Bakteriofagi w praktyka lekarska stosowane w diagnostyce, leczeniu i profilaktyce choroba zakaźna.

A. W diagnostyce bakteriofag wykorzystuje się przy przeprowadzaniu metody badań kulturowych w celu określenia rodzaju izolowanej czystej kultury, a także jej typowania. Opisana poniżej metoda wykorzystania bakteriofaga do wskazania obecności określonego rodzaju bakterii w materiale patologicznym bez izolowania go w czystej kulturze nie stała się powszechna.

1. Reakcja wzrostu miana faga opiera się na zdolności konkretnego bakteriofaga do replikacji jedynie w komórkach bakterii „własnego” gatunku. Odbywa się to według następującej zasady. Do materiału patologicznego dodaje się pewną ilość określonego bakteriofaga, inkubuje się go w termostacie, a następnie ponownie określa ilość faga. Jeśli wzrosła, oznacza to, że bakteriofag „znalazł” komórkę „swojego” gatunku do replikacji, dlatego w materiale patologicznym obecne są bakterie pożądanego gatunku.

2. W procesie identyfikacji czystej kultury wykorzystuje się gatunki i typy bakteriofagów.
A. Do oznaczania fagów stosuje się bakteriofagi specyficzne dla gatunku. Wyizolowaną czystą hodowlę zaszczepia się na płytkę agarową i upuszcza na nią kroplę określonego bakteriofaga. Jeśli kultura należy do pożądanego gatunku, wówczas w miejscu podania kropli nie będzie wzrostu, w przeciwnym razie w miejscu podania kropli będzie obserwowany wzrost bakterii. Czasami po nałożeniu bakteriofaga szalkę Petriego zawierającą płytkę agarową przechyla się, umożliwiając kropelce spłynięcie na brzeg szalki (dlatego metoda ta nazywana jest „kroplowaniem kroplowym”).

B. Do typowania fagów wykorzystuje się typowe bakteriofagi. Zasada metody jest następująca.
1. Szczep przeznaczony do typowania zaszczepia się na płytce agarowej.
2. Następnie na inokulowaną powierzchnię upuszczamy krople typowych bakteriofagów (każdą na swój własny kwadrat, wcześniej oznaczony np. szklanym wykresem na dnie szalki Petriego).
3. Zaszczepiona płytka jest inkubowana w termostacie.
4. Doświadczenie uwzględnia się poprzez odnotowanie „sterylnych plamek” lub „blaszek” – miejsc braku wzrostu w miejscu nałożenia kropli bakteriofaga, na który dany wariant bakterii jest wrażliwy.
5. Fagowar (fagotyp) oznacza się poprzez wyszczególnienie typowych fagów dokonujących lizy danego wariantu.
B. Stosowanie bakteriofagów (zwykle gatunków) w leczeniu określa się mianem terapii fagowej. W celu leczenia bakteriofagi stosuje się miejscowo (w postaci irygacji dotkniętej powierzchni, wstrzyknięcia w miejscowe ognisko proces patologiczny itp.), od czasu ich wprowadzenia pozajelitowo prowadzi do rozwoju odpowiedzi immunologicznej na obce białko faga. Jeśli bakteriofag terapeutyczny zostanie podany doustnie (w celu leczenia infekcje jelitowe), wówczas najlepiej zastosować lek w postaci tabletek, pokrytych kwasoodporną powłoką, która rozpuszcza się w zasadowym środowisku jelit – bakteriofagi są bardzo wrażliwe na niskie pH i szybko ulegają inaktywacji kwaśne środowiskożołądek.
B. Profilaktyka fagowa polega na zastosowaniu bakteriofaga (również z reguły specyficznego), aby zapobiec rozwojowi infekcji bakteryjnej. Obecnie stosowany w profilaktyce awaryjnej dur brzuszny i czerwonki (profilaktyka doraźna oznacza zestaw działań zapobiegających rozwojowi choroby po wystąpieniu aktu infekcji, tj. przedostaniu się patogenu do organizmu pacjenta).

