Metode za proučavanje pacijenata sa bolestima endokrinog sistema. Algoritam za ispitivanje endokrinog sistema. Metode pregleda: endokrini sistem. Metode za proučavanje bolesti endokrinog sistema

Federalna agencija za obrazovanje Ruske Federacije
Državna obrazovna ustanova visokog profesionalnog obrazovanja Baškirski državni univerzitet
Odsjek za biologiju
Odsjek za biohemiju

Rad na kursu
Metode za proučavanje endokrinog sistema u normalnim i patološkim stanjima

Završeno:
Student 5. godine OSE
Grupa A
Usachev S. A.

Ufa 2010
Sadržaj
Uvod……………………………………………………………………………4
1. Pregled metoda za proučavanje endokrinog sistema
normalno i patološko…………………………………………………………………………6
1.1. Kratka istorijska skica………………………………………………………...6
1.2. Pregled savremenim metodama istraživanja endokrini sistem..12
1.3. Savremene metode proučavanja endokrinog sistema
studija slučaja štitne žlijezde………………………………28
2. Problemi i perspektive endokrinih metoda istraživanja
sistemi……………………………………………………………………………45
Zaključak………………………………………………………………………..58
Spisak korištene literature…………………………………………………………………59

Spisak skraćenica usvojenih u radu
AOK – ćelije koje stvaraju antitela
AG – antigen
ACTH – adrenokortikotropni hormon
HPLC – tečna hromatografija velike brzine
HI – kompenzatorna hiperinzulinemija
DNK – deoksiribonukleinska kiselina
LC – tečna hromatografija
ELISA – enzimski imunotest
IR – insulinska rezistencija
CT – kompjuterizovana tomografija
LH – luteinizirajući hormon
MS – metabolički sindrom
MRI – magnetna rezonanca
PCR – lančana reakcija polimeraze
RIA – radioimunotest
DHT – reakcija preosjetljivosti odgođenog tipa
DM 2 – dijabetes melitus tipa 2
TSH – hormon koji stimuliše štitnjaču
T4 – tiroksin
T3 – trijodtironin
TBG – test globulina koji vezuje tiroksin
Ultrazvuk – ultrazvučni pregled
FIA – fluorescentni imunotest
Color Doppler mapiranje
CNS - centralni nervni sistem
štitna žlijezda - štitna žlijezda

Uvod
U posljednjih nekoliko godina, kao rezultat razvoja suptilnijih, osjetljivijih i specifičnijih metoda za određivanje hormona i drugih metoda za proučavanje endokrinog sistema u zdravlju i bolesti, klinička endokrinologija i biohemija su se u velikoj mjeri transformisale iz svojevrsne umjetnosti u umjetnost. grana primijenjene hemije, fiziologije, fizike i genetike. Ovaj napredak je omogućen zahvaljujući uvođenju u praksu veliki broj najnovije i visokotehnološke metode za proučavanje endokrinog sistema, izolaciju i naknadnu biološku i biohemijsku karakterizaciju različitih visoko prečišćenih polipeptidnih hormona, steroida, vitamina, derivata malih polipeptida i aminokiselina, koji se svrstavaju u hormone, kao i proizvodnju hormona obilježenih radioaktivnim atomima visoke specifične aktivnosti.
Relevantnost teme:
Trenutno, na pragu razumevanja najskrivenijih i najmisterioznijih pojava živog organizma, nalazi se najvažniji zadatak- pronaći najpouzdanije, pristupačne i visokotehnološke metode istraživanja. Nova era nanotehnologije i visokospecijalizovanih otkrića počinje da daje svoj doprinos biološkoj hemiji, koja već dugo koristi metode ne samo hemijske analize, već i najsavremenije tehnologije u svim granama fizike, računarstva, matematike i drugih nauka. Vrijeme diktira čovječanstvu svoje uslove - da dublje sazna, da sazna temeljnije, da pronađe uzrok procesa koji se dešavaju u živom organizmu u normalnim i patološkim uslovima. Potraga za novim istraživačkim metodama ne prestaje, a naučnik jednostavno nema vremena da generalizira, sistematizira ovo područje spoznaje ili istakne ono što mu je trenutno potrebno. Osim toga, kada sam proučavao problem istraživanja endokrinog sistema, nisam našao dovoljno potpun, generalizirajući priručnik na ovu temu. Mnogi istraživači, a posebno biohemičari, suočeni su sa problemom traženja i sistematizacije savremenih metoda za proučavanje endokrinog sistema u zdravlju i bolesti. To je prije svega zbog činjenice da se svakodnevno pojavljuju novi izvori literature i nove metode istraživanja, ali ne postoji niti jedan vodič o metodama istraživanja koji bi sistematizovao podatke o metodama. Upravo iz tih razloga je relevantnost teme koju sam odabrao veoma visoka.
Cilj rada:
Sistematizirati podatke o stanju metoda za proučavanje endokrinog sistema u normalnim i patološkim stanjima u savremenom svijetu.
Zadaci:

Napravite istorijski pregled teme.
Odraziti trenutna znanja o metodama za proučavanje endokrinog sistema, bez Detaljan opis metode i tehnike istraživanja.
Opišite metode istraživanja na primjeru jedne endokrine žlijezde.
Istaknuti probleme i izglede savremenih metoda za proučavanje endokrinog sistema u zdravlju i bolesti.

Nastavni rad se zasniva na proučavanju i analizi književnih izvora, sastoji se od uvoda, dva poglavlja, zaključka i liste literature. Ukupan obim kursa je 61 list kucanog teksta u formatu Microsoft Word 2007, font Times New Roman, 14 tačaka, prored 1,5. Rad sadrži 13 slika, 2 tabele, 32 korišćena bibliografska naslova sa linkovima u tekstu rada. Rad je praćen apstraktom na ruskom i engleskom jeziku.

