Metody badania pacjentów z chorobami układu hormonalnego. Algorytm badania układu hormonalnego. Metody badania: układ hormonalny. Metody badania chorób układu hormonalnego

Federalna Agencja Edukacji Federacji Rosyjskiej
Państwowa instytucja edukacyjna wyższego kształcenia zawodowego Baszkirski Uniwersytet Państwowy
Katedra Biologii
Katedra Biochemii

Praca na kursie
Metody badania układu hormonalnego w stanach normalnych i patologicznych

Zakończony:
Student V roku OSE
grupa A
Usachev S.A.

Ufa 2010
Treść
Wprowadzenie……………………………………………………………4
1. Przegląd metod badania układu hormonalnego
normalne i patologiczne……………………………………………………………6
1.1. Krótki szkic historyczny…………………………………………………...6
1.2. Recenzja nowoczesne metody badania układ hormonalny..12
1.3. Nowoczesne metody badania układu hormonalnego
studium przypadku Tarczyca………………………………28
2. Problemy i perspektywy metod badań endokrynologicznych
systemy…………………………………………………………… …………45
Zakończenie…………………………………………………………………..58
Lista referencji……………………………………………………………59

Wykaz skrótów przyjętych w pracy
AOK – komórki tworzące przeciwciała
AG – antygen
ACTH – hormon adrenokortykotropowy
HPLC – szybka chromatografia cieczowa
HI – hiperinsulinemia kompensacyjna
DNA – kwas dezoksyrybonukleinowy
LC – chromatografia cieczowa
ELISA – test immunoenzymatyczny
IR – insulinooporność
CT – tomografia komputerowa
LH – hormon luteinizujący
Stwardnienie rozsiane – zespół metaboliczny
MRI – rezonans magnetyczny
PCR – reakcja łańcuchowa polimerazy
RIA – test radioimmunologiczny
DHT – reakcja nadwrażliwości typu opóźnionego
DM 2 – cukrzyca typu 2
TSH – hormon stymulujący tarczycę
T4 – tyroksyna
T3 – trójjodotyronina
TBG – test globuliny wiążącej tyroksynę
USG – badanie USG
FIA – test immunologiczny fluorescencyjny
Mapowanie kolorowego Dopplera
OUN – centralny układ nerwowy
tarczyca - tarczyca

Wstęp
W ciągu ostatnich kilku lat, w wyniku rozwoju bardziej subtelnych, czułych i specyficznych metod oznaczania hormonów oraz innych metod badania układu hormonalnego w zdrowiu i chorobie, endokrynologia kliniczna i biochemia w dużej mierze przekształciły się z rodzaju sztuki w dziedzinę nauki. dział chemii stosowanej, fizjologii, fizyki i genetyki. Postęp ten był możliwy dzięki wprowadzeniu do praktyki duża liczba najnowsze i zaawansowane technologicznie metody badania układu hormonalnego, izolacja i późniejsza charakterystyka biologiczna i biochemiczna różnych wysoko oczyszczonych hormonów polipeptydowych, steroidów, witamin, pochodnych małych polipeptydów i aminokwasów, które są klasyfikowane jako hormony, a także produkcja hormonów znakowanych atomami radioaktywnymi o wysokiej aktywności właściwej.
Trafność tematu:
Obecnie na progu zrozumienia najbardziej ukrytych i tajemniczych zjawisk żywego organizmu jest najważniejsze zadanie- znaleźć najbardziej niezawodne, dostępne i zaawansowane technologicznie metody badawcze. Nowa era nanotechnologii i wysoce specjalistycznych odkryć zaczyna wnosić swój wkład do chemii biologicznej, która od dawna wykorzystuje metody nie tylko analizy chemicznej, ale najnowocześniejsze technologie we wszystkich gałęziach fizyki, informatyki, matematyki i innych nauk. Czas dyktuje ludzkości swoje warunki - poznać głębiej, poznać dokładniej, znaleźć przyczynę procesów zachodzących w żywym organizmie w warunkach normalnych i patologicznych. Poszukiwanie nowych metod badawczych nie ustaje, a naukowiec po prostu nie ma czasu na uogólnienia, usystematyzowanie tego obszaru poznania, czy podkreślenie tego, czego w danej chwili potrzebuje. Ponadto, gdy studiowałem problematykę badań układu hormonalnego, nie znalazłem wystarczająco kompletnego, uogólniającego podręcznika na ten temat. Wielu badaczy, zwłaszcza biochemików, staje przed problemem poszukiwania i usystematyzowania nowoczesnych metod badania układu hormonalnego w zdrowiu i chorobie. Wynika to przede wszystkim z faktu, że codziennie pojawiają się nowe źródła literatury i nowe metody badawcze, natomiast brak jest jednego przewodnika po metodach badawczych, który systematyzowałby dane o metodach. Z tych powodów trafność wybranego przeze mnie tematu jest bardzo duża.
Cel pracy:
Usystematyzować dane na temat stanu metod badania układu hormonalnego w warunkach normalnych i patologicznych we współczesnym świecie.
Zadania:

Zrób historyczny przegląd tematu.
Odzwierciedlaj aktualną wiedzę na temat metod badania układu hormonalnego, bez szczegółowy opis metody i techniki badawcze.
Opisz metody badawcze na przykładzie jednego gruczołu wydzielania wewnętrznego.
Podkreśl problemy i perspektywy współczesnych metod badania układu hormonalnego w zdrowiu i chorobie.

Praca kursu opiera się na badaniu i analizie źródeł literackich, składa się ze wstępu, dwóch rozdziałów, zakończenia oraz spisu literatury. Całkowita objętość zajęć wynosi 61 arkuszy tekstu pisanego na maszynie w formacie Microsoft Word 2007, czcionka Times New Roman, 14 pkt, interlinia 1,5. Praca kursowa zawiera 13 rycin, 2 tabele, 32 wykorzystane tytuły bibliograficzne z linkami w tekście pracy. Do pracy dołączone jest streszczenie w języku rosyjskim i angielskim.

1. Przegląd metod badania układu hormonalnego w stanach normalnych i patologicznych
1.1. Krótki szkic historyczny
Badanie układu hormonalnego i sama endokrynologia są stosunkowo nowymi zjawiskami w historii nauki. Aż do początków XX wieku układ hormonalny był niedostępną częścią organizmu człowieka. Wcześniej badacze nie mogli rozwikłać tajemnic formacji endokrynologicznych, ponieważ nie mogli wyizolować i zbadać wydzielanych przez nie płynów („soków” lub „sekretów”). Naukowcy nie odkryli żadnych „soków” ani specjalnych przewodów wydalniczych, którymi zwykle wypływa wytwarzany płyn. Dlatego jedyną metodą badania funkcji gruczołu dokrewnego była metoda wycięcia części lub całego narządu.
Naukowcy i historycy argumentowali, że narządy układu hormonalnego na Wschodzie były znane już w starożytności i z szacunkiem nazywano je „gruczołami losu”. Według wschodnich uzdrowicieli gruczoły te były odbiornikami i transformatorami energii kosmicznej wpływającej do niewidzialnych kanałów (czakr) i wspierającej ludzką witalność. Wierzono, że skoordynowaną pracę „gruczołów losu” mogą zakłócić katastrofy, które dzieją się na rozkaz złego losu.
Wzmianka o chorobie, najprawdopodobniej cukrzycy, znajduje się w egipskich papirusach z 1500 roku p.n.e. e.. Wole i skutki kastracji u zwierząt i ludzi należą do pierwszych klinicznych opisów chorób, których później udowodniono endokrynologiczny charakter. Stare opisy kliniczne choroby endokrynologiczne wytwarzano nie tylko na Zachodzie, ale także w starożytnych Chinach i Indiach.
Jeśli w czasie uporządkujemy istotne odkrycia z wielu dziedzin endokrynologii, powstały obraz odzwierciedli w miniaturze historię całej biologii i medycyny. Po fragmentarycznych obserwacjach klinicznych prowadzonych w starożytności i średniowieczu, nauki te rozwijały się niezwykle powoli. W drugiej połowie XIX wieku nastąpił szybki postęp w wielu dziedzinach medycyny, zarówno jeśli chodzi o jakość badań klinicznych, jak i zrozumienie mechanizmów chorobowych. Proces ten wynikał ze złożoności powiązań przyczyn historycznych.
Po pierwsze, rewolucja przemysłowa doprowadziła do akumulacji kapitału, który posłużył do rozwoju wielu nauk, głównie chemii i biologii.
Kolejną rewolucją, która miała miejsce w drugiej połowie XIX wieku i miała fundamentalne znaczenie dla rozwoju nie tylko endokrynologii, ale także medycyny i biologii, było pojawienie się eksperymentalnego modelowania zwierząt. Claude Bernard i Oscar Minkowski wykazali możliwość prowadzenia kontrolowanych i powtarzalnych eksperymentów w warunkach laboratoryjnych. Inaczej mówiąc, stworzono możliwość „przebadania” natury. Bez pracy tych pionierów bylibyśmy pozbawieni dużej części naszej obecnej wiedzy z zakresu endokrynologii. Badania wszystkich substancji zwanych hormonami rozpoczynały się od eksperymentów na całych zwierzętach (i często były poprzedzone obserwacjami na chorych ludziach). Substancje te nazwano substancją „X” lub czynnikiem „?”. Postulaty Kocha dla endokrynologii przewidywały następujący porządek pracy:
1. Usunięcie podejrzanego gruczołu. Po usunięciu gruczołu dokrewnego pojawia się zespół zaburzeń z powodu utraty działania regulacyjnego hormonów wytwarzanych w tym gruczole. Ze względu na traumatyczny charakter interwencji chirurgicznej zamiast chirurgicznego usunięcia gruczoł dokrewny mogą być użyte do wprowadzenia substancji chemicznych, które je zakłócają funkcja hormonalna. Na przykład podawanie alloksanu zwierzętom zaburza funkcję komórek β trzustki, co prowadzi do rozwoju cukrzycy, której objawy są niemal identyczne z zaburzeniami obserwowanymi po wytępieniu trzustki. 1
2. Opis skutków biologicznych operacji. Przykładowo założenie o występowaniu funkcji endokrynnych w trzustce zostało potwierdzone w doświadczeniach I. Meringa i O. Minkowskiego (1889), którzy wykazali, że jej usunięcie w trzustce psy prowadzi do ciężkiej hiperglikemii i cukromoczu; zwierzęta padły w ciągu 2-3 tygodni. po operacji na tle ciężkiej cukrzycy. Później odkryto, że zmiany te powstają na skutek braku insuliny, hormonu wytwarzanego w aparacie wysp trzustkowych.
3. Wprowadzenie ekstraktu gruczołowego.
4. Dowód, że podanie ekstraktu likwiduje objawy braku gruczołu.
5. Izolacja, oczyszczanie i identyfikacja substancji czynnej.
W czasie II wojny światowej dziedzina endokrynologii uległa znacznemu poszerzeniu duża liczba danych, z których wiele miało fundamentalne znaczenie dla późniejszego rozwoju nauki. Po wojnie, w związku z pojawieniem się wielu nowych technik, nastąpiło w ogóle niespotykane dotąd przyspieszenie tempa badań. A teraz, w wyniku gwałtownego napływu sił technicznych i twórczych, liczba publikacji, zarówno na temat endokrynologii, jak i wszystkich innych aspektów wiedzy biomedycznej, rośnie w imponującym tempie. Oznacza to stały dopływ nowych danych, co wymaga okresowej rewizji starych pomysłów w ich świetle. 2
Wiek XX upłynął pod znakiem narodzin nauki o hormonach, czyli endokrynologii. Samo słowo „hormon” zostało wprowadzone w 1905 roku przez brytyjskiego fizjologa, profesora Ernsta Starlinga, na wykładzie w Royal College of Physicians w Londynie. Zostało utworzone przez dwóch profesorów Uniwersytetu Cambridge od greckiego słowa hormao, które oznacza „szybko wprawić w ruch”, „podnosić” lub „podniecać”. Starling użyła go do opisania „nośników chemicznych” uwalnianych do krwi przez gruczoły wydzielania wewnętrznego (endon – wewnętrzny + krino – produkt), takie jak jądra, nadnercza i tarczyca, a także z zewnątrz, zewnątrzwydzielniczego (egzo – zewnętrzne) gruczoły, takie jak ślina i gruczoły łzowe. Ta nowa nauka rozwinęła się bardzo szybko, ekscytując umysły nie tylko lekarzy, ale także społeczeństwa.
Z reguły historia badania dowolnego hormonu przechodzi przez cztery etapy.
Najpierw obserwuje się wpływ wydzieliny wydzielanej przez gruczoł na organizm.
Po drugie, opracowywane są metody określania wydzielania wewnętrznego i stopnia jego wpływu na organizm. Dokonuje się tego najpierw za pomocą testów biologicznych w celu określenia wpływu hormonu na organizm, w którym występuje jego niedobór. Później zainstalowany metody chemiczne taki pomiar.
Po trzecie, hormon jest izolowany z gruczołu i izolowany.
I wreszcie, po czwarte, jego strukturę określają chemicy i jest ona syntetyzowana. 3
Obecnie badacze rozpoczynający od obserwacji na poziomie całego organizmu w miarę postępu prac mają coraz więcej pytań, aż w końcu podejmują próbę rozwiązania pierwotnego problemu na poziomie całego organizmu. Poziom molekularny. Tutaj badania endokrynologiczne biorą w swoje ręce chemia biologiczna a jej dział to biologia molekularna (endokrynologia).
Gdy tylko pojawią się nowe techniki morfologiczne, chemiczne, elektrofizjologiczne, immunologiczne i inne, okazują się bardzo szybka aplikacja w endokrynologii. Na przykład w latach 30. i 40. do badania sterydów stosowano bardzo złożone metody. Doprowadziło to do wielkiego postępu w zrozumieniu struktury i biosyntezy hormonów steroidowych. Możliwość wykorzystania izotopów promieniotwórczych, która pojawiła się na przełomie lat 40. i 50. XX wieku, poszerzyła naszą wiedzę na temat wielu aspektów cyklu jodowego, metabolizmu pośredniego, transportu jonów itp. Aby zbadać aktywność funkcjonalną gruczołu dokrewnego, jego zdolność do wychwytywania z krwi i gromadzić określony związek. Wiadomo np., że tarczyca aktywnie wchłania jod, który następnie wykorzystywany jest do syntezy tyroksyny i trójjodotyroniny. W przypadku nadczynności tarczycy zwiększa się akumulacja jodu, przy niedoczynności obserwuje się odwrotny efekt. Intensywność gromadzenia jodu można określić wprowadzając do organizmu izotop promieniotwórczy 131I, a następnie oceniając radioaktywność tarczycy. Związki, które służą do syntezy hormonów endogennych i są zawarte w ich strukturze, można również wprowadzić jako znacznik radioaktywny. Następnie możliwe jest określenie radioaktywności różnych narządów i tkanek, a co za tym idzie ocena rozmieszczenia hormonu w organizmie, a także odnalezienie jego narządów docelowych.
Później twórczo wykorzystano połączenie elektroforezy w żelu polikryloamidowym i autoradiografii do badania wielu białek, w tym receptorów hormonalnych. Równolegle z imponującym postępem chemii, jeszcze bardziej owocne okazało się zastosowanie metod histochemicznych, immunohistochemicznych i mikroskopii elektronowej.
Wszystkie warianty chromatografii – kolumnowa, cienkowarstwowa, papierowa, wielowymiarowa, gaz-ciecz (ze spektrometrią mas lub bez), ciecz wysokosprawna – były stosowane przez endokrynologów natychmiast po ich wprowadzeniu. Umożliwiły uzyskanie ważnych informacji nie tylko o sekwencji aminokwasowej peptydów i białek, ale także o lipidach (zwłaszcza prostaglandynach i substancjach pokrewnych), węglowodanach i aminach.
W miarę rozwoju technik badań z zakresu biologii molekularnej endokrynolodzy szybko wykorzystują je do badania mechanizmów działania hormonów. Obecnie metodę rekombinacji DNA wykorzystuje się nie tylko w tym celu, ale także do produkcji hormonów białkowych. Rzeczywiście trudno nazwać biochemicznym lub metoda fizjologiczna, które nie zostałyby przyjęte przez endokrynologów. 4