Ze względu na swój destrukcyjny (lityczny) wpływ na bakterie, fagi mogą mieć zastosowanie terapeutyczne - w celach profilaktycznych Na różne choroby(czerwonka, cholera, różne choroby ropno-zapalne itp.). Zestawy standardowych fagów, w tym międzynarodowych, służą do typowania fagowego patogenów szeregu chorób (cholera, dur brzuszny, salmonelloza, błonica, gronkowce i inne choroby). Stosowane są także bakteriofagi Inżynieria genetyczna Jako wektory przenoszące fragmenty DNA możliwy jest także naturalny transfer genów pomiędzy bakteriami poprzez określone fagi (transdukcja). Z reguły takim pacjentom przepisuje się antybiotyki. Jednak ze względu na to, że stale mutujące bakterie stają się oporne na antybiotyki, ich skuteczność jest ograniczona. ostatnie lata osłabiony. Uwagę badaczy przykuły bakteriofagi – wirusy pożerające bakterie. W przeciwieństwie do antybiotyków, które niszczą zarówno szkodliwe, jak i zdrowa mikroflora organizmu, bakteriofagi działają selektywnie, pod ich wpływem ulegają jedynie bakterie chorobotwórcze. Jak działają bakteriofagi w organizmie? Wnikają tylko do niektórych komórek i wchodzą w interakcję z ich DNA, tworząc efekt lizogenny lub lityczny. Działając na drobnoustroje typu litycznego, bakteriofagi niszczą je, co pozwala na szybkie namnażanie się. Typ lizogenny reprezentuje przenikanie genomu faga do genomu bakteryjnego, ich syntezę i dalsze przejście z jednego pokolenia na drugie. Informacje o bakteriofagach pojawiły się ponad sto lat temu, kiedy zaczęto je stosować w leczeniu gronkowców. Obecnie są szeroko stosowane w profilaktyce i leczeniu infekcji jelitowych, gronkowcowych, paciorkowcowych, duru brzusznego i wielu innych. Nowoczesna medycyna poszukuje metod wykorzystujących nie żywe bakteriofagi, ale enzymy działające na bakterie chorobotwórcze poprzez lizę. Można je stosować w postaci aerozolu do nosa lub jamy ustnej, pasty do zębów, pożywienia, dodatki do żywności. Skuteczność stosowania bakteriofagów polega na braku przeciwwskazań i powikłań, kompatybilności z innymi lekami, aktywny wpływ dla drobnoustrojów opornych na antybiotyki. Dzięki tym właściwościom bakteriofagi oceniane są jako przyszłe leki skuteczne w walce z infekcjami.

Do najważniejszych zalet terapii fagowej należą: wysoka czułość patogenną mikroflorę dla bakteriofaga, możliwość początkowego stosowania małych dawek bakteriofaga, kompatybilność ze wszystkimi rodzajami tradycyjnej terapii przeciwbakteryjnej, brak przeciwwskazań do profilaktyki fagowej i terapii fagowej. Ustalono, że w przyrodzie nie ma mikroorganizmów całkowicie odpornych na bakteriofaga. Ważne jest, aby rozmnażanie się bakteriofaga było możliwe tylko w obecności wrażliwych na niego bakterii. Po śmierci ostatniej komórki drobnoustroju w źródle zakażenia przestaje ona aktywnie działać i jest usuwana z organizmu bez śladu.

Ze względu na obserwowany spadek działanie terapeutyczne stosuje się antybiotyki, preparaty bakteriofagowe praktyka kliniczna jako alternatywa dla antybiotyków i w połączeniu z nimi. Preparaty bakteriofagowe nie ustępują lekom przeciwbakteryjnym pod względem skuteczności, stymulują lokalne czynniki specyficzne i odporność nieswoista i nie powodują działania toksycznego i ubocznego reakcje alergiczne. Bakteriofagi są przepisywane doustnie, a także służą do nawadniania ran, do wprowadzania do drenowanych jam - jamy brzusznej, opłucnej, zatok, ucha środkowego, ropni, ran, macicy, pęcherza moczowego. Po podaniu doustnym i w aerozolu, a także na powierzchni błon śluzowych, bakteriofagi przenikają do krwi i limfy i są wydalane przez nerki, odkażając drogi moczowe.

Obecnie wzrosło zainteresowanie terapią fagową w chirurgii, urologii, okulistyce i traumatologii.

Preparaty lecznicze i profilaktyczne bakteriofagów składają się z poliklonalnych zjadliwych bakteriofagów o szerokim spektrum działania, aktywnych wobec bakterii opornych na antybiotyki. Produkowane są w postaci płynnej, w tabletkach kwasoodpornych, w postaci czopków, maści i mazideł.

