bacteriofagi în practică medicală utilizate în diagnostic, tratament și prevenire boli infecțioase.

A. În diagnosticare, bacteriofagul este utilizat în implementarea metodei culturale de cercetare pentru a determina tipul culturii pure izolate, precum și pentru tiparea acesteia. Metoda descrisă mai jos pentru utilizarea unui bacteriofag pentru a indica prezența unui anumit tip de bacterii într-un material patologic fără a-l izola într-o cultură pură nu a devenit larg răspândită.

1. Reacția de creștere a titrului fagului se bazează pe capacitatea unui anumit bacteriofag de a se replica numai în celulele bacteriene din „propria” specie. Se efectuează după următorul principiu. La materialul patologic se adaugă o anumită cantitate dintr-un bacteriofag specific, este incubată într-un termostat și apoi se determină din nou cantitatea de fag. Dacă a crescut, înseamnă că bacteriofagul „a găsit” celule din „propria” specie pentru replicare, prin urmare, bacteriile din specia dorită sunt prezente în materialul patologic.

2. În procesul de identificare a unei culturi pure se folosesc bacteriofagi de specii și tip.
A. Speciile bacteriofage sunt utilizate pentru indicarea fagilor. Cultura pură izolată este însămânțată cu un gazon pe agar pe placă și se aruncă pe ea o picătură din specia bacteriofag. Dacă cultura aparține speciei dorite, atunci nu va exista creștere la locul de aplicare a picăturii, în caz contrar se va observa creșterea bacteriană la locul de aplicare a picăturii de fagi. Uneori, după ce bacteriofagul a fost aplicat, placa de Petri a plăcii de agar este înclinată, permițând picăturii să curgă pe marginea vasului (de aceea această metodă se numește „picătură dribble”).

b. Bacteriofagii tipici sunt utilizați pentru tiparea fagilor. Principiul metodei este următorul.
1. Tulpina de tipat este însămânțată cu un gazon pe agar pe placă.
2. Apoi, picături de bacteriofagi tipici sunt aruncate pe suprafața însămânțată (fiecare în propriul său pătrat, marcat în prealabil, de exemplu, cu un grafic pe sticlă pe fundul unei plăci Petri).
3. Vasul de inoculare este incubat într-un termostat.
4. Se ține cont de experiență prin înregistrarea „petelor sterile” sau „plăcilor” - locuri de lipsă de creștere la locul aplicării unei picături bacteriofage, la care această variantă bacteriană este sensibilă.
5. Fagovar (fagotip) este desemnat prin enumerarea fagilor tipici care lizează această variantă.
B. Utilizarea bacteriofagelor (de obicei specii) pentru tratament este denumită terapie cu fagi. În scopul tratamentului, bacteriofagii sunt aplicați local (sub formă de irigare a suprafeței afectate, injectare într-un focar local). proces patologic etc.), de la introducerea lor pe cale parenterală duce la dezvoltarea unui răspuns imun la o proteină fagică străină. Dacă un bacteriofag terapeutic este utilizat pe cale orală (pentru a trata infectii intestinale), atunci cel mai bine este să utilizați forma de tabletă a medicamentului, acoperită cu o înveliș rezistentă la acid, care se dizolvă în mediul alcalin al intestinului - bacteriofagii sunt foarte sensibili la pH scăzut și sunt rapid inactivați în mediu acid stomac.
C. Profilaxia fagilor - utilizarea unui bacteriofag (de asemenea, de regulă, o specie) pentru a preveni dezvoltarea unei infecții bacteriene. Folosit în prezent pentru prevenirea situațiilor de urgență febră tifoidăși dizenterie (profilaxia de urgență se referă la un set de măsuri de prevenire a dezvoltării bolii după ce actul de infecție a avut deja loc, adică agentul patogen pătrunde în corpul pacientului).

