Pośredni test Coombsa jest dodatni. Cechy przeprowadzenia bezpośredniego testu Coombsa i interpretacja uzyskanych wyników. Pośredni test Coombsa

Zasada antyglobuliny. Przeciwciała przeciw erytrocytom typu niekompletnego oraz cząsteczki dopełniacza (C) znajdujące się na powierzchni erytrocytów wykrywa się – metodą bezpośrednią – poprzez ich aglutynację w kontakcie z surowicą zwierzęcą zawierającą przeciwciała przeciwko antyglobulinie ludzkiej (surowica antyglobulinowa). Niekompletne przeciwciała wolne w surowicy wykrywa się – test pośredni – przyłączając je do mieszaniny prawidłowych czerwonych krwinek grupy 0, których wszystkie antygeny należą do znanego układu Rh, a następnie ulegają aglutynacji pod wpływem surowicy antyglobulinowej.

Materiały, odczynniki do testu antyglobulinowego Coombsa: probówki 10/100 ml; pipety miarowe 1, 2 ml; Pipety Pasteura; statywy; nieszlifowane szkiełka szklane; 8,5‰ roztwór NaCl; Czerwone krwinki. Czerwone krwinki pacjenta, a także te należące do grupy 0, zostaną pobrane ze świeżo pobranej krwi z zastosowaniem środka przeciwzakrzepowego (roztwór EDTA).

Krwinki czerwone grupy 0 należy wybierać w taki sposób, aby pochodziły od zdrowych osób i zawierały wszystkie Antygeny Rh. Można je przechowywać do 7 dni w autologicznym osoczu w temperaturze + 4°C. W przypadku braku czerwonych krwinek grupy 0 można zastosować znaną mozaikę antygenową, mieszaninę czerwonych krwinek grupy 0, czerwonych krwinek Rh dodatnich i Rh ujemnych.

Serum pacjent musi być świeżo wybrany.

Surowica antyglobulinowa wyprodukowane przez Instytut. Dr I. Cantacuzino dostępny jest w postaci liofilizowanej w ampułkach 1 ml. Po rozpuszczeniu serum przechowywać w temperaturze -20°C.

Technika testu antyglobulinowego Coombsa:
A) Bezpośredni test Coombsa: Przepłucz czerwone krwinki pacjenta 3 razy roztworem NaCl o stężeniu 8,5‰.
Na kilka szkiełek nałożyć dużą kroplę rozcieńczeń surowicy antyglobulinowej, a obok niej małą kroplę osadu erytrocytów pacjenta; wymieszaj krople z rogiem szklanki. Przygotowany materiał pozostawić na stole na 5 minut, następnie zbadać na obecność aglutynianów. Jeżeli wynik jest pozytywny, określić maksymalne miano aglutynacji.

B) Pośredni test Coombsa: erytrocyty grupy 0, Rh-dodatnie i Rh-ujemne, przepłukać 3 razy 8,5‰ roztworem NaCl i poddać działaniu surowicy pacjenta w ilości 2 krople erytrocytów na 8-10 kropli surowicy, następnie inkubować 60 minut w temperaturze temperatura 37°C. Następnie ponownie trzykrotnie przemyj czerwone krwinki i potraktuj je surowicą antyglobulinową, zgodnie z instrukcją bezpośredniego testu Coombsa.

Jeśli chodzi o zimnych aktywnych przeciwciałach uwrażliwiać krwinki czerwone grupy 0 na 60 minut. w temperaturze +4°C.

Notatka 1) Nie należy wykonywać bezpośredniego testu Coombsa na krwinkach czerwonych przechowywanych przez jeden lub kilka dni w temperaturze + 4°C lub temperaturze pokojowej, ponieważ wyniki mogą być fałszywie dodatnie ze względu na utrwalenie niekompletnych przeciwciał aktywnych na zimno obecnych w prawidłowej surowicy. 2) W przypadku ciężkiej hiperproteinemii przemyć krwinki czerwone 4-5 razy i sprawdzić, czy w ostatnim płynie płuczącym nie ma białek surowicy, stosując kwas sulfosalicylowy.

Ewentualna pozostałość 2 μg IgG/ml w osadzie erytrocytów może neutralizować surowicę antyglobulinową. Test Coombsa można także wykonać stosując surowice anty-IgG, -IgM, -IgA -C3 i -C4 w celu określenia rodzaju komórek znajdujących się na powierzchni czerwonych krwinek, np. u pacjentów cierpiących na autoimmunologiczną chorobę hemolityczną niedokrwistość.