Preparaty bakteriofagowe są sterylnym filtratem fagolizatów bakteryjnych, przepisywane są doustnie, miejscowo w celu płukania ran i błon śluzowych, wprowadzenia do jamy macicy, Pęcherz moczowy, ucho, Zatoki przynosowe a także w jamach drenażowych – jamy brzusznej, opłucnej, a także w jamach ropniowych po usunięciu wysięku.

Bakteriofagi są w stanie szybko przenikać do krwi i limfy oraz są wydalane przez nerki z moczem. Jak wykazały nasze badania, po przyjęciu 30 ml bakteriofaga cząsteczki faga są wykrywane w moczu w ciągu 2 godzin, a maksymalne stężenie osiągane są w moczu po 6-8 godzinach od podania.

Aktywność lecznicza i profilaktyczna bakteriofagów wobec patogenów chorób ropno-septycznych i jelitowych jest dość wysoka – od 72% do 90%, w tym wobec szczepów pochodzenia szpitalnego, charakteryzujących się wieloraką opornością na antybiotyki. Zgodność preparatów bakteriofagów ze współczesną strukturą atiologiczną patogenów osiąga się poprzez ich ciągłą adaptację do krążących szczepów w wyniku odnawiania ras fagów i produkcji stempli bakteryjnych. Cecha ta odróżnia fagi od innych leków przeciwdrobnoustrojowych – antybiotyków, eubiotyków czy szczepionek, w przypadku których szczepy produkcyjne lub szczepy producenckie lub syntetyzowana substancja nie podlegają żadnym modyfikacjom. Ta plastyczność preparatów bakteriofagów zapewnia kontynuację pierwotnej oporności fagów patogenów.

Zalety leków bakteriofagowych

Do zalet leków bakteriofagowych należy wąska specyfika działania, która w odróżnieniu od antybiotyków nie powoduje hamowania prawidłowej mikroflory. Udowodnione działanie stymulujące bakteriofag gronkowcowy na bifidobakterie - najważniejszy składnik mikrobiocenozy jelitowej. Zastosowanie bakteriofagów w leczeniu chorób zakaźnych stymuluje czynniki odporności swoistej i nieswoistej, co jest szczególnie skuteczne w leczeniu chorób przewlekłych choroby zapalne na tle warunków immunosupresyjnych, nosicielstwo bakterii.

Praca eksperymentalna i długoterminowa obserwacje kliniczne Udowodniono niemożność przenoszenia plazmidów o oporności na antybiotyki i toksyczności przez leki terapeutyczne i profilaktyczne bakteriofagów, ponieważ są one poliklonalnymi kompleksami zjadliwych bakteriofagów.

W Rosji, krajach WNP, Polsce, Francji i Hiszpanii bakteriofagi znajdują szerokie zastosowanie w medycynie i weterynarii. W zakresie stosowania bakteriofagów w leczeniu infekcji jelitowych zgromadzono duże doświadczenie: wysoka skuteczność kliniczna terapii fagowej w leczeniu ostrych i przewlekła czerwonka, salmonellozy, któremu towarzyszy odkażanie nosicieli. Wykazano wysoką skuteczność epidemiologiczną profilaktycznego stosowania bakteriofagów czerwonki, duru brzusznego i salmonelli.W kontrolowanych eksperymentach epidemiologicznych przeprowadzonych w placówkach przedszkolnych i przedsiębiorstwach przemysłowych stwierdzono spadek zachorowalności od 3 do 6 razy. Zastosowanie bakteriofagów wykazało dobre rezultaty w leczeniu chorób wywołanych przez bakterie oportunistyczne, dysbiozie, zmiany ropne skóra, narządy laryngologiczne, układ mięśniowo-szkieletowy, układ moczowo-płciowy, układu krążenia i oddechowego, w tym u noworodków i dzieci w pierwszym roku życia.

Istotnym warunkiem zapewniającym skuteczność leczenia preparatami fagowymi jest pewna wrażliwość fagowa patogenu.