1. Pregled metoda za proučavanje endokrinog sistema u normalnim i patološkim stanjima
1.1. Kratka istorijska skica
Proučavanje endokrinog sistema i sama endokrinologija su relativno nove pojave u istoriji nauke. Endokrini sistem je bio nedostupan deo ljudskog tela sve do početka 20. veka. Prije toga, istraživači nisu mogli otkriti tajne endokrinih formacija zbog činjenice da nisu mogli izolirati i proučavati tekućine koje luče („sokove“ ili „tajne“). Naučnici nisu otkrili nikakve "sokove" ili posebne izvodne kanale kroz koje proizvedena tečnost obično istječe. Stoga je jedina metoda za proučavanje funkcija endokrinih žlijezda bila metoda ekscizije dijela ili cijelog organa.
Naučnici i istoričari su tvrdili da su organi endokrinog sistema na Istoku bili poznati u davna vremena i s poštovanjem su ih nazivali "žlijezdama sudbine". Prema istočnjačkim iscjeliteljima, ove žlijezde su bile prijemnici i transformatori kosmičke energije koja je tekla u nevidljive kanale (čakre) i podržavala ljudsku vitalnost. Vjerovalo se da bi koordinirani rad "žlijezda sudbine" mogao biti poremećen katastrofama koje su se dogodile po nalogu zle sudbine.
Spominjanje bolesti, najvjerovatnije dijabetesa, nalazi se u egipatskim papirusima iz 1500. godine prije Krista. e. Gušavost i efekti kastracije kod životinja i ljudi spadaju u prve kliničke opise bolesti čija je endokrina priroda naknadno dokazana. Stari klinički opisi endokrinih bolesti pravljene ne samo na Zapadu, već iu drevnoj Kini i Indiji.
Ako na vrijeme uredimo značajna otkrića u mnogim područjima endokrinologije, rezultirajuća slika odražava u minijaturi povijest cjelokupne biologije i medicine. Nakon fragmentarnih kliničkih opservacija u antici i srednjem vijeku, ove nauke su napredovale izuzetno sporo. U drugoj polovini 19. veka došlo je do brzog napretka u mnogim oblastima medicine, kako u kvalitetu kliničkih istraživanja tako i u razumevanju mehanizama bolesti. Ovaj proces je nastao zbog složenosti povezanosti istorijskih razloga.
Prvo, industrijska revolucija dovela je do akumulacije kapitala, koji je korišćen za razvoj mnogih nauka, uglavnom hemije i biologije.
Još jedna revolucija koja se dogodila u drugoj polovini 19. stoljeća i koja je bila od fundamentalnog značaja za razvoj ne samo endokrinologije, već i medicine i biologije, bila je pojava eksperimentalnog životinjskog modeliranja. Claude Bernard i Oscar Minkowski demonstrirali su mogućnost izvođenja kontroliranih i ponovljivih eksperimenata u laboratorijskim uvjetima. Drugim riječima, stvorena je prilika za „unakrsno ispitivanje“ prirode. Bez rada ovih pionira, bili bismo uskraćeni za većinu našeg sadašnjeg znanja iz oblasti endokrinologije. Proučavanje svih tih supstanci zvanih hormoni započelo je eksperimentima na cijelim životinjama (i često im prethode opažanja na bolesnim ljudima). Ove supstance su nazvane supstanca "X" ili faktor "?". Kochovi postulati za endokrinologiju predviđali su sljedeći radni red:
1. Uklanjanje sumnjive žlezde. Nakon uklanjanja endokrine žlijezde dolazi do kompleksa poremećaja zbog gubitka regulatornog djelovanja onih hormona koji se proizvode u ovoj žlijezdi. Zbog traumatske prirode hirurške intervencije, umjesto hirurškog uklanjanja endokrine žlezde mogu se koristiti za uvođenje hemikalija koje ih ometaju hormonska funkcija. Na primjer, davanje aloksana životinjama narušava funkciju β-ćelija gušterače, što dovodi do razvoja dijabetes melitusa, čije su manifestacije gotovo identične poremećajima uočenim nakon ekstirpacije pankreasa. 1
2. Opis bioloških efekata operacije. Na primjer, pretpostavka o prisutnosti endokrinih funkcija u pankreasu potvrđena je u eksperimentima I. Meringa i O. Minkowskog (1889), koji su pokazali da njegovo uklanjanje u psi dovodi do teške hiperglikemije i glikozurije; životinje su uginule u roku od 2-3 sedmice. nakon operacije u pozadini teškog dijabetes melitusa. Kasnije je utvrđeno da do ovih promjena dolazi zbog nedostatka inzulina, hormona koji se proizvodi u otočnom aparatu gušterače.
3. Uvođenje ekstrakta žlijezde.
4. Dokaz da primena ekstrakta eliminiše simptome odsustva žlezde.
5. Izolacija, prečišćavanje i identifikacija aktivnog principa.
Tokom Drugog svetskog rata došlo je do nagomilavanja oblasti endokrinologije veliki broj podataka, od kojih su mnogi bili od fundamentalnog značaja za kasniji razvoj nauke. Nakon rata, zbog pojave mnogih novih tehnika, došlo je do generalno neviđenog ubrzanja tempa istraživanja. I sada, kao rezultat naglog priliva tehničkih i kreativnih snaga, broj publikacija, kako o endokrinologiji tako i o svim drugim aspektima biomedicinskog znanja, raste impresivnom brzinom. To znači stalno snabdevanje novim podacima, što zahteva periodičnu reviziju starih ideja u njihovom svetlu. 2
20. vijek je obilježen rođenjem nauke o hormonima, odnosno endokrinologije. Samu reč "hormon" uveo je 1905. godine britanski fiziolog, profesor Ernst Starling, na predavanju na Kraljevskom koledžu lekara u Londonu. Formirala su ga dva profesora Univerziteta Kembridž od grčke reči hormao, što znači „brzo pokrenuti“, „podići“ ili „uzbuditi“. Starlingova ga je koristila da opiše "hemijske nosače" koje u krv oslobađaju endokrine žlijezde (endon - unutrašnji + krino - proizvodi), kao što su testisi, nadbubrežne žlijezde i štitna žlijezda, kao i iz vanjskih, egzokrinih (egzo - vanjske) žlijezde.žlijezde kao što su pljuvačne i suzne žlezde. Ova nova nauka razvila se veoma brzo, uzbudivši umove ne samo lekara, već i društva.
Po pravilu, istorija proučavanja bilo kojeg hormona prolazi kroz četiri faze.
Prvo se opaža učinak koji na tijelo proizvodi sekret koji izlučuje žlijezda.
Drugo, razvijaju se metode za određivanje unutrašnjeg sekreta i stepena njegovog uticaja na organizam. To se prvo radi putem bioloških testova kako bi se utvrdilo djelovanje hormona na organizam kojem nedostaje. Kasnije instaliran hemijske metode takvo merenje.
Treće, hormon se izoluje iz žlezde i izoluje.
I konačno, četvrto, hemičari određuju njegovu strukturu i sintetiziraju je. 3
U današnje vrijeme istraživači koji počinju sa zapažanjima na nivou cijelog organizma, kako rad napreduje, imaju sve više pitanja dok ne pokušaju riješiti prvobitni problem na nivou cijelog organizma. molekularnom nivou. Ovdje endokrinološka istraživanja uzimaju u svoje ruke biološka hemija a njen dio je molekularna biologija (endokrinologija).
Čim se pojave nove morfološke, hemijske, elektrofiziološke, imunološke i druge tehnike, vrlo brza primjena u endokrinologiji. Na primjer, 30-ih i 40-ih godina korišćene su vrlo složene metode za proučavanje steroida. To je dovelo do velikog napretka u razumijevanju strukture i biosinteze steroidnih hormona. Mogućnost upotrebe radioaktivnih izotopa, koja se pojavila kasnih 40-ih - 50-ih godina, proširila je naše znanje o mnogim aspektima jodnog ciklusa, srednjem metabolizmu, transportu jona, itd. Proučiti funkcionalnu aktivnost endokrine žlijezde, njenu sposobnost hvatanja iz krv i akumuliraju određeni spoj. Poznato je, na primjer, da štitna žlijezda aktivno apsorbira jod, koji se zatim koristi za sintezu tiroksina i trijodtironina. Kod hiperfunkcije štitne žlijezde nakupljanje joda se povećava, a kod hipofunkcije se opaža suprotan učinak. Intenzitet akumulacije joda može se odrediti unošenjem radioaktivnog izotopa 131I u organizam, nakon čega se procjenjuje radioaktivnost štitne žlijezde. Spojevi koji se koriste za sintezu endogenih hormona i koji su uključeni u njihovu strukturu mogu se uvesti i kao radioaktivna oznaka. Naknadno je moguće odrediti radioaktivnost različitih organa i tkiva i na taj način procijeniti distribuciju hormona u tijelu, kao i pronaći njegove ciljne organe.
Kasnije je kombinacija elektroforeze u polikrilamidnom gelu i autoradiografije kreativno korištena za proučavanje mnogih proteina, uključujući hormonske receptore. Istovremeno sa ovim impresivnim napretkom u hemiji, upotreba histohemijskih, imunohistohemijskih i elektronskih mikroskopskih metoda pokazala se još plodnijom.
Sve varijante hromatografije – kolonsku, tankoslojnu, papirnu, multidimenzionalnu, gasno-tečnu (sa ili bez masene spektrometrije), tečnu visokoučinkovitu – endokrinolozi su koristili odmah nakon njihovog uvođenja. Oni su omogućili da se dobiju važne informacije ne samo o sekvenci aminokiselina peptida i proteina, već i o lipidima (posebno prostaglandinima i srodnim supstancama), ugljikohidratima i aminima.
Kako se razvijaju tehnike molekularno-bioloških istraživanja, endokrinolozi ih ubrzano koriste za proučavanje mehanizama djelovanja hormona. Trenutno se metoda rekombinantne DNK koristi ne samo u tu svrhu, već i za proizvodnju proteinskih hormona. Zaista, teško je imenovati biohemijske ili fiziološka metoda, koji endokrinolozi ne bi usvojili. 4

1.2. Pregled savremenih metoda za proučavanje endokrinog sistema
Prilikom pregleda pacijenata sa sumnjom na endokrinu patologiju, osim prikupljanja anamneze bolesti, pregleda i pritužbi pacijenta, koriste se i sljedeće dijagnostičke metode: opšte laboratorijske metode (kliničke i biohemijske), hormonske studije, instrumentalne metode, molekularne genetičke metode.
U većini slučajeva hormonska studija nema ključ, već verifikujuću vrijednost za postavljanje dijagnoze. Hormonsko testiranje se uopće ne koristi za dijagnosticiranje niza endokrinih bolesti (diabetes insipidus i dijabetes melitus); u nekim slučajevima, hormonsko testiranje ima dijagnostičku vrijednost samo u kombinaciji s biohemijskim pokazateljima (nivo kalcija kod hipertireoze).
Hormonska studija može otkriti smanjenje proizvodnje određenog hormona, povećanje i njegovu normalnu razinu (Tabela 1). Najčešće se koristi u kliničku praksu metode za određivanje hormona su različite modifikacije radioimune metode . Ove metode se zasnivaju na činjenici da se radioaktivno označeni hormon i hormon sadržan u materijalu za ispitivanje međusobno natječu za vezivanje za specifična antitijela: što je više određenog hormona sadržano u biološkom materijalu, to će se vezati manje obilježenih molekula hormona, jer konstantan broj mesta za vezivanje hormona u uzorku. Prije više od 20 godina, Berson i Yalow su predložili radioimunološki test za određivanje inzulina.
Ova metoda se zasnivala na njihovom zapažanju da se u perifernoj krvi dijabetičara liječenih inzulinom nalazi protein (kasnije se pokazalo da je globulin) koji veže inzulin označen sa 131I. Značaj ovih podataka i potonjeg razvoja radioimunog testa za određivanje insulina je naglašen dodelom Nobelove nagrade Yalowu i Bersonu.
Ubrzo nakon prvih izvještaja ovih istraživača, odgovarajuće metode za određivanje drugih hormona su razvijene i opisane od strane drugih laboratorija. Ove metode koriste ili antitijela ili serumske proteine ​​koji vezuju određeni hormon ili ligand i nose radioaktivno obilježeni hormon koji se takmiči sa standardnim hormonom ili hormonom prisutnim u biološkom uzorku.
Princip radioreceptorska metoda suštinski se ne razlikuje od radioimunog testa, samo se hormon, umesto da se veže za antitela, vezuje za određeni hormonski receptor plazma membrana ili citosol. Specifični receptori za većinu polipeptidnih hormona nalaze se na vanjska površina plazma membrane ćelija, dok se receptori za biološki aktivne steroide, kao i tiroksin i trijodtironin, nalaze u citosolu i jezgrima. Osetljivost radioreceptorske analize je niža nego kod radioimunih testova i većine bioloških metoda u in vitro sistemima. Da bi stupio u interakciju sa svojim receptorom, hormon mora imati odgovarajuću konformaciju, odnosno biti biološki aktivan. Moguće je da hormon izgubi sposobnost da se veže za svoj receptor, ali nastavlja da stupa u interakciju sa antitelima u sistemu radioimunog testa. Ovo neslaganje odražava činjenicu da antitijela i receptori „prepoznaju“ različite dijelove molekula hormona.
Predložen je niz radioreceptorskih metoda za hormonsku analizu. Obično se dobija tkivo iz organa specifičnih za određeni hormon i iz njega se izoluju receptori standardnim tehnikama. Izolovani receptori plazma membrane u sedimentu su relativno stabilni kada se čuvaju na temperaturama ispod -20°C. Međutim, solubilizirani receptori polipeptida i steroidnih hormona, izolovani iz plazma membrana ili iz citosola i nisu povezani sa ligandima, pokazuju se nestabilnim, što se manifestuje smanjenjem njihove sposobnosti vezivanja. specifičnih hormona, čak i ako su se čuvali zamrznuti, relativno kratko.
Nedavno su neradioaktivne metode postale najrasprostranjenije. Kao standardna metoda za određivanje različitih jedinjenja u kliničkoj hemiji, imunotest , odlikuje se dobrom osjetljivošću, specifičnošću i širokim spektrom primjena. Konkretno, imunotest se koristi za određivanje hormona. Takve metode uključuju:

1) enzimski imunosorbentni test (ELISA), čvrsta faza ELISA tipa ELISA ili homogena ELISA tipa EMIT.

2) fluorescentni imunoesej (FIA), zasnovan na merenju pojačanja fluorescencije, gašenja ili polarizacije ili na proučavanju fluorescencije sa vremenskom rezolucijom.

3) bio- ili hemiluminiscentni imunotest.