Zatwierdzone zarządzeniem Roszdravnadzor

w sprawie stosowania „Zestawu odczynników do oznaczania antygenów i przeciwciał układu Rh we krwi ludzkiej”
(AGS dla testu Coombsa)

TU 9398-102-51203590-2012

RU nr RZN 2013/1255 z dnia 10.11.2013

I. WSTĘP

Surowica standardowa do testu Coombsa zawiera specyficzne przeciwciała heteroimmunologiczne skierowane przeciwko białkom ludzkiej krwi i przeznaczona jest do stosowania w dwóch opcjach reakcji – bezpośrednim i pośrednim teście Coombsa.

Bezpośredni test Coombsa służy do oznaczania uczulenia erytrocytów in vivo w chorobie hemolitycznej noworodków oraz u pacjentów z autoimmunologiczną postacią przewlekłej niedokrwistości hemolitycznej, a także w niektórych innych schorzeniach. Przeprowadzenie bezpośredniego testu Coombsa polega na tym, że surowicę do testu Coombsa dodaje się do badanych krwinek czerwonych, uprzednio wypłukanych z białek ich własnego osocza. Jeśli czerwone krwinki zostały uczulone in vivo, reakcja powoduje ich aglutynację.

Pośredni test Coombsa stosowany jako test pozwalający określić stan uczulenia organizmu, pozwalający na wykrycie przeciwciał znajdujących się w stanie wolnym w surowicy krwi osoby badanej; jako test zgodności przetoczonej krwi, gdy bada się wpływ surowicy biorcy na czerwone krwinki docelowego dawcy; oraz jako test do oznaczania różnych antygenów grupowych w erytrocytach przy zastosowaniu wstępnej ekspozycji na standardowe surowice zawierające przeciwciała o znanej swoistości. Pośredni test Coombsa (wszystkie opcje) wytworzony składa się z dwóch etapów, z których pierwszy polega na inkubacji surowicy testowej (lub standardowej) z erytrocytami wzorcowymi (lub testowymi), czyli uwrażliwieniu erytrocytów in vitro. Drugi etap to właściwa reakcja z surowicą do testu Coombsa, którą przeprowadza się analogicznie jak bezpośredni test Coombsa.

Ostateczny wynik reakcji zarówno w bezpośrednim, jak i pośrednim teście Coombsa następuje w wyniku oddziaływania standardowej surowicy do testu Coombsa z przeciwciałami (białkiem krwi ludzkiej) utrwalonymi na czerwonych krwinkach. Wynik ten objawia się aglutynacją czerwonych krwinek. Do obserwacji aglutynacji należy użyć białej porcelany lub dowolnej białej płytki o zwilżalnej powierzchni, tak aby nałożone na nią krople dobrze się wymieszały i nie rozprzestrzeniały po powierzchni płytki. Wymieszane krople należy delikatnie rozprowadzić na talerzu, mniej więcej do wielkości monety dwukopijkowej.
II. PRZYGOTOWANIE SKŁADNIKÓW REAKCJI

Surowicę testową do określenia obecności i swoistości w niej przeciwciał pobiera się z krwi osoby badanej bez dodatku konserwantu. Przechowywać w temperaturze + 4–8 0 C nie dłużej niż 2 dni lub zamrozić na 1 miesiąc.

Surowicę do badania zgodności otrzymuje się w ten sam sposób, ale stosuje się ją z okresem przydatności do spożycia nie dłuższym niż 2 dni.

Czerwone krwinki przeznaczone do oznaczania w nich określonych izoantygenów przygotowuje się z dodatkiem pewnego rodzaju środka konserwującego pochodzącego od osoby, której krew jest badana. Można także użyć osadu krwinek czerwonych z krwi pobranej bez środka konserwującego.

Do badania zgodności wykorzystuje się krew dawcy pobraną przez igłę z fiolki przygotowanej do transfuzji.

We wszystkich przypadkach krwinki czerwone płucze się 3-4 razy w probówkach z osocza, dodając 8-10 objętości izotonicznego roztworu chlorku sodu do jednej objętości czerwonych krwinek, a następnie mieszając i wirując przy 1500-2000 obr/min przez 5- 10 minut (aż do całkowitej sedymentacji erytrocytów). Po każdym wirowaniu supernatant jest odsysany.
III. TECHNIKI REAKCJI

Do badania erytrocyty przygotowuje się w postaci 5% zawiesiny, dla której jedną kroplę erytrocytów przemytych czterokrotnie miesza się w probówce z 19 kroplami izotonicznego roztworu chlorku sodu.

