A közvetett Coombs-teszt pozitív. A közvetlen Coombs-teszt lefolytatásának jellemzői és a kapott eredmények értelmezése. Közvetett Coombs-teszt

Antiglobulin elv. A vörösvértestek felszínén elhelyezkedő, inkomplett típusú és komplement molekulák (C) vörösvértest ellenes antitestek kimutatása - közvetlen teszt - humán antiglobulin (antiglobulin szérum) antitesteket tartalmazó állati szérummal érintkezve történik. A szérumban mentes, hiányos antitesteket - közvetett teszt - úgy mutatják ki, hogy normál 0-s csoportú vörösvértestek keverékéhez kapcsolják őket, amelyek összes antigénje az ismert Rh rendszerhez tartozik, majd antiglobulin szérum hatására agglutinálódik.

Anyagok, reagensek a Coombs antiglobulin teszthez: kémcsövek 10/100 ml; beosztásos pipetta 1, 2 ml; Pasteur pipetták; állványok; csiszolatlan üveg csúszdák; 8,5‰ NaCl oldat; vörös vérsejtek. A páciens vörösvérsejtjeit, valamint a 0. csoportba tartozó vörösvértesteket a frissen vett vérből véralvadásgátló szerrel (EDTA-oldat) nyerik ki.

A 0. csoportba tartozó vörösvértesteket úgy kell kiválasztani, hogy azok normális egyénektől származzanak, és az összeset tartalmazzák Rh antigének. Legfeljebb 7 napig tárolhatók autológ plazmában + 4°C-on. 0. csoportú vörösvértestek hiányában ismert antigén mozaik, 0. csoportú vörösvértestek, Rh-pozitív és Rh-negatív vörösvértestek keveréke használható.

Szérum a beteget frissen kell kiválasztani.

Antiglobulin szérum az intézet készítette. Dr. I. Cantacuzino, liofilizált formában, 1 ml-es ampullákban kapható. Feloldódás után a szérumot -20°C-on tárolja.

Coombs antiglobulin teszt technika:
A) Közvetlen Coombs-teszt: Öblítse le a páciens vörösvérsejtjeit háromszor 8,5‰-os NaCl oldattal.
Vigyen fel egy nagy csepp hígítású antiglobulin szérumot több tárgylemezre, és mellette egy kis cseppet a páciens vörösvértest-üledékéből; keverje össze a cseppeket az üveg sarkával. Hagyja az elkészített anyagot az asztalon 5 percig, majd vizsgálja meg az agglutinátok jelenlétét. Ha az eredmény pozitív, határozza meg a maximális agglutinációs titert.

b) Közvetett Coombs-teszt: 0. csoport vörösvértestei, Rh-pozitív és Rh-negatív, öblítsük le háromszor 8,5‰-os NaCl-oldattal, és tegyük ki a páciens szérumának 2 csepp eritrocitát 8-10 csepp szérumonként, majd inkubáljuk 60 percig 37°-os hőmérsékleten. Ezt követően mossa meg ismét háromszor a vörösvértesteket, és kezelje őket antiglobulin szérummal a közvetlen Coombs-teszt utasításai szerint.

Amikor jön a hideg aktív antitestekről 60 percig érzékenyítse a 0. csoport vörösvértesteit. + 4°C hőmérsékleten.