Widać wieloletnie doświadczenie terapii fagowej w Instytucie Urologii; W wyniku adaptacji bakteriofagów komercyjnych do szczepów szpitalnych krążących w poradni urologicznej NPO „Biophage” czułość fagów szczepów wzrosła o 15% i kształtowała się na poziomie lub wyższym od wrażliwości na najnowocześniejsze zagraniczne antybiotyki. Na tle długotrwałego stosowania bakteriofagów w szpitalu nie zaobserwowano powstawania oporności na fagi wśród szczepów szpitalnych, natomiast zmniejszyła się oporność na antybiotyki. Skuteczność kliniczną terapii fagowej zaobserwowano w 92% przypadków, często przewyższającą wyniki antybiotykoterapii. Brak przeciwwskazań i powikłań przy stosowaniu preparatów bakteriofagowych, możliwość ich stosowania w połączeniu z innymi leki, w tym z antybiotykami, działanie przeciwko szczepom antybiotykoopornym i adaptacja bakteriofagów do współczesnych patogenów - wszystko to pozwala ocenić preparaty bakteriofagowe jako wysoce skuteczny i obiecujący środek doraźnego leczenia infekcji ropno-septycznych i jelitowych. Jednak fagi, czyli „naturalni sanitariusze”, mogą znaleźć zastosowanie nie tylko w leczeniu, ale także w profilaktyce chorób zakaźnych. Można je przepisywać kobietom w ciąży, karmiącym piersią i dzieciom w każdym wieku, w tym wcześniakom. Głównym warunkiem ich pomyślnego zastosowania jest przetestowanie wyizolowanej kultury pod kątem wrażliwości na odpowiedniego faga. Zaobserwowano niesamowity wzór: w przeciwieństwie do antybiotyków wrażliwość szczepów klinicznych mikroorganizmów na bakteriofagi jest stabilna i ma tendencję do wzrostu, co można wytłumaczyć wzbogaceniem leki lecznicze nowe rasy fagów. Oprócz zastosowań medycznych bakteriofagi są szeroko stosowane w weterynarii; Bakteriofag gronkowcowy jest szczególnie skuteczny w leczeniu zapalenia sutka u krów. Preparaty bakteriofagowe są przepisywane doustnie na choroby narządy wewnętrzne lub lokalnie, bezpośrednio do zmiany chorobowej. Działanie faga pojawia się w ciągu 2-4 godzin od jego podania (co jest szczególnie istotne w warunkach intensywnej terapii). Bakteriofagi przenikają do krwi, limfy i są wydalane przez nerki, odkażając drogi moczowe.

Zatem bakteriofagi wykorzystują:

W weterynarii dla:

profilaktyka i leczenie choroby bakteryjne ptaki i zwierzęta;

leczenie chorób ropno-zapalnych błon śluzowych oczu i jamy ustnej;

zapobieganie powikłaniom ropno-zapalnym w oparzeniach, ranach, interwencjach chirurgicznych;

W inżynierii genetycznej:

do transdukcji - naturalny transfer genów pomiędzy bakteriami;

jako wektory przenoszące skrawki DNA;

przy użyciu fagów możliwe jest zaprojektowanie ukierunkowanych zmian w genomie DNA gospodarza;

W branży spożywczej:

gotowe do spożycia produkty mięsne i drobiowe są już masowo przetwarzane za pomocą środków zawierających fagi;

bakteriofagi znajdują zastosowanie w produkcji produktów spożywczych z mięsa, drobiu, serów, produktów roślinnych itp.;



Praktyczne użycie fagi. Bakteriofagi wykorzystywane są w diagnostyce laboratoryjnej zakażeń do wewnątrzgatunkowej identyfikacji bakterii, czyli określenia fagowaru (fagotypu). W tym celu stosuje się metodę typowania fagowego, opartą na ścisłej specyfice działania fagów: krople różnych fagów specyficznych dla typu diagnostycznego nanosi się na płytkę z gęstą pożywką obsianą „trawnikiem” czystej kultury patogenu. Faga bakterii określa się na podstawie rodzaju faga, który spowodował jej lizę (utworzenie sterylnej plamki, „płytki” lub „kolonii ujemnej”, faga). Do identyfikacji źródła i dróg szerzenia się zakażenia (oznaczanie epidemiologiczne) wykorzystuje się technikę fagotypowania. Izolacja bakterii tego samego fagowara od różnych pacjentów wskazuje na wspólne źródło ich infekcji.

Fagi są również stosowane w leczeniu i zapobieganiu wielu chorobom infekcje bakteryjne. Wytwarzają dur brzuszny, salmonellę, czerwonkę, pseudomonas, fagi gronkowcowe, paciorkowcowe i leki kombinowane(coliproteus, pyobakteriofagi itp.). Bakteriofagi przepisywane są według wskazań doustnie, pozajelitowo lub miejscowo w postaci płynu, tabletek, czopków lub aerozoli.

