Bakteriofagi u medicinska praksa koristi se u dijagnostici, liječenju i prevenciji zarazne bolesti.

A. Bakteriofag se u dijagnostici koristi kada se vrši kulturološki istraživački metod za određivanje vrste izolovane čiste kulture, kao i za njenu tipizaciju. Dolje opisana metoda za korištenje bakteriofaga za ukazivanje na prisutnost određene vrste bakterija u patološkom materijalu bez izolacije u čistoj kulturi nije postala široko rasprostranjena.

1. Reakcija povećanja titra faga zasniva se na sposobnosti specifičnog bakteriofaga da se replicira samo u ćelijama bakterija „svoje“ vrste. Izvodi se prema sljedećem principu. U patološki materijal se dodaje određena količina specifičnog bakteriofaga, inkubira se u termostatu, a zatim se ponovo određuje količina faga. Ako se povećao, to znači da je bakteriofag "pronašao" ćeliju "svoje" vrste da se replicira, stoga su bakterije željene vrste prisutne u patološkom materijalu.

2. U procesu identifikacije čiste kulture koriste se vrsta i tip bakteriofaga.
A. Bakteriofagi specifični za vrstu koriste se za indikaciju faga. Izolovana čista kultura se inokulira na pločasti agar i na nju se kapne kap specifičnog bakteriofaga. Ako kultura pripada željenoj vrsti, tada neće biti rasta na mjestu gdje je kap aplicirana; u suprotnom će se primijetiti rast bakterija na mjestu gdje se kap faga primjenjuje. Ponekad, nakon nanošenja bakteriofaga, Petrijeva posuda u kojoj se nalazi agar ploča se naginje, omogućavajući kapljici da se ocijedi na ivicu posude (zbog čega se ova metoda naziva “kapanje po kap”).

b. Za tipizaciju faga koriste se tipični bakteriofagi. Princip metode je sljedeći.
1. Soj koji se kuca se inokulira na pločasti agar.
2. Zatim se kapi tipičnih bakteriofaga kapaju na inokulisanu površinu (svaki u svoj kvadrat, unaprijed označen, na primjer, staklenim grafikonom na dnu Petrijeve posude).
3. Inokulirana posuda se inkubira u termostatu.
4. Doživljaj se uzima u obzir tako što se evidentiraju „sterilne tačke” ili „plakovi” – mesta odsustva rasta na mestu nanošenja kapi bakteriofaga na koje je osetljiva određena varijanta bakterije.
5. Fagovar (fagotip) se označava navođenjem tipičnih faga koji liziraju datu varijantu.
B. Upotreba bakteriofaga (obično vrsta) za liječenje se naziva fagoterapija. U svrhu liječenja, bakteriofagi se koriste lokalno (u obliku navodnjavanja zahvaćene površine, injekcije u lokalno žarište patološki proces itd.), od njihovog uvođenja parenteralno dovodi do razvoja imunološkog odgovora na strani protein faga. Ako se terapeutski bakteriofag primjenjuje oralno (za liječenje crijevne infekcije), tada je najbolje koristiti tabletni oblik lijeka, obložen premazom otpornim na kiseline koji se rastvara u alkalnoj sredini crijeva – bakteriofagi su vrlo osjetljivi na nizak pH i brzo se inaktiviraju u kisela sredina stomak.
B. Profilaksa faga je upotreba bakteriofaga (također, po pravilu, specifičnog) za sprečavanje razvoja bakterijske infekcije. Trenutno se koristi za hitnu profilaksu tifusne groznice i dizenterija (hitna prevencija je skup mjera za sprječavanje razvoja bolesti nakon što je nastupio čin infekcije, tj. patogen uđe u tijelo pacijenta).