Tehnika bi trebala:
1) biti primenljiv i za imunometrijsku analizu proteina na dve lokacije i za direktne kompetitivne analize haptena zasnovane na principu vezivanja.
2) imaju odgovarajuću osetljivost, tačnost i radni opseg utvrđenih koncentracija sa minimalnim rasutom rezultata u celom opsegu.
3) lako se poboljšati kako bi se dodatno povećala osjetljivost i pojednostavila analiza.
Potencijalno bi tehnika trebala imati mogućnost njenog poboljšanja i primjene na analize drugih supstanci, vanlaboratorijske i analize bez separacije i na istovremeno određivanje više supstanci (tzv. višestruki imunoesej). Idealne metode imunotestiranja najviše odgovaraju luminescentnim ili fotoemisionim metodama, u kojima se oznaka detektuje snimanjem emisije svjetlosti.
Luminescencija je emisija svjetlosti tvari u elektronski pobuđenom stanju. Postoji nekoliko vrsta luminiscencije, koje se razlikuju samo po izvorima energije koji prenose elektrone u pobuđeno stanje, tj. na viši energetski nivo, i to:
1) Radioluminiscencija, kod kojih se ekscitacija odgovarajućeg fluorofora postiže apsorpcijom energije oslobođene tokom procesa ireverzibilnog radioaktivnog raspada. Pobuđeni fluorofor emituje svetlost, vraćajući se u osnovno stanje.
2) hemiluminiscencija, kod kojih se ekscitacija postiže kao rezultat hemijske reakcije (obično ireverzibilna reakcija oksidacije). Ako hemijska reakcija koje se odvija u biološkim sistemima pod dejstvom enzima, tada se u ovom slučaju obično koristi termin bioluminiscencija. Ako je kemijska reakcija pokrenuta povećanjem temperature reagensa, tada se ova vrsta luminiscencije naziva termohemiluminiscencija, ali ako je reakcija pokrenuta električnim potencijalom, tada se odgovarajući fenomen naziva elektrohemiluminiscencija.
3) fotoluminiscencija, kod kojih je ekscitacija uzrokovana fotonima infracrvene, vidljive ili ultraljubičaste svjetlosti. Fotoluminiscenciju se dalje može podijeliti na fluorescenciju, gdje se pobuđeni molekul brzo vraća u prvobitno stanje kroz singlet stanje, i fosforescenciju, gdje se pobuđena molekula vraća u prvobitno stanje kroz triplet stanje. Emisija fosforescencije opada mnogo sporije. Emitovani svetlosni kvanti imaju dugu talasnu dužinu. Fotoluminiscencija se razlikuje od radio- i hemiluminiscencije po tome što je obično reverzibilna, pa se stoga može više puta inducirati u datom sistemu (pošto formiranje pobuđenog intermedijera i njegova naknadna inaktivacija emisijom svjetlosti ne dovodi do kemijskih transformacija).
Pored ovih metoda, hemijske metode za određivanje niza supstanci (obično metabolita hormona i njihovih prekursora) nisu u potpunosti izgubile na značaju. Često se koriste za pročišćavanje proteinskih frakcija i proučavanje hormona. hromatografija . Nalazi tečnom hromatografijom široka primena kao brza i selektivna analitička metoda za odvajanje i identifikaciju različitih supstanci. Tečna hromatografija (LC) u svojoj klasičnoj verziji (pri atmosferskom pritisku) i brza ili HPLC pri visok krvni pritisak- optimalna metoda za analizu hemijski i termički nestabilnih molekula, visokomolekularnih supstanci sa smanjenom isparljivošću, što se objašnjava posebnom ulogom mobilne faze: za razliku od gasovitog eluenta u LC, on obavlja ne samo transportnu funkciju. Priroda i struktura komponenti mobilne faze kontrolišu hromatografsko ponašanje odvojenih supstanci. Među najtipičnijim objektima tečne hromatografije su proteini, nukleinske kiseline, aminokiseline, boje, polisaharidi, eksplozivi, lekovi, biljni i životinjski metaboliti. Tekuća hromatografija se pak dijeli na tečno-adsorpcijsku (odvajanje spojeva nastaje zbog njihove različite sposobnosti da se adsorbiraju i desorbiraju s površine adsorbenta), tekućinsko-tečno ili distribucijsku (odvajanje se vrši zbog različite rastvorljivosti). u mobilnoj fazi - eluent i stacionarna faza, fizički sorbovana ili hemijski kalemljena na površinu čvrstog adsorbenta), jonoizmenjivačka hromatografija, gde se razdvajanje postiže reverzibilnom interakcijom analiziranih jonizujućih supstanci sa jonskim grupama sorbenta - jona. izmjenjivač. Posebno mjesto u primjeni metoda tekućinske hromatografije u medicini zauzimaju ekskluzijska ili gel hromatografija i afinitetna ili biospecifična hromatografija. Ova verzija LC temelji se na principu razdvajanja mješavine tvari prema njihovoj molekularnoj težini. U ekskluzijskoj (od engleskog exclusion - izuzetak; zastarjeli naziv - sito) hromatografiji, molekule tvari se razdvajaju po veličini zbog njihove različitih sposobnosti prodiru u pore sorbenta. Mobilna faza je tekućina, a stacionarna faza je ista tekućina koja je ispunila pore sorbenta (gela). Ako su ove pore nedostupne molekulima analita, tada će odgovarajuće jedinjenje napustiti kolonu ranije od onog s manjim molekularnim veličinama. Molekuli ili ioni čije su veličine između maksimalnog i minimalnog promjera pora gela podijeljeni su u zasebne zone. Ekskluzivna hromatografija je dobila posebno intenzivan razvoj u poslednje dve decenije, čemu je doprinelo uvođenje u hemijsku i biohemijsku praksu Sephadex - dekstran gelova umreženih epihlorohidrinom. Na različitim tipovima Sephadexa mogu se frakcionisati hemikalije različite molekularne težine, pa se široko koriste za izolaciju i prečišćavanje biopolimera, peptida, oligo- i polisaharida, nukleinskih kiselina pa čak i ćelija (limfocita, eritrocita), u industrijskoj proizvodnji. raznih proteinskih preparata, posebno enzima i hormona. 5 Afinitetnu hromatografiju karakteriše izuzetno visoka selektivnost svojstvena biološkim interakcijama. Često jedna hromatografska procedura može pročistiti željeni protein hiljadama puta. Ovo opravdava napor potreban za pripremu afinitetnog sorbenta, što nije uvijek lak zadatak zbog rizika da biološki molekuli izgube sposobnost specifične interakcije tokom njihovog kovalentnog vezivanja za matriks. 6
Prilikom proučavanja funkcionalnog stanja endokrinih žlijezda koriste se sljedeći metodološki pristupi:
1. Određivanje početnog nivoa određenog hormona.
2. Određivanje nivoa hormona tokom vremena, uzimajući u obzir cirkadijalni ritam lučenja.
3. Određivanje nivoa hormona u uslovima funkcionalnog testa.
4. Određivanje nivoa metabolita hormona.

Tabela 1. Patogeneza endokrinih bolesti 7

Najčešće se u kliničkoj praksi koristi određivanje bazalnog nivoa određenog hormona. Krv se obično uzima ujutro na prazan želudac, iako unos hrane ne utiče na proizvodnju mnogih hormona. Ocijeniti aktivnosti mnogih endokrine žlezde(tiroidna, paratiroidna) procjena bazalnih nivoa hormona je sasvim dovoljna. Prilikom određivanja bazalne razine hormona mogu nastati određene poteškoće zbog cirkulacije u krvi nekoliko molekularnih oblika istog hormona. Prije svega, ovo se odnosi na paratiroidni hormon.
Većina hormona cirkuliše u krvi vezana za proteine ​​nosače. Po pravilu, nivo slobodnog, biološki aktivnog hormona u krvi je desetine ili stotine puta niži od ukupnog nivoa hormona.
Nivoi većine hormona imaju karakterističnu dnevnu dinamiku (cirkadijalni ritam lučenja), a vrlo često ova dinamika dobija klinički značaj. Najvažnija i najilustrativnija u tom pogledu je dinamika proizvodnje kortizola (slika 1.1). 8

Drugi primjeri u tom smislu su prolaktin i hormon rasta, čiji je ritam lučenja također određen ciklusom spavanja i buđenja. Patogeneza brojnih endokrinih bolesti zasniva se na poremećaju cirkadijalnog ritma proizvodnje hormona.
Pored cirkadijalnog ritma, većina bioloških parametara može se odraziti na nivo hormona u krvi. Za mnoge hormone, referentne vrijednosti u velikoj mjeri zavise od starosti (slika 1.2) 9, pola i faze menstrualnog ciklusa.

Na nivo određenog broja hormona mogu uticati ne samo prateće somatske bolesti i lekovi koji se uzimaju za njih, već i faktori kao što su stres (kortizol, adrenalin), karakteristike životne sredine (nivo tiroksina u regionima sa različita potrošnja jod), sastav hrane uzete dan ranije (C-peptid) i mnoge druge.
Osnovni princip za procjenu aktivnosti zavisnih od hipofize ( štitaste žlezde, koru nadbubrežne žlijezde, gonade) i niz drugih endokrinih žlijezda je određivanje takozvanih dijagnostičkih parova hormona. U većini slučajeva, proizvodnja hormona je regulirana mehanizmom negativne povratne sprege. Povratne informacije se mogu javiti između hormona koji pripadaju istom sistemu (kortizol i ACTH), ili između hormona i njegovog biološkog efektora (paratiroidni hormon i kalcijum). Osim toga, ne mora postojati direktna interakcija između hormona koji čine par. Ponekad je posredovan drugim humoralnim faktorima, elektrolitima i fiziološkim parametrima (volumen bubrežnog krvotoka, nivo kalijuma i angiotenzin za par renin-aldosteron). Izolovana procjena indikatora koji čine par može dovesti do pogrešnog zaključka.
Uprkos poboljšanjima u metodama hormonske analize, funkcionalni testovi i danas su od velikog dijagnostičkog značaja u dijagnostici endokrinopatija. Funkcionalni testovi se dijele na stimulativne i supresivne (supresivne). Opšti princip testiranja je da se kod sumnje na insuficijenciju endokrinih žlijezda propisuju stimulacijski testovi, a kod sumnje na hiperfunkciju supresivni.
Uz procjenu nivoa hormona u krvi, u nekim slučajevima određivanje njihovog izlučivanja u urinu može imati određenu dijagnostičku vrijednost. Dijagnostička vrijednost ovih studija, na primjer, određivanje izlučivanja slobodnog kortizola, znatno je manja od modernih funkcionalnih testova. Slično tome, primjena određivanja izlučivanja metabolita hormona sada je gotovo potpuno prestala, jedini izuzetak je određivanje nivoa metabolita kateholamina za dijagnozu feohromocitoma.
Posljednjih godina su postale široko rasprostranjene potpuno automatizirane metode istraživanja hormona, čime se smanjuje broj grešaka kao što su pogrešno uzimanje krvi, skladištenje, isporuka i drugi “ljudski faktori”.
Od instrumentalne metode Studije najčešće koriste ultrazvuk (US), radiografiju, kompjuterizovanu tomografiju (CT) i magnetnu rezonancu (MRI). Osim toga, koriste se u endokrinologiji posebne metode: angiografija sa selektivnim uzorkovanjem krvi koja teče iz endokrine žlijezde, radioizotopska studija (scintigrafija štitnjače), denzitometrija kostiju. Glavne instrumentalne metode koje se koriste za proučavanje endokrinih žlijezda prikazane su u Tabeli 2.
Metode molekularnog genetičkog istraživanja.
Brzi razvoj nauke u proteklih nekoliko decenija i istraživanja u oblasti molekularne biologije, medicinske genetike, biohemije, biofizike, usko isprepletena sa mikrobiologijom, imunologijom, onkologijom, epidemiologijom itd., doveli su do stvaranja i aktivne primene molekularnih biološke dijagnostičke laboratorijske metode za istraživanje genoma ljudi, životinja, biljaka, bakterija i virusa. Ove metode se najčešće nazivaju istraživanjem DNK.
Metode istraživanja DNK omogućavaju rano i više kompletna dijagnostika razne bolesti, pravovremeno provoditi diferencijalnu dijagnozu i pratiti učinkovitost terapije. Aktivan razvoj DNK dijagnostičkih metoda i njihovo uvođenje u praksu sugerira da nije daleko trenutak kada će ove metode značajno suziti obim zadataka tradicionalnijih dijagnostičkih studija, poput citogenetičkih metoda, a možda i istisnuti ih iz praktične medicine u naučnoj sferi.