Bakteriofagi są szeroko stosowane w inżynierii genetycznej i biotechnologii jako wektory do produkcji rekombinowanego DNA.

W praktyce stosowane preparaty bakteriofagowe to filtrat hodowli bulionowej odpowiednich drobnoustrojów poddanych lizie przez faga, zawierający żywe cząstki faga, a także rozpuszczone antygeny bakteryjne uwalniane z komórek bakteryjnych podczas ich lizy. Powstały preparat, płynny bakteriofag, powinien wyglądać całkowicie klarowny płyn żółty kolor większą lub mniejszą intensywnością.

Do stosowania w celach terapeutycznych i profilaktycznych fagi można wytwarzać w postaci tabletek z powłoką kwasoodporną. Pelletowany suchy fag jest bardziej stabilny podczas przechowywania i wygodny w użyciu. Jedna tabletka suchego bakteriofaga odpowiada 20-25 ml preparat płynny. Okres ważności preparatów suchych i płynnych wynosi 1 rok. Bakteriofaga płynnego należy przechowywać w temperaturze +2 +10 C, sucho - nie wyższej niż +1 ° C, ale można go przechowywać w lodówce w temperaturach ujemnych.

Bakteriofag podany doustnie pozostaje w organizmie przez 5-7 dni. Z reguły przyjmowaniu bakteriofaga nie towarzyszą żadne reakcje ani powikłania. Nie ma żadnych przeciwwskazań do stosowania. Stosuje się je w postaci irygacji, płukanek, balsamów, tamponów, zastrzyków, a także podaje się je do jam brzusznych, opłucnowych, stawowych oraz do pęcherza moczowego, w zależności od umiejscowienia patogenu.

Fagi diagnostyczne produkowane są w postaci płynnej i suchej w ampułkach.Przed rozpoczęciem pracy suchy bakteriofag jest rozcieńczany. Jeśli na ampułkach wskazane jest miano tr, w reakcji fagolizy (metoda Otto) stosuje się DRT (roboczą dawkę miana) w celu identyfikacji bakterii; jeśli wskazany jest typ faga, wówczas do typowania faga, w celu określenia źródła infekcji.

Wpływ bakteriofaga na kulturę drobnoustrojów w pożywce płynnej i dalej gęste środowisko

Metoda Otto (kapiąca kropla)

Grubo zasiej trawnik badanej rośliny. 5-10 minut po wysiewie na osuszoną powierzchnię pożywki nanosi się płynny fag diagnostyczny. Naczynie jest lekko przechylone, tak aby kropla faga rozprzestrzeniła się na powierzchni agaru. Kubek umieszcza się w termostacie na 18-24 godziny. Wyniki obliczane są wg całkowita nieobecność wzrost kultury w miejscu zastosowania kropli faga.

Eksperyment na płynnej pożywce

Zaszczepić kulturę testową do dwóch probówek płynny środek. Do jednej probówki („O”) dodaje się bakteriofaga diagnostycznego z pętlą. Po 18-20 godzinach w probówce, do której nie dodano bakteriofaga („K”), obserwuje się silne zmętnienie bulionu – zaszczepiona kultura wyrosła. Bulion w probówce, do której dodano bakteriofaga, pozostał przezroczysty ze względu na lizę kultury pod jego wpływem.

Typowanie fagowe bakterii

Ze względu na spektrum działania wyróżnia się następujące bakteriofagi: bakterie wielowartościowe, ulegające lizie; jednowartościowe bakterie lizujące określonego gatunku; typowe, lizujące poszczególne typy (warianty) bakterii.

Na przykład jeden szczep patogennego gronkowca może zostać poddany lizie przez kilka typów fagów, zatem wszystkie typowe fagi (24) i szczepy patogenne gronkowce połączone w 4 grupy.

Metoda typowania fagowego ma bardzo ważne do badań epidemiologicznych, gdyż pozwala na identyfikację źródła i dróg rozprzestrzeniania się patogenów. W tym celu wirusa fagowego określa się z czystej hodowli wyizolowanej z materiału patologicznego na stałej pożywce, przy użyciu standardowych fagów diagnostycznych.