Jedną kroplę (0,05 ml) 5% zawiesiny czerwonych krwinek przenosi się na białą płytkę i rozmazuje. Płytkę wytrząsa się i obserwuje przez 3 minuty, aby sprawdzić, czy nastąpiła aglutynacja czerwonych krwinek. Jeżeli aglutynacja nie nastąpiła, dodać 1-2 krople standardowej surowicy do testu Coombsa, dokładnie wymieszać krople, następnie lekko potrząsnąć płytką, następnie pozostawić na jedną lub dwie minuty i ponownie wstrząsnąć. Jednocześnie wynik monitoruje się przez 10 minut, co wyraża się w obecności lub braku aglutynacji.
Interpretacja wyników bezpośredniego testu Coombsa.

Brak aglutynacji – test negatywny

Obecność aglutynacji – pozytywny wynik testu, który wskazuje na uczulenie badanych krwinek czerwonych, czyli wchłanianie na nich przeciwciał, które zachodziło in vivo w organizmie człowieka (noworodka, pacjenta). W przypadku aglutynacji badanych czerwonych krwinek wystąpiło przed dodaniem surowica do testu Coombsa nie jest brana pod uwagę.
2. Pośredni test Coombsa

Zaprojektowany do wykrywania izoprzeciwciał w surowicy krwi pacjenta

Stosowane jest w przypadkach, gdy konieczne jest sprawdzenie, czy we krwi pacjenta, kobiety w ciąży, dawcy itp. nie znajdują się przeciwciała izoimmunologiczne w postaci niepełnej oraz określenie ich swoistości. Do reakcji wykorzystuje się surowicę krwi osoby badanej oraz wzorcowe krwinki czerwone o znanej swoistości. Wśród tych 8–10 lub więcej próbek czerwonych krwinek powinny występować różnice w czynnikach z innych układów i bardzo ważne jest, aby każdy z tych czynników był zawarty w co najmniej jednej próbce czerwonych krwinek. Panel obejmuje także próbki erytrocytów Rh-ujemnych z różnymi kombinacjami antygenów innych układów, tak że wśród nich znajdują się próbki Duffy-dodatnie i Duffy-ujemne, które z kolei można podzielić na Kell-dodatnie i Kell-ujemne, Kidd-dodatni i Kidd-ujemny itp. Jako kontrolę negatywną, jeśli to możliwe, do reakcji włącza się erytrocyty osoby, której surowica jest badana.

Technika reakcji

W stojaku instaluje się pewną liczbę probówek wirówkowych lub innych o pojemności 3-10 ml, w zależności od liczby próbek erytrocytów objętych reakcją. Probówki są oznakowane i zgodnie z etykietą dodaje się do nich 1 małą kroplę (0,01 ml) przemytych standardowych krwinek czerwonych. Do każdej probówki wkrapla się trzy krople surowicy testowej, probówki energicznie wstrząsa się w celu wymieszania czerwonych krwinek z surowicą i umieszcza w termostacie w temperaturze 37 0 C na 45 minut. Po inkubacji probówki wyjmuje się z termostatu, a krwinki czerwone przemywa się dodając na wierzch probówki izotoniczny roztwór chlorku sodu, mieszając, a następnie odwirowując. Płukanie powtarzamy 3-4 razy, za każdym razem ostrożnie odsysając supernatant, następnie do umytych krwinek czerwonych dodaje się 2 krople izotonicznego roztworu chlorku sodu tak, aby uzyskać około 5% zawiesiny (w przypadku stosowania probówek wirówkowych można ograniczyć się do dwukrotnego prania).

Z każdej probówki przenosi się 1 kroplę 5% zawiesiny erytrocytów na białą płytkę, dodaje się 1-2 krople surowicy wzorcowej do testu Coombsa i surowicę dokładnie miesza się z erytrocytami. Płytkę lekko wytrząsa się, następnie pozostawia na 1-2 minuty i ponownie okresowo wytrząsa, jednocześnie obserwując wynik reakcji przez 20 minut.

Interpretacja wyników

Brak oznak aglutynacji (wynik ujemny) we wszystkich próbkach oznacza, że ​​w badanej surowicy nie znajdują się niekompletne przeciwciała przeciwko antygenom grupowym, które znajdują się w standardowych krwinkach czerwonych objętych badaniem.