Zbog svog destruktivnog (litičkog) dejstva na bakterije, fagi se mogu koristiti u terapiji - u preventivne svrhe at razne bolesti(dizenterija, kolera, razne gnojno-upalne bolesti itd.). Setovi standardnih faga, uključujući i međunarodne, koriste se za fagotipizaciju uzročnika niza bolesti (kolera, trbušni tifus, salmoneloza, difterija, stafilokok i druge bolesti). Bakteriofagi se također koriste u genetski inženjering Kao vektori koji prenose dijelove DNK, moguć je i prirodni prijenos gena između bakterija putem određenih faga (transdukcija). Takvim pacijentima se po pravilu propisuju antibiotici. Ali zbog činjenice da bakterije koje stalno mutiraju postaju otporne na antibiotike, njihova učinkovitost je ograničena. poslednjih godina oslabljen. Pažnju istraživača privukli su bakteriofagi - virusi koji proždiru bakterije. Za razliku od antibiotika, koji uništavaju i štetne i zdrava mikroflora organizma, bakteriofagi su selektivni, pod njihov uticaj dolaze samo patogene bakterije. Kako bakteriofagi djeluju u tijelu? Oni prodiru samo u određene ćelije i stupaju u interakciju sa njihovom DNK, stvarajući lizogeni ili litički efekat. Utječući na mikrobe litičkog tipa, bakteriofagi ih uništavaju, što im omogućava da se brzo razmnožavaju. Lizogeni tip predstavlja prodor genoma faga u genom bakterije, njihovu sintezu i daljnji prijelaz s jedne generacije na drugu. Informacije o bakteriofagima pojavile su se prije više od jednog stoljeća kada su se koristili za liječenje stafilokoka. Trenutno se široko koriste za prevenciju i liječenje crijevnih, stafilokoknih, streptokoknih, tifusnih i mnogih drugih infekcija. Moderna medicina traži metode koje ne koriste žive bakteriofage, već enzime koji lizom djeluju na patogene bakterije. Njihova upotreba može biti u obliku nazalnog ili oralnog spreja, paste za zube, hrane, aditivi za hranu. Učinkovitost upotrebe bakteriofaga sastoji se u odsustvu kontraindikacija i komplikacija, kompatibilnosti s drugim lijekovima, aktivan uticaj za mikrobe otporne na antibiotike. Zahvaljujući ovim svojstvima, bakteriofagi se procjenjuju kao budući lijekovi za uspješnu borbu protiv infekcija.

Najvažnije prednosti fagoterapije su visoka osjetljivost patogena mikroflora bakteriofaga, mogućnost početne upotrebe malih doza bakteriofaga, kompatibilnost sa svim vrstama tradicionalne antibakterijske terapije, odsustvo kontraindikacija za profilaksu faga i terapiju fagom. Utvrđeno je da u prirodi ne postoje mikroorganizmi koji su apsolutno otporni na bakteriofag. Važno je da je reprodukcija bakteriofaga moguća samo u prisustvu bakterija osjetljivih na njega. Nakon smrti posljednje mikrobne stanice u izvoru infekcije, ona prestaje sa aktivnom aktivnošću i eliminira se iz organizma bez traga.

Zbog uočenog smanjenja terapijsko djelovanje koriste se antibiotici, preparati bakteriofaga kliničku praksu kao alternativa antibioticima iu kombinaciji sa ovim poslednjim. Preparati bakteriofaga po djelotvornosti nisu inferiorni od antibakterijskih lijekova, stimuliraju lokalne faktore specifične i nespecifični imunitet i ne izazivaju bočnu toksičnost i alergijske reakcije. Bakteriofagi se propisuju oralno, a koriste se i za ispiranje rana, za uvođenje u drenirane šupljine - trbušne, pleuralne, sinusne šupljine, srednje uho, apscese, rane, matericu, bešiku. Kada se daju oralno i u obliku aerosola, kao i kada se nanose na površinu sluzokože, bakteriofagi prodiru u krv i limfu i izlučuju se kroz bubrege, sanirajući urinarni trakt.

Trenutno je obnovljeno interesovanje za terapiju fagom u hirurgiji, urologiji, oftalmologiji i traumatologiji.

Terapijski i profilaktički preparati bakteriofaga sastoje se od poliklonalnih virulentnih bakteriofaga širokog spektra djelovanja, aktivnih protiv bakterija otpornih na antibiotike. Proizvode se u tečnom obliku, u tabletama otpornim na kiseline, u obliku supozitorija, masti i linimenata.