Fagowar kultury mikroorganizmu określa się na podstawie typowego faga, który spowodował jego lizę.Izolacja bakterii tego samego fagowara od różnych osobników wskazuje na źródło infekcji.

Zyskuje coraz więcej zwolenników wśród lekarzy, spychając antybiotyki na dalszy plan. Dawno, dawno temu pojawienie się antybiotyków całkowicie zmieniło sposób, w jaki lekarze myśleli o leczeniu. Wcześniej beznadziejni pacjenci zaczęli wracać do zdrowia, algorytmy leczenia zostały niezwykle uproszczone, śmiertelność gwałtownie spadła… Cuda! Magia leczy! Ale entuzjastyczna postawa nie trwała długo. Zaczęło pojawiać się zbyt wiele problemów.

Wróg mojego wroga jest moim przyjacielem

Teraz „śliskie” kwestie antybiotykoterapii są znane każdemu. Działaniu antybiotyków towarzyszy:

Zniszczenie niezbędnej, „użytecznej” mikroflory jelit i błon śluzowych;

Aktywny wzrost nowych szczepów bakterii na nie odpornych;

Pojawienie się skutki uboczne ze względu na ogólnoustrojowe działanie leków.

W związku z tym pilne stało się poszukiwanie zasadniczo różnych leków do leczenia infekcji bakteryjnych. A potem na pierwszy plan wyszły bakteriofagi.

Bakteriofagi to wirusy, które selektywnie infekują komórki bakteryjne. Wirus przyczepia się do Ściana komórkowa bakterii i wprowadza do komórki swój materiał genetyczny. W rezultacie rozpoczyna się synteza nowych wirusów, a następnie następuje liza komórki bakteryjnej i uwolnienie 200-1000 nowych fagów, które infekują inne bakterie. Kiedy wszystkie bakterie szczepu chorobotwórczego zostaną zniszczone, bakteriofagi są eliminowane z organizmu bez śladu. Wiele bakteriofagów jest wysoce specyficznych, a każdy szczep wirusa infekuje tylko określony rodzaj bakterii, nie wpływając w żaden sposób na inne mikroorganizmy i komórki organizmu. Zapewnia to znaczne zmniejszenie liczby skutków ubocznych.

Zatem do niewątpliwych zalet zastosowanie bakteriofagów można przypisać:

Wysoki profil bezpieczeństwa, pozwalający na ich stosowanie u pacjentów w każdym wieku, od noworodków do osób w podeszłym wieku;

Zmniejszenie ryzyka pojawienia się opornych szczepów bakterii;

Możliwość ich łączenia z innymi lekami, w tym antybiotykami.

Być może jedyną rzeczą, która ogranicza zastosowanie bakteriofagów, jest ich selektywność, dzięki czemu przed leczeniem konieczne jest wyjaśnienie natury patogenu i jego wrażliwości na różne rodzaje bakteriofagi. Taka analiza nie jest przeprowadzana wszędzie i trwa określony czas, ale poprawa systemy diagnostyczne pozwala mieć nadzieję, że problem ten zostanie wkrótce rozwiązany.

Od teorii do praktyki

Istnieć różne rodzaje bakteriofagi: monofagi, mające na celu zniszczenie tylko jednego rodzaju bakterii i polifagi, działające na kilka rodzajów bakterii chorobotwórczych jednocześnie. Ponieważ bakteriofagi są niezwykle poszukiwane w prawie wszystkich dziedzinach medycyny, od chirurgii i ginekologii po neonatologię i laryngologię, planuje się uwolnienie bakteriofagów w różne formy. Stosuje się je do podawania doustnego w postaci lewatyw, aplikacji, irygacji, do wprowadzania do jam ran, pochwy, macicy, nosa, zatok, a także do wprowadzania do drenowanych jam jamy brzusznej, opłucnej, pęcherza moczowego, miedniczki nerkowej . Czas trwania kursu zależy od wskazań klinicznych i może wynosić 7-20 dni. Bezpieczne, skuteczne i niezawodne bakteriofagi to właśnie broń, która jest tak niezbędna w walce z bakteriami chorobotwórczymi.

Nie tylko medycyna

Postęp biologii molekularnej i biotechnologii umożliwił wykorzystanie bakteriofagów nie tylko do celów leczniczych, ale także do innych celów. Na przykład w USA bakteriofagi stosuje się jako bezpieczny środek konserwujący produkty żywieniowe. Dodane do żywności bakteriofagi zapobiegają namnażaniu się niepożądanych bakterii.