Tabela 2. Osnovne instrumentalne metode
istraživanje endokrinih žlezda 10

Trenutno postoje dva područja DNK dijagnostike: hibridizacijska analiza nukleinskih kiselina i dijagnostika pomoću lančane reakcije polimeraze.
PCR je odmah uveden u praksu, što je omogućilo podizanje medicinske dijagnostike na viši standard. novi nivo. Metoda je postala toliko popularna da je danas teško zamisliti rad na polju molekularne biologije bez njene upotrebe. Posebno brz razvoj PCR metoda dobio zahvaljujući međunarodnom programu “Ljudski genom”. Stvorene su moderne tehnologije sekvenciranja (dešifriranje nukleotidnih sekvenci DNK). Ako je u nedavnoj prošlosti trebalo nedelju dana da se dešifruje DNK od 250 parova nukleotida (bp), savremeni automatski sekvenceri mogu da odrede i do 5000 bp. po danu. Ovo zauzvrat doprinosi značajnom rastu baza podataka koje sadrže informacije o nukleotidnim sekvencama u DNK. Trenutno su predložene različite modifikacije PCR-a, opisane su desetine različitih primjena metode, uključujući i “long-PCR”, koji omogućava kopiranje ultra dugih DNK sekvenci. Za otkriće PCR-a, K. W. Mullis je dobio Nobelovu nagradu za hemiju 1993. godine.
Svi pristupi genskoj dijagnostici mogu se podijeliti u nekoliko glavnih grupa:
1. Metode za identifikaciju specifičnih dijelova DNK.
2. Metode za određivanje primarne sekvence nukleotida u DNK.
3. Metode određivanja sadržaja i analize DNK ćelijski ciklus. 11
PCR vam omogućava da pronađete u materijalu koji se proučava mali dio genetskih informacija sadržanih u specifičnom nizu nukleotida DNK bilo kojeg organizma među ogromnim brojem drugih dijelova DNK i umnožite ga mnogo puta. PCR je “in vitro” analog biohemijske reakcije sinteze DNK u ćeliji.
PCR je ciklični proces u kojem se u svakom ciklusu događa termička denaturacija dvostrukog lanca ciljne DNK, naknadno dodavanje kratkih oligonukleotidnih prajmera i njihovo proširenje pomoću DNK polimeraze dodavanjem nukleotida. Kao rezultat toga, nakuplja se veliki broj kopija originalne ciljne DNK, koje se lako otkrivaju.
Otkriće PCR-a rezultiralo je trenutnom praktičnom upotrebom metode. Godine 1985. objavljen je članak koji opisuje testni sistem zasnovan na PCR-u za dijagnosticiranje anemije srpastih ćelija. Od 1986. godine. Do danas je više od 10.000 naučnih publikacija posvećeno PCR-u. Izgledi za korištenje PCR-a djeluju više nego impresivno. 12
Citokemijske metode istraživanja.
Ove metode su varijante opisanih in vitro bioloških studija. Obično imaju veću osjetljivost od radioimunih metoda, ali su mnogo glomaznije i skuplje po određivanju. Rezultati citokemijskih bioloških studija se kvantitativno procjenjuju na histološkim rezovima pomoću posebnog uređaja - mikrodenzitometra.
Histološki rezovi se pripremaju od hormonski specifičnih tkiva ili ciljnih ćelija koje su prethodno bile izložene različitim koncentracijama standardnog i test hormona. Pomoću denzitometra skenira se područje promjera 250 - 300 nm kako bi se kvantifikovala reakcija boje uzrokovana promjenom redoks stanja objekta pod utjecajem hormonska stimulacija. Za kvantitativnu analizu koriste se histološke boje koje su osjetljive na ove promjene.
Prvi citokemijski biološki sistem za analizu razvijen je za ACTH, a ciljno tkivo u ovom sistemu bio je korteks nadbubrežne žlijezde. Druge metode za biološko određivanje ACTH su ili previše neosjetljive ili zahtijevaju velike količine plazme. Stoga je citokemijsko određivanje redoks stanja tkiva vrijedan način analize normalne i izmijenjene funkcije hipotalamus-hipofizno-nadbubrežnog sistema na osnovu nivoa ACTH.
Razvijena je citokemijska metoda za određivanje LH, ali su naišle značajne poteškoće povezane sa značajnim fluktuacijama u rezultatima različitih određivanja i promjenjivom osjetljivošću objekta, što može odražavati poznate biološke razlike kod različitih životinja. Predložene su osjetljive specifične citokemijske metode za određivanje paratiroidnog hormona, ADH i tireotropina.
Uz daljnju sofisticiranost opreme, koja će povećati broj studija u jednom određivanju, ova metoda može naći širu primjenu. Posebno je atraktivan jer ne zahtijeva upotrebu radioaktivnih spojeva. Citokemijske metode se ne koriste široko u klinici i koriste se uglavnom kao osjetljiva metoda u naučnim istraživanjima. 13

1.3. Savremene metode proučavanja endokrinog sistema na primjeru proučavanja štitne žlijezde
U svom radu, ograničenom obimu, razmatrat ću savremene metode proučavanja endokrinog sistema u normalnim i patološkim stanjima na primjeru proučavanja endokrinih žlijezda, što je relevantno zbog visoke prevalencije bolesti štitnjače u Republici Baškortostan.
1. Ultrazvučni pregled.
Ultrazvuk vam omogućava da provjerite prilično subjektivne podatke palpacije. Senzori sa frekvencijom od 7,5 MHz i 10 MHz su optimalni za istraživanje. Trenutno se koristi kolor dopler mapiranje, koje omogućava vizualizaciju malih žila u štitnoj žlijezdi i daje informacije o smjeru i prosječnoj brzini toka. Mogućnosti metode zavise od iskustva i kvalifikacija specijaliste koji provodi istraživanje. Princip metode je da ultrazvuk, koji se šalje u čestim impulsima, prodire u ljudske organe, reflektuje se na međuprostoru između medija različitog ultrazvučnog otpora, percipira ga uređaj i reprodukuje na ekranu i ultraljubičastom papiru. Metoda je bezopasna i nema kontraindikacija (slika 1.3).

Sl.1.3. Ultrazvuk štitne žlezde.
Korištenje složenih ultrazvučnih pregleda kolor Doppler mapiranje (CDC), (slika 1.4). 14

Rice. 1.4. AIT sa formiranjem čvorova na štitnoj žlezdi u CD modu.
2. Ubodna biopsija štitne žlijezde tankom iglom.
Finoigla biopsija štitaste žlezde jedina je preoperativna metoda za direktnu procenu strukturnih promena i utvrđivanje citoloških parametara formacija u štitnoj žlezdi. Efikasnost dobijanja adekvatnog citološkog materijala pri biopsiji punkcije tankom iglom značajno se povećava ako se ova dijagnostička procedura provodi pod kontrolom ultrazvuka, što omogućava identifikaciju najizmijenjenih područja štitne žlijezde, kao i odabir optimalnog smjera i dubine. punkcije. 15

3. Citološki pregled.
Citološka dijagnoza formacija u štitnoj žlijezdi zasniva se na skupu određenih karakteristika, kao što su količina dobijenog materijala, njegov ćelijski sastav, morfološke karakteristike ćelija i njihovih strukturnih grupa, kvaliteta razmaza itd.
4. Radioizotopska studija (skeniranje), scintigrafija.
Radioizotopsko skeniranje (skeniranje) je metoda dobivanja dvodimenzionalne slike koja odražava distribuciju radiofarmaceutika u različitim organima pomoću skenera.


Sl.1.6. Rezultat skeniranja radioizotopa
štitne žlijezde

Skeniranje vam omogućava da odredite veličinu štitne žlijezde, intenzitet akumulacije radioaktivnog joda u njoj i u njenim pojedinačnim područjima, što vam omogućava da procijenite funkcionalno stanje i cijele žlijezde i fokalnih formacija (slika 1.6).
Scintigrafija- metoda funkcionalnog snimanja, koja se sastoji od unošenja u tijeloradioaktivnih izotopai dobijanje slike određivanjem emitovanog radijacije . Pacijentu se daje radio indikator - lijek koji se sastoji od vektorske molekule i radioaktivnog markera. Molekul vektora apsorbira određena struktura tijela (organ, tekućina). Radioaktivna oznaka služi kao “predajnik”: emituje gama zrake, koje snima gama kamera. Količina primijenjenog radiofarmaka je takva da se zračenje koje emituje lako uhvati, ali nema toksično djelovanje na tijelo.
Za scintigrafiju štitnjače, najčešće korišteni izotop tehnecija je 99m Tc-pertehnetat. Upotreba 131 joda ograničena je na identifikaciju funkcionalnih metastaza raka štitnjače. Za dijagnosticiranje substernalne i aberantne strume, kao iu nekim slučajevima s urođenom hipotireozom (ateroza, distopija, defekt organizacije), koristi se 123 jod. 16
5. Određivanje nivoa TSH i hormona štitnjače.
Ispitivanje nivoa TSH i hormona štitnjače (slobodni tiroksin i trijodtironin) indicirano je za sve kod kojih se sumnja na patologiju štitnjače. Trenutno je svrsishodnije proučavati slobodne frakcije hormona štitnjače u kombinaciji s određivanjem razine TSH.
6. Određivanje nivoa tireoglobulina u krvi.
Povećan sadržaj tireoglobulina u krvi karakterističan je za mnoge bolesti štitnjače, otkriva se u roku od 2-3 tjedna nakon biopsije punkcije, kao iu roku od 1-2 mjeseca nakon operacije na štitnoj žlijezdi.
7. Određivanje nivoa kalcitonina u krvi.
Kod pacijenata sa porodičnom anamnezom medularnog karcinoma štitnjače (sindrom više endokrinih neoplazija tip 2 i 3), treba odrediti nivo kalcitonina u krvi. U svim ostalim slučajevima određivanje kalcitonina nije indicirano.
Normalan nivo kalcitonina u krvi ne prelazi 10 pg/ml Nivo ovog markera, veći od 200 pg/ml, je najvažniji dijagnostički kriterijum za medularni karcinom štitnjače.

