gyógyszerek, mint a Viracept, Reyataz, Kaletra stb.

A helyi gyógyszerek harmadik csoportját a reverz transzkriptáz inhibitorok alkotják. Szükségesek annak az enzimnek a blokkolásához, amely lehetővé teszi a vírus RNS-ének szaporodását a limfocita sejtmagjában. Az ilyen módszerek jelentős hatással lehetnek olyan problémákra, mint például a HIV-fertőzés. Az AIDS diagnosztizálása, kezelése és megelőzése szakképzett orvosok munkája, ezért nekik kell összeállítaniuk a gyógyszerek alkalmazásának algoritmusát.

Szükség esetén immunológiai és klinikai beavatkozások is alkalmazhatók.

Megelőzés

Az Egészségügyi Világszervezet a következő módszereket javasolja a HIV-fertőzés leküzdésére:

• A szexuális terjedés megelőzése. Ezek közé tartozik a védett szex, az óvszerosztás, az STD-kezelés és az oktatási programok.
• HIV-fertőzéssel diagnosztizált terhes nők számára - diagnózis, megelőzés megfelelő vegyszerekkel, valamint szakmai tanácsadás és kezelés.
• A megelőzés megszervezése vérkészítményeken keresztül. Ebben az esetben vírusellenes feldolgozásról és a donorok szűréséről beszélünk.
• Szociális és orvosi segítségnyújtás a betegeknek és családtagjaiknak.

Annak érdekében, hogy a HIV-diagnózis ne tárja fel a vírus jelenlétét, egyszerű biztonsági szabályokat kell követnie:

• ha a fertőzött személy vére a bőrre kerül, azonnal le kell mosni szappannal és vízzel, majd kezelni kell az érintkezési területet alkohollal;
• ha a sérülést víruselemeket tartalmazó tárgy okozta, akkor a sebet össze kell nyomni, a vért ki kell préselni, a területet hidrogén-peroxiddal kezelni, a széleit jóddal kell kauterizálni;
• soha ne használjon fecskendőt, amelynek sterilitása sérült;
• Használjon óvszert szexuális kapcsolat során, és jobb, ha először megvizsgálja partnerét, hogy nincs-e fertőzés.

Eredmények

Köszönhetően annak, hogy a HIV-diagnózis nem áll meg, több ezer embernek van lehetősége időben elkezdeni a kezelést, és jelentősen meghosszabbítani várható élettartamát. A legfontosabb dolog az, hogy ne hagyja figyelmen kívül a nyilvánvaló tüneteket, és ne féljen orvoshoz menni.

Többféle módszerrel készül. Úgy tűnik, semmi sem egyszerűbb, mint a betegség vérmintavétellel történő azonosítása. De ez nem így van. A HIV diagnózisa valóban kimutatható így, de a további kutatások különböző módszerekkel folynak. Nagymértékben meghatározzák, hogy milyen kezelést írnak elő a betegnek, és milyen intézkedéseket tesznek ezt követően. A legelterjedtebb és leghatékonyabb módszerek közé tartozik a szűrőelemzés és az immunblot. Mindegyiket részletesebben meg kell vizsgálni.

AIDS diagnózis: szűrővizsgálat

A HIV-fertőzés diagnosztizálásának kezdeti szakaszában szűrővizsgálatot vagy ELISA-tesztet alkalmaznak. Ennek a módszernek a kidolgozásakor mesterségesen hoztak létre vírusfehérjéket a laboratóriumban. Különleges módon reagálnak az antitestekre. Ez utóbbiak akkor keletkeznek a szervezetben, amikor szörnyű betegséggel fertőzött sejtek jelennek meg benne. A HIV laboratóriumi diagnózisa ebben az esetben mesterséges enzimek felhasználásával történik. Amikor kölcsönhatásba lépnek az antitestekkel, bizonyos színt kapnak. Egy indikátorral ellátott csíkot, miután vér került rá, egy speciális eszköz alá helyezik, amelynek segítségével megállapítható, hogy egy személynek van-e ez a betegsége vagy sem. A HIV diagnosztizálásának modern módszerei, beleértve az ELISA-t is, lehetővé teszik a fertőzés tényének vagy hiányának nagy pontosságú meghatározását. De mint minden berendezésnél, a szűrőelemző berendezésben is van egy hiba. Éppen ezért, ha szükséges, a beteg ismételten elvégzi a vizsgálatot.