Datorită efectului lor distructiv (litic) asupra bacteriilor, fagii pot fi utilizați în scopuri terapeutice. scop preventiv la diverse boli(dizenterie, holeră, diverse boli purulent-inflamatorii etc.). Seturi de fagi standard, inclusiv cei internaționali, sunt utilizate pentru tiparea fagică a agenților patogeni ai unui număr de boli (holera, febră tifoidă, salmoneloză, difterie, stafilococ și alte boli). Bacteriofagii sunt, de asemenea, utilizați în Inginerie genetică ca vectori care transferă segmente de ADN, este posibil și transferul natural de gene între bacterii prin intermediul anumitor fagi (transducție). De regulă, acestor pacienți li se prescriu antibiotice. Dar datorită faptului că bacteriile cu mutații constante dobândesc rezistență la antibiotice, eficacitatea lor este anul trecut slăbit. Atenția cercetătorilor a fost atrasă de bacteriofagi – viruși care devorează bacteriile. Spre deosebire de antibiotice, care distrug atât nocive cât și microfloră sănătoasă organism, bacteriofagii sunt selectivi, doar bacteriile patogene cad sub influența lor. Cum funcționează bacteriofagii în organism? Ele pătrund doar în anumite celule și interacționează cu ADN-ul lor, creând un efect lizogen sau litic. Acționând asupra microbilor de tip litic, bacteriofagii îi distrug, ceea ce le permite să se înmulțească rapid. Tipul lizogen este pătrunderea genomului fag în genomul bacterian, sinteza lor și trecerea ulterioară de la o generație la alta. Informațiile despre bacteriofagi au apărut în urmă cu mai bine de un secol, când erau folosite pentru a trata stafilococul auriu. În prezent, ele sunt utilizate pe scară largă pentru prevenirea și tratamentul infecțiilor intestinale, stafilococice, streptococice, tifoide și multe alte infecții. Medicină modernă caută metode care să nu folosească bacteriofagi vii, ci enzime care acționează asupra bacteriilor patogene prin liză. Aplicarea lor poate fi sub formă de spray nazal sau oral, pastă de dinți, alimente, aditivi alimentari. Eficacitatea utilizării bacteriofagelor constă în absența contraindicațiilor și a complicațiilor, compatibilitatea cu alte medicamente, influență activă pentru microbii rezistenți la antibiotice. Datorită acestor proprietăți, bacteriofagii sunt evaluați ca medicamente ale viitorului pentru controlul cu succes al infecțiilor.

Cele mai importante avantaje ale terapiei cu fagi sunt sensibilitate crescută microflora patogenă la bacteriofag, posibilitatea utilizării inițiale a dozelor mici de bacteriofag, compatibilitatea cu toate tipurile de terapie cu antibiotice tradiționale, absența contraindicațiilor pentru profilaxia fagilor și terapia cu fagi. S-a stabilit că în natură nu există microorganisme care să fie absolut rezistente la bacteriofagi. Este important ca reproducerea bacteriofagelor să fie posibilă numai în prezența bacteriilor sensibile la acesta. După moartea ultimei celule microbiene aflate în focarul unei leziuni infecțioase, aceasta își încetează activitatea activă și este complet eliminată din organism.

Datorită scăderii observate efect terapeutic preparatele antibiotice ale bacteriofagelor sunt utilizate în practica clinica ca alternativă la antibiotice și în combinație cu acestea din urmă. Preparatele bacteriofage nu sunt inferioare preparatelor antibacteriene din punct de vedere al eficacității, ele stimulează factori locali de specific și imunitatea nespecificăși nu provoacă lateral toxic și reactii alergice. Bacteriofagii se administrează pe cale orală, și se folosesc și pentru irigarea rănilor, pentru injectare în cavitățile drenate - abdominale, pleurale, sinusale, urechii medii, abcese, răni, uter, vezică urinară. Cu aplicarea orală și cu aerosoli, precum și atunci când sunt aplicate pe suprafața membranelor mucoase, bacteriofagii pătrund în sânge și limfă și sunt excretați prin rinichi, dezinfectând tractul urinar.

În prezent, interesul pentru terapia cu fagi a fost reînnoit în chirurgie, urologie, oftalmologie și traumatologie.