Jeśli w niektórych lub większości kropli, oprócz kontroli, zauważony aglutynacja oznacza to, że surowica testowa zawiera niekompletne przeciwciała przeciwko antygenom erytrocytów. Kwestię specyficzności tych przeciwciał rozstrzyga się poprzez porównanie reakcji dodatnich i ujemnych ze strukturą antygenową czerwonych krwinek biorących udział w reakcji. Kwestię aktywności tych przeciwciał rozwiązuje się poprzez miareczkowanie.

Przykład 1. Aglutynacja wystąpiła w przypadku wszystkich próbek erytrocytów zawierających czynnik Rh 0 (D), niezależnie od obecności lub braku innych czynników tego układu i innych układów, natomiast we wszystkich próbkach Rh 0 (D) - ujemnych nie zaobserwowano aglutynacji (tj. niezależnie od obecności lub braku innych czynników) – oznacza to, że w surowicy testowej znajdują się niekompletne przeciwciała anty-Rhesus – Rh 0 (D).

Przykład 2. Aglutynacja wystąpiła w przypadku wszystkich próbek erytrocytów zawierających czynnik Duffy'ego, niezależnie od obecności lub braku antygenów układu Rh i innych układów, natomiast nie zaobserwowano aglutynacji w przypadku wszystkich próbek Duffy-ujemnych, co oznacza, że ​​surowica testowa zawiera niepełne antygeny przeciwciała -Duffy.

Dodatek. Jeżeli placówka nie dysponuje pełnym panelem standardowych krwinek czerwonych, ale zachodzi potrzeba zbadania surowicy na obecność przeciwciał, zaleca się przeprowadzenie badania na 25–30 losowo wybranych próbkach krwinek czerwonych od zdrowych osób w wieku grupa 0 (I) lub surowica o tej samej nazwie co surowica testowa. Umożliwi to rozwiązanie problemu obecności lub braku przeciwciał przeciwko większości antygenów układu Rh-Hr, Duffy, Kell, Kidd.

W przypadku uzyskania wyniku pozytywnego dalsze wnioski na temat specyficzności wykrytych przeciwciał można wyciągnąć w drodze specjalnego badania z udziałem pełnego panelu standardowych czerwonych krwinek.

3. Technika wykonywania pośredniego testu Coombsa jako testu zgodności przetoczonej krwi

Aby zapobiec niezgodnościom podczas transfuzji krwi, przed transfuzją należy przeprowadzić następujące testy zgodności:

1. 
   Test zgodności grup krwi ABO, który przeprowadza się na samolocie w temperaturze pokojowej.
2. 
   Testy zgodności dla czynnika Rh i innych izoantygenów.

Niezgodność dla czynnika Rh i niektórych innych izoantygenów może zależeć zarówno od obecności przeciwciał pełnych (oznaczanych w probówkach w środowisku soli fizjologicznej w temperaturze 37 0 C), jak i najczęściej od przeciwciał niekompletnych, dla których najbardziej skuteczny jest pośredni test Coombsa wrażliwy.

Jedną małą (0,01 ml) kroplę przemytych erytrocytów dawcy, pobraną przez igłę z butelki z krwią przeznaczoną do transfuzji, przenosi się na dno wirówki lub innej probówki o objętości 3-4 ml i dodaje się 3 krople krwi pacjenta dodaje się do niego serum. Probówkę wytrząsa się w celu wymieszania erytrocytów z surowicą, po czym umieszcza się ją w termostacie w temperaturze 37°C na 45 minut. Po inkubacji na wierzch probówki dodaje się izotoniczny roztwór chlorku sodu, zawartość probówki miesza się i odwirowuje przez 5-10 minut. To przemywanie czerwonych krwinek powtarza się 3 razy, za każdym razem ostrożnie usuwając supernatant. Stosując probówki wirówkowe można ograniczyć się do dwukrotnego płukania. Do umytych czerwonych krwinek dodać 2 krople izotonicznego roztworu chlorku sodu, aby uzyskać około 5% zawiesinę.

1 kroplę 5% zawiesiny krwinek czerwonych przenosi się na białą płytkę, dodaje się 1-2 krople standardowej surowicy do testu Coombsa i surowicę dokładnie miesza się z krwinkami czerwonymi. Następnie płytkę lekko wstrząsa się, pozostawia na 1-2 minuty i okresowo ponownie wstrząsa, obserwując wynik przez 20 minut.

Notatka: W przypadku niezgodności Rh aglutynacja zwykle następuje w ciągu pierwszej minuty, ale przy niskim mianie przeciwciał Rh (lub innych przeciwciał) aglutynacja może nastąpić później, czasami do dwudziestej minuty.
Interpretacja wyniku:

Widoczne są aglutynaty w postaci grudek na przezroczystym lub całkowicie wybielonym tle - oznacza to, że krew dawcy niekompatybilny z krwią biorcy i nie można go mu przetoczyć.