Interesujące fakty

Odkrycie bakteriofagów nastąpiło w 1894 roku, kiedy brytyjski bakteriolog Ernest Hankin zauważył, że indyjskie rzeki Ganges i Jumna mają znaczną aktywność przeciwbakteryjną, która całkowicie zanika po ugotowaniu. Zasugerował, że w wodzie znajduje się substancja zabijająca bakterie. Wirusy te otrzymały nazwę „bakteriofag” („zjadacz bakterii”) w 1917 r. od francuskiego naukowca Felixa D’Hérelle, który odkrył „niewidzialny drobnoustrój zakażający prątki czerwonki”. Wyjaśnienie natury tej „niewidzialności” stało się możliwe dopiero po pojawieniu się mikroskopii elektronowej.

4. Interakcja wirusów z podatną komórką. Pasożytnictwo ścisłe i cytotropizm wirusów oraz czynniki je wywołujące. Receptory komórkowe i specyficzne dla wirusa.

5. Cechy infekcji, mechanizmy odporności nieswoistej i swoistej w chorobach wirusowych. Interferony

1. Wrodzona odporność przeciwwirusowa

2. Nabyta (adaptacyjna) odporność przeciwwirusowa

6. Rodzaje infekcji wirusowych komórek. Zmiany w komórkach gospodarza podczas infekcji wirusowej. Działanie cytopatyczne wirusów, rodzaje.

9. Hodowle komórkowe, klasyfikacja, charakterystyka. Hodowla wirusów na kulturach komórkowych. Przygotowanie materiału, zanieczyszczenie kultury. Metody oznaczania i identyfikacji wirusów.

I. Hodowle komórkowe

10. Hodowla wirusów w zarodku kurczaka. Metody infekcji. Wskazanie i identyfikacja wirusów.

11. Izolacja wirusów u zwierząt laboratoryjnych. Metody zakażania zwierząt, oznaczanie i identyfikacja wirusów.

13. Etiologia ostrych chorób wirusowych układu oddechowego. Klasyfikacja wirusów grypy. Ogólna charakterystyka. Właściwości strukturalnych i niestrukturalnych białek wirusowych. Genom wirusa.

14. Struktura antygenowa wirusów grypy i jej zmienność, rola w epidemicznym i pandemicznym rozprzestrzenianiu się grypy. Mechanizmy odporności naturalnej i nabytej.

15. Mechanizmy patogenezy, specyficznej i nieswoistej terapii oraz profilaktyki grypy.

16. Paramyksowirusy. Skład rodziny. Wirusy paragrypy, charakterystyka, różnicowanie z wirusami grypy. Wirus świnki. Syncytialny wirus oddechowy.

17.Nowoczesne metody diagnostyki laboratoryjnej grypy i paragrypy.

18. Wirus odry, morfologia, właściwości kulturowe i antygenowe. Patogeneza i odporność odry. Specyficzna szczepionka i gamma globulina.

19. Wirus wścieklizny, morfologia, właściwości biologiczne, wtręty wirusowe. Patogeneza choroby. Diagnostyka laboratoryjna wścieklizny.

20. Epidemiologia, profilaktyka specyficzna i nieswoista wścieklizny. Szczepionka przeciw wściekliźnie i gamma globulina. dzieła Pasteura.

Diagnostyka laboratoryjna zakażenia wirusem HIV

23. Klasyfikacja wirusów zapalenia wątroby. Charakterystyka wirusa zapalenia wątroby typu A. Patogeneza, odporność, metody zapobiegania wirusowemu zapaleniu wątroby typu A.

24. Charakterystyka wirusa zapalenia wątroby typu B. Genom, główne białka. Patogeneza, odporność, profilaktyka, diagnostyka laboratoryjna wirusowego zapalenia wątroby typu B.

25. Wirusowe zapalenie wątroby typu c, d, f. Charakterystyka wirusów, epidemiologia, patogeneza chorób.

26. Klasyfikacja i charakterystyka grupy ekologicznej arbowirusów. Toga i flawiwirusy. Znaczenie w patologii człowieka. Diagnostyka wirusologiczna kleszczowego zapalenia mózgu.

Grupa I.

Grupa II.

III grupa.