Preparati bakteriofaga su sterilni filtrat bakterijskih fagolizata, propisuju se oralno, lokalno za ispiranje rana i sluzokože, uvođenje u šupljinu materice, Bešika, uho, paranazalnih sinusa, kao i u dreniranim šupljinama - trbušnoj, pleuralnoj, kao iu apscesnim šupljinama nakon uklanjanja eksudata.

Bakteriofagi su u stanju da brzo prodru u krv i limfu i izlučuju se kroz bubrege u urinu. Kako su pokazala naša istraživanja, nakon uzimanja 30 ml bakteriofaga, čestice faga se detektuju u urinu u roku od 2 sata, a maksimalna koncentracija dostižu se u urinu 6-8 sati nakon primjene.

Aktivnost terapijskih i profilaktičkih bakteriofaga protiv uzročnika gnojno-septičkih i enteralnih bolesti je prilično visoka - od 72% do 90%, uključujući i sojeve bolničkog porijekla, koje karakterizira višestruka rezistencija na antibiotike. Korespondencija preparata bakteriofaga sa savremenom atiološkom strukturom patogena postiže se njihovim stalnim prilagođavanjem cirkulišućim sojevima usled obnavljanja fagnih rasa i proizvodnje bakterijskih pečata. Ovo svojstvo razlikuje fage od drugih antimikrobnih lijekova - antibiotika, eubiotika ili vakcina, gdje proizvodni sojevi ili sojevi proizvođači, ili sintetizirana supstanca nisu podložni modifikacijama. Ova plastičnost preparata bakteriofaga osigurava nastavak primarne fagne rezistencije patogena.

Prednosti bakteriofagnih lijekova

Prednosti lijekova bakteriofaga uključuju usku specifičnost djelovanja, koja, za razliku od antibiotika, ne uzrokuje inhibiciju normalne mikroflore. Dokazano stimulativno dejstvo stafilokokni bakteriofag na bifidobakterije - najvažniju komponentu crijevne mikrobiocenoze. Upotreba bakteriofaga u liječenju infektivnih bolesti stimulira faktore specifičnog i nespecifičnog imuniteta, što je posebno učinkovito u liječenju hroničnih bolesti. inflamatorne bolesti na pozadini imunosupresivnih stanja, prijenos bakterija.

Eksperimentalni rad i dugoročan klinička zapažanja Dokazana je nemogućnost prenošenja plazmida otpornosti na antibiotike i toksičnosti terapijskim i profilaktičkim lijekovima bakteriofaga, jer su poliklonalni kompleksi virulentnih bakteriofaga.

U Rusiji, zemljama ZND, Poljskoj, Francuskoj i Španiji, bakteriofagi se široko koriste u medicini i veterini. Sakupljeno je veliko iskustvo u upotrebi bakteriofaga u liječenju crijevnih infekcija: visoka klinička efikasnost terapije fagama za akutne i hronična dizenterija, salmoneloze, praćene sanitacijom nosilaca. Dokazana je visoka epidemiološka efikasnost preventivne upotrebe bakteriofaga dizenterije, tifusa i salmonele.U kontrolisanim epidemiološkim eksperimentima sprovedenim u predškolskim ustanovama i industrijskim preduzećima utvrđeno je smanjenje stope incidencije za 3 do 6 puta. Upotreba bakteriofaga pokazala je dobre rezultate u liječenju bolesti uzrokovanih oportunističkim bakterijama, disbioze, gnojne lezije koža, ORL organi, mišićno-koštani sistem, genitourinarnog sistema, krvožilnog i respiratornog sistema, uključujući novorođenčad i djecu prve godine života.

Važan uslov koji osigurava efikasnost tretmana preparatima faga je određena fagna osetljivost patogena.