8. Test funkcije štitne žlijezde.
Testovi funkcije štitne žlijezde su testovi krvi koji se koriste za procjenu koliko efikasno radi štitna žlijezda. Ovi testovi uključuju test hormona stimulacije štitnjače (TSH), tiroksina (T4), test trijodtironina (T3), test globulina koji vezuje tiroksin (TBG), test na trijodtironin katran (T3RU) i test dugotrajnog stimulatora štitnjače (LATS). .
Testovi funkcije štitne žlijezde se koriste za:

pomoć u dijagnosticiranju nedovoljno aktivne štitne žlijezde (hipotireoza) i preaktivne štitne žlijezde (hipertireoza)
procjena aktivnosti štitne žlijezde
praćenje odgovora na terapiju štitnjače

Većina ih smatra osjetljivim test hormona koji stimuliše štitnjaču (TSH). najprecizniji pokazatelj aktivnosti štitne žlijezde. Mjerenjem nivoa TSH, doktori mogu otkriti čak i manje probleme sa štitnom žlijezdom. Budući da je ovaj test vrlo osjetljiv, odstupanja u funkcija štitne žlijezde mogu se identificirati čak i prije nego što se pacijent počne žaliti na simptome.
TSH govori štitnoj žlijezdi da oslobodi hormone tiroksin (T4) i trijodtironin (T3). Prije upotrebe TSH testova, standardnim krvnim testovima koji su mjerili nivoe T4 i T3 korišćeni su kako bi se utvrdilo da li štitna žlijezda radi ispravno. Trijodtironin (T3) test mjeri količinu ovog hormona u krvi. T3 je obično prisutan u vrlo malim količinama, ali ima značajan uticaj na metabolizam. Aktivna je komponenta hormona štitnjače.

Test globulina koji vezuje tiroksin (TBG). testira nivoe ove supstance u krvi, koja se proizvodi u jetri. GTD se vezuje za T3 i T4, sprečavajući da se hormoni ispiru iz krvi od strane bubrega, i oslobađa ih kada i gde su potrebni za regulaciju telesnih funkcija.
Test unosa katrana trijodtironina (T3RU) mjeri nivo T4 u krvi. Laboratorijske analize Ovaj test traje nekoliko dana da se završi i koristi se rjeđe od testova čiji su rezultati dostupni brže.
Test stimulatora štitnjače dugog djelovanja (LATS) pokazuje da li krv sadrži dugodjelujući stimulans štitnjače. Ako je prisutan u krvi abnormalno, LATS uzrokuje da štitna žlijezda proizvodi i oslobađa abnormalno velike količine hormona.
9. Kompjuter, magnetna rezonanca, transmisiona optička tomografija.

CT i MRI su visoko informativne neinvazivne metode koje vizualiziraju štitnu žlijezdu. Međutim, ove studije se trenutno izvode prilično rijetko zbog visoke cijene i niske dostupnosti odgovarajuće opreme. Uz procjenu lokalizacije štitne žlijezde, njenih kontura, oblika, veličine, strukture, odnosa sa susjednim tkivima, veličine i strukture regionalnih limfnih čvorova, CT omogućava određivanje denzitometrijske gustoće formacija u štitnoj žlijezdi. I CT i MRI su metode izbora u dijagnostici substernalne strume. Kompjuterska tomografija (CT) je metoda rendgenskog pregleda zasnovana na nejednakoj apsorpciji rendgenskog zračenja od strane različitih tkiva tijela, a uglavnom se koristi u dijagnostici patologije štitne žlijezde, abdominalnog dijela (jetra, žučna kesa, gušterača, bubrezi, nadbubrežne žlijezde itd.)
Kompjuterska tomografija vam omogućava da dobijete informacije o konfiguraciji, veličini, lokaciji i opsegu bilo koje formacije, jer ova metoda razlikuje tvrda i meka tkiva po gustoći.
Magnetna rezonanca (MRI) - instrumentalna metoda dijagnostika, uz pomoć koje se u endokrinologiji procjenjuje stanje hipotalamo-hipofizno-nadbubrežnog sistema, skeleta, trbušnih i karličnih organa.
MRI vam omogućava da dobijete informacije o konfiguraciji kostiju, veličini, lokaciji i opsegu bilo koje formacije, jer ova metoda razlikuje tvrda i meka tkiva po gustoći.
MRI, poslednjih godina, postaje sve važniji u dijagnostici patologije hipotalamus-hipofizne regije i postaje metoda izbora kod pregleda pacijenata sa sumnjivim lezijama u ovoj oblasti (slika 1.7).


Sl.1.7. Priprema za MRI.
Tokom snimanja magnetnom rezonancom, pokretni sto sa pacijentom se kreće kroz „tunel” koji stvara elektromagnetno polje, koje stvara zračenje koje omogućava dobijanje trodimenzionalne slike unutrašnje strukture tela.

Bolesti dijagnosticirane MR:

? tumori hipofize (nprprolaktinom , Itsenko-Cushingova bolest)

? nadbubrežne mase (npr. Cushingov sindrom, aldosterom, feohromocitom)

? osteoporoza

? i sl.

Prednosti MRI:

? omogućava vam da dobijete presjeke debljine 2-3 mm u bilo kojoj ravnini

? sposobnost prosuđivanja po prirodi signala ne samo o prisutnosti formacije, već i o njenoj unutrašnja struktura(hemoragije, ciste, itd.)

? odsustvo izlaganja jonizujućem zračenju na pacijenta i gotovo potpuna neškodljivost, što je važno prilikom pregleda dece, kao i po potrebi ponovljenih ponovljenih pregleda.

Još modernija metoda tomografije, ali još nije široko uvedena u praksu, je transmisiona optička tomografija (TOT), koja koristi blisko infracrveno zračenje male snage (reda nekoliko desetina mW) koje je praktički bezopasno za ljude (Sl. 1.8.). Potencijalne prednosti TOT-a daleko prevazilaze njegovu sigurnost. Upotreba IR zračenja, koje hemoglobin dobro apsorbuje u oksi- i deoksi-stanjima (na različitim talasnim dužinama), omogućava da se dobije prostorna distribucija stepena oksigenacije tkiva, što je nemoguće u drugim tehnikama. Upotreba zračenja specifičnih talasnih dužina omogućiće i određivanje prostorne distribucije NAD, NAD+ (NADH), triptofana, raznih citohroma (bilirubin, melanin, citokrom oksidaza) i koncentracije vode. Sve to omogućuje ne samo uspješno i pravovremeno dijagnosticiranje niza bolesti (displazije, tumori, tromboze, hematomi), već i dobivanje informacija o metaboličkim procesima i funkcioniranju različitih organa tijekom vremena. Konkretno, optička tomografija će omogućiti da se u realnom vremenu posmatra prostorna distribucija zasićenosti tkiva vodom i pH faktor. 17

Rice. 1.8. CTLM sistem je jedan od prvih svjetskih serijskih optičkih tomografa.
10. Imunohistohemijska studija tumorskog tkiva štitnjače.
Izvode se u tkivu tumora štitnjače dobivenih kao rezultat operacije. Glavna svrha ove studije je prognostička. U tkivu štitaste žlezde utvrđuje se prisustvo supstanci kao što su p53 (gen supresor rasta tumora), CD44, Met (proteoglikani odgovorni za metastaze), PTC, ras-onkogeni (onkogeni koji regulišu progresiju tumora) i druge. Najvažnija stvar u kliničkoj praksi je otkrivanje imunoreaktivnosti str. 53, Met i PTC u tkivu raka štitnjače. Prisustvo ovih markera u tumorskom tkivu znak je brzog (u roku od 2-5 mjeseci) razvoja metastatske bolesti kod operisanog pacijenta. Studija je skupa i zahtijeva posebnu laboratorijsku opremu. Trenutno se određivanje tumorskih markera uglavnom provodi u specijaliziranim onkološkim klinikama za određene indikacije, odnosno ako pacijent ima druge prognostičke znakove recidiva tumora ili razvoja metastatske bolesti (slabo diferencirani karcinom štitnjače, starost bolesnika preko 55 godina, invazija okolnih tkiva tumorom i sl.). 18
11. Imunološke metode.
Imunološke metode prvenstveno uključuju enzimski imunosorbentni test (ELISA). ELISA je metoda za otkrivanje antigena ili antitijela, zasnovana na određivanju kompleksa antigen-antitijelo zbog:

preliminarna fiksacija antigena ili antitijela na supstratu;
dodavanje testnog uzorka i vezivanje fiksiranog antigena ili antitijela za ciljni antigen ili ciljno antitijelo;
naknadno dodavanje antigena ili antitijela obilježenog enzimskom oznakom uz njegovu detekciju korištenjem odgovarajućeg supstrata koji mijenja boju pod djelovanjem enzima. Promjena boje reakcione smjese ukazuje na prisustvo ciljnog molekula u uzorku. enzimske reakcije Prilikom proučavanja ispitnih uzoraka oni se upoređuju sa kontrolnim uzorcima.