1.2. Przegląd nowoczesnych metod badania układu hormonalnego
Podczas badania pacjentów z podejrzeniem patologii endokrynologicznej, oprócz zbierania wywiadu o chorobie, badania i skarg pacjenta, stosuje się następujące metody diagnostyczne: ogólne metody laboratoryjne (kliniczne i biochemiczne), badania hormonalne, metody instrumentalne, metody genetyki molekularnej.
W większości przypadków badanie hormonalne nie ma klucza, ale wartość weryfikującą do postawienia diagnozy. Testów hormonalnych w ogóle nie stosuje się do diagnozowania szeregu chorób endokrynologicznych (moczówki prostej i cukrzycy); w niektórych przypadkach badania hormonalne mają wartość diagnostyczną jedynie w połączeniu ze wskaźnikami biochemicznymi (poziom wapnia w nadczynności tarczycy).
Badanie hormonalne może ujawnić zmniejszenie produkcji danego hormonu, wzrost i jego normalny poziom (Tabela 1). Najczęściej stosowany w praktyka kliniczna metody oznaczania hormonów to różne modyfikacje metoda radioimmunologiczna . Metody te opierają się na fakcie, że hormon znakowany radioaktywnie i hormon zawarty w materiale testowym konkurują ze sobą o wiązanie się z określonymi przeciwciałami: im więcej danego hormonu jest zawarte w materiale biologicznym, tym mniej cząsteczek znakowanego hormonu będzie się wiązać, gdyż stała liczba miejsc wiążących hormony w próbce. Ponad 20 lat temu Berson i Yalow zaproponowali metodę radioimmunologiczną do oznaczania insuliny.
Metoda ta opierała się na obserwacji, że we krwi obwodowej pacjentów z cukrzycą leczonych insuliną znajdowało się białko (później okazało się, że jest to globulina), które wiąże insulinę znakowaną 131I. Znaczenie tych danych i późniejszy rozwój testu radioimmunologicznego do oznaczania insuliny podkreśla przyznanie Yalowowi i Bersonowi Nagrody Nobla.
Wkrótce po pierwszych doniesieniach tych badaczy opracowano i opisano odpowiednie metody oznaczania innych hormonów w innych laboratoriach. W metodach tych wykorzystuje się przeciwciała lub białka surowicy, które wiążą określony hormon lub ligand i zawierają znakowany radioaktywnie hormon, który konkuruje ze standardowym hormonem lub hormonem obecnym w próbce biologicznej.
Zasada metoda radioreceptorowa zasadniczo nie różni się od testu radioimmunologicznego, tylko hormon zamiast wiązać się z przeciwciałami, wiąże się ze specyficznym receptorem hormonalnym błona plazmatyczna lub cytozol. Specyficzne receptory dla większości hormonów polipeptydowych znajdują się na powierzchnia zewnętrzna błonie komórkowej komórek, natomiast receptory dla biologicznie aktywnych steroidów, a także tyroksyny i trójjodotyroniny znajdują się w cytozolu i jądrach. Czułość analizy radioreceptorów jest niższa niż w przypadku testów radioimmunologicznych i większości metod biologicznych w układach in vitro. Aby hormon mógł oddziaływać ze swoim receptorem, musi mieć odpowiednią konformację, czyli być aktywny biologicznie. Możliwe jest, że hormon traci zdolność wiązania się ze swoim receptorem, ale nadal wchodzi w interakcję z przeciwciałami w systemie testów radioimmunologicznych. Ta rozbieżność odzwierciedla fakt, że przeciwciała i receptory „rozpoznają” różne części cząsteczki hormonu.
Zaproponowano szereg metod radioreceptorowych do analizy hormonalnej. Zazwyczaj pobiera się tkankę z narządów specyficznych dla danego hormonu i izoluje się z niej receptory, stosując standardowe techniki. Wyizolowane receptory błony komórkowej w osadzie są stosunkowo stabilne, gdy są przechowywane w temperaturach poniżej -20°C. Natomiast solubilizowane receptory hormonów polipeptydowych i steroidowych, wyizolowane z błon komórkowych lub cytozolu i niezwiązane z ligandami, okazują się niestabilne, co objawia się zmniejszeniem ich zdolności wiązania określone hormony, nawet jeśli były przechowywane w stanie zamrożonym, przez stosunkowo krótki czas.
Ostatnio najbardziej rozpowszechnione stały się metody nieradioaktywne. Jako standardowa metoda oznaczania różnych związków w chemii klinicznej, test immunologiczny charakteryzują się dobrą czułością, swoistością i szerokim zakresem zastosowań. W szczególności test immunologiczny służy do oznaczania hormonów. Do takich metod należą:

1) test immunoenzymatyczny (ELISA), test ELISA na fazie stałej typu ELISA lub homogeniczny test ELISA typu EMIT.

2) test immunologiczny fluorescencji (FIA), polegający na pomiarze wzmocnienia fluorescencji, wygaszenia lub polaryzacji lub na badaniu fluorescencji z rozdzielczością czasową.

3) test immunologiczny bio- lub chemiluminescencyjny.