Fontos tudni, hogy az ELISA teszt az egyik legkorábbi módszer az immunhiány-vírus jelenlétének meghatározására a szervezetben. A HIV-fertőzés olyan diagnózis, amelyet csak a fertőzés után néhány héttel lehet kimutatni. Amikor a fertőzött sejtek belépnek a véráramba, a szervezet immunrendszere aktívan ellenáll. Antitestek képződnek, amelyeket két-három hét múlva laboratóriumi vizsgálattal mutatnak ki. A HIV-fertőzés korai diagnosztizálása ELISA-teszt segítségével lehetővé teszi az immunhiányos vírus elleni antitestek kimutatását egy személy vérében. Ez a fő különbség a többi modern módszertől.

Érdemes megjegyezni, hogy egyeseknél egy későbbi időpontban kezdenek antitestek képződni ezzel a betegséggel szemben. A fertőzés pillanatától a folyamat kezdetéig három-hat hétig tarthat. Ezért javasolják az orvosok, hogy négy-öt héttel védekezés nélküli szexuális kapcsolat vagy egyéb ok után szűrővizsgálatot végezzenek a véletlen fertőzés gyanúja miatt.

A HIV-fertőzés ELISA-val történő laboratóriumi diagnosztizálására szolgáló módszereket hosszú időn keresztül fejlesztették ki. Jelenleg a tesztek négy generációja létezik. Ezek közül a legpontosabbak és leghatékonyabbak azok, amelyeket legutóbb fejlesztettek ki. A HIV-fertőzés és az AIDS laboratóriumi diagnosztizálása az ELISA tesztek harmadik és negyedik generációjával rekombináns fehérjék és peptidek felhasználásával történik. Ezeknek a teszteknek a érzékenysége a szervezet által termelt antitestekre 92-93%. Orosz kutatási módszerekről beszélünk. Az európaiak megtanultak hasonló teszteket végezni 99%-os érzékenységgel.

A HIV-fertőzés ELISA-n alapuló laboratóriumi diagnózisának modern módszereit nemcsak a betegség jelenlétének kimutatására használják. Szűrőanalízis segítségével nyomon követhető az immunhiányos vírus terjedése, valamint a donorok vérvétele előtt vizsgálati anyag gyűjthető.

Az ELISA egy standard módszer a HIV-fertőzés diagnosztizálására: hogyan történik, miért ad hamis eredményt?

A HIV és az AIDS diagnosztizálása ELISA-val standard eljárás. A beteg vérét vénából veszik. Öt milliliter anyag elegendő az elemzéshez. Klinikai A HIV 2-es és 1-es típusát legalább nyolc órával a lenyelés után diagnosztizálják. Az orvosok azt javasolják, hogy reggel éhgyomorra végezzék el. A teljes vizsgálat eredménye két-három napon belül ismert. Az expressz szűrés rövidebb idő alatt történik. Ez általában csak néhány órát vesz igénybe. Ebben az esetben azonban a hiba növekszik. A HIV expressz diagnosztizálása sürgős esetekben szükséges, például amikor a betegnek sürgős műtétre van szüksége. Az ilyen elemzést a nem tervezett sebészeti beavatkozások előtt el kell végezni, mert ha a betegnek immunhiányos vírusa van, az orvosok fokozott biztonsági intézkedéseket tartanak be. A HIV-fertőzés rövid időn belüli klinikai diagnosztizálása olyan esetekben is szükséges, amikor az adományozott vért gyorsan kell összegyűjteni egy másik beteg megmentése érdekében.

Vannak esetek, amikor egy személynél AIDS-et vagy HIV-fertőzést diagnosztizáltak, de ennek eredményeként nem erősítették meg, vagy fordítva. Miért történik ez az ELISA teszt esetében? A hamis negatív eredmény annak a ténynek köszönhető, hogy a vért nem megfelelően készítették elő a vizsgálathoz. Ennek oka néha a gyűjtés helytelen végrehajtása. A HIV-fertőzés diagnózisának ellenőrzésekor kapott hamis negatív eredményt még akkor sem erősítik meg, ha a vizsgálathoz szükséges anyagokat túl korán vették fel. Végül is legalább három hétnek el kell telnie a fertőzés után. Vannak esetek, amikor az immunhiányos vírus kimutatásának eredménye hamis pozitív. Ez az emberi szervezet immun- és hormonrendszerének általános állapotának köszönhető. A legtöbb esetben a beteg olyan betegségeket tapasztal, amelyek hamis pozitív eredmény következményei. Alkoholos hepatitisről beszélünk, amelyben a máj speciális enzimeket termel, amelyek a HIV hibás diagnózisát okozhatják. A terhesség és egyes autoimmun betegségek, valamint a myeloma multiplex szintén téves pozitív eredményt okozhatnak. Ez a lista tartalmazhat dializált betegeket és olyan személyeket, akiket röviddel a HIV differenciáldiagnózisa előtt beoltottak.