Preparatele terapeutice și profilactice ale bacteriofagelor sunt compuse din bacteriofagi policlonali virulenți cu o gamă largă de acțiune, care sunt și activi împotriva bacteriilor rezistente la antibiotice. Sunt produse sub formă lichidă, sub formă de tablete cu înveliș rezistent la acid, sub formă de supozitoare, unguente, linimente.

Preparatele bacteriofage sunt un filtrat steril de fagolizate bacteriene, se administrează pe cale orală, topic pentru irigarea rănilor și mucoaselor, introducerea în cavitatea uterină, Vezica urinara, ureche, sinusuri paranazale, precum și în cavitățile drenate - abdominale, pleurale și, de asemenea, în cavitatea abceselor după îndepărtarea exudatului.

Bacteriofagii sunt capabili să pătrundă rapid în sânge și limfă și sunt excretați prin rinichi cu urină. După cum se arată în studiile noastre, după administrarea a 30 ml de bacteriofag, particulele de fagi sunt detectate în urină după 2 ore și concentrație maximă ele sunt atinse prin urină la 6-8 ore după ingestie.

Activitatea bacteriofagelor terapeutice și profilactice împotriva agenților patogeni ai bolilor purulent-septice și enterice este destul de ridicată - de la 72% la 90%, inclusiv împotriva tulpinilor de origine spitalicească, caracterizate prin rezistență multiplă la antibiotice. Conformitatea preparatelor de bacteriofagi cu structura atiologică modernă a agenților patogeni se realizează prin adaptarea lor constantă la tulpinile circulante datorită reînnoirii raselor de fagi și producției de ștampile bacteriene. Această caracteristică distinge favorabil fagii de alte preparate antimicrobiene - antibiotice, eubiotice sau vaccinuri, în care tulpinile de producție sau tulpinile producătoare sau substanța sintetizată nu sunt supuse niciunei modificări. O astfel de plasticitate a preparatelor bacteriofagice asigură continuarea rezistenței fagice primare a agenților patogeni.

Beneficiile preparatelor cu bacteriofagi

Avantajele preparatelor bacteriofage includ o specificitate îngustă de acțiune, care, spre deosebire de antibiotice, nu provoacă inhibarea microflorei normale. Efect stimulant dovedit bacteriofag stafilococic pe bifidobacterii – cea mai importantă componentă a microbiocenozei intestinale. Utilizarea bacteriofagelor pentru tratamentul bolilor infecțioase stimulează factorii imunității specifice și nespecifice, care este deosebit de eficientă pentru tratamentul bolilor cronice. boli inflamatorii pe fondul stărilor imunosupresoare, bacteriopurtător.

Muncă experimentală și lungă observatii clinice s-a dovedit imposibilitatea transmiterii plasmidelor de rezistență la antibiotice și toxicitate prin preparate terapeutice și profilactice ale bacteriofagelor, deoarece sunt complexe policlonale de bacteriofagi virulenți.

În Rusia, țările CSI, Polonia, Franța, Spania, bacteriofagii sunt utilizați pe scară largă în medicină și medicina veterinară. S-a acumulat o mare experiență în utilizarea bacteriofagelor în tratamentul infecțiilor intestinale: o eficacitate clinică ridicată a terapiei cu fagi pentru tratamentul acut și dizenterie cronică, salmoneloză, însoțită de igienizarea purtătorilor. Eficiența epidemiologică ridicată a utilizării profilactice a bacteriofagelor de dizenterie, tifoidă și salmonella a fost dovedită. Utilizarea bacteriofagelor a dat rezultate bune în tratamentul bolilor cauzate de bacterii oportuniste, disbacterioză, leziuni purulente piele, ORL - organe, sistem musculo-scheletic, sistemul genito-urinar, sisteme ale organelor circulator și respirator, inclusiv la nou-născuți și copiii din primul an de viață.

O condiție importantă care asigură eficacitatea tratamentului cu preparate fagice este o anumită sensibilitate fagică a agentului patogen.