Evidentno je dugogodišnje iskustvo terapije fagom na Istraživačkom institutu za urologiju; Kao rezultat adaptacije komercijalnih bakteriofaga na bolničke sojeve koji cirkulišu u urološkoj klinici NPO „Biofag“, fagna osetljivost sojeva porasla je za 15% i bila je na nivou ili viša od osetljivosti na najsavremenije strane antibiotike. Na pozadini dugotrajne primjene bakteriofaga u bolnici, kod bolničkih sojeva nije uočeno stvaranje otpornosti na fage, dok se rezistencija na antibiotike smanjila. Klinička efikasnost terapije fagom je uočena u 92% slučajeva, često nadmašujući rezultate antibiotske terapije. Odsutnost kontraindikacija i komplikacija pri korištenju pripravaka bakteriofaga, mogućnost njihove upotrebe u kombinaciji s drugim lijekovi, uključujući i antibiotike, aktivnost protiv sojeva otpornih na antibiotike i prilagođavanje bakteriofaga modernim patogenima - sve to nam omogućava da ocjenjujemo preparate bakteriofaga kao visoko učinkovito i obećavajuće sredstvo za hitno liječenje gnojno-septičkih i enteralnih infekcija. Međutim, fagi, ovi „prirodni bolesnici“, mogu se koristiti ne samo za liječenje, već i za prevenciju zaraznih bolesti. Mogu se prepisivati ​​trudnicama, dojiljama i djeci bilo koje dobi, uključujući i nedonoščad. Glavni uslov za njihovu uspešnu upotrebu je testiranje izolovane kulture na osetljivost na odgovarajući fag. Zapažen je nevjerovatan obrazac: za razliku od antibiotika, osjetljivost kliničkih sojeva mikroorganizama na bakteriofage je stabilna i ima tendenciju povećanja, što se može objasniti obogaćivanjem lekovite droge nove rase faga. Pored medicinske primjene, bakteriofagi se široko koriste u veterinarskoj medicini; Stafilokokni bakteriofag je posebno efikasan u liječenju mastitisa kod krava. Preparati bakteriofaga se propisuju oralno za bolesti unutrašnje organe ili lokalno, direktno na leziju. Efekat faga se javlja u roku od 2-4 sata nakon njegove primene (što je posebno važno u uslovima intenzivne nege). Bakteriofagi prodiru u krv, limfu i izlučuju se kroz bubrege, sanirajući urinarni trakt.

Dakle, bakteriofagi koriste:

U veterinarskoj medicini za:

prevencija i liječenje bakterijske bolesti ptice i životinje;

liječenje gnojno-upalnih bolesti sluznice očiju i usne šupljine;

prevencija gnojno-upalnih komplikacija kod opekotina, rana, hirurških intervencija;

U genetskom inženjeringu:

za transdukciju - prirodni prijenos gena između bakterija;

kao vektori koji prenose delove DNK;

koristeći fage, moguće je napraviti ciljane promjene u genomu DNK domaćina;

U prehrambenoj industriji:

gotovi proizvodi od mesa i peradi već se masovno obrađuju sredstvima koja sadrže fage;

bakteriofagi se koriste u proizvodnji prehrambenih proizvoda od mesa, peradi, sira, biljnih proizvoda itd.;



Praktična upotreba fagi. Bakteriofagi se koriste u laboratorijskoj dijagnostici infekcija za intraspecifičnu identifikaciju bakterija, odnosno određivanje fagovara (fagotipa). U tu svrhu koristi se metoda tipizacije faga, zasnovana na strogoj specifičnosti djelovanja faga: kapi različitih dijagnostičkih faga specifičnih za tip nanose se na ploču s gustim hranjivim podlogom zasijanim "travnjakom" čiste kulture. patogena. Fag bakterije je određen tipom faga koji je izazvao njenu lizu (formiranje sterilne mrlje, „plaka“ ili „negativne kolonije“, faga). Tehnika fagotipizacije koristi se za identifikaciju izvora i puteva širenja infekcije (epidemiološko obilježavanje). Izolacija bakterija istog fagovara od različitih pacijenata ukazuje na zajednički izvor njihove infekcije.