Prije pojave ELISA metoda, dijagnoza bolesti štitnjače temeljila se na analizi kliničke slike, koja ne odražava uvijek jasno razvoj patologije i manifestira se u prilično kasnim fazama. Danas su ELISA metode glavne za identifikaciju abnormalnosti u funkciji štitne žlijezde, postavljanje diferencijalne dijagnoze i praćenje liječenja. 19
Proučavanje nivoa antitireoidnih antitijela – imunohemiluminiscentna metoda. Proučavana je prevalencija antitijela na antigene tkiva štitnjače: tireoglobulin, tireoidnu peroksidazu i TSH receptor u bolesnika s difuznom toksičnom strumom i endokrinom oftalmopatijom. Kada se pregledaju, takvi pacijenti imaju visok nivo antitijela na TSH receptor, koji se smanjuje tireostatskom terapijom. 20 Pokazalo se da bi određivanje antitela na TSH receptor i tireoglobulin trebalo da posluži kao dodatni dijagnostički kriterijum tokom pregleda. 21
Metode za određivanje antitijela na TSH receptor:
1. Definicija TBII
1.1. Radioreceptorska metoda
1.1.1. Korištenje svinjskog rTSH (TRAK)
1.1.2. Korištenje humanog rTSH izraženog od strane CHO stanica (CHO-R)
1.1.3. Korištenje rTSH izraženog ćelijama leukemije (K562)
1.2. FACS
1.3. Imunoprecipitacija
2. Biološke metode za određivanje stimulirajućih (TSAb) i blokirajućih (TBAb) antitijela
2.1. Procjena proizvodnje cAMP-a (utvrđena pomoću RIA)
2.1.1. u FRTL-5 ćelijama
itd...................

Većina endokrinih organa je nedostupna za direktan pregled, s izuzetkom štitnjače i gonada, pa se stanje endokrinih žlijezda često mora suditi prema kliničkim sindromima koji su karakteristični za hiper- ili hipofunkciju zahvaćene žlijezde i pokazateljima homeostaze.

Klinički pregled endokrinog sistema kod djece sastoji se od proučavanja pritužbi, anamneze i života djeteta, uključujući genetske karakteristike porodice, sprovođenja objektivnog pregleda svih organa i sistema djeteta, te evaluacije podataka iz dodatnih metoda istraživanja.

Opšti pregled pacijenta

Prilikom eksternog pregleda djeteta pažnja se obraća na proporcionalnost tjelesne građe. Zatim se vrši procjena fizički razvoj djeteta, na osnovu čega se mogu identifikovati poremećaji rasta. Ocjena fizički razvoj kod djece:

S obzirom na uočene varijacije u različitim pokazateljima fizičkog razvoja djeteta, potrebno je poznavati takozvanu normalnu, odnosno Gauss-Laplacianu raspodjelu. Karakteristike ove distribucije su aritmetička srednja vrijednost atributa ili indikatora (M) i vrijednost standardne devijacije ili sigme (δ). Vrijednosti iznad M ± 2δ standarda za zdravu djecu, u pravilu, ukazuju na patologiju.

U praksi, indikativne procjene zadržavaju svoj značaj, pri čemu treba koristiti sljedeće empirijsko pravilo: slučajna varijacija osobine koja se mijenja s godinama obično ne prelazi jedan dobni interval; vrijednost znaka može biti patološke prirode ako je njegova vrijednost u intervalu + 1-2 starosna intervala. Starosni intervali u tabelama standarda obično se biraju na sljedeći način: od rođenja do jedne godine interval je jednak mjesecu, od 1 godine do 3 godine - 3 mjeseca, od 3 do 7 godina - 6 mjeseci, od 7 do 12 godina godine - godinu dana.

Za precizno određivanje pokazatelja fizičkog razvoja, pedijatar mora koristiti tabele (ili krive) dobne centilne distribucije. Praktična upotreba ovih tabela (grafikona) je izuzetno jednostavna i zgodna. Stupci centilnih tabela ili grafičkih krivulja pokazuju kvantitativne granice osobine u određenom omjeru ili postotku (centil) djece ovog uzrasta i spol. U ovom slučaju, vrijednosti karakteristične za polovicu zdrave djece date dobi i spola - u rasponu od 25. do 75. centila - uzimaju se kao prosječne ili uslovno normalne vrijednosti.

Patuljastost hipofize karakterizira usporavanje rasta bez promjene proporcija tijela. O patuljastosti možete razmišljati ako djetetova visina zaostaje za onim što bi trebala biti i prelazi M-3δ (u sigma seriji), ispod granica 3. centila (u centilnim tablicama) ili SDS<-2. Рост взрослого мужчины-карлика не превышает 130 см, рост женщины - менее 120 см.

Kod hipotireoze dolazi do usporavanja rasta s kršenjem proporcija tijela - kratkih udova. Lice ima karakterističan izgled: širok ravan most nosa, široko razmaknute oči (hipertelorizam), relativna prevlast lobanje lica, veliki debeli jezik, debele usne i drugi simptomi hipotireoze.

Ubrzanje rasta je karakteristično za hipofizni gigantizam, kod kojeg rast prelazi potrebnu visinu za više od 15% (iznad 97. centila, SDS = +2), i tireotoksikozu. Proporcije tijela se ne mijenjaju ni sa jednom bolešću.

Ako se hiperfunkcija hipofize manifestira nakon zatvaranja ploča rasta, razvija se akromegalija - povećanje nosa, šaka i stopala, masivna donja čeljust, a obrvi snažno strše.

Pregled, palpacija i procjena stanja kože. Blijeda koža sa ikteričnom nijansom, sivkastom mramornošću i suhoćom opažena je kod hipotireoze. Voštano bljedilo je karakteristično za tumore hipofize.

Ljubičasto-plavkasta boja kože lica se opaža uz hiperfunkciju kore nadbubrežne žlijezde (Cushingov sindrom i bolest).

Hiperpigmentacija kože (brončana nijansa) uočava se kod nadbubrežne insuficijencije.

Strije (strije) su karakteristične za Cushingov sindrom i hipotalamsku gojaznost.

Suha koža se opaža kod dijabetes melitusa i dijabetesa insipidusa; Kod dijabetes melitusa, osim toga, može doći do svrbeža kože i furunculoze.

Povećana vlažnost kože opažena je kod tireotoksikoze, hipoglikemijskih stanja i hiperinzulinizma.

Stanje kose. Suva, gruba, lomljiva kosa karakteristična je za hipotireozu. Hirzutizam (prekomerni rast dlaka kod muškaraca u područjima zavisnim od androgena) i hipertrihoza (pretjerani rast dlaka u područjima neovisnim o androgenima) povezani su s hiperfunkcijom kore nadbubrežne žlijezde.

Virilizacija- promjene vanjskih ženskih genitalija prema muškom tipu - uočene kod urođene disfunkcije kore nadbubrežne žlijezde, kod tumora nadbubrežne žlijezde ili jajnika.

Pregled, palpacija i procjena raspodjele potkožnog masnog tkiva. Višak potkožnog tkiva sa njegovom ravnomjernom distribucijom karakterističan je za konstitucijsko-egzogenu, nutritivnu i diencefaličnu gojaznost.

Prekomjerno taloženje potkožnog masnog tkiva u području ramenog pojasa, 7. vratnog pršljena, grudnog koša i abdomena uočeno je kod Itsenko-Cushingove bolesti i sindroma.

Cerebralnu pretilost karakterizira bizarna distribucija potkožnog tkiva, na primjer, na vanjskoj površini ramena, unutrašnjoj strani bedara itd.

Postoje 4 stepena gojaznosti:

I stepen - višak telesne težine je 15-25% potrebne količine,

II stepen - -»- -»- od 25 do 50% -»-

III stepen - -»- -»- 50-100% -»-

IV stepen - -»- -»- više od 100%.

Važan kriterij za gojaznost je indeks tjelesne mase (Quetelet) (BMI) - odnos težine u kg i visine (u m 2). Gojaznost se definiše kao BMI koji prelazi 95. centil za datu dob i spol.

U tijelu, masnoća se nalazi 1) u potkožnoj masnoći (subkutana mast) i 2) oko unutrašnjih organa (visceralna mast). Višak potkožnog masnog tkiva u predjelu trbuha i visceralne masti u trbušnoj šupljini stvaraju abdominalnu gojaznost. ili tip "top". Ovaj tip distribucije masti može se razlikovati mjerenjem opsega: struka (WA) - ispod donjeg ruba rebara iznad pupka, kukova (HT) - na nivou maksimalnog izbočenog dijela zadnjice i izračunavanje WC/CV omjera. Vrijednosti WC/BV veće od 0,9 kod muškaraca i više od 0,8 kod žena ukazuju na prisustvo abdominalne gojaznosti. Naprotiv, kada su vrijednosti WC/TB jednake ili manje od 0,7, uspostavlja se „donji“ ili femoroglutealni tip gojaznosti.

Smanjenje razvoja potkožnog masnog tkiva karakteristično je za Simmondsovu bolest (hipofizno trošenje), tireotoksikozu i dijabetes melitus prije liječenja.

Procjena neuropsihičkog razvoja i stanja nervnog sistema

Hipotireoza karakteriše zaostajanje u mentalnom razvoju, dok se tireotoksikoza karakteriše ubrzanjem mentalnih procesa, razdražljivost, plačljivost, fini tremor očnih kapaka, prstiju, nestabilnost autonomnog nervnog sistema.

Kod hipofiznog patuljastosti i adipozno-genitalne distrofije, opaža se mentalni infantilizam; sa hipoparatireoidizmom, povećanom neuromuskularnom ekscitabilnosti (pozitivni simptomi Trousseaua i Chvosteka).

Zatim se pregledaju endokrine žlijezde dostupne objektivnom pregledu.

Metode za proučavanje štitne žlijezde:

Inspekcija.Štitna žlijezda obično nije vidljiva oku i ne može se palpirati. Pregledom se može utvrditi stepen povećanja štitaste žlezde. Počevši od drugog (sa povećanjem stepena I, nije vidljivo oku). Osim toga, pregledom se otkrivaju simptomi karakteristični za smanjenje ili povećanje funkcije žlijezde: stanje kože, potkožnog tkiva, fizički razvoj, simptomi oka (egzoftalmus-ispupčene oči, Dalrymple-ovi simptomi - proširenje palpebralne fisure , Jellinek - pigmentacija kapaka, Kraus - rijetko treptanje, Graefe - zaostajanje gornjeg kapka pri gledanju prema dolje, Möbius - kršenje konvergencije - kada se predmet približi očima, one se prvo konvergiraju, a zatim se jedno oko nehotice pomiče u stranu ).

PalpacijaŠtitna žlijezda se izvodi palčevima obje ruke, koji se nalaze na prednjoj površini, a preostali prsti se postavljaju na stražnji dio vrata. Kod dojenčadi, palpacija se može obaviti palcem i kažiprstom jedne ruke. Kod palpacije žlijezde kod starije djece od njih se traži da naprave pokret gutanja, dok se žlijezda pomiče prema gore, a njeno klizanje u tom trenutku po površini prstiju olakšava palpacijski pregled.