Experiența îndelungată a terapiei cu fago la Institutul de Cercetare de Urologie este clară; Ca urmare a adaptării bacteriofagelor comerciali la tulpinile spitalicești care circulă în clinica urologică de la NPO Biofag, sensibilitatea fagică a tulpinilor a crescut cu 15% și a fost la sau peste nivelul de sensibilitate la cele mai moderne antibiotice străine. Pe fondul utilizării pe termen lung a bacteriofagelor într-un spital, nu a fost observată nicio formare de rezistență la fagi în rândul tulpinilor de spital, în timp ce rezistența la antibiotice a scăzut. Eficacitatea clinică a terapiei cu fagi a fost observată în 92% din cazuri, depășind adesea rezultatele terapiei cu antibiotice. Absența contraindicațiilor și a complicațiilor în utilizarea preparatelor bacteriofage, posibilitatea utilizării lor în combinație cu alte medicamente, inclusiv cu antibiotice, activitate împotriva tulpinilor rezistente la antibiotice și adaptarea bacteriofagelor la agenții patogeni moderni - toate acestea fac posibilă evaluarea preparatelor bacteriofage ca un mijloc extrem de eficient și promițător de tratament de urgență al infecțiilor purulent-septice și enterice. Cu toate acestea, fagii, acești „ordonați naturali”, pot fi folosiți nu numai pentru tratament, ci și pentru prevenirea bolilor infecțioase. Ele pot fi prescrise femeilor însărcinate, mamelor care alăptează și copiilor de orice vârstă, inclusiv prematurilor. Condiția principală pentru aplicarea lor cu succes este testarea culturii izolate pentru sensibilitatea la fagul corespunzător. S-a remarcat un model uimitor: spre deosebire de antibiotice, sensibilitatea tulpinilor clinice de microorganisme la bacteriofagi este stabilă și tinde să crească, ceea ce poate fi explicat prin îmbogățire. preparate medicale noi rase de fagi. Pe lângă aplicațiile medicale, bacteriofagii sunt utilizați pe scară largă în medicina veterinară; bacteriofag stafilococic deosebit de eficient în tratamentul mastitei la vaci. Preparatele bacteriofage sunt prescrise oral pentru boli organe interne sau local, direct pe leziune. Acțiunea fagului se manifestă deja la 2-4 ore de la introducerea lui (ceea ce este deosebit de important la terapie intensivă). Bacteriofagii pătrund în sânge, limfă și sunt excretați prin rinichi, igienizând tractul urinar.

Astfel, bacteriofagii folosesc:

În medicina veterinară pentru:

prevenire si tratament boli bacteriene păsări și animale;

tratamentul bolilor purulent-inflamatorii ale membranelor mucoase ale ochilor, cavității bucale;

prevenirea complicațiilor purulent-inflamatorii în arsuri, răni, intervenții chirurgicale;

În inginerie genetică:

pentru transducție - transferul natural de gene între bacterii;

ca vectori care transferă secțiuni de ADN;

folosind fagi, este posibil să se construiască modificări direcționate în genomul ADN-ului gazdă;

În industria alimentară:

agenții care conțin fagi la scară largă prelucrează deja carne și produse de pasăre gata de consumat;

bacteriofagii sunt utilizați la producerea produselor alimentare din carne, păsări de curte, brânzeturi, produse vegetale etc.;



Uz practic fagi. Bacteriofagii sunt utilizați în diagnosticul de laborator al infecțiilor în timpul identificării intraspecifice a bacteriilor, adică la determinarea fagovarului (tipul de fag). Pentru a face acest lucru, se utilizează metoda de tipare a fagilor, bazată pe specificul strict al acțiunii fagilor: picături de diferite fagi specifice tipului de diagnostic sunt aplicate într-o cană cu un mediu nutritiv dens însămânțat cu o „gazon” de cultură pură. a agentului patogen. Fagul fag al unei bacterii este determinat de tipul de fag care i-a cauzat liza (formarea unei pete sterile, „placă” sau „colonie negativă”, fag). Tehnica de tipărire a fagilor este utilizată pentru a identifica sursa și modalitățile de răspândire a infecției (marcaj epidemiologic). Izolarea bacteriilor aceluiași fagovar de la diferiți pacienți indică o sursă comună de infecție.