Technika powinna:
1) mieć zastosowanie zarówno do dwumiejscowej analizy immunometrycznej białek, jak i do bezpośrednich testów konkurencyjnych haptenów opartych na zasadzie wiązania.
2) posiadać odpowiednią czułość, dokładność i zakres roboczy oznaczanych stężeń przy minimalnym rozrzucie wyników w całym zakresie.
3) łatwe do ulepszenia w celu dalszego zwiększenia czułości i uproszczenia analizy.
Potencjalnie technika powinna mieć możliwość doskonalenia i zastosowania do analiz innych substancji, analiz pozalaboratoryjnych i bez separacji oraz do jednoczesnego oznaczania kilku substancji (tzw. immunotest wielokrotny). Idealnym metodom immunologicznym najbardziej odpowiadają metody luminescencyjne lub fotoemisyjne, w których znacznik jest wykrywany poprzez rejestrację emisji światła.
Luminescencja to emisja światła przez substancję w stanie wzbudzonym elektronicznie. Istnieje kilka rodzajów luminescencji, różniących się jedynie źródłami energii przenoszącymi elektrony do stanu wzbudzonego, tj. na wyższy poziom energii, a mianowicie:
1) Radioluminescencja, w którym wzbudzenie odpowiedniego fluoroforu uzyskuje się poprzez absorpcję energii uwolnionej w procesie nieodwracalnego rozpadu promieniotwórczego. Wzbudzony fluorofor emituje światło, powracając do stanu podstawowego.
2) Chemiluminescencja, w którym wzbudzenie uzyskuje się w wyniku reakcji chemicznej (zwykle nieodwracalnej reakcji utleniania). Jeśli Reakcja chemiczna przeprowadzanych w układach biologicznych pod wpływem enzymów, wówczas zwykle używa się w tym przypadku terminu bioluminescencja. Jeśli reakcja chemiczna jest inicjowana wzrostem temperatury odczynników, wówczas ten rodzaj luminescencji nazywa się termochemiluminescencją, ale jeśli reakcję inicjuje potencjał elektryczny, wówczas odpowiednie zjawisko nazywa się elektrochemiluminescencją.
3) Fotoluminescencja, w którym wzbudzenie jest spowodowane fotonami światła podczerwonego, widzialnego lub ultrafioletowego. Fotoluminescencję można dalej podzielić na fluorescencję, w której wzbudzona cząsteczka szybko powraca do stanu pierwotnego poprzez stan singletowy, oraz fosforescencję, w której wzbudzona cząsteczka powraca do swojego stanu pierwotnego poprzez stan trypletowy. Emisja fosforescencji zanika znacznie wolniej. Emitowane kwanty światła mają dużą długość fali. Fotoluminescencja różni się od radio- i chemiluminescencji tym, że jest zwykle odwracalna, a zatem może być wielokrotnie indukowana w danym układzie (ponieważ powstanie wzbudzonego półproduktu i późniejsza jego inaktywacja przez emisję światła nie prowadzi do przemian chemicznych).
Oprócz tych metod na znaczeniu nie straciły całkowicie chemiczne metody oznaczania szeregu substancji (najczęściej metabolitów hormonów i ich prekursorów). Często wykorzystuje się je do oczyszczania frakcji białkowych i badania hormonów. chromatografia . Wyniki chromatografii cieczowej szerokie zastosowanie jako szybka i selektywna metoda analityczna służąca do rozdzielania i identyfikacji różnych substancji. Chromatografia cieczowa (LC) w wersji klasycznej (pod ciśnieniem atmosferycznym) oraz wysokoobrotowej czyli HPLC w temp wysokie ciśnienie krwi- optymalna metoda analizy cząsteczek niestabilnych chemicznie i termicznie, substancji wielkocząsteczkowych o obniżonej lotności, co tłumaczy się szczególną rolą fazy ruchomej: w odróżnieniu od eluentu gazowego w LC pełni ona nie tylko funkcję transportową. Charakter i struktura składników fazy ruchomej decydują o zachowaniu chromatograficznym rozdzielonych substancji. Do najbardziej typowych obiektów chromatografii cieczowej należą białka, kwasy nukleinowe, aminokwasy, barwniki, polisacharydy, materiały wybuchowe, leki, metabolity roślinne i zwierzęce. Chromatografię cieczową z kolei dzielimy na adsorpcję cieczową (rozdzielenie związków następuje ze względu na ich różną zdolność do adsorbowania i desorbowania z powierzchni adsorbentu), ciecz-ciecz lub dystrybucyjną (rozdzielenie odbywa się ze względu na różną rozpuszczalność w fazie ruchomej – eluent i faza stacjonarna, fizycznie zasorbowana lub chemicznie szczepiona na powierzchni stałego adsorbentu), chromatografia jonowymienna, w której rozdział następuje poprzez odwracalne oddziaływanie analizowanych substancji jonizujących z grupami jonowymi sorbentu – jon wymiennik. Szczególne miejsce w zastosowaniu metod chromatografii cieczowej w medycynie zajmuje chromatografia wykluczania lub chromatografia żelowa i powinowactwa lub chromatografia biospecyficzna. Ta wersja LC opiera się na zasadzie rozdzielania mieszaniny substancji według ich mas cząsteczkowych. W wyłączeniu (z angielskiego wykluczenia - wyjątek; przestarzała nazwa - sito) chromatografii, cząsteczki substancji rozdzielane są według wielkości ze względu na ich o różnych zdolnościach wniknąć w pory sorbentu. Fazą ruchomą jest ciecz, fazą stacjonarną jest ta sama ciecz, która wypełniła pory sorbentu (żel). Jeśli pory te będą niedostępne dla cząsteczek analitu, wówczas odpowiedni związek opuści kolumnę wcześniej niż ten o mniejszych rozmiarach cząsteczek. Cząsteczki lub jony, których rozmiary mieszczą się pomiędzy maksymalną a minimalną średnicą porów żelu, są podzielone na oddzielne strefy. Szczególnie intensywnie rozwinęła się chromatografia wykluczania w ciągu ostatnich dwóch dekad, co ułatwiło wprowadzenie do praktyki chemicznej i biochemicznej Sephadexu – żeli dekstranowych usieciowanych epichlorohydryną. Na różnych typach Sephadexu można frakcjonować substancje chemiczne o różnej masie cząsteczkowej, dlatego są one szeroko stosowane do izolacji i oczyszczania biopolimerów, peptydów, oligo- i polisacharydów, kwasów nukleinowych, a nawet komórek (limfocytów, erytrocytów) w produkcji przemysłowej różnych preparatów białkowych, w szczególności enzymów i hormonów. 5 Chromatografia powinowactwa charakteryzuje się wyjątkowo wysoką selektywnością właściwą interakcjom biologicznym. Często jedna procedura chromatograficzna może oczyścić pożądane białko tysiące razy. Uzasadnia to wysiłek wymagany do przygotowania sorbentu powinowactwa, co nie zawsze jest zadaniem łatwym ze względu na ryzyko utraty przez cząsteczki biologiczne zdolności do specyficznego oddziaływania podczas kowalencyjnego przyłączania do matrycy. 6
Badając stan funkcjonalny gruczołów dokrewnych, stosuje się następujące podejścia metodologiczne:
1. Określenie początkowego poziomu danego hormonu.
2. Oznaczanie poziomu hormonu w czasie z uwzględnieniem dobowego rytmu wydzielania.
3. Oznaczanie poziomu hormonu w warunkach próby funkcjonalnej.
4. Oznaczanie poziomu metabolitu hormonu.

Tabela 1. Patogeneza chorób endokrynologicznych 7

Najczęściej w praktyce klinicznej stosuje się oznaczenie podstawowego poziomu danego hormonu. Krew pobiera się zwykle na czczo rano, chociaż przyjmowanie pokarmu nie wpływa na produkcję wielu hormonów. Aby ocenić działania wielu gruczoły wydzielania wewnętrznego(tarczyca, przytarczyce) wystarczy ocena podstawowego poziomu hormonów. Przy określaniu podstawowego poziomu hormonu mogą pojawić się pewne trudności z powodu krążenia we krwi kilku form molekularnych tego samego hormonu. Przede wszystkim dotyczy to hormonu przytarczyc.
Większość hormonów krąży we krwi w postaci związanej z białkami nośnikowymi. Z reguły poziom wolnego, biologicznie aktywnego hormonu we krwi jest dziesiątki lub setki razy niższy niż całkowity poziom tego hormonu.
Poziomy większości hormonów mają charakterystyczną dobową dynamikę (dobowy rytm wydzielania), która bardzo często nabiera znaczenia klinicznego. Najważniejsza i ilustracyjna w tym zakresie jest dynamika produkcji kortyzolu (ryc. 1.1). 8

Innymi przykładami w tym zakresie są prolaktyna i hormon wzrostu, których rytm wydzielania jest również determinowany przez cykl snu i czuwania. Patogeneza wielu chorób endokrynologicznych opiera się na zakłóceniu dobowego rytmu produkcji hormonów.
Oprócz rytmu dobowego większość parametrów biologicznych może mieć odzwierciedlenie w poziomie hormonu we krwi. W przypadku wielu hormonów wartości referencyjne w dużej mierze zależą od wieku (ryc. 1.2) 9, płci i fazy cyklu menstruacyjnego.

Na poziom wielu hormonów wpływają nie tylko współistniejące choroby somatyczne i przyjmowane na nie leki, ale także takie czynniki, jak stres (kortyzol, adrenalina), warunki środowiskowe (poziom tyroksyny w regionach o różne zużycie jod), skład przyjmowanego dzień wcześniej pokarmu (peptyd C) i wiele innych.
Podstawowa zasada oceny aktywności przysadki zależnej ( tarczyca, kora nadnerczy, gonady) i szeregu innych gruczołów wydzielania wewnętrznego, polega na określeniu tzw. par diagnostycznych hormonów. W większości przypadków produkcja hormonów jest regulowana przez mechanizm ujemnego sprzężenia zwrotnego. Sprzężenie zwrotne może zachodzić pomiędzy hormonami należącymi do tego samego układu (kortyzol i ACTH) lub pomiędzy hormonami a ich biologicznym efektorem (parathormonem i wapniem). Ponadto nie musi istnieć bezpośrednia interakcja między hormonami tworzącymi parę. Czasami pośredniczą w tym inne czynniki humoralne, elektrolity i parametry fizjologiczne (objętość przepływu krwi przez nerki, poziom potasu i angiotensyna dla pary renina-aldosteron). Pojedyncza ocena wskaźników tworzących parę może prowadzić do błędnych wniosków.
Pomimo udoskonalenia metod analizy hormonalnej, testy funkcjonalne i dziś mają one ogromne znaczenie diagnostyczne w diagnostyce endokrynopatii. Testy funkcjonalne dzielą się na stymulacyjne i tłumiące (supresyjne). Ogólna zasada badania jest taka, że ​​w przypadku podejrzenia niewydolności gruczołu dokrewnego przepisuje się testy stymulacyjne, a w przypadku podejrzenia nadczynności gruczołu dokrewnego – testy tłumiące.
Oprócz oceny poziomu hormonów we krwi, w niektórych przypadkach oznaczenie ich wydalania z moczem może mieć pewną wartość diagnostyczną. Wartość diagnostyczna tych badań, np. określenia wydalania wolnego kortyzolu, jest znacznie mniejsza niż współczesnych testów funkcjonalnych. Podobnie, obecnie prawie całkowicie zaprzestano stosowania oznaczania wydalania metabolitów hormonów, a jedynym wyjątkiem jest oznaczanie poziomu metabolitów katecholamin w diagnostyce guza chromochłonnego.
W ostatnich latach upowszechniły się w pełni zautomatyzowane metody badań hormonalnych, co zmniejsza liczbę błędów, takich jak nieprawidłowe pobieranie, przechowywanie, poród i inne „czynniki ludzkie”.
Z metody instrumentalne W badaniach najczęściej wykorzystuje się ultradźwięki (USG), radiografię, tomografię komputerową (CT) i rezonans magnetyczny (MRI). Ponadto w endokrynologii używają specjalne metody: angiografia z selektywnym pobieraniem krwi wypływającej z gruczołu dokrewnego, badanie radioizotopowe (scyntygrafia tarczycy), densytometria kości. Główne metody instrumentalne stosowane w badaniu gruczołów dokrewnych przedstawiono w tabeli 2.
Metody badań genetyki molekularnej.
Szybki rozwój nauki w ciągu ostatnich kilkudziesięciu lat oraz badania z zakresu biologii molekularnej, genetyki medycznej, biochemii, biofizyki, ściśle powiązane z mikrobiologią, immunologią, onkologią, epidemiologią itp., doprowadziły do ​​powstania i aktywnego wdrażania molekularnych biologiczne laboratoria diagnostyczne metody badania genomu człowieka, zwierząt, roślin, bakterii i wirusów. Metody te nazywane są najczęściej badaniami DNA.
Metody badań DNA pozwalają na wczesne i więcej pełna diagnostyka różne choroby, terminowo przeprowadzaj diagnostykę różnicową i monitoruj skuteczność terapii. Aktywny rozwój metod diagnostyki DNA i ich wprowadzanie do praktyki sugeruje, że niedaleki jest moment, w którym metody te w znaczący sposób zawężą zakres zadań bardziej tradycyjnych badań diagnostycznych, takich jak metody cytogenetyczne, i być może wyprzedzą je z medycyny praktycznej do sfera naukowa.