Fagi se također koriste za liječenje i prevenciju brojnih bolesti bakterijske infekcije. Proizvode tifus, salmonelu, dizenteriju, pseudomonas, stafilokok, streptokokne fage i kombinovani lekovi(koliproteus, piobakteriofagi, itd.). Bakteriofagi se propisuju prema indikacijama oralno, parenteralno ili lokalno u obliku tečnosti, tableta, supozitorija ili aerosola.

Bakteriofagi se široko koriste u genetskom inženjeringu i biotehnologiji kao vektori za proizvodnju rekombinantne DNK.

Preparati bakteriofaga koji se koriste u praksi su filtrat bujonske kulture odgovarajućih mikroba liziranih fagom, koji sadrži žive čestice faga, kao i otopljene bakterijske antigene koji se oslobađaju iz bakterijskih ćelija tokom njihove lize. Dobiveni preparat, tekući bakteriofag, trebao bi izgledati potpuno bistra tečnost žuta boja većeg ili manjeg intenziteta.

Za upotrebu u terapeutske i profilaktičke svrhe, fagi se mogu proizvoditi u obliku tableta sa premazom otpornim na kiseline. Peletirani suhi fag je stabilniji tokom skladištenja i pogodan za upotrebu. Jedna tableta suvog bakteriofaga odgovara 20-25 ml tečna priprema. Rok trajanja suhih i tečnih preparata je 1 godina. Tečni bakteriofag treba čuvati na temperaturi od + 2 +10 C, suvi - ne više od +1 ° C, ali se može čuvati u frižideru na negativnim temperaturama.

Bakteriofag koji se uzima oralno ostaje u tijelu 5-7 dana. U pravilu, uzimanje bakteriofaga ne prati nikakve reakcije ili komplikacije. Nema kontraindikacija za upotrebu. Koriste se u obliku navodnjavanja, ispiranja, losiona, tampona, injekcija, a primjenjuju se i u šupljine - trbušne, pleuralne, zglobne i u mjehur, ovisno o lokaciji patogena.

Dijagnostički fagi se proizvode u tečnom i suvom obliku u ampulama.Pre početka rada suvi bakteriofag se razblaži. Ako je na ampulama naveden titar tr, DRT (radna titarska doza) se koristi u reakciji fagolizacije (Otto metoda) za identifikaciju bakterija; ako je naznačen tip faga, onda za tipizaciju faga, za određivanje izvora infekcije.

Učinak bakteriofaga na mikrobnu kulturu u tečnom mediju i dalje gusto okruženje

Otto metoda (kapajući kap)

Gusto zasijajte travnjak ispitivanog usjeva. 5-10 minuta nakon sjetve tečni dijagnostički fag se nanosi na osušenu površinu hranljive podloge. Posuda se lagano nagne tako da se kap faga proširi po površini agara. Čaša se stavlja u termostat na 18-24 sata. Rezultati se izračunavaju prema potpuno odsustvo rast kulture na mjestu gdje se primjenjuje kap faga.

Eksperimentišite na tečnom hranljivom mediju

Inokulirajte test kulturu u dvije epruvete sa tečni medij. Dijagnostički bakteriofag se dodaje sa petljom u jednu epruvetu („O“). Nakon 18-20 sati, u epruveti u koju nije dodan bakteriofag (“K”), uočava se jaka zamućenost bujona - inokulirana kultura je porasla. Bujon u epruveti u koju je dodat bakteriofag ostao je providan zbog lize kulture pod njenim uticajem.

Fagotipizacija bakterija

Prema spektru djelovanja razlikuju se sljedeći bakteriofagi: polivalentne, lizirajuće srodne vrste bakterija; monovalentne, lizirajuće bakterije određene vrste; tipične, lizirajuće pojedinačne vrste (varijante) bakterija.

Na primjer, jedan soj patogenog stafilokoka može se lizirati sa nekoliko tipova faga, tako da svi tipični fagi (24) i sojevi patogenih stafilokoka objedinjeni u 4 grupe.

Metoda tipizacije faga ima veliki značaj za epidemiološka istraživanja, jer nam omogućava da identifikujemo izvor i puteve širenja patogena. U tu svrhu, virus faga se određuje iz čiste kulture izolirane iz patološkog materijala na čvrstim hranjivim podlogama korištenjem standardnih dijagnostičkih faga.