Fagii sunt, de asemenea, utilizați pentru a trata și preveni o serie de infecții bacteriene. Ei produc tifoidă, salmonella, dizenterie, pseudomonas, fagi stafilococici, streptococici și preparate combinate(coliproteice, piobacteriofage etc.). Bacteriofagii sunt prescriși conform indicațiilor pe cale orală, parenterală sau locală sub formă de lichide, tablete, supozitoare sau aerosoli.

Bacteriofagii sunt folosiți pe scară largă în inginerie genetică și biotehnologie ca vectori pentru obținerea ADN-ului recombinant.

Preparatele bacteriofage utilizate în practică sunt un filtrat dintr-o cultură în bulion a microbilor corespunzători lizați de un fag, care conține particule de fagi vii, precum și antigene bacteriene dizolvate eliberate din celulele bacteriene în timpul lizei lor. Preparatul rezultat - un bacteriofag lichid ar trebui să arate ca un complet lichid limpede Culoarea galbena intensitate mai mare sau mai mică.

În scopuri terapeutice și profilactice, fagii pot fi produși sub formă de tablete cu un înveliș rezistent la acid. Fagul uscat tabletat este mai stabil în timpul depozitării și mai ușor de utilizat. O tabletă de bacteriofag uscat corespunde la 20-25 ml preparat lichid. Perioada de valabilitate a preparatului uscat și lichid este de 1 an. Bacteriofagul lichid trebuie păstrat la o temperatură de + 2 +10 C, uscat - nu mai mare de +1 ° C, dar poate fi păstrat la frigider la o temperatură negativă.

Bacteriofagul luat pe cale orală rămâne în organism timp de 5-7 zile. De regulă, administrarea unui bacteriofag nu este însoțită de reacții sau complicații. Nu există contraindicații pentru internare. Ele sunt utilizate sub formă de irigații, clătiri, loțiuni, tampoane, injecții și, de asemenea, injectate în cavitățile - abdominale, pleurale, articulare și vezicii urinare, în funcție de localizarea agentului patogen.

Fagii de diagnostic sunt produși atât sub formă lichidă, cât și uscată în fiole.Înainte de începerea lucrului, bacteriofagul uscat este diluat. Dacă titrul, tr, DRT (doza de titru de lucru) este indicat pe fiole, acesta este utilizat în testul de lizabilitate a fagilor (metoda Otto) pentru a identifica bacteriile, dacă este indicat tipul de fag, atunci pentru tiparea fagilor - pentru a determina sursa de infectie.

Acțiunea unui bacteriofag asupra unei culturi microbiene în mediu lichid și pe mediu dens

Metoda lui Otto (Picătură care căde)

Faceți un gazon dens de semănat al culturii studiate. La 5-10 minute după însămânțare, pe suprafața uscată a mediului nutritiv se aplică un fag de diagnostic lichid. Vasul este înclinat ușor, astfel încât picătura de fag să se răspândească pe suprafața agarului. Cupa se pune într-un termostat timp de 18-24 de ore. Rezultatul este contabilizat absenta totala creșterea culturii la locul aplicării picăturilor de fagi.

Experimentați pe un mediu nutritiv lichid

Cultura de testat se inoculează în două eprubete cu mediu lichid. Un bacteriofag de diagnostic este adăugat într-o buclă într-o eprubetă („O”). După 18-20 de ore într-o eprubetă în care nu a fost adăugat bacteriofagul („K”), se observă o tulburare puternică a bulionului - cultura însămânțată a crescut. Bulionul din eprubetă, unde s-a adăugat bacteriofagul, a rămas transparent datorită lizei culturii sub influența sa.

Tiparea fagică a bacteriilor

După spectrul de acțiune, se disting următoarele bacteriofagi: tipuri de bacterii polivalente, înrudite cu liză; bacterii monovalente, lizante de un anumit tip; tipuri (variante) de bacterii tipice, care lizează.

De exemplu, o tulpină de stafilococ patogen poate fi lizată de mai multe tipuri de fagi, astfel încât toți fagii (24) și tulpinile tipice stafilococi patogeni grupate in 4 grupe.