A szűrőelemzésről szólva fontos megjegyezni, hogy ez a kutatási módszer megerősítést igényel. Az orvosok, mielőtt ez alapján diagnosztizálják a HIV-fertőzést, mindig immunblot-vizsgálatra küldik a beteget.

A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztikájának alapvető módszerei: immunoblot

Az AIDS-t, amelynek diagnosztizálása és kezelése szorosan összefügg egymással, többféleképpen észlelik. Mint fentebb említettük, egy ELISA-teszt nem elegendő a diagnózis végleges meghatározásához. A HIV-fertőzés differenciáldiagnózisát ebben az esetben immunoblot-vizsgálat egészíti ki. A modern orvoslásban ezt a diagnózis végső megerősítő módszerének nevezik. Ebben az esetben a páciens vérében lévő fehérjéket kutatásra használják. Egy speciális gélben választják el őket, majd a laboratóriumi dolgozóknak lehetőségük van a vér molekuláris összetételének tanulmányozására.

A HIV-nek ezzel a módszerrel történő diagnosztizálásához szükséges idő egy és három nap között van. A vizsgálathoz vért vesznek az alany vénájából, és géllel ellátott teszterre helyezik. A megkérdőjelezhető eredmény előfordulhat terhesség, onkológiai folyamatok jelenléte vagy tuberkulózis idején. A teszt álnegatív reakciója akkor fordulhat elő, ha a tesztet helytelenül vagy túl korán végzik el. A fertőzés pillanatától számítva legalább három hétnek el kell telnie. Végül is a HIV diagnosztizálásának időtartama közvetlenül az immunrendszer állapotától függ.

Egyéb módszerek az AIDS és a HIV diagnosztizálására

Az AIDS sugárdiagnosztikai módszereit általában a terminális vagy másodlagos szakaszokban használják. Segítségükkel azonosíthatók a szervezetben másodlagos betegségek vagy opportunista fertőzések következtében fellépő változások.

A HIV biorezonancia diagnosztikáját, más néven nemlineáris szkennelést elsősorban magánklinikákon alkalmazzák az immunhiányos vírus kimutatására. A hivatalos orvoslás ezt a módszert nem tartja elég pontosnak és hatékonynak. Talán a nemlineáris diagnosztika fejlesztése a jövőben lehetővé teszi ennek a szörnyű diagnózisnak a felismerését már az inkubációs időszakban.

A HIV-fertőzés diagnózisa: szerológiai módszer és jellemzői

Ez egy viszonylag új technika, amelyben a HIV-fertőzés diagnosztizálásának laboratóriumi kritériumai az antigén-antitest elven alapulnak. Az immunhiányos vírus esetében az emberi szervezetben a vírus elleni antitestek keresése történik. Ehhez mesterségesen előállított antigént használnak, amelyre az antitesteknek reagálniuk kell. A HIV-fertőzés specifikus szerológiai markerei specifikus változásokat okoznak a vér összetételében. Érdemes megjegyezni, hogy ez a kutatási módszer a leghatékonyabb az akut szakaszban, amely szerokonverzióval végződik. Ezt egy tünetmentes látens periódus követi, amely alatt nem könnyű megtalálni az antigént.

A HIV-fertőzés referenciadiagnosztikája: leírás és jellemzők

A HIV referenciaértékeket tekintik a legpontosabbnak a diagnózis felállításában. Ez a kutatási módszer az ELISA-tesztet és az immunblot-vizsgálatot ötvözi. A HIV-diagnosztikai referencialaboratórium kétféle módon teszi lehetővé a minták gyűjtését és utólagos feldolgozását. Ez lehetővé teszi a legpontosabb eredmény elérését 24 órán belül. A referencialaboratóriumban kapott analízis újraellenőrzése csak akkor szükséges, ha az ELISA-teszt és az immunoblot adatai ellentmondanak egymásnak. Ez egy meglehetősen ritka jelenség, amely leggyakrabban a fent leírt egyidejű betegségekben szenvedőknél fordul elő.