Isthmus štitaste žlijezde se pregledava kliznim pokretima palca jedne ruke duž srednje linije vrata u smjeru odozgo prema dolje. Isthmus se nalazi na prednjoj površini dušnika ispod tiroidne hrskavice i dopire do 3. prstena dušnika. Režnjevi žlijezde nalaze se s obje strane dušnika i larinksa, dostižući 5-6. trahealni prsten.

Prilikom palpacije štitne žlijezde potrebno je uočiti njenu veličinu, površinske karakteristike, prirodu povećanja (difuzno, nodularno, nodularno), konzistenciju (tvrda ili meka elastična), pulsiranje, bol.

Termin „guša“ se koristi kada je štitna žlezda uvećana.

Trenutno u upotrebi klasifikacija SZO 2001, uzimajući u obzir tri klinička stepena povećanja štitnjače:

Stepen 0 - štitna žlijezda nije uvećana

1. stepen - štitna žlijezda je palpabilna

2. stepen - gušavost je opipljiva i vidljiva oku

Auskultacija pregled štitne žlijezde vrši se pomoću fonendoskopa koji se aplicira na žlijezdu. Kada se funkcija žlijezde pojača, preko nje se često čuje vaskularni šum. Kod starije djece auskultacija se izvodi uz zadržavanje daha.

Dodatne metode ispitivanja, koji se koristi u dijagnostici bolesti štitnjače kod djece:

Ultrazvučni pregled – koristi se za procjenu veličine i strukture žlijezde;

Ultrazvučni pregled sa doplerografijom - procjenjuje se protok krvi u žlijezdi;

Punkciona biopsija finom iglom je citološki pregled punktata, koji se koristi kod nodularnih oblika strume za određivanje ćelijske prirode čvorova;

Određivanje koncentracije hormona u krvnom serumu: tiroksina (T-4), trijodtironina (T-3) i tireostimulirajućeg hormona (TSH). T-4 i T-3 u krvi su u slobodnom i vezanom za proteine ​​stanju. Hormonska aktivnost određena je koncentracijom slobodnih frakcija tiroidnih hormona, stoga je za procjenu funkcionalnog stanja štitnjače potrebno ispitati slobodne frakcije T-3 i T-4;

5) Izotopska scintigrafija - može se koristiti za dijagnosticiranje hormonski aktivnih i/ili neaktivnih formacija, posebno malih kod djece iznad 12 godina.

Enzimski imunotest ili radioimunotest

A) Antitijela na tiroidnu peroksidazu (TPO) i mikrosomalne antigenske frakcije (MAG) – koriste se za dijagnosticiranje autoimunog procesa kod kroničnog autoimunog tiroiditisa;

B) Antitijela na TSH receptore - testirana na sumnju na difuznu toksičnu strumu (Gravesova bolest);

C) Antitela na tireoglobulin se ispituju tokom posmatranja pacijenata operisanih od karcinoma štitaste žlezde (samo u slučaju totalne resekcije).

7) Rendgen metoda

Određivanje koštane starosti pomoću rendgenskih snimaka šaka.

Za dijagnostiku u endokrinologiji koriste se radioimune metode za određivanje hormona u biološkim tekućinama i tkivima tijela, radioizotopske i ultrazvučne metode istraživanja i termografija (termografija). Upotreba kompjuterske tomografije u kliničkoj praksi značajno je povećala učestalost prepoznavanja mnogih endokrinoloških bolesti, tomografijom se mogu otkriti lezije koje se ne otkrivaju konvencionalnim rendgenskim pregledom (na primjer, mali tumori hipofize).
U dijagnozi bolesti štitnjače široko se koriste opće kliničke metode istraživanja (povećanje štitne žlijezde, koje se naziva gušavost, dobro se utvrđuje palpacijom); proučavanje funkcionalne aktivnosti štitne žlijezde određivanjem apsorpcije radioaktivnog joda u štitnoj žlijezdi, proučavanje strukture organa ultrazvukom, termografijom, biopsijom štitne žlijezde itd.
Laboratorijske metode istraživanja dijabetes melitusa usmjerene su na određivanje razine glukoze u krvi i urinu.
Test tolerancije na glukozu radi se kod pacijenata sa latentnim dijabetes melitusom.
Za određivanje sadržaja šećera u urinu, osim općeg kliničkog testa urina, koriste se i posebni indikatorski testovi (glukotest) za brzo otkrivanje prisutnosti glukoze u urinu i približno određivanje njene količine. Preciznije, kvantitativni sadržaj glukoze u urinu određuje se polarimetrijskom metodom. Uz to se utvrđuje dnevna diureza, što omogućava da se izračuna dnevni gubitak glukoze u urinu i na taj način odabere željena doza inzulina.
Prisustvo ketonskih tijela (acetona, acetoacetatne kiseline, itd.) u urinu uvijek je ozbiljan znak koji ukazuje na teški dijabetes melitus i razvoj njegove dekompenzacije. Obično se za to koristi test sa natrijum nitroprusidom, koji daje ljubičastu boju kada reaguje sa ketonskim tijelima u alkalnoj sredini. U hitnim slučajevima koriste se brzi dijagnostički testovi za određivanje ketonskih tijela.
Krv i hematopoeza
Krv, zajedno sa limfom i tkivnom tečnošću, čini unutrašnju sredinu tela, koja pere sve njegove ćelije, organe i tkiva.
Krv se sastoji od tekućeg dijela (plazme) i formiranih krvnih elemenata suspendiranih u njoj (eritrociti, leukociti, trombociti).
Sastav krvne plazme uključuje vodu, bjelančevine, masti, ugljikohidrate, makro- i mikroelemente, hormone, enzime, vitamine, biološke supstance i produkte metabolizma.
Krvni sistem obuhvata perifernu krv, hematopoetske i hematopoetske organe (crvena koštana srž, jetra, slezena, limfni čvorovi i druge limfoidne formacije).
Hematopoeza u periodu intrauterinog razvoja počinje rano. Već u 3. sedmici intrauterinog razvoja pojavljuju se prva krvna zrnca. Od 6. sedmice
intrauterinom razvoju, jetra postaje glavni organ hematopoeze, čija hematopoetska funkcija dostiže maksimum do 5. mjeseca, a zatim počinje postepeno blijediti prema rođenju djeteta. Od 3. mjeseca intrauterinog razvoja počinje da se javlja hematopoeza u slezeni i prestaje do 5. mjeseca intrauterinog razvoja. Koštana srž se formira na kraju 3. mjeseca embrionalnog razvoja, a od 4. mjeseca počinje hematopoeza koštane srži, koja postaje glavna do kraja intrauterinog razvoja i tokom cijelog postnatalnog perioda. Kod male djece hematopoeza se javlja u svim kostima, kao iu perifernom limfnom tkivu i slezini. U periodu puberteta dolazi do hematopoeze u ravnim kostima (grudna kost, rebra, kapice pršljenova), epifizama tubularnih kostiju, kao i u limfnim čvorovima i slezeni.
Glavna razlika u sastavu fetalnih krvnih stanica je stalno povećanje broja crvenih krvnih stanica koje sadrže hemoglobin i leukocite. U prvoj polovini intrauterinog razvoja (do 6 mjeseci) u krvi se nalaze mnogi nezreli elementi, a u narednim mjesecima periferna krv sadrži pretežno zrele oblike. Mijenja se i sastav hemoglobina, koji je prijenosnik kisika u organe, tkiva i ćelije tijela. Prvo se pojavljuje primitivni hemoglobin, koji se zamjenjuje fetalnim hemoglobinom (fetalni hemoglobin), koji postaje glavni oblik u prenatalnom periodu. Ali već od 3. tjedna intrauterinog razvoja počinje proizvodnja hemoglobina odraslih, čije se stvaranje i količina povećava s godinama fetusa. Ali do rođenja djeteta, količina fetalnog hemoglobina iznosi još 60-80% ukupnog hemoglobina. Odlika fetalnog hemoglobina je brže vezivanje kiseonika od hemoglobina odrasle osobe, što je u prenatalnom periodu od velike važnosti za snabdevanje fetusa kiseonikom, zbog nedostatka plućnog disanja. Visok sadržaj fetalnog hemoglobina u krvi novorođenčeta igra važnu ulogu u mehanizmima adaptacije na nove životne uslove.
Prisustvo velikog broja crvenih krvnih zrnaca, povećan sadržaj hemoglobina i prisustvo nezrelih oblika crvenih krvnih zrnaca u perifernoj krvi novorođenčeta ukazuju na intenzivnu hematopoezu u crvenoj krvnoj klici kao reakciju na nedostatak opskrbe kisikom. na fetus tokom intrauterinog razvoja i porođaja. Nakon rođenja djeteta, uslijed pojave vanjskog disanja, eliminira se nedostatak kisika, a samim tim se smanjuje potreba za povećanom proizvodnjom crvenih krvnih stanica i hemoglobina i počinje njihov pad.
Kod novorođenčeta količina hemoglobina je 180-240 g/l, eritrocita 4,5-7,5 x 10/l, a kod jednogodišnjeg djeteta količina hemoglobina je već 110-135 g/l, eritrocita 3,6 -4,9 x 10 /l.
Ukupan broj leukocita (bijelih krvnih zrnaca) kod djece se relativno malo mijenja. Pri rođenju njihov broj je 8,5-24 x 10/l, a do godine 6,0-12,0 x 10/l.
Kvalitativni sastav leukocita prolazi kroz drastične promjene, što je posljedica formiranja imunoloških funkcija.