Metoda de tipare a fagilor are mare importanță pentru cercetarea epidemiologică, deoarece permite identificarea sursei și modalităților de răspândire a agenților patogeni. În acest scop, fagovarul unei culturi pure izolate din materialul patologic este determinat pe medii nutritive dense utilizând fagi de diagnostic tipic.

Fagovarul culturii de microorganisme este determinat de tipul de fag care i-a cauzat liza.Izolarea bacteriilor aceluiași fagovar de la diferiți subiecți indică sursa infecției.

Câștigând din ce în ce mai mulți fani în rândul medicilor, împingând antibioticele în plan secund. Pe vremuri, apariția antibioticelor a schimbat complet modul în care medicii gândesc despre tratament. Pacienții anterior fără speranță au început să se recupereze, algoritmii de tratament au fost extrem de simplificați, mortalitatea a scăzut brusc... Miracole! Medicamente magice! Dar atitudinea entuziastă nu a durat mult. Au început să apară prea multe probleme.

Dușmanul dușmanului meu este prietenul meu

Acum problemele „alunecoase” ale terapiei cu antibiotice sunt cunoscute de toată lumea. Acțiunea antibioticelor este însoțită de:

Distrugerea microflorei intestinale și a membranelor mucoase necesare, „utile”;

Creșterea activă a noilor tulpini de bacterii rezistente la acestea;

aparitie efecte secundare datorită acţiunii sistemice a medicamentelor.

În acest sens, căutarea unor medicamente fundamental diferite pentru tratamentul infecțiilor bacteriene a devenit relevantă. Și apoi bacteriofagii au apărut în prim-plan.

Bacteriofagii sunt viruși care infectează selectiv celulele bacteriene. Virusul se atașează de perete celular bacterii și introduce materialul său genetic în celulă. Ca urmare, începe sinteza de noi virusuri, iar apoi are loc liza celulei bacteriene și eliberarea a 200-1000 de noi fagi care infectează alte bacterii. Când toate bacteriile tulpinii patogene sunt distruse, bacteriofagii sunt eliminați din organism fără urmă. Mulți bacteriofagi sunt foarte specifici, iar fiecare tulpină a virusului infectează doar un anumit tip de bacterii, fără a afecta alte microorganisme și celule ale corpului. Acest lucru asigură o reducere semnificativă a numărului de efecte secundare.

Astfel, la avantajele neîndoielnice utilizarea bacteriofagelor pot fi atribuite:

Profil ridicat de siguranță, permițându-le să fie utilizate la pacienții de orice vârstă, de la nou-născuți până la persoane foarte în vârstă;

Reducerea riscului de a dezvolta tulpini rezistente de bacterii;

Posibilitatea combinarii lor cu orice alte medicamente, inclusiv antibiotice.

Poate că singurul lucru care limitează utilizarea bacteriofagelor este selectivitatea lor, din cauza căreia, înainte de tratament, este necesar să se clarifice natura agentului patogen și sensibilitatea acestuia la tipuri variate bacteriofagi. O astfel de analiză nu este în niciun caz efectuată peste tot și ia anumit timp, dar îmbunătățire sisteme de diagnosticare Este de sperat că această problemă va fi rezolvată în curând.

De la teorie la practică

Exista tipuri diferite bacteriofage: monofage, care vizează distrugerea unui singur tip de bacterii, și polifage, care acționează simultan asupra mai multor tipuri de bacterii patogene. Deoarece bacteriofagii sunt extrem de solicitați în aproape toate domeniile medicinei, de la chirurgie și ginecologie la neonatologie și practica ORL, eliberarea bacteriofagelor în diferite forme. Se folosesc pentru administrare orală regos, sub formă de clisme, aplicații, irigații, pentru introducerea în cavitatea rănilor, vaginului, uterului, nasului, sinusurilor, precum și pentru introducerea în cavitățile drenate - abdominale, pleurale, vezicii urinare, pelvis renal. Durata cursului depinde de indicațiile clinice și poate fi de 7-20 de zile. Bacteriofagii siguri, eficienți și de încredere sunt exact arma atât de necesară în lupta împotriva bacteriilor patogene.