Brak oznaki aglutynacji oznaczają, że krew pacjenta nie zawiera niepełnych przeciwciał przeciwko czerwonym krwinkom dawcy w stosunku do czynnika Rh i innych izoantygenów, przeciwko którym mogłyby powstać niepełne przeciwciała.

Pośredni test Coombsa jest czuły tylko w przypadku niekompletnych przeciwciał.
4. Pośrednia technika testu Coombsa do określania struktury antygenowej erytrocytów

Test ten służy do określenia obecności lub braku antygenu grupy krwinek czerwonych przy użyciu standardowej surowicy zawierającej odpowiednie przeciwciała w niekompletnej formie.

Najczęściej pośredni test Coombsa służy do oznaczania antygenów Kell (K), Duffy (Fy), Kidd (Jk), a także do oznaczania słabego antygenu układu Rh (Du).

Przed przystąpieniem do oznaczania antygenów badane krwinki czerwone należy zbadać bezpośrednim testem Coombsa. Jeżeli wynik testu bezpośredniego jest pozytywny, nie można przeprowadzić oznaczenia antygenów pośrednim testem Coombsa i należy w tym celu zastosować inne reakcje.

Do reakcji wykorzystuje się wirówkę lub inne probówki o pojemności 3-4 ml w ilości trzech: jedną na badaną próbkę erytrocytów i dwie na 1 małą (0,01 ml) kroplę trzykrotnie przemytych testowych erytrocytów. dna pierwszej probówki, do drugiej probówki, zawierającej pożądany antygen (np. Duffy-dodatni), dodano kontrolne erytrocyty, a do trzeciej probówki - kontrolę ujemną (Duffy-ujemny). Do wszystkich probówek dodać 2-3 krople surowicy standardowej (w tym przykładzie anty-Duffy). Probówki wytrząsa się w celu wymieszania zawartości i umieszcza w termostacie w temperaturze 37°C na 45 minut. Po takiej inkubacji probówki wyjmuje się z termostatu, do góry dodaje się izotoniczny roztwór chlorku sodu, dokładnie miesza zawartość i odwirowuje przy 1500-2000 tys. obr/min przez 5-10 minut. Po odwirowaniu ostrożnie odsysa się supernatant i przemywanie czerwonych krwinek powtarza się 4 razy. (W przypadku korzystania z probówek wirówkowych można ograniczyć się do dwukrotnego płukania).

Do umytych czerwonych krwinek dodać 2 krople izotonicznego roztworu chlorku sodu, aby uzyskać około 5% zawiesinę. 1 kroplę 5% zawiesiny erytrocytów z każdej probówki przenosi się na białą płytkę, do każdej kropli erytrocytów dodaje się 1-2 krople wzorcowej surowicy do testu Coombsa i miesza. Płytkę lekko wytrząsa się, następnie pozostawia na 1-2 minuty i ponownie okresowo wytrząsa, jednocześnie obserwując postęp reakcji przez 20 minut.
Interpretacja wyników

Obecność aglutynacji czerwone krwinki (wynik dodatni) oznacza, że ​​krew zawiera pożądany antygen (w tym przykładzie krew z dodatnim wynikiem testu Duffy'ego).

Brak aglutynacji (wynik ujemny) oznacza, że ​​badana krew nie zawiera pożądanego antygenu (ujemna metoda Duffy'ego).

Wynik uznaje się za prawdziwy po sprawdzeniu próbek kontrolnych, czyli w przykładzie, jeżeli wynik jest dodatni w przypadku próbki Duffy-dodatniej i ujemny w przypadku próbki Duffy-ujemnej.

5. Formularz zwolnienia

Odczynnik dostępny jest w postaci płynnej w butelkach o pojemności 5 lub 10 ml (1 ml zawiera 10 dawek). Jako środek konserwujący stosuje się azydek sodu w stężeniu końcowym 0,1%.

6. Przechowywanie

Okres ważności: dwa lata w lodówce w temperaturze 2-8°C. Otwarta butelka nadaje się do użycia, jeśli jest przechowywana w lodówce, hermetycznie zamknięta, przez cały okres ważności.