Tabela 2. Podstawowe metody instrumentalne
badania gruczołów dokrewnych 10

Obecnie istnieją dwa obszary diagnostyki DNA: analiza hybrydyzacyjna kwasów nukleinowych oraz diagnostyka z wykorzystaniem reakcji łańcuchowej polimerazy.
Natychmiast wprowadzono do praktyki PCR, co umożliwiło podniesienie diagnostyki medycznej na wyższy standard. nowy poziom. Metoda stała się tak popularna, że ​​dziś trudno sobie wyobrazić pracę w dziedzinie biologii molekularnej bez jej zastosowania. Szczególnie szybki rozwój Metoda PCR otrzymane dzięki międzynarodowemu programowi „Human Genome”. Powstały nowoczesne technologie sekwencjonowania (rozszyfrowania sekwencji nukleotydów DNA). Jeśli w niedawnej przeszłości odszyfrowanie DNA o długości 250 par nukleotydów (pz) zajmowało tydzień, nowoczesne automatyczne sekwencery są w stanie określić do 5000 pz. na dzień. To z kolei przyczynia się do znacznego wzrostu baz danych zawierających informacje o sekwencjach nukleotydów w DNA. Obecnie zaproponowano różne modyfikacje PCR, opisano dziesiątki różnych zastosowań tej metody, w tym „long-PCR”, który pozwala na kopiowanie ultradługich sekwencji DNA. Za odkrycie PCR K. W. Mullis otrzymał w 1993 roku Nagrodę Nobla w dziedzinie chemii.
Wszystkie podejścia do diagnostyki genów można podzielić na kilka głównych grup:
1. Metody identyfikacji określonych odcinków DNA.
2. Metody wyznaczania pierwszorzędowej sekwencji nukleotydów w DNA.
3. Metody oznaczania zawartości i analizy DNA cykl komórkowy. 11
PCR pozwala znaleźć w badanym materiale niewielką część informacji genetycznej zawartej w określonej sekwencji nukleotydów DNA dowolnego organizmu spośród ogromnej liczby innych odcinków DNA i wielokrotnie ją pomnożyć. PCR jest „in vitro” analogiem biochemicznej reakcji syntezy DNA w komórce.
PCR jest procesem cyklicznym, w każdym cyklu, w którym następuje termiczna denaturacja podwójnej nici docelowego DNA, późniejsze dodanie krótkich starterów oligonukleotydowych i ich przedłużenie za pomocą polimerazy DNA poprzez dodanie nukleotydów. W rezultacie gromadzi się duża liczba kopii pierwotnego docelowego DNA, które można łatwo wykryć.
Odkrycie PCR zaowocowało natychmiastowym zastosowaniem tej metody w praktyce. W 1985 roku opublikowano artykuł opisujący system testowy oparty na PCR do diagnozowania anemii sierpowatokrwinkowej. Od 1986 r. Do chwili obecnej PCR poświęcono ponad 10 000 publikacji naukowych. Perspektywy zastosowania PCR wydają się więcej niż imponujące. 12
Metody badań cytochemicznych.
Metody te stanowią warianty opisanych badań biologicznych in vitro. Zwykle mają większą czułość niż metody radioimmunologiczne, ale są znacznie bardziej kłopotliwe i droższe w przeliczeniu na oznaczenie. Wyniki badań cytochemicznych i biologicznych ocenia się ilościowo na skrawkach histologicznych za pomocą specjalnego urządzenia – mikrodensytometru.
Skrawki histologiczne przygotowuje się z tkanek specyficznych dla hormonu lub komórek docelowych, które zostały wcześniej wystawione na działanie hormonu standardowego i testowego o różnych stężeniach. Za pomocą densytometru skanuje się obszar o średnicy 250–300 nm w celu ilościowego określenia reakcji barwnej spowodowanej zmianą stanu redoks obiektu pod wpływem stymulacja hormonalna. Do analizy ilościowej wykorzystuje się barwniki histologiczne wrażliwe na te zmiany.
Opracowano pierwszy system cytochemicznych testów biologicznych dla ACTH, a tkanką docelową w tym systemie była kora nadnerczy. Inne metody biologicznego oznaczania ACTH są albo zbyt nieczułe, albo wymagają dużych objętości osocza. Zatem cytochemiczne określenie stanu redoks tkanki jest cennym sposobem analizy normalnej i zmienionej funkcji układu podwzgórze-przysadka-nadnercza na podstawie poziomów ACTH.
Opracowano cytochemiczną metodę oznaczania LH, lecz napotkano znaczne trudności związane ze znacznymi wahaniami wyników różnych oznaczeń oraz zmienną czułością obiektu, która może odzwierciedlać znane różnice biologiczne u różnych zwierząt. Zaproponowano czułe, specyficzne metody cytochemiczne do oznaczania parathormonu, ADH i tyreotropiny.
W miarę dalszego udoskonalania aparatury, co zwiększy liczbę badań w jednym oznaczeniu, metoda ta może znaleźć szersze zastosowanie. Jest szczególnie atrakcyjna, ponieważ nie wymaga stosowania związków radioaktywnych. Metody cytochemiczne nie są powszechnie stosowane w klinice i wykorzystywane są głównie jako metoda czuła w badaniach naukowych. 13

1.3. Nowoczesne metody badania układu hormonalnego na przykładzie badania tarczycy
W mojej pracy o ograniczonym zakresie rozważę nowoczesne metody badania układu hormonalnego w stanach normalnych i patologicznych na przykładzie badania gruczołu dokrewnego, co jest istotne ze względu na dużą częstość występowania chorób tarczycy w Republice Baszkortostanu.
1. Badanie USG.
USG pozwala na weryfikację raczej subiektywnych danych palpacyjnych. Do badań optymalne są czujniki o częstotliwości 7,5 MHz i 10 MHz. Obecnie wykorzystuje się mapowanie kolorowego Dopplera, które pozwala na wizualizację małych naczyń w tarczycy oraz dostarcza informacji o kierunku i średniej prędkości przepływu. Możliwości metody zależą od doświadczenia i kwalifikacji specjalisty prowadzącego badania. Zasada metody polega na tym, że ultradźwięki wysyłane w częstych impulsach przenikają do narządów człowieka, odbijają się na styku ośrodków o różnym oporze ultradźwiękowym, są odbierane przez urządzenie i odtwarzane na ekranie i papierze ultrafioletowym. Metoda jest nieszkodliwa i nie ma przeciwwskazań (ryc. 1.3).

Ryc.1.3. USG tarczycy.
Kompleksowe badania USG z wykorzystaniem mapowanie kolorowego Dopplera (CDC), (ryc. 1.4). 14

Ryż. 1.4. AIT z powstawaniem guzków tarczycy w trybie CD.
2. Biopsja cienkoigłowa tarczycy.
Biopsja cienkoigłowa tarczycy jest jedyną metodą przedoperacyjną pozwalającą na bezpośrednią ocenę zmian strukturalnych i ustalenie parametrów cytologicznych formacji tarczycy. Skuteczność uzyskania odpowiedniego materiału cytologicznego podczas biopsji cienkoigłowej znacznie wzrasta, jeśli tę diagnostykę przeprowadza się pod kontrolą USG, co pozwala na identyfikację najbardziej zmienionych obszarów tarczycy, a także dobranie optymalnego kierunku i głębokości przebicia. 15

3. Badanie cytologiczne.
Diagnostyka cytologiczna formacji tarczycy opiera się na zestawie pewnych cech, takich jak ilość uzyskanego materiału, jego skład komórkowy, cechy morfologiczne komórek i ich grup strukturalnych, jakość rozmazu itp.
4. Badanie radioizotopowe (skanowanie), scyntygrafia.
Skanowanie radioizotopowe (skanowanie) to metoda uzyskania za pomocą skanera dwuwymiarowego obrazu odzwierciedlającego rozmieszczenie radiofarmaceutyku w różnych narządach.


Ryc.1.6. Wynik skanowania radioizotopowego
Tarczyca

Skanowanie pozwala określić wielkość tarczycy, intensywność gromadzenia się w niej i w jej poszczególnych obszarach radioaktywnego jodu, co pozwala ocenić stan funkcjonalny zarówno całego gruczołu, jak i formacji ogniskowych (ryc. 1.6).
Scyntygrafia- metoda obrazowania funkcjonalnego, polegająca na wprowadzeniu do organizmuizotopy radioaktywneoraz uzyskanie obrazu poprzez określenie emitowanego promieniowanie . Pacjent jest dany wskaźnik radiowy - lek składający się z cząsteczki wektora i znacznika radioaktywnego. Cząsteczka wektora jest wchłaniana przez określoną strukturę ciała (narząd, ciecz). Znacznik radioaktywny pełni rolę „nadajnika”: emituje promienie gamma, które są rejestrowane przez kamerę gamma. Ilość podawanego radiofarmaceutyku jest taka, aby emitowane przez niego promieniowanie było łatwo wychwytywane, lecz nie miało ono toksycznego działania na organizm.
Do scyntygrafii tarczycy najczęściej stosowanym izotopem technetu jest nadtechnecjan 99m Tc. Stosowanie jodu 131 ogranicza się do identyfikacji funkcjonujących przerzutów raka tarczycy. W diagnostyce wola podmostkowego i nieprawidłowego, a także w niektórych przypadkach wrodzonej niedoczynności tarczycy (miażdżyca, dystopia, defekty organizacyjne) stosuje się jod 123. 16
5. Oznaczanie poziomu TSH i hormonów tarczycy.
Badanie poziomu TSH i hormonów tarczycy (wolnej tyroksyny i trójjodotyroniny) wskazane jest u każdej osoby z podejrzeniem patologii tarczycy. Obecnie bardziej celowe jest badanie wolnych frakcji hormonów tarczycy w połączeniu z oznaczaniem poziomu TSH.
6. Oznaczanie poziomu tyreoglobuliny we krwi.
Podwyższona zawartość tyreoglobuliny we krwi jest charakterystyczna dla wielu chorób tarczycy i jest wykrywana w ciągu 2-3 tygodni po biopsji nakłuciowej, a także w ciągu 1-2 miesięcy po operacji tarczycy.
7. Oznaczanie poziomu kalcytoniny we krwi.
U chorych, u których w rodzinie występował rak rdzeniasty tarczycy (zespół nowotworów wieloendokrynnych typu 2 i 3), należy oznaczyć stężenie kalcytoniny we krwi. We wszystkich pozostałych przypadkach oznaczanie kalcytoniny nie jest wskazane.
Prawidłowy poziom kalcytoniny we krwi nie przekracza 10 pg/ml, a poziom tego markera, przekraczający 200 pg/ml, jest najważniejszym kryterium diagnostycznym raka rdzeniastego tarczycy.