27. Wirus różyczki. Ogólna charakterystyka. Rola w patologii. Zapobieganie różyczce.

28. Bunyawirusy, ogólna charakterystyka, wywoływane choroby.

29. Pikornawirusy, klasyfikacja, ogólna charakterystyka rodziny.

31. Wirusy Coxsackie i Echo, charakterystyka. Rola w patologii człowieka. Zasady różnicowania.

32. Rinowirusy. Rotawirusy. Ogólna charakterystyka. Rola w patologii człowieka.

33. Adenowirusy, morfologia, kultura, właściwości biologiczne, klasyfikacja serologiczna. Mechanizmy patogenezy, diagnostyka laboratoryjna zakażeń adenowirusowych.

Charakterystyka ludzkich herpeswirusów

35. Etiologia ospy wietrznej, opryszczki złośliwej, cytomegalii, mononukleozy zakaźnej. Mechanizmy patogenezy. Diagnostyka laboratoryjna.

36. Teorie karcynogenezy wirusowej. Wirusy onkogenne. Onkogeny komórkowe i wirusowe.

37. Wirusy bakteryjne (bakteriofagi), właściwości, klasyfikacja. Oddziaływanie bakteriofagów z podatną komórką bakteryjną. Fagi zjadliwe i umiarkowane. Lizogenia.

38. Praktyczne zastosowanie bakteriofagów. Diagnostyka fagowa, typowanie fagowe, terapia fagowa. Metody miareczkowania bakteriofagów.

29 www.Bsmu.H15.Ru

38. Praktyczne zastosowanie bakteriofagów. Diagnostyka fagowa, typowanie fagowe, terapia fagowa. Metody miareczkowania bakteriofagów.

Praktyczne zastosowanie bakteriofagów.Ścisła specyficzność bakteriofagów pozwala na ich wykorzystanie do typowania fagowego i różnicowania kultur bakteryjnych, a także do oznaczania ich otoczenie zewnętrzne na przykład w zbiornikach.

Metoda fagowego typowania bakterii jest szeroko stosowana w praktyce mikrobiologicznej. Pozwala nie tylko określić gatunek badanej kultury, ale także jej fagotyp (fagowar). Wynika to z faktu, że bakterie tego samego gatunku posiadają receptory, które adsorbują ściśle specyficzne fagi, które następnie powodują ich lizę. Zastosowanie zestawów takich fagów specyficznych dla danego typu pozwala na typowanie fagowe badanych hodowli na potrzeby analizy epidemiologicznej chorób zakaźnych: ustalenie źródła zakażenia i dróg jego przenoszenia.

Dodatkowo na podstawie obecności fagów w środowisku zewnętrznym (zbiornikach) można ocenić zawartość w nich odpowiednich bakterii stwarzających zagrożenie dla zdrowia człowieka. Ta metoda oznaczanie bakterii chorobotwórczych wykorzystuje się także w praktyce epidemiologicznej. Jego skuteczność wzrasta w przypadku przeprowadzenia reakcji wzrostu miana faga, która opiera się na zdolności określonych linii fagów do namnażania się na ściśle określonych kulturach bakteryjnych. Kiedy taki fag zostanie wprowadzony do materiału testowego zawierającego pożądany patogen, jego miano wzrasta. Powszechne stosowanie reakcji wzrostu miana fagów komplikuje trudność w uzyskaniu zestawu wskaźników fagów i inne powody.

Stosowanie fagów w celach terapeutycznych i profilaktycznych jest stosunkowo rzadkie. Wynika to z dużej liczby negatywnych wyników, które tłumaczy się następującymi przyczynami:

1) ścisła specyficzność fagów, które dokonują lizy tylko tych komórek populacji bakteryjnej, które są wyposażone w odpowiednie receptory, w wyniku czego obecne w każdej populacji osobniki oporne na fagi całkowicie zachowują swoją żywotność;

2) powszechne stosowanie skuteczniejszych leków etiotropowych - antybiotyków, które nie mają swoistości bakteriofagów.

Obecnie preparaty bakteriofagowe stosuje się w leczeniu czerwonki, salmonellozy i infekcji ropnych wywołanych przez bakterie antybiotykooporne. W każdym przypadku wrażliwość izolowanych patogenów na ten lek fag.

Fagi Salmonelli stosuje się w celu zapobiegania chorobie o tej samej nazwie w grupach dziecięcych.

29 www.Bsmu.H15.Ru