Podstawą reklamacji jest: brak działania, niespecyficzność, naruszenie integralności butelki, obecność płatków, przeterminowany odczynnik. Składając reklamację prosimy o podanie daty odbioru, dostawcy (jeżeli otrzymali Państwo produkt nie od producenta), numeru partii oraz przyczyny uznania odczynnika za nieodpowiedni. Prosimy o dołączenie protokołu z wynikami badania odczynnika oraz 2-3 nieotwartych butelek z odczynnikiem
Reklamację należy przesłać do producenta LLC „MEDICLON”: 127276

Na powierzchni czerwonych krwinek znajduje się duża liczba antygenów. W zależności od rodzaju tych antygenów wyróżnia się grupy krwi; najczęściej badanymi grupami są ABO, Rh, Kell, Duffy i wiele innych...

Średnia cena w Twoim regionie: 2645 od 2645... do 2645

1 laboratoria wykonują tę analizę w Twoim regionie

Opis badania

Przygotowanie do badania: Krew pobiera się z żyły, a następnie otrzymuje się surowicę (osocze krwi bez fibrynogenu) w wyniku naturalnego krzepnięcia lub wytrącania fibrynogenu. Materiał testowy: Pobieranie krwi

Na powierzchni czerwonych krwinek znajduje się duża liczba antygenów. W zależności od rodzaju tych antygenów wyróżnia się grupy krwi; najczęściej badanymi grupami są układy ABO, Rh, Kell, Duffy i wiele innych. Zwykle we krwi znajdują się przeciwciała przeciwko antygenom innej grupy, ale podczas transfuzji krwi, ciąży, chorób autoimmunologicznych itp. wykrywane są przeciwciała przeciwko własnym antygenom

metoda

Pośrednia reakcja Coombsa polega na wykryciu aglutynacji (zlepiania się) czerwonych krwinek, które mają na powierzchni niekompletne przeciwciała, co pojawia się po dodaniu surowicy antyglobulinowej.

W pierwszym etapie do jednej probówki dodaje się krwinki czerwone dawcy (grupa O(I), Rh+) ​​oraz surowicę testową. Jeżeli w surowicy testowej obecne są niekompletne przeciwciała przeciwko krwinkom czerwonym, wówczas są one utrwalane na powierzchni czerwonych krwinek dawcy.

W drugim etapie na szkło nanosi się krwinki czerwone dawcy z przeciwciałami (jeśli występują) oraz standardową surowicę antyglobulinową z przeciwciałami przeciwko immunoglobulinom ludzkim. Jeśli w pierwszym etapie przeciwciała przeciwko krwinkom czerwonym utrwalą się na powierzchni krwinek czerwonych, to po dodaniu standardowej surowicy krwinki czerwone sklejają się w wyniku interakcji przeciwciał.

Wartości referencyjne - norma
(pośredni test Coombsa (test antyglobulinowy, wykrywanie niepełnych przeciwciał przeciw erytrocytom), krew)

Informacje dotyczące wartości referencyjnych wskaźników, a także składu wskaźników objętych analizą, mogą się nieznacznie różnić w zależności od laboratorium!

Norma:

Zwykle nie powinno być żadnych przeciwciał przeciwko własnym krwinkom czerwonym; podczas wykonywania testu Coombsa nie dochodzi do agregacji czerwonych krwinek.

Wskazania

Badanie odporności humoralnej specyficznej w przypadku podejrzenia reakcji autoimmunologicznych w organizmie, konflikt Rh pomiędzy matką a płodem, określenie zgodności krwi pomiędzy dawcą a biorcą

Zwiększanie wartości (wynik dodatni)

Przeciwciała przeciwko krwinkom czerwonym wykrywa się, gdy:

1. Autoimmunologiczna niedokrwistość hemolityczna

2. Choroba hemolityczna noworodka

3. Układowe choroby tkanki łącznej

4. Przewlekłe aktywne zapalenie wątroby itp.

Reakcja Coombsa

Reakcja Coombsa- badanie antyglobulinowe w celu określenia niekompletnych przeciwciał przeciwko erytrocytom. Test Coombsa służy do wykrywania przeciwciał przeciwko czynnikowi Rh u kobiet w ciąży oraz do określenia niedokrwistości hemolitycznej u noworodków z niezgodnością Rh, która prowadzi do zniszczenia czerwonych krwinek. Metodę tę zaproponował angielski lekarz Robert Coombs w 1945 roku i dlatego nazwano ją później „reakcją Coombsa”.