8. Badanie czynności tarczycy.
Testy czynności tarczycy to badania krwi stosowane w celu oceny efektywności pracy tarczycy. Testy te obejmują test hormonu tyreotropowego (TSH), test tyroksyny (T4), test trijodotyroniny (T3), test globuliny wiążącej tyroksynę (TBG), test trójjodotyroniny smoły (T3RU) i test długotrwałego stymulacji tarczycy (LATS).) .
Badania czynności tarczycy służą do:

pomoc w diagnostyce niedoczynności tarczycy (niedoczynności tarczycy) i nadczynności tarczycy (nadczynności tarczycy)
ocena czynności tarczycy
monitorowanie odpowiedzi na leczenie tarczycy

Większość uważa za wrażliwe badanie hormonu tyreotropowego (TSH). najdokładniejszy wskaźnik aktywności tarczycy. Mierząc poziom TSH, lekarze mogą wykryć nawet drobne problemy z tarczycą. Ponieważ ten test jest bardzo czuły, odchylenia w Funkcja tarczycy można rozpoznać jeszcze zanim pacjent zacznie skarżyć się na objawy.
TSH nakazuje tarczycy wydzielanie hormonów tyroksyny (T4) i trójjodotyroniny (T3). Przed zastosowaniem testów TSH wykonywano standardowe badania krwi, mierząc poziomy T4 i T3, aby określić, czy tarczyca pracuje prawidłowo. Test trójjodotyroniny (T3) mierzy ilość tego hormonu we krwi. T3 występuje zwykle w bardzo małych ilościach, ale ma znaczący wpływ na metabolizm. Jest aktywnym składnikiem hormonów tarczycy.

Test na globulinę wiążącą tyroksynę (TBG). bada poziom tej substancji produkowanej w wątrobie we krwi. GTD wiąże się z T3 i T4, zapobiegając wypłukiwaniu hormonów z krwi przez nerki i uwalniając je wtedy i tam, gdzie są potrzebne do regulacji funkcji organizmu.
Test wychwytu smoły trijodotyroninowej (T3RU) mierzy poziom T4 we krwi. Analiza laboratoryjna Wykonanie tego testu zajmuje kilka dni i jest stosowane rzadziej niż testy, których wyniki są dostępne szybciej.
Test długo działającego stymulatora tarczycy (LATS) wskazuje, czy krew zawiera długo działający środek pobudzający tarczycę. Jeśli LATS występuje nieprawidłowo we krwi, powoduje, że tarczyca wytwarza i uwalnia nienormalnie duże ilości hormonów.
9. Komputer, rezonans magnetyczny, transmisyjna tomografia optyczna.

CT i MRI to nieinwazyjne metody o dużej zawartości informacji, które pozwalają na wizualizację tarczycy. Badania te są jednak obecnie wykonywane dość rzadko ze względu na wysoki koszt i małą dostępność odpowiedniej aparatury. Oprócz oceny lokalizacji tarczycy, jej konturów, kształtu, wielkości, struktury, związku z sąsiednimi tkankami, wielkości i budowy regionalnych węzłów chłonnych, CT pozwala określić gęstość densytometryczną formacji w tarczycy. Zarówno CT, jak i MRI są metodami z wyboru w diagnostyce wola podmostkowego. Tomografia komputerowa (CT) jest metodą badania rentgenowskiego polegającą na nierównomiernym pochłanianiu promieniowania rentgenowskiego przez różne tkanki organizmu, stosowaną głównie w diagnostyce patologii tarczycy, okolicy jamy brzusznej (wątroba, pęcherzyk żółciowy, trzustka, nerki, nadnercza itp.)
Tomografia komputerowa pozwala uzyskać informacje o konfiguracji, rozmiarze, lokalizacji i zasięgu dowolnej formacji, ponieważ metoda ta rozróżnia tkanki twarde i miękkie na podstawie gęstości.
Rezonans magnetyczny (MRI) - metoda instrumentalna diagnostyka, za pomocą której w endokrynologii ocenia się stan układu podwzgórze-przysadka-nadnercza, szkieletu, narządów jamy brzusznej i miednicy.
MRI pozwala uzyskać informacje o konfiguracji kości, wielkości, lokalizacji i zasięgu dowolnej formacji, ponieważ metoda ta różnicuje tkanki twarde i miękkie na podstawie gęstości.
W ostatnich latach badanie MRI zyskuje coraz większe znaczenie w diagnostyce patologii okolicy podwzgórzowo-przysadkowej i staje się metodą z wyboru w badaniu pacjentów z podejrzeniem zmian w tym właśnie obszarze (ryc. 1.7).


Ryc.1.7. Przygotowanie do rezonansu magnetycznego.
Podczas rezonansu magnetycznego ruchomy stół z pacjentem przemieszcza się przez „tunel”, który generuje pole elektromagnetyczne, które z kolei wytwarza promieniowanie, które pozwala uzyskać trójwymiarowy obraz wewnętrznej struktury ciała.

Choroby diagnozowane za pomocą MRI:

? guzy przysadki mózgowej (npprolaktynoma , choroba Itzenki-Cushinga)

? guzy nadnerczy (np. zespół Cushinga, aldosteroma, guz chromochłonny)

? osteoporoza

? itd.

Zalety rezonansu magnetycznego:

? pozwala uzyskać profile o grubości 2-3 mm w dowolnej płaszczyźnie

? umiejętność oceny na podstawie charakteru sygnału nie tylko obecności formacji, ale także jej Struktura wewnętrzna(krwotoki, cysty itp.)

? brak narażenia pacjenta na promieniowanie jonizujące i prawie całkowita nieszkodliwość, co jest ważne podczas badania dzieci, a także, w razie potrzeby, powtarzanych powtarzanych badań.

Jeszcze nowocześniejszą metodą tomografii, ale jeszcze niewprowadzoną szerzej do praktyki, jest transmisyjna tomografia optyczna (TOT), która wykorzystuje promieniowanie bliskiej podczerwieni o małej mocy (rzędu kilkudziesięciu mW) i jest praktycznie nieszkodliwe dla człowieka (ryc. 1.8.). Potencjalne korzyści TOT wykraczają daleko poza bezpieczeństwo. Zastosowanie promieniowania IR, które jest dobrze absorbowane przez hemoglobinę w stanie oksy i deoksy (przy różnych długościach fal), pozwala uzyskać przestrzenny rozkład stopnia utlenowania tkanek, co jest niemożliwe w przypadku innych technik. Zastosowanie promieniowania o określonych długościach fal umożliwi także określenie przestrzennego rozkładu NAD, NAD+ (NADH), tryptofanu, różnych cytochromów (bilirubiny, melaniny, oksydazy cytochromowej) oraz stężenia wody. Wszystko to pozwala nie tylko skutecznie i terminowo zdiagnozować szereg chorób (dysplazja, nowotwory, zakrzepica, krwiaki), ale także uzyskać informacje o procesach metabolicznych i funkcjonowaniu różnych narządów w czasie. W szczególności tomografia optyczna umożliwi obserwację w czasie rzeczywistym przestrzennego rozkładu nasycenia tkanek wodą i współczynnika pH. 17

Ryż. 1.8. System CTLM jest jednym z pierwszych na świecie seryjnych tomografów optycznych.
10. Badanie immunohistochemiczne tkanki guza tarczycy.
Przeprowadza się je w tkance nowotworów tarczycy uzyskanej w wyniku operacji. Głównym celem tego badania jest prognostyka. W tkance tarczycy określa się obecność substancji takich jak p53 (gen supresorowy wzrostu guza), CD44, Met (proteoglikany odpowiedzialne za przerzuty), PTC, ras-onkogeny (onkogeny regulujące progresję nowotworu) i inne. Najważniejszą rzeczą w praktyce klinicznej jest wykrycie immunoreaktywności s. 53, Met i PTC w tkance raka tarczycy. Obecność tych markerów w tkance nowotworowej świadczy o szybkim (w ciągu 2-5 miesięcy) rozwoju choroby przerzutowej u operowanego pacjenta. Badanie jest drogie i wymaga specjalnego sprzętu laboratoryjnego. Obecnie oznaczanie markerów nowotworowych przeprowadza się głównie w specjalistycznych klinikach onkologicznych dla określonych wskazań, a mianowicie jeśli u pacjenta występują inne objawy prognostyczne wznowy nowotworu lub rozwoju choroby przerzutowej (słabo zróżnicowany rak tarczycy, wiek pacjenta powyżej 55 lat, inwazja otaczających tkanek przez guz itp.). 18
11. Metody immunologiczne.
Metody immunologiczne obejmują przede wszystkim test immunoenzymatyczny (ELISA). ELISA to metoda wykrywania antygenów lub przeciwciał, polegająca na oznaczeniu kompleksu antygen-przeciwciało ze względu na:

wstępne utrwalenie antygenu lub przeciwciała na podłożu;
dodanie próbki testowej i związanie utrwalonego antygenu lub przeciwciała z docelowym antygenem lub docelowym przeciwciałem;
późniejsze dodanie antygenu lub przeciwciała znakowanego znacznikiem enzymatycznym i jego detekcja przy użyciu odpowiedniego substratu, który pod wpływem enzymu zmienia swoją barwę. Zmiana koloru mieszaniny reakcyjnej wskazuje na obecność cząsteczki docelowej w próbce.Oznaczanie produktów reakcje enzymatyczne Podczas badania próbek testowych porównuje się je z próbkami kontrolnymi.