Nu numai medicamente

Progresul în biologia moleculară și biotehnologie a făcut posibilă utilizarea bacteriofagelor nu numai pentru tratament, ci și în alte scopuri. În Statele Unite, de exemplu, bacteriofagii sunt folosiți ca conservant sigur pentru Produse alimentare. Adăugați la alimente, bacteriofagii împiedică creșterea bacteriilor nedorite.

Fapte interesante

Descoperirea bacteriofagelor a avut loc în 1894, când bacteriologul britanic Ernest Hankin a observat că râurile indiene Gange și Jumna aveau o activitate antibacteriană semnificativă, care a dispărut complet după fierbere. El a sugerat că există o substanță în apă care ucide bacteriile. Numele „bacteriofag” („mâncător de bacterii”), acești viruși au primit în 1917 de la omul de știință francez Felix d’Herelle, care a descoperit „un microb invizibil care infectează bacilul dizenteriei”. Clarificarea naturii acestei „invizibilitati” a devenit posibilă numai după apariția microscopiei electronice.

4. Interacțiunea virusurilor cu o celulă susceptibilă. Parazitismul strict și citotropismul virusurilor și factorilor care îl cauzează. Receptori celulari și specifici virusului.

5. Caracteristici ale infecției, mecanisme ale imunității nespecifice și specifice în bolile virale. interferoni

1. Imunitatea antivirală înnăscută

2. Imunitate antivirală dobândită (adaptativă).

6. Tipuri de infecție virală a celulelor. Modificări ale celulelor gazdă în timpul infecției virale. Acțiunea citopatică a virusurilor, tipuri.

9. Culturi celulare, clasificare, caracterizare. Cultivarea virusurilor în culturi celulare. Pregătirea materialului, infectarea culturii. Metode de indicare și identificare a virusurilor.

I. Culturi celulare

10. Cultivarea virusurilor la un embrion de pui. metode de infectare. Indicarea si identificarea virusurilor.

11. Izolarea virusurilor la animalele de laborator. Metode de infectare a animalelor, indicarea și identificarea virusurilor.

13. Etiologia bolilor virale respiratorii acute. Clasificarea virusurilor gripale. Caracteristici generale. Proprietățile proteinelor virale structurale și nestructurale. Genomul virusului.

14. Structura antigenică a virusurilor gripale și variabilitatea acesteia, rolul în răspândirea epidemiei și pandemice a gripei. Mecanisme ale imunității naturale și dobândite.

15. Mecanisme de patogeneză, terapie specifică și nespecifică și prevenire a gripei.

16. Paramixovirusuri. Componența familiei. Virusuri paragripale, caracteristici, diferențiere cu virusurile gripale. Virusul oreionului. Virus respirator sincițial.

17. Metode moderne de diagnosticare de laborator a gripei și paragripalelor.

18. Virusul rujeolei, morfologie, proprietăți culturale și antigenice. Patogenie și imunitate la rujeolă. Vaccin specific și gamma globulină.

19. Virusul rabiei, morfologie, proprietăți biologice, incluziuni virale. Patogeneza bolii. Diagnosticul de laborator al rabiei.

20. Epidemiologia, prevenirea specifică și nespecifică a rabiei. Vaccin antirabic și gamma globulină. opera lui Pasteur.

Diagnosticul de laborator al infecției cu HIV

23. Clasificarea virusurilor hepatite. caracteristicile virusului hepatitei a. Patogenie, imunitate, metode de prevenire a hepatitei a.

24. Caracteristicile virusului hepatitei B. Genomul, proteinele de bază. Patogeneza, imunitatea, prevenirea, diagnosticul de laborator al hepatitei B.

25. Hepatita c, e, e. Caracteristicile virusurilor, epidemiologie, patogeneza bolilor.

26. Clasificarea și caracteristicile grupului ecologic de arbovirusuri. Toga și flavivirusuri. Semnificație în patologia umană. Diagnosticul virusologic al encefalitei transmise de căpușe.

eu grupez.

grupa II.

grupa III.