Bezpośrednia reakcja Coombsa

Przeciwciała znajdujące się na powierzchni czerwonych krwinek mogą być statyczne lub wolne w osoczu krwi. W zależności od stanu przeciwciał przeprowadza się bezpośrednią lub pośrednią reakcję Coombsa. Jeśli istnieją podstawy, aby sądzić, że przeciwciała są utrwalone na powierzchni czerwonych krwinek, przeprowadza się bezpośredni test Coombsa. W tym przypadku badanie odbywa się jednoetapowo – dodaje się surowicę antyglobulinową. Jeśli na powierzchni czerwonych krwinek obecne są niekompletne przeciwciała, następuje aglutynacja czerwonych krwinek.

Reakcja pośrednia

Pośrednia reakcja Coombsa przebiega w 2 etapach. Po pierwsze, konieczne jest sztuczne uwrażliwienie czerwonych krwinek. W tym celu inkubuje się badane krwinki czerwone i surowicę krwi, co powoduje osadzanie się przeciwciał na powierzchni czerwonych krwinek. Następnie przeprowadza się drugi etap testu Coombsa – dodanie surowicy antyglobulinowej.

Notatki

Fundacja Wikimedia. 2010.

Zobacz, co oznacza „reakcja Coombsa” w innych słownikach:

REAKCJA COMBESA- (test Coombsa) metoda oznaczania resusantyciał na powierzchni erytrocytów, które powodują wytrącanie się globulin w surowicy krwi. Test ten służy do diagnozowania niedokrwistości hemolitycznej u niemowląt z niezgodnością Rh, które... ... Wyjaśniający słownik medycyny

Metoda oznaczania obecności przeciwciał na powierzchni erytrocytów powodujących wytrącanie się globulin w surowicy krwi. Test ten służy do diagnozowania niedokrwistości hemolitycznej u niemowląt z niezgodnością Rh, u których... ... Terminy medyczne

- (test antyglobulinowy) metoda wykrywania niekompletnych Abs naturalnie lub sztucznie związanych z komórkami (zwykle erytrocytami) przy użyciu antyglobuliny ki (A.s.). A. s., wytrącając niekompletny Abs, włącza w ten proces komórki nośnikowe,... ... Słownik mikrobiologii

REAKCJA COMBESA- (nazwany na cześć brytyjskiego immunologa R. R. A. Coombsa, ur. 1921, synonim - test antyglobulinowy) - reakcja serologiczna polegająca na aglutynacji erytrocytów przez niekompletne auto- i izoprzeciwciała w obecności surowicy antyglobulinowej. Na… … Encyklopedyczny słownik psychologii i pedagogiki

REAKCJA HEMOLITYCZNA TRANSFUZJI- Miód Reakcja hemolityczna transfuzji (THR) to hemoliza czerwonych krwinek biorcy lub dawcy (rzadko), która występuje podczas transfuzji krwi i jej składników. Reakcje mogą mieć charakter immunologiczny lub nieimmunologiczny. Etiologia i patogeneza Reakcje immunologiczne... ... Katalog chorób

- (R. R. A. Coombs, ur. 1921, angielski immunolog) reakcja serologiczna polegająca na aglutynacji erytrocytów przez niekompletne auto i izoprzeciwciała w obecności surowicy antyglobulinowej; stosowany w transfuzjologii, medycynie sądowej, a także... ... Duży słownik medyczny

REAKCJA COMBESA- Reakcja Coombsa, reakcja serologiczna umożliwiająca wykrycie niekompletnych przeciwciał utrwalonych na powierzchni czerwonych krwinek lub zawartych w osoczu krwi. K.r. opiera się na wykorzystaniu surowicy antyglobulinowej uzyskanej w wyniku hiperimmunizacji... Weterynaryjny słownik encyklopedyczny

REAKCJA COMBESA- Stosowany do wykrywania przeciwciał jednowartościowych lub tzw. częściowych, w szczególności do analizy grup krwi świń i niektórych innych zwierząt... Terminy i definicje stosowane w hodowli, genetyce i rozrodzie zwierząt gospodarskich

Zobacz reakcję Coombsa. (

Test Coombsa jest badaniem laboratoryjnym przeprowadzanym poprzez wpływ na hemaglutynację. Opiera się na wrażliwości przeciwciał na immunoglobuliny i elementy enzymatyczne, a także na ich zdolności do aglutynacji erytrocytów opłaszczonych C3 lub Lg.

Bezpośrednia diagnoza Coombsa

Służy do wykrywania przeciwciał lub składników dopełniacza zainstalowanych na zewnątrz komórek. Bezpośredni test Coombsa przeprowadza się w następujący sposób.