Przed pojawieniem się metod ELISA diagnostyka chorób tarczycy opierała się na analizie obrazu klinicznego, który nie zawsze jednoznacznie odzwierciedla rozwój patologii i objawia się w dość późnym stadium. Obecnie metody ELISA są głównymi metodami wykrywania nieprawidłowości w funkcjonowaniu tarczycy, diagnostyki różnicowej i monitorowania leczenia. 19
Badanie poziomu przeciwciał przeciwtarczycowych – metoda immunochemiluminescencyjna. Badano częstość występowania przeciwciał przeciwko antygenom tkanki tarczycy: tyreoglobulinie, peroksydazie tarczycowej i receptorowi TSH u pacjentów z wolem rozlanym toksycznym i oftalmopatią endokrynną. W badaniu u takich pacjentów występuje wysoki poziom przeciwciał przeciwko receptorowi TSH, który zmniejsza się w trakcie terapii tyreostatykami. 20 Wykazano, że oznaczenie przeciwciał przeciwko receptorowi TSH i tyreoglobulinie powinno stanowić dodatkowe kryterium diagnostyczne w trakcie badania. 21
Metody oznaczania przeciwciał przeciwko receptorowi TSH:
1. Definicja TBII
1.1. Metoda radioreceptorowa
1.1.1. Stosowanie świńskiego rTSH (TRAK)
1.1.2. Stosowanie ludzkiego rTSH wyrażanego przez komórki CHO (CHO-R)
1.1.3. Stosowanie rTSH wyrażanego w komórkach białaczkowych (K562)
1.2. FACS
1.3. Immunoprecypitacja
2. Biologiczne metody oznaczania przeciwciał stymulujących (TSAb) i blokujących (TBAb).
2.1. Ocena produkcji cAMP (określona za pomocą RIA)
2.1.1. w komórkach FRTL-5
itp.................

Większość narządów dokrewnych jest niedostępna do bezpośredniego badania, z wyjątkiem tarczycy i gonad, dlatego stan gruczołów dokrewnych często należy oceniać na podstawie zespołów klinicznych charakterystycznych dla nadczynności lub niedoczynności zajętego gruczołu oraz wskaźników homeostazy.

Badanie kliniczne układu hormonalnego u dzieci polega na zapoznaniu się z dolegliwościami, historią choroby i życia dziecka, w tym cech genetycznych rodziny, obiektywnym badaniem wszystkich narządów i układów dziecka oraz oceną danych z dodatkowych metod badawczych.

Ogólne badanie pacjenta

Podczas zewnętrznego badania dziecka zwraca się uwagę na proporcjonalność budowy ciała. Następnie przeprowadzana jest ocena rozwój fizyczny dziecka na podstawie których można rozpoznać zaburzenia wzrostu. Stopień rozwój fizyczny u dzieci:

Biorąc pod uwagę obserwowane zróżnicowanie różnych wskaźników rozwoju fizycznego dziecka, konieczna jest znajomość tzw. rozkładu normalnego, czyli Gaussa-Laplaciana. Cechami charakterystycznymi tego rozkładu są średnia arytmetyczna wartości atrybutu lub wskaźnika (M) oraz wartość odchylenia standardowego, czyli sigma (δ). Wartości przekraczające normę M ± 2δ dla zdrowych dzieci z reguły wskazują na patologię.

W praktyce szacunki indykatywne zachowują swoje znaczenie, przy czym należy stosować następującą regułę empiryczną: losowa zmienność cechy zmieniająca się wraz z wiekiem zwykle nie wykracza poza jeden przedział wiekowy; wartość znaku może mieć charakter patologiczny, jeżeli jego wartość mieści się w przedziale + 1-2 przedziały wiekowe. Przedziały wiekowe w tabelach norm są zwykle wybierane w następujący sposób: od urodzenia do jednego roku odstęp wynosi miesiąc, od 1 roku do 3 lat - 3 miesiące, od 3 do 7 lat - 6 miesięcy, od 7 do 12 lat lata - jeden rok.

Aby dokładnie określić wskaźniki rozwoju fizycznego, pediatra musi skorzystać z tabel (lub krzywych) rozkładu centylowego wieku. Praktyczne wykorzystanie tych tabel (wykresów) jest niezwykle proste i wygodne. Kolumny tabel centylowych lub krzywe graficzne pokazują ilościowe granice cechy w określonej proporcji lub odsetku (centylu) dzieci w tym wieku i płeć. W tym przypadku wartości charakterystyczne dla połowy zdrowych dzieci w danym wieku i płci – w przedziale od 25 do 75 centyla – przyjmuje się jako wartości średnie lub warunkowo normalne.

Karłowatość przysadkowa charakteryzuje się spowolnieniem wzrostu bez zmiany proporcji ciała. O karłowatości można pomyśleć, jeśli wzrost dziecka pozostaje w tyle za tym, co powinno być i wykracza poza M-3δ (w serii sigma), poniżej granic 3. centyla (w tabelach centylowych) lub SDS<-2. Рост взрослого мужчины-карлика не превышает 130 см, рост женщины - менее 120 см.

W przypadku niedoczynności tarczycy występuje opóźnienie wzrostu z naruszeniem proporcji ciała - krótkie kończyny. Twarz ma charakterystyczny wygląd: szeroki, płaski grzbiet nosa, szeroko rozstawione oczy (hiperteloryzm), względną przewagę czaszki twarzowej, duży, gruby język, grube wargi i inne objawy niedoczynności tarczycy.

Przyspieszenie wzrostu jest charakterystyczne dla gigantyzmu przysadkowego, w którym wzrost przekracza wymaganą wysokość o ponad 15% (powyżej 97. centyla, SDS = +2) i tyreotoksykozy. Proporcje ciała nie zmieniają się w przypadku żadnej choroby.

Jeśli nadczynność przysadki mózgowej objawia się po zamknięciu płytek wzrostowych, rozwija się akromegalia - powiększenie nosa, dłoni i stóp, masywna żuchwa i mocno wystające łuki brwiowe.

Badanie, palpacja i ocena stanu skóry. W niedoczynności tarczycy obserwuje się bladą skórę z żółtawym odcieniem, szarawą marmurkowatością i suchością. Bladość woskowa jest charakterystyczna dla guzów przysadki mózgowej.

Fioletowo-niebieskawe zabarwienie skóry twarzy obserwuje się przy nadczynności kory nadnerczy (zespół i choroba Cushinga).

Przebarwienia skóry (brązowy odcień) obserwuje się przy niewydolności nadnerczy.

Rozstępy (rozstępy) są charakterystyczne dla zespołu Cushinga i otyłości podwzgórzowej.

Suchość skóry obserwuje się w cukrzycy i moczówce prostej; Ponadto w cukrzycy może wystąpić swędzenie skóry i czyraczność.

Zwiększone nawilżenie skóry obserwuje się w tyreotoksykozie, stanach hipoglikemii i hiperinsulinizmie.

Stan włosów. Suche, szorstkie i łamliwe włosy są charakterystyczne dla niedoczynności tarczycy. Hirsutyzm (nadmierny wzrost włosów typu męskiego w obszarach zależnych od androgenów) i nadmierne owłosienie (nadmierny wzrost włosów w obszarach niezależnych od androgenów) są związane z nadczynnością kory nadnerczy.

Wirylizacja- zmiany w zewnętrznych żeńskich narządach płciowych typu męskiego - obserwowane przy wrodzonych dysfunkcjach kory nadnerczy, przy nowotworach nadnerczy lub jajników.

Kontrola, palpacja i ocena rozmieszczenia tkanki tłuszczowej podskórnej. Nadmierna ilość tkanki podskórnej o równomiernym rozmieszczeniu jest charakterystyczna dla otyłości konstytucjonalnie-egzogennej, odżywczej i międzymózgowiowej.

W chorobie i zespole Itenko-Cushinga obserwuje się nadmierne odkładanie się tłuszczu podskórnego w okolicy obręczy barkowej, 7. kręgu szyjnego, klatki piersiowej i brzucha.

Otyłość mózgowa charakteryzuje się dziwnym rozmieszczeniem tkanki podskórnej, na przykład na zewnętrznej powierzchni barku, wewnętrznej stronie ud itp.

Wyróżnia się 4 stopnie otyłości:

I stopień – nadmierna masa ciała wynosi 15-25% wymaganej ilości,

II stopień - -»- -»- od 25 do 50% -»-

III stopień - -»- -»- 50-100% -»-

IV stopień - -»- -»- ponad 100%.

Ważnym kryterium otyłości jest wskaźnik masy ciała (Quetelet) (BMI) - stosunek masy ciała w kg do wzrostu (w m2). Otyłość definiuje się jako BMI przekraczające 95 centyla dla danego wieku i płci.

W organizmie tłuszcz znajduje się 1) w tkance podskórnej (tłuszcz podskórny) i 2) wokół narządów wewnętrznych (tłuszcz trzewny). Nadmiar tłuszczu podskórnego w okolicy brzucha i tłuszcz trzewny w jamie brzusznej powodują otyłość brzuszną. lub typ „górny”. Ten typ rozkładu tłuszczu można wyróżnić mierząc obwody: talii (WA) – poniżej dolnej krawędzi żeber powyżej pępka, bioder (HT) – na wysokości maksymalnie wystającego punktu pośladków oraz obliczanie współczynnika WC/CV. Wartości WC/BV powyżej 0,9 u mężczyzn i powyżej 0,8 u kobiet wskazują na obecność otyłości brzusznej. I odwrotnie, gdy wartości WC/TB są równe lub mniejsze niż 0,7, stwierdza się otyłość „dolną”, czyli udowo-pośladkową.

Zmniejszenie rozwoju tkanki tłuszczowej podskórnej jest charakterystyczne dla choroby Simmondsa (zanik przysadki mózgowej), tyreotoksykozy i cukrzycy przed leczeniem.

Ocena rozwoju neuropsychicznego i stanu układu nerwowego

Niedoczynność tarczycy charakteryzuje się opóźnieniem w rozwoju umysłowym, podczas gdy tyreotoksykoza charakteryzuje się przyspieszeniem procesów umysłowych, gniewem, drażliwością, płaczliwością, delikatnym drżeniem powiek, palców, niestabilnością autonomicznego układu nerwowego.

W przypadku karłowatości przysadkowej i dystrofii tłuszczowo-płciowej obserwuje się infantylizm umysłowy; z niedoczynnością przytarczyc, zwiększoną pobudliwością nerwowo-mięśniową (dodatnie objawy Trousseau i Chvostka).

Następnie badane są gruczoły dokrewne dostępne do obiektywnego badania.

Metody badania tarczycy:

Kontrola. Tarczycy zwykle nie widać gołym okiem i nie można jej wyczuć palpacyjnie. Po badaniu można określić stopień powiększenia tarczycy. Począwszy od drugiego (wraz ze wzrostem stopnia I nie jest to widoczne dla oka). Ponadto podczas badania ujawniają się objawy charakterystyczne dla zmniejszenia lub zwiększenia funkcji gruczołu: stan skóry, tkanki podskórnej, rozwój fizyczny, objawy oczne (wytrzeszcz oczu, objawy Dalrymple'a - poszerzenie szpary powiekowej , Jellinek – pigmentacja powiek, Kraus – rzadkie mruganie, Graefe – opóźnienie powieki górnej przy patrzeniu w dół, Möbius – naruszenie zbieżności – gdy obiekt zbliża się do oczu, najpierw zbiegają się one, a następnie jedno oko mimowolnie przesuwa się w bok ).

Palpacja Tarczycę wykonuje się kciukami obu rąk, które znajdują się na przedniej powierzchni, a pozostałe palce umieszcza się z tyłu szyi. U niemowląt badanie palpacyjne można wykonywać kciukiem i palcem wskazującym jednej ręki. Podczas dotykania gruczołu u starszych dzieci proszone są o wykonanie ruchu połykającego, przy czym gruczoł przesuwa się w górę, a jego przesuwanie się w tym momencie po powierzchni palców ułatwia badanie palpacyjne.