• Žalbe na umor, promjene raspoloženja, ponekad plačljivost, emocionalnu labilnost, lupanje srca koje se pojačava fizičkom aktivnošću -1-!Ove tegobe su karakteristične za tireotoksikozu.
• Neki pacijenti primjećuju osjećaj vrućine i smanjenu zimicu (pacijenti spavaju pod tankim pokrivačem ili čaršavom). Smatra se da je patofiziološka osnova ovog simptoma povećanje metabolizma (zbog pojačane aktivnosti štitne žlijezde).
• Pritužbe na pospanost, zimicu, apatiju, letargiju, slabo pamćenje, ponekad u kombinaciji sa zatvorom, mogu biti manifestacije hipotireoze.
• Za dijabetes melitus karakteristične su pritužbe na žeđ (polidipsiju), poliuriju, suha usta, povećan apetit ili, obrnuto, smanjen apetit i periodični svrbež kože. U većini slučajeva navedeni simptomi se uočavaju tokom dekompenzacije bolesti.
• Kod feohromocitoma, hormonski aktivnog tumora nadbubrežne žlijezde, mogu se primijetiti pritužbe na napade bezrazložnog straha, praćene zimicama, glavoboljom, ponekad vrtoglavicom, mučninom i povraćanjem.
• Za kroničnu insuficijenciju nadbubrežne žlijezde karakteristične su pritužbe na tamnjenje kože, pigmentaciju pojedinih dijelova tijela, posebno na mjestima prirodne pigmentacije, u kombinaciji sa pritužbama na slabost, gubitak težine, umor mišića i bol u mišićima. Sinonimi za ovaj pojam su: hipokortizolizam, bronzana bolest, Addisonova bolest.
• Pritužbe na grčeve, često u mišićima pregibača gornjih udova, pojavu periodičnog trizma - konvulzivnog stiskanja čeljusti i drugih oblika grčeva prugasto-prugastih mišića znak su hipoparatireoze.
• Pritužbe na progresivnu slabost, jak umor, pospanost, u kombinaciji s brzim povećanjem tjelesne težine, zahtijevaju da se isključi prisutnost adiposogenitalne distrofije kod pacijenta.
• Pritužbe na jaku žeđ i odgovarajuću poliuriju, kada dnevna diureza dosegne nekoliko litara, mogu biti znakovi dijabetesa insipidusa.
• Pritužbe na jaku slabost, loš apetit, gubitak težine, poliuriju u kombinaciji sa pritužbama na bol u kostima, sklonost gubitku zuba i česte frakture kostiju koje slabo zarastaju mogu biti znakovi hipertireoze.

Patološki tok menopauze zauzima graničnu poziciju između terapije (endokrinologije) i ginekologije. Pritužbe žena na valunge - kratkotrajni osjećaj vrućine u kombinaciji sa pojačanim znojenjem, razdražljivošću, a ponekad i plačljivošću - zahtijevaju detaljno prikupljanje ginekološke anamneze i ginekološki pregled kako bi se isključila ova bolest. Muška menopauza teče lakše, uglavnom uz razvoj simptoma oslabljene seksualne potencije.
Ispitivač dobija porodičnu i seksualnu anamnezu. Čovjeka se pita da li je seksualno aktivan iu kojoj dobi i broju djece. Ženu se pita da li ima menstruaciju, njihovu redovnost i obilje (posebno broj dana). Kod zrelih i starijih žena razjašnjeno je vrijeme menopauze i posebnosti menopauze (prisustvo valunga i njihova učestalost). Zatim treba saznati broj trudnoća i porođaja, ako nije bilo trudnoće, utvrditi uzrok.

Metode fizikalnog istraživanja

Pregled pacijenta

U nekim slučajevima, pregled pacijenta je inicijalni momenat koji dovodi do sumnje na endokrinu patologiju i usmjerava pregled pacijenta tim putem.

Prije svega, vizualno se procjenjuje endokrini status pacijenta. Potrebno je obratiti pažnju na težinu i visinu pacijenta. Prosečna visina odraslog muškarca u Evropi kreće se od 170 do 190 cm, žena - od 150 do 180 cm.U drugoj polovini 20. veka. visina mlađe generacije povećala se u prosjeku za 10-20 cm.Shodno tome, težina muškarca bi trebala biti u rasponu od 70-90 kg, a žena - od 40 do 60 kg.
Ako su ovi parametri prekoračeni, govore o patologiji koja može biti povezana s endokrinim statusom. Visina iznad 2,5 m kod muškaraca i više od 2,1 m kod žena naziva se gigantizam, ispod 1 m - patuljastost, što je takođe povezano sa patologijom endokrinog sistema. Kada je rast vrlo nizak, uobičajeno je govoriti o nanizmu (nanos - patuljak).

Za izračunavanje idealnog omjera visine i težine preporučuje se korištenje formule. Najjednostavniji metod je korištenje Broca indeksa:
Idealna tjelesna težina = (visina u cm - 100) ± 10% korekcija prema konstitucijskom tipu.
Sa Brocinim indeksom u rasponu od 90-100%, pokazatelji se smatraju zadovoljavajućim, indeks iznad 110% ukazuje na višak kilograma.
Postoje četiri stepena gojaznosti:

• I stepen: indeks 110-125%;
• II stepen: indeks 125-150%;
• III stepen: indeks 150-200%;
• IV stepen: indeks iznad 200%.

Ako imate prekomjernu težinu ili gojaznost, obratite pažnju na raspodjelu masnog tkiva. Tome se sada pridaje veliki značaj, jer je gojaznost postala globalni problem, a sa velikom težinom smrtnost se povećava 4-6 puta.

Prema modernim konceptima, postoje dvije vrste gojaznosti:

• android;
• ginoid.

Kod androidnog tipa gojaznosti dolazi do dominantnog taloženja masti u gornjoj polovini tela i na stomaku. Kod ginoidnog tipa gojaznosti, naslage su uočljivije na bokovima i zadnjici.

Dakle, karakteristični znakovi endokrine patologije su sljedeće vanjske manifestacije:

• akromegalija (grč. asgop - ud) - neproporcionalno povećanje udova, lica i drugih dijelova skeleta;
• gigantizam - neobično visoka (više od 2,5 m) visina pacijenta;
• nanizam - patuljastost, kada je visina odraslog pacijenta manja od 140 cm;
• Itsenko-Cushingov sindrom - morbidna pretilost s prisustvom ljubičastih ožiljaka na koži (strije, koje se često nalaze u donjem dijelu trbuha i bedara), često u kombinaciji s patološkom ćelavošću. Znak hronične povišene koncentracije kortizola u serumu;
• morbidna gojaznost;
• bronzana boja kože i sluzokože zbog insuficijencije nadbubrežne žlijezde, Addisonove bolesti;
• vrsta rasta dlake možda ne odgovara spolu pacijenta, što zahtijeva genetsku analizu. Prilikom pregleda pacijenta, prisutnost teške pretilosti ženskog tipa s taloženjem masti na bokovima, stražnjici i dojkama u kombinaciji s hipoplazijom genitalnih organa zahtijeva isključivanje adiposogenitalne distrofije;

Pacijent mora biti skinut.

I. pregled lica:

Obratite pažnju na usklađenost crta (kod bolesti hipofize utvrđuje se neravnomjeran rast kostiju - povećanje donje vilice, nosa, supercilijarnih lukova zigomatičnih kostiju itd.)

2.Boja kože:

• Ružičasta boja kod dijabetes melitusa, moguće prisustvo ksantoma i ksantelazme;
• Mršavo lice sa tankom baršunastom kožom, egzoftalmusom i pigmentacijom očnih kapaka zbog tireotoksikoze;
• Bezizražajno lice nalik maski sa sporim izrazima lica, pospanim, voštanim izrazom, natečenim kapcima i suženim palpebralnim fisurama. Koža je suha, peruta se – miksedem – teški oblik hipotireoze;
• U obliku mjeseca, ljubičasto-crvene boje sa prisustvom pustula, strija (striae), lice - prekomjerna proizvodnja adrenokortikotropnog hormona (ACTH).

II. Stanje kose:

• Tanka, lomljiva kosa koja lagano opada zbog hipertireoze;
• Gusta, dosadna (bez sjaja), lomljiva kosa koja lako opada zbog hipotireoze;
• Smanjenje ili nestanak dlaka kod muškaraca na grudima, stomaku, pubisu (sekundarne polne karakteristike) i rast dlaka muškog tipa kod žena (pojava brkova, brade).

III. pregled kože:

1. Obratite pažnju na boju, prisustvo ogrebotina (dijabetes melitus), pustularni osip, čireve (dijabetes melitus, Ischeng-Cushingova bolest).
2. Pigmentacija (meladerma) – hronična insuficijencija nadbubrežne žlezde. Pigmentacija je posebno izražena na otvorenim dijelovima tijela, u naborima kože, u predjelu bradavica i genitalija, te oralnoj sluznici.
3. Određivanje suhoće i vlažnosti kože vrši se vizualno (ako je koža suha, postaje hrapava i debela; kod visoke vlažnosti primjećuju se zrnca znoja) i uvijek palpacijom.

IV. Određivanje visine pacijenta

1. Postavite pacijenta tako da petama, zadnjicom i lopaticama dodiruje vertikalnu ploču stadiometra.
2. Držite glavu tako da gornja ivica spoljašnjeg slušnog kanala i spoljašnji ugao oka budu na istoj horizontalnoj liniji.
3. Spustite horizontalnu traku na glavu i prebrojite podjele.

V. Vaganje pacijenta

Uradite to ujutro, na prazan želudac, nakon pražnjenja mokraćne bešike i creva, u donjem vešu (posle toga sledi gubitak težine donjeg veša)

Vaganje se vrši redovno, u određenim intervalima.

VI. Debljina potkožnog masnog sloja

1. Skupite kožu na stomaku u nivou pupka u nabor.
2. Kod žena normalno ne bi trebalo da prelazi 4 cm, kod muškaraca – 2 cm

VII. Očni simptomi

• Isturene oči - egzoftalmus
• Široki otvor palpebralnih fisura je Delrympleov simptom.
• Odsjaj u očima je Krausov simptom.
• Rijetko treptanje je Stellwagov simptom.
• Recesija gornjeg kapka kada se gleda prema dolje je Graefeov simptom.
• Poremećaj konvergencije – Moebiusov znak (slabost konvergencije)
• Povlačenje gornjeg kapka sa brzim promjenama pogleda - Kocherov znak

VIII. Prisustvo tremora se utvrđuje u Rombergovom položaju:

1. Pacijent stoji sa ispruženim rukama ispred grudi, razdvojenih prstiju, nije napet, pete skupljene, zatvorenih očiju
2. Odredite prisustvo tremora prstiju
3. U slučaju izraženog tremora potrebno je uraditi test prst-nos, u kojem se može otkriti namjerni tremor - povećanje amplitude vibracija prstiju pri približavanju nosu

IX. Kod bolesti endokrinih žlijezda može doći do otoka kao posljedica oštećenja srca (dijabetes melitus, tireotoksikoza), bubrega (dijabetes melitus), te svojevrsnog otoka tkiva (edem sluzokože) sa hipotireozom.

Velike masivne otekline određuju se vizualno.

Kod blagog otoka treba koristiti palpaciju:

1. Prstima pritisnite natečenu kožu, pritiskajući je na kost. Ispod prstiju ostaju jame, koje se zatim izglađuju.