Zastosowanie takiej próbki

Bezpośrednią diagnostykę Coombsa stosuje się w niektórych przypadkach, takich jak:

• skutki transfuzji;
• hemoliza autoimmunologiczna;
• niedokrwistość hemolityczna polekowa.

Pośredni test Coombsa

Diagnoza ta umożliwia wykrycie przeciwciał przeciwko komórkom w surowicy, którą z reguły inkubuje się z czerwonymi krwinkami dawcy typu 0, a następnie przeprowadza się bezpośredni test. Pośrednią diagnostykę Coombsa stosuje się w następujących przypadkach:

Jak przygotować się do analizy

Istnieją pewne zasady przygotowania do egzaminu.

1. Jeśli pacjentem jest noworodek, rodzice muszą mieć świadomość, że badanie pomoże zdiagnozować chorobę hemolityczną noworodka.
2. Jeśli pacjent ma podejrzenie niedokrwistości hemolitycznej, należy mu wyjaśnić, że analiza pozwoli mu ustalić, czy jest ona spowodowana zaburzeniami ochronnymi, przyjmowanymi lekami, czy też innymi czynnikami.
3. Test Coombsa, bezpośredni i pośredni, nie nakłada żadnych ograniczeń w zakresie odżywiania i diety.
4. Należy poinformować pacjenta, że ​​badanie będzie wymagało pobrania krwi z żyły, a także poinformować go dokładnie, kiedy zostanie wykonane wkłucie żyły.
5. Należy również ostrzec o prawdopodobieństwie nieprzyjemnych wrażeń w okresie nakładania bandaża na ramię i samego zabiegu.
6. Należy odstawić leki mogące mieć wpływ na wynik próbki.

Leki te obejmują:

• "Streptomycyna";
• „Metyldopa”;
• „Prokainamid”;
• sulfonamidy;
• „Melfalan”;
• „chinidyna”;
• „Rifampicyna”;
• „Izoniazyd”;
• cefalosporyny;
• „Hydralazyna”;
• „Chlorpromazyna”;
• „Lewodopa”;
• „Tetracyklina”;
• „Difenylohydantoina”;
• „Etosuksymid”;
• "Penicylina";
• kwas mefenamowy.

Pobieranie krwi odbywa się rano, na pusty żołądek.

Jak odbywa się impreza

Test Coombsa przeprowadza się w następującej kolejności:

1. Podczas diagnostyki dorosłego pacjenta, po nakłuciu żyły, do probówek pobierana jest krew z EDTA (etylenodiaminotetraoctanem).
2. Krew noworodka pobiera się z pępowiny do zlewki zawierającej EDTA.
3. Miejsce nakłucia dociska się wacikiem aż do ustania krwawienia.
4. Jeśli w miejscu wkłucia żyły pojawi się siniak, przepisywane są ciepłe okłady.
5. Po pobraniu krwi pacjent może powrócić do przyjmowania leków.
6. Należy poinformować rodziców noworodka, że ​​w celu monitorowania dynamiki niedokrwistości może być konieczna analiza wtórna.

Zalety testu Coombsa

Takie badania mają pewne zalety, a mianowicie:

Wady analizy

Pozytywny test Coombsa jest dość pracochłonną metodą badania, wymagającą charakterystycznej dokładności wykonania. Używając go, możesz napotkać pewne trudności, zwłaszcza związane z interpretacją słabo pozytywnych efektów.

Ustalono, że błędnie ujemne lub słabo dodatnie reakcje podczas wykonywania testów Coombsa mogą być konsekwencją niezadowalająco aktywnego przemywania komórek, osłabienia odczynnika antyglobulinowego przez pozostałości surowicy, a także połączeń z nietłuszczowymi powierzchniami, na których antyglobulina może przyczepić, tracąc w ten sposób swoją skuteczność.

Test Coombsa ma jeszcze jedną wadę - niską stabilność odczynnika antyglobulinowego, którego pozyskiwanie i utrwalanie ma indywidualne cechy, co podobnie utrudnia numeryczną ocenę wpływu surowicy antyglobulinowej na hemaglutynację.

Choroby, które można wykryć podczas badania

Diagnostyka Coombsa umożliwia wykrycie niektórych rodzajów chorób, takich jak:

• złe samopoczucie hemolityczne noworodka;
• różne reakcje transfuzyjne;
• hemoliza autoimmunologiczna;
• niedokrwistość hemolityczna polekowa.

Obecnie test Coombsa jest uważany za dość popularny system badania krwi zarówno u dorosłych, jak i noworodków. Pozwala rozpoznać wiele różnych chorób.