Cieśń tarczycy bada się przesuwając ruchami kciuka jednej ręki wzdłuż linii środkowej szyi w kierunku od góry do dołu. Cieśń znajduje się na przedniej powierzchni tchawicy, poniżej chrząstki tarczowatej i sięga do trzeciego pierścienia tchawicy. Płaty gruczołu znajdują się po obu stronach tchawicy i krtani, docierając do 5-6 pierścienia tchawicy.

Podczas badania palpacyjnego tarczycy należy zwrócić uwagę na jej wielkość, cechy powierzchni, charakter powiększenia (rozproszony, guzkowy, guzkowy), konsystencję (twardą lub miękką sprężystą), pulsację, ból.

Terminu „wole” używa się, gdy tarczyca jest powiększona.

Obecnie w użyciu Klasyfikacja WHO 2001, biorąc pod uwagę trzy stopnie kliniczne powiększenia tarczycy:

Stopień 0 – tarczyca nie jest powiększona

I stopień - tarczyca jest wyczuwalna

II stopień – wole jest wyczuwalne i widoczne gołym okiem

Osłuchiwanie badanie tarczycy wykonuje się za pomocą fonendoskopu, który przykłada się do gruczołu. Kiedy wzrasta funkcja gruczołu, często słychać nad nim szmer naczyniowy. U starszych dzieci osłuchiwanie przeprowadza się na wstrzymującym oddechu.

Dodatkowe metody badania, stosowany w diagnostyce chorób tarczycy u dzieci:

Badanie USG – służy do oceny wielkości i budowy gruczołu;

Badanie USG z dopplerografią – ocenia przepływ krwi w gruczole;

Biopsja cienkoigłowa jest badaniem cytologicznym punkcików, stosowanym w guzowatych postaciach wola w celu określenia komórkowego charakteru węzłów;

Oznaczanie stężenia hormonów w surowicy krwi: tyroksyny (T-4), trójjodotyroniny (T-3) i hormonu tyreotropowego (TSH). T-4 i T-3 we krwi są w stanie wolnym i związanym z białkami. Aktywność hormonalna zależy od stężenia wolnych frakcji hormonów tarczycy, dlatego do oceny stanu funkcjonalnego tarczycy konieczne jest badanie wolnych frakcji T-3 i T-4;

5) Scyntygrafia izotopowa - pozwala na diagnostykę hormonalnie czynnych i/lub nieaktywnych formacji, zwłaszcza małych, u dzieci powyżej 12. roku życia.

Test immunologiczny enzymatyczny lub test radioimmunologiczny

A) Przeciwciała przeciwko peroksydazie tarczycowej (TPO) i frakcjom antygenów mikrosomalnych (MAG) – stosowane w diagnostyce procesu autoimmunologicznego w przewlekłym autoimmunologicznym zapaleniu tarczycy;

B) Przeciwciała przeciwko receptorom TSH – badane w kierunku podejrzenia wola rozlanego toksycznego (choroba Gravesa-Basedowa);

C) Podczas obserwacji chorych operowanych z powodu raka tarczycy (tylko w przypadku całkowitej resekcji) bada się przeciwciała przeciwko tyreoglobulinie.

7) Metoda rentgenowska

Określanie wieku kostnego na podstawie zdjęć rentgenowskich dłoni.

Do diagnostyki w endokrynologii wykorzystuje się radioimmunologiczne metody oznaczania hormonów w płynach biologicznych i tkankach organizmu, metody badań radioizotopowych i ultradźwiękowych oraz termografię (termografię). Zastosowanie tomografii komputerowej w praktyce klinicznej znacznie zwiększyło częstotliwość rozpoznawania wielu chorób endokrynologicznych, tomografia pozwala wykryć zmiany, których nie można wykryć konwencjonalnym badaniem rentgenowskim (np. małe guzy przysadki mózgowej).
W diagnostyce chorób tarczycy powszechnie stosuje się ogólne metody badań klinicznych (powiększenie tarczycy, zwane wolem, jest dobrze określane palpacyjnie); badanie czynności funkcjonalnej tarczycy poprzez określenie wchłaniania radioaktywnego jodu przez tarczycę, badanie struktury narządu za pomocą ultradźwięków, termografii, biopsji tarczycy itp.
Laboratoryjne metody badań cukrzycy mają na celu oznaczenie poziomu glukozy we krwi i moczu.
U pacjentów z utajoną cukrzycą wykonuje się test tolerancji glukozy.
Aby określić zawartość cukru w ​​moczu, oprócz ogólnego klinicznego badania moczu, stosuje się również specjalne testy wskaźnikowe (glukotest), które pozwalają szybko wykryć obecność glukozy w moczu i w przybliżeniu określić jej ilość. Dokładniej, ilościową zawartość glukozy w moczu określa się metodą polarymetryczną. Wraz z tym określana jest diureza dobowa, co pozwala obliczyć dobową utratę glukozy w moczu i tym samym dobrać pożądaną dawkę insuliny.
Obecność ciał ketonowych (acetonu, kwasu acetylooctowego itp.) w moczu jest zawsze poważnym objawem wskazującym na ciężką cukrzycę i rozwój jej dekompensacji. Zwykle stosuje się do tego próbę z nitroprusydkiem sodu, który daje fioletową barwę podczas reakcji z ciałami ketonowymi w środowisku zasadowym. W nagłych przypadkach stosuje się szybkie testy diagnostyczne w celu określenia ciał ketonowych.
Krew i hematopoeza
Krew wraz z limfą i płynem tkankowym tworzy wewnętrzne środowisko organizmu, które obmywa wszystkie jego komórki, narządy i tkanki.
Krew składa się z części płynnej (osocza) i zawieszonych w niej utworzonych elementów krwi (erytrocyty, leukocyty, płytki krwi).
Skład osocza krwi obejmuje wodę, białka, tłuszcze, węglowodany, makro- i mikroelementy, hormony, enzymy, witaminy, substancje biologiczne i produkty przemiany materii.
Układ krwionośny obejmuje krew obwodową, narządy krwiotwórcze i krwiotwórcze (czerwony szpik kostny, wątrobę, śledzionę, węzły chłonne i inne formacje limfatyczne).
Hematopoeza w okresie rozwoju wewnątrzmacicznego rozpoczyna się wcześnie. Już w 3. tygodniu rozwoju wewnątrzmacicznego pojawiają się pierwsze krwinki. Od 6 tygodnia
rozwój wewnątrzmaciczny wątroba staje się głównym narządem hematopoezy, którego funkcja krwiotwórcza osiąga maksimum w piątym miesiącu, a następnie zaczyna stopniowo zanikać w kierunku narodzin dziecka. Od 3. miesiąca rozwoju wewnątrzmacicznego hematopoeza zaczyna zachodzić w śledzionie i zatrzymuje się w 5. miesiącu rozwoju wewnątrzmacicznego. Szpik kostny powstaje pod koniec 3. miesiąca rozwoju embrionalnego, a od 4. miesiąca rozpoczyna się hematopoeza szpiku kostnego, która staje się główna pod koniec rozwoju wewnątrzmacicznego i przez cały okres poporodowy. U małych dzieci hematopoeza zachodzi we wszystkich kościach, a także w obwodowej tkance limfatycznej i śledzionie. W okresie dojrzewania hematopoeza zachodzi w kościach płaskich (mostek, żebra, czapki kręgowe), nasadach kości rurkowych, a także w węzłach chłonnych i śledzionie.
Główną różnicą w składzie krwinek płodu jest stały wzrost liczby czerwonych krwinek zawierających hemoglobinę i leukocyty. W pierwszej połowie rozwoju wewnątrzmacicznego (do 6 miesiąca życia) we krwi stwierdza się wiele pierwiastków niedojrzałych, w kolejnych miesiącach w krwi obwodowej przeważają formy dojrzałe. Zmienia się także skład hemoglobiny, która jest nośnikiem tlenu dla narządów, tkanek i komórek organizmu. Najpierw pojawia się pierwotna hemoglobina, którą zastępuje hemoglobina płodowa (hemoglobina płodowa), która staje się główną formą w okresie prenatalnym. Ale już od 3. tygodnia rozwoju wewnątrzmacicznego rozpoczyna się produkcja dorosłej hemoglobiny, której powstawanie i ilość wzrasta wraz z wiekiem płodu. Ale do urodzenia dziecka ilość hemoglobiny płodowej stanowi kolejne 60-80% całkowitej hemoglobiny. Cechą hemoglobiny płodowej jest szybsze wiązanie tlenu niż hemoglobina osoby dorosłej, co w okresie prenatalnym ma ogromne znaczenie dla zaopatrzenia płodu w tlen, ze względu na brak oddychania płucnego. Wysoka zawartość hemoglobiny płodowej we krwi noworodka odgrywa ważną rolę w mechanizmach adaptacji do nowych warunków życia.
Obecność dużej liczby czerwonych krwinek, zwiększona zawartość hemoglobiny oraz obecność niedojrzałych form czerwonych krwinek we krwi obwodowej noworodka wskazują na intensywną hematopoezę w pędzie czerwonej krwinki jako reakcję na brak dopływu tlenu dla płodu podczas rozwoju wewnątrzmacicznego i porodu. Po urodzeniu dziecka, na skutek wystąpienia oddychania zewnętrznego, eliminowany jest niedobór tlenu, w związku z czym zmniejsza się potrzeba zwiększonej produkcji czerwonych krwinek i hemoglobiny i rozpoczyna się ich spadek.
U noworodka ilość hemoglobiny wynosi 180-240 g/l, erytrocytów 4,5-7,5 x 10/l, a u rocznego dziecka ilość hemoglobiny wynosi już 110-135 g/l, erytrocytów 3,6 -4,9 x 10 /l.
Całkowita liczba leukocytów (białych krwinek) u dzieci zmienia się stosunkowo niewiele. W chwili urodzenia ich liczba wynosi 8,5–24 x 10/l, a do roku 6,0–12,0 x 10/l.
Skład jakościowy leukocytów ulega drastycznym zmianom, co wynika z kształtowania się funkcji odpornościowych.