Fagovar kulture mikroorganizma određen je tipičnim fagom koji je uzrokovao njenu lizu.Izolacija bakterija istog fagovara od različitih subjekata ukazuje na izvor infekcije.

Stiče sve više obožavatelja među ljekarima, potiskujući antibiotike u drugi plan. Nekada davno, pojava antibiotika potpuno je promijenila način na koji su ljekari razmišljali o liječenju. Ranije beznadežni pacijenti počeli su da se oporavljaju, algoritmi lečenja su postali krajnje pojednostavljeni, stopa smrtnosti je naglo opala... Čuda! Magic cure! Ali entuzijastični stav nije dugo trajao. Počelo je da se javlja previše problema.

Neprijatelj mog neprijatelja je moj prijatelj

Sada su "klizavi" problemi antibiotske terapije svima poznati. Djelovanje antibiotika je praćeno:

Uništavanje potrebne, "korisne" mikroflore crijeva i sluzokože;

Aktivan rast novih sojeva bakterija otpornih na njih;

Pojava nuspojave zbog sistemskog djelovanja lijekova.

S tim u vezi, potraga za fundamentalno različitim lijekovima za liječenje bakterijskih infekcija postala je hitna. A onda su bakteriofagi došli do izražaja.

Bakteriofagi su virusi koji selektivno inficiraju bakterijske stanice. Virus se veže za ćelijski zid bakterija i unosi svoj genetski materijal u ćeliju. Kao rezultat, počinje sinteza novih virusa, a zatim dolazi do lize bakterijske stanice i oslobađanja 200-1000 novih faga koji inficiraju druge bakterije. Kada se unište sve bakterije patogenog soja, bakteriofagi se eliminiraju iz tijela bez traga. Mnogi bakteriofagi su vrlo specifični, a svaki soj virusa inficira samo određenu vrstu bakterija, a da ni na koji način ne utječe na druge mikroorganizme i stanice tijela. Ovo osigurava značajno smanjenje nuspojava.

Dakle, do nesumnjivih prednosti upotreba bakteriofaga može se pripisati:

Visok sigurnosni profil, koji omogućava njihovu upotrebu kod pacijenata bilo koje dobi, od novorođenčadi do veoma starih;

Smanjenje rizika od pojave rezistentnih sojeva bakterija;

Mogućnost njihove kombinacije s bilo kojim drugim lijekovima, uključujući antibiotike.

Možda jedina stvar koja ograničava upotrebu bakteriofaga je njihova selektivnost, zbog čega je prije liječenja potrebno razjasniti prirodu patogena i njegovu osjetljivost na razne vrste bakteriofagi. Takva analiza se nikako ne provodi svuda i uzima određeno vrijeme, ali poboljšanje dijagnostičkih sistema nam omogućava da se nadamo da će ovaj problem uskoro biti riješen.

Od teorije do prakse

Postoji različite vrste bakteriofagi: monofagi, koji imaju za cilj uništavanje samo jedne vrste bakterija, i polifagi, koji djeluju na nekoliko vrsta patogenih bakterija odjednom. Budući da su bakteriofagi izuzetno traženi u gotovo svim oblastima medicine, od kirurgije i ginekologije do neonatologije i ORL prakse, planirano je puštanje bakteriofaga u razne forme. Koriste se za oralnu primenu, u vidu klistira, aplikacija, irigacija, za uvođenje u šupljine rana, vagine, materice, nosa, sinusa, kao i za uvođenje u drenirane šupljine - trbušne, pleuralne, mokraćne bešike, bubrežne karlice. . Trajanje kursa zavisi od kliničkih indikacija i može biti 7-20 dana. Sigurni, efikasni i pouzdani bakteriofagi su upravo ono oružje koje je toliko neophodno u borbi protiv patogenih bakterija.