27. Virusul rubeolei. Caracteristici generale. rol în patologie. Prevenirea rubeolei.

28. Bunyavirusuri, caracteristici generale, boli cauzate.

29. Picornavirusuri, clasificare, caracteristici generale ale familiei.

31. Viruși Coxsackie și echo, caracteristici. rol în patologia umană. Principii de diferențiere.

32. Rinovirusuri. Rotavirusuri. Caracteristici generale. rol în patologia umană.

33. Adenovirusuri, morfologie, proprietăți culturale, biologice, clasificare serologică. Mecanisme de patogeneză, diagnostic de laborator al infecțiilor cu adenovirus.

Caracterizarea herpesvirusurilor umane

35. Etiologia varicelei, herpesului malign, citomegaliei, mononucleozei infectioase. Mecanisme de patogeneză. Diagnosticul de laborator.

36. Teorii ale carcinogenezei virale. virusuri oncogene. Oncogene celulare și virale.

37. Virușii bacteriilor (bacteriofagi), proprietăți, clasificare. Interacțiunea bacteriofagelor cu celulele bacteriene susceptibile. Fagi virulenți și temperați. Lizogenie.

38. Utilizarea practică a bacteriofagelor. Diagnosticarea fagilor, tiparea fagilor, terapia cu fagi. Metode de titrare a bacteriofagelor.

29 Www.Bsmu.H15.Ru

38. Utilizarea practică a bacteriofagelor. Diagnosticarea fagilor, tiparea fagilor, terapia cu fagi. Metode de titrare a bacteriofagelor.

Aplicarea practică a bacteriofagelor. Specificitatea strictă a bacteriofagelor le permite să fie utilizate pentru tiparea fagilor și diferențierea culturilor bacteriene, precum și pentru indicarea lor în Mediul extern, de exemplu, în rezervoare.

Metoda de tipizare fagică a bacteriilor este utilizată pe scară largă în practica microbiologică. Permite nu numai determinarea apartenenței la specii a culturii studiate, ci și a fagotipului acesteia (fagovar). Acest lucru se datorează faptului că bacteriile din aceeași specie au receptori care adsorb fagii strict definiți, care apoi provoacă liza acestora. Utilizarea unor seturi de astfel de fagi specifici tipului face posibilă efectuarea tipizării fagice a culturilor studiate în scopul analizei epidemiologice a bolilor infecțioase: pentru a stabili sursa de infecție și căile de transmitere a acesteia.

În plus, prin prezența fagilor în mediul extern (corpurile de apă), se poate judeca conținutul bacteriilor corespunzătoare din acestea, care reprezintă un pericol pentru sănătatea umană. Aceasta metoda indicarea bacteriilor patogene este folosită și în practica epidemiologică. Eficacitatea sa este crescută prin stabilirea unei reacții de creștere a titrului fagilor, care se bazează pe capacitatea liniilor de fagi specifice de a se reproduce pe culturi bacteriene strict definite. Când un astfel de fag este introdus în materialul de testat care conține agentul patogen dorit, titrul acestuia crește. Utilizarea pe scară largă a reacției de creștere a titrului fagilor este complicată de dificultatea de a obține seturi de indicatori de fagi și din alte motive.

Utilizarea fagilor în scopuri terapeutice și profilactice este relativ rară. Acest lucru se datorează unui număr mare de rezultate negative, care se explică prin următoarele motive:

1) specificitatea strictă a fagilor care lizează doar acele celule din populația bacteriană care sunt echipate cu receptorii corespunzători, drept urmare indivizii rezistenți la fagi prezenți în fiecare populație își păstrează pe deplin viabilitatea;

2) utilizarea pe scară largă a agenților etiotropi mai eficienți – antibiotice care nu au specificul bacteriofagelor.

În prezent, preparatele cu bacteriofagi sunt folosite pentru a trata dizenteria, salmoneloza și infecțiile purulente cauzate de bacterii rezistente la antibiotice. În fiecare caz, sensibilitatea agenților patogeni izolați la acest medicament bacteriofag.

Fagii Salmonella sunt utilizați pentru a preveni boala cu același nume în grupurile de copii.

29 Www.Bsmu.H15.Ru