• Skargi na zmęczenie, wahania nastroju, czasami płaczliwość, labilność emocjonalna, kołatanie serca nasilające się wraz z wysiłkiem fizycznym -1-!Dolegliwości te są charakterystyczne dla tyreotoksykozy.
• Niektórzy pacjenci zauważają uczucie gorąca i zmniejszenie chłodu (pacjenci śpią pod cienkim kocem lub prześcieradłem). Uważa się, że podstawą patofizjologiczną tego objawu jest wzrost metabolizmu (w wyniku zwiększonej aktywności tarczycy).
• Skargi na senność, dreszcze, apatię, letarg, słabą pamięć, czasami w połączeniu z zaparciami, mogą być objawami niedoczynności tarczycy.
• Skargi na pragnienie (polidypsja), wielomocz, suchość w ustach, zwiększony apetyt lub odwrotnie, zmniejszony apetyt i okresowe swędzenie skóry są charakterystyczne dla cukrzycy. W większości przypadków wymienione objawy obserwuje się podczas dekompensacji choroby.
• Skargi na ataki nieuzasadnionego strachu, którym towarzyszą dreszcze, ból głowy, czasem zawroty głowy, nudności i wymioty, można zaobserwować w przypadku guza chromochłonnego, hormonalnie aktywnego guza nadnerczy.
• Dolegliwości związane z ciemnieniem skóry, pigmentacją niektórych obszarów ciała, zwłaszcza w miejscach naturalnej pigmentacji, w połączeniu z dolegliwościami związanymi z osłabieniem, utratą masy ciała, zmęczeniem mięśni i bólami mięśni są charakterystyczne dla przewlekłej niewydolności kory nadnerczy. Synonimy tego terminu to: hipokortyzolizm, choroba brązowa, choroba Addisona.
• Dolegliwości w postaci skurczów, często mięśni zginaczy kończyn górnych, pojawienie się okresowego szczękościska - konwulsyjnego zaciskania szczęk i innych postaci skurczów mięśni prążkowanych są oznaką niedoczynności przytarczyc.
• Skargi na postępujące osłabienie, silne zmęczenie, senność w połączeniu z szybkim przyrostem masy ciała powodują konieczność wykluczenia obecności dystrofii tłuszczowo-płciowej u pacjenta.
• Skargi na silne pragnienie i towarzyszącą mu wielomocz, gdy dzienna diureza sięga kilku litrów, mogą być oznakami moczówki prostej.
• Skargi związane z silnym osłabieniem, słabym apetytem, ​​utratą masy ciała, wielomoczem w połączeniu z dolegliwościami związanymi z bólem kości, tendencją do luzowania zębów i częstymi, słabo gojącymi się złamaniami kości mogą być objawami nadczynności tarczycy.

Patologiczny przebieg menopauzy plasuje się na pograniczu terapii (endokrynologii) i ginekologii. Dolegliwości kobiet związane z uderzeniami gorąca – krótkotrwałym uczuciem gorąca połączonym ze zwiększoną potliwością, drażliwością, a czasami płaczliwością – wymagają szczegółowego zebrania wywiadu ginekologicznego i badania ginekologicznego w celu wykluczenia tej choroby. Menopauza u mężczyzn przebiega łagodniej, głównie wraz z rozwojem objawów osłabienia potencji seksualnej.
Badający zbiera wywiad rodzinny i seksualny. Mężczyzna zostaje zapytany, czy jest aktywny seksualnie, w jakim wieku i ile ma dzieci. Kobieta jest pytana, czy ma miesiączki, ich regularność i obfitość (w szczególności liczbę dni). U kobiet dojrzałych i starszych wyjaśniono czas menopauzy i specyfikę okresu menopauzy (obecność uderzeń gorąca i ich częstotliwość). Następnie powinieneś sprawdzić liczbę ciąż i porodów, a jeśli nie było ciąży, znajdź przyczynę.

Metody badań fizycznych

Badanie pacjenta

W niektórych przypadkach badanie pacjenta jest momentem inicjującym, który nasuwa podejrzenie patologii endokrynologicznej i ukierunkowuje badanie pacjenta na tę ścieżkę.

Przede wszystkim wizualnie ocenia się stan endokrynologiczny pacjenta. Należy zwrócić uwagę na wagę i wzrost pacjenta. Średni wzrost dorosłego mężczyzny w Europie waha się od 170 do 190 cm, kobiet - od 150 do 180 cm, w drugiej połowie XX wieku. wzrost młodszego pokolenia wzrósł średnio o 10-20 cm, w związku z czym waga mężczyzny powinna mieścić się w przedziale 70-90 kg, a kobiety - od 40 do 60 kg.
Jeśli te parametry zostaną przekroczone, mówią o patologii, która może być związana ze stanem endokrynologicznym. Wysokość powyżej 2,5 m u mężczyzn i powyżej 2,1 m u kobiet nazywa się gigantyzmem, poniżej 1 m - karłowatością, która jest również związana z patologią układu hormonalnego. Kiedy wzrost jest bardzo niski, zwyczajowo mówi się o nanizmie (nanos - karzeł).

Aby obliczyć idealny stosunek wzrostu i masy ciała, zaleca się skorzystanie ze wzoru. Najprostszą metodą jest użycie indeksu Broca:
Idealna masa ciała = (wzrost w cm - 100) ± 10% korekty w zależności od typu konstytucyjnego.
Przy wskaźniku Broca w przedziale 90-100% wskaźniki uznaje się za zadowalające, wskaźnik powyżej 110% oznacza nadwagę.
Wyróżnia się cztery stopnie otyłości:

• I stopień: indeks 110-125%;
• II stopień: indeks 125-150%;
• III stopień: indeks 150-200%;
• Stopień IV: wskaźnik powyżej 200%.

Jeśli masz nadwagę lub otyłość, powinieneś zwrócić uwagę na rozmieszczenie tkanki tłuszczowej. Obecnie nadano temu ogromne znaczenie, ponieważ otyłość stała się problemem globalnym, a przy dużej wadze śmiertelność wzrasta 4-6 razy.

Według współczesnych koncepcji wyróżnia się dwa rodzaje otyłości:

• android;
• gynoidalny.

W przypadku otyłości androidalnej tłuszcz odkłada się głównie w górnej połowie ciała i na brzuchu. W przypadku otyłości gynoidalnej złogi są bardziej widoczne na biodrach i pośladkach.

Zatem charakterystycznymi objawami patologii endokrynologicznej są następujące objawy zewnętrzne:

• akromegalia (gr. asgop – kończyna) – nieproporcjonalne powiększenie kończyn, twarzy i innych części szkieletu;
• gigantyzm - niezwykle wysoki (ponad 2,5 m) wzrost pacjenta;
• nanizm - karłowatość, gdy wzrost dorosłego pacjenta jest mniejszy niż 140 cm;
• Zespół Itenko-Cushinga - chorobliwa otyłość z obecnością fioletowych blizn na skórze (rozstępy, które często zlokalizowane są w podbrzuszu i udach), często połączona z patologicznym łysieniem. Oznaka przewlekłego podwyższonego stężenia kortyzolu w surowicy;
• chorobliwa otyłość;
• brązowe zabarwienie skóry i błon śluzowych spowodowane niewydolnością nadnerczy, chorobą Addisona;
• rodzaj owłosienia może nie odpowiadać płci pacjenta, co wymaga analizy genetycznej. Podczas badania pacjenta obecność ciężkiej otyłości typu żeńskiego z odkładaniem się tłuszczu na biodrach, pośladkach i piersiach w połączeniu z hipoplazją narządów płciowych wymaga wykluczenia dystrofii tłuszczowo-płciowej;

Pacjenta należy rozebrać.

I. Badanie twarzy:

Zwróć uwagę na harmonię cech (w przypadku choroby przysadki mózgowej stwierdza się nierówny wzrost kości - powiększenie żuchwy, nosa, łuków brwiowych kości jarzmowych itp.)

2.Kolor skóry:

• Różowy kolor w cukrzycy, możliwa obecność ksantoma i ksantelaza;
• Cienka twarz z cienką aksamitną skórą, wytrzeszczem i pigmentacją powiek z powodu tyreotoksykozy;
• Twarz przypominająca maskę, pozbawiona wyrazu, z powolnym wyrazem twarzy, sennym, woskowatym wyrazem, opuchniętymi powiekami i zwężonymi szparami powiekowymi. Skóra jest sucha, łuszcząca się – obrzęk śluzowaty – ciężka postać niedoczynności tarczycy;
• Księżycowaty, fioletowo-czerwony kolor z obecnością krost, rozstępów (rozstępów), twarz - nadmierna produkcja hormonu adrenokortykotropowego (ACTH).

II. Stan włosów:

• Włosy cienkie, łamliwe, lekko wypadające na skutek nadczynności tarczycy;
• Włosy grube, matowe (bez połysku), łamliwe i łatwo wypadają na skutek niedoczynności tarczycy;
• Zmniejszenie lub zanik owłosienia u mężczyzn na klatce piersiowej, brzuchu, łonie (wtórne cechy płciowe) i owłosienie typu męskiego u kobiet (pojawienie się wąsów, brody).

III. Badanie skóry:

1. Zwróć uwagę na kolor, obecność zadrapań (cukrzyca), wysypki krostkowej, czyraki (cukrzyca, choroba Ischenga-Cushinga).
2. Pigmentacja (meladerma) – przewlekła niewydolność nadnerczy. Pigmentacja jest szczególnie widoczna na otwartych częściach ciała, w fałdach skórnych, w okolicy sutków i narządów płciowych oraz na błonie śluzowej jamy ustnej.
3. Określenie suchości i wilgotności skóry przeprowadza się wizualnie (jeśli skóra jest sucha, staje się szorstka i gruba, przy dużej wilgotności zauważalne są kropelki potu) i zawsze palpacyjnie.

IV. Określenie wzrostu pacjenta

1. Ułóż pacjenta tak, aby piętami, pośladkami i łopatkami dotykał pionowej tablicy stadiometru.
2. Trzymaj głowę tak, aby górna krawędź zewnętrznego przewodu słuchowego i zewnętrzny kącik oka znajdowały się na tej samej poziomej linii.
3. Opuść poziomy pasek na głowę i policz podziały.

V. Ważenie pacjenta

Zrób to rano, na czczo, po opróżnieniu pęcherza i jelit, w bieliźnie (po czym następuje utrata wagi bielizny)

Ważenie odbywa się regularnie, w określonych odstępach czasu.

VI. Grubość podskórnej warstwy tłuszczu

1. Zbierz skórę na brzuchu na wysokości pępka w fałd.
2. U kobiet zwykle nie powinna przekraczać 4 cm, u mężczyzn – 2 cm

VII. Objawy oczne

• Wystające oczy - wytrzeszcz
• Objawem Delrymple’a jest szerokie otwarcie szpar powiekowych.
• Blask w oczach jest objawem Krausa.
• Objawem Stellwaga jest rzadkie mruganie.
• Objawem Graefego jest recesja górnej powieki przy patrzeniu w dół.
• Zaburzenie konwergencji – objaw Moebiusa (słabość zbieżności)
• Cofnięcie górnej powieki przy szybkiej zmianie spojrzenia – objaw Kochara

VIII. Obecność drżenia określa się w pozycji Romberga:

1. Pacjent stoi z ramionami wyciągniętymi przed klatką piersiową, palce rozstawione, nie napięte, pięty złączone, oczy zamknięte
2. Określ obecność drżenia palców
3. W przypadku wyraźnego drżenia konieczne jest wykonanie testu palec-nos, w którym można wykryć drżenie zamiarowe - wzrost amplitudy drgań palców podczas zbliżania się do nosa

IX. W przypadku chorób gruczołów dokrewnych może wystąpić obrzęk w wyniku uszkodzenia serca (cukrzyca, tyreotoksykoza), nerek (cukrzyca) i rodzaj obrzęku tkanek (obrzęk śluzowy) z niedoczynnością tarczycy.

Duże masywne obrzęki określa się wizualnie.

W przypadku lekkiego obrzęku należy zastosować badanie palpacyjne:

1. Naciskaj palcami opuchniętą skórę, dociskając ją do kości. Pod palcami pozostają dołki, które następnie zostają wygładzone.