Ne samo medicina

Napredak u molekularnoj biologiji i biotehnologiji omogućio je korištenje bakteriofaga ne samo za liječenje, već i za druge svrhe. U SAD se, na primjer, bakteriofagi koriste kao siguran konzervans za prehrambeni proizvodi. Kada se dodaju hrani, bakteriofagi sprečavaju razmnožavanje neželjenih bakterija.

Zanimljivosti

Do otkrića bakteriofaga došlo je 1894. godine, kada je britanski bakteriolog Ernest Hankin primijetio da indijske rijeke Gang i Jumna imaju značajno antibakterijsko djelovanje, koje je nakon ključanja potpuno nestalo. On je sugerisao da je u vodi bilo neke supstance koja ubija bakterije. Ovi virusi su 1917. dobili naziv "bakteriofag" ("žder bakterija") od francuskog naučnika Felixa D'Hérellea, koji je otkrio "nevidljivi mikrob koji inficira bacil dizenterije". Pojašnjenje prirode ove "nevidljivosti" postalo je moguće tek nakon pojave elektronske mikroskopije.

4. Interakcija virusa sa osjetljivom ćelijom. Strogi parazitizam i citotropizam virusa i faktori koji ga uzrokuju. Ćelijski i virus specifični receptori.

5. Osobine infekcije, mehanizmi nespecifičnog i specifičnog imuniteta kod virusnih bolesti. Interferoni

1. Urođeni antivirusni imunitet

2. Stečeni (adaptivni) antivirusni imunitet

6. Vrste virusnih infekcija ćelija. Promjene u ćelijama domaćina tokom virusne infekcije. Citopatsko djelovanje virusa, vrste.

9. Ćelijske kulture, klasifikacija, karakteristike. Uzgoj virusa na ćelijskim kulturama. Priprema materijala, kontaminacija kulture. Metode indikacije i identifikacije virusa.

I. Ćelijske kulture

10. Uzgoj virusa u pilećem embrionu. Metode infekcije. Indikacija i identifikacija virusa.

11. Izolacija virusa u laboratorijskim životinjama. Metode zaraze životinja, indikacija i identifikacija virusa.

13. Etiologija akutnih respiratornih virusnih bolesti. Klasifikacija virusa gripe. Opće karakteristike. Svojstva strukturnih i nestrukturnih virusnih proteina. Virusni genom.

14. Antigenska struktura virusa gripe i njena varijabilnost, uloga u epidemijskom i pandemijskom širenju gripe. Mehanizmi prirodnog i stečenog imuniteta.

15. Mehanizmi patogeneze, specifična i nespecifična terapija i prevencija gripe.

16. Paramiksovirusi. Sastav porodice. Virusi parainfluence, karakteristike, diferencijacija od virusa gripe. Virus zaušnjaka. Respiratorni sincicijski virus.

17.Savremene metode laboratorijske dijagnostike gripa i parainfluence.

18. Virus morbila, morfologija, kulturološka i antigena svojstva. Patogeneza i imunitet kod morbila. Specifična vakcina i gama globulin.

19. Virus bjesnila, morfologija, biološka svojstva, virusne inkluzije. Patogeneza bolesti. Laboratorijska dijagnostika bjesnila.

20. Epidemiologija, specifična i nespecifična prevencija bjesnila. Vakcina protiv bjesnila i gama globulin. Pasteurova djela.

Laboratorijska dijagnostika HIV infekcije

23. Klasifikacija virusa hepatitisa. Karakteristike virusa hepatitisa A. Patogeneza, imunitet, metode prevencije hepatitisa A.

24. Karakteristike virusa hepatitisa B. Genom, glavni proteini. Patogeneza, imunitet, prevencija, laboratorijska dijagnostika hepatitisa B.

25. Hepatitis c, d, f. Karakteristike virusa, epidemiologija, patogeneza bolesti.

26. Klasifikacija i karakteristike ekološke grupe arbovirusa. Toga i flavivirusi. Značaj u ljudskoj patologiji. Virološka dijagnoza krpeljnog encefalitisa.

Grupa I.

Grupa II.

III grupa.

27. Virus rubeole. Opće karakteristike. Uloga u patologiji. Prevencija rubeole.

28. Bunyavirusi, opšte karakteristike, uzrokovane bolesti.

29. Picornavirusi, klasifikacija, opšte karakteristike porodice.

31. Coxsackie i Echo virusi, karakteristike. Uloga u ljudskoj patologiji. Principi diferencijacije.

32. Rinovirusi. Rotavirusi. Opće karakteristike. Uloga u ljudskoj patologiji.

33. Adenovirusi, morfologija, kulturološka, ​​biološka svojstva, serološka klasifikacija. Mehanizmi patogeneze, laboratorijska dijagnostika adenovirusnih infekcija.

Karakteristike humanih herpes virusa

35. Etiologija vodenih kozica, malignog herpesa, citomegalije, infektivne mononukleoze. Mehanizmi patogeneze. Laboratorijska dijagnostika.

36. Teorije virusne karcinogeneze. Onkogeni virusi. Ćelijski i virusni onkogeni.

37. Bakterijski virusi (bakteriofagi), svojstva, klasifikacija. Interakcija bakteriofaga sa osjetljivom bakterijskom ćelijom. Virulentni i umjereni fagi. Lizogenija.

38. Praktična upotreba bakteriofaga. Dijagnostika faga, tipizacija faga, fagoterapija. Metode titriranja bakteriofaga.

29 www.Bsmu.H15.Ru

38. Praktična upotreba bakteriofaga. Dijagnostika faga, tipizacija faga, fagoterapija. Metode titriranja bakteriofaga.

Praktična primjena bakteriofaga. Stroga specifičnost bakteriofaga omogućava im da se koriste za tipizaciju faga i diferencijaciju bakterijskih kultura, kao i za indikaciju njihovih spoljašnje okruženje, na primjer u rezervoarima.

Metoda fagotipizacije bakterija ima široku primjenu u mikrobiološkoj praksi. Omogućuje ne samo određivanje vrste kulture koja se proučava, već i njen fagotip (fagovar). To je zbog činjenice da bakterije iste vrste imaju receptore koji adsorbiraju striktno specifične fage, koji potom uzrokuju njihovu lizu. Upotreba setova ovakvih tip-specifičnih faga omogućava fagotipizaciju proučavanih kultura u svrhu epidemiološke analize zaraznih bolesti: utvrđivanje izvora infekcije i puteva njenog prenošenja.

Osim toga, po prisutnosti faga u vanjskoj sredini (rezervoarima) može se suditi o sadržaju odgovarajućih bakterija u njima koje predstavljaju opasnost po zdravlje ljudi. Ova metoda indikacija patogenih bakterija se također koristi u epidemiološkoj praksi. Njegova efikasnost se povećava kada se izvede reakcija povećanja titra faga, koja se zasniva na sposobnosti specifičnih fagnih linija da se razmnožavaju na strogo definisanim bakterijskim kulturama. Kada se takav fag unese u ispitni materijal koji sadrži željeni patogen, njegov titar se povećava. Široko rasprostranjena upotreba reakcije povećanja titra faga je komplicirana zbog poteškoća u dobivanju indikatorskih setova faga i drugih razloga.

Upotreba faga u terapeutske i profilaktičke svrhe je relativno rijetka. To je zbog velikog broja negativnih rezultata, koji se objašnjavaju sljedećim razlozima:

1) striktna specifičnost faga, koji liziraju samo one ćelije bakterijske populacije koje su opremljene odgovarajućim receptorima, zbog čega jedinke otporne na fage prisutne u svakoj populaciji u potpunosti zadržavaju svoju vitalnost;

2) široka upotreba efikasnijih etiotropnih lijekova - antibiotika koji nemaju specifičnost bakteriofaga.

Trenutno se preparati bakteriofaga koriste za liječenje dizenterije, salmoneloze i gnojnih infekcija uzrokovanih bakterijama otpornim na antibiotike. U svakom slučaju, osjetljivost izolovanih patogena na ovu drogu bakteriofag.

Za prevenciju istoimene bolesti u dječjim grupama koriste se fagi salmonele.

29 www.Bsmu.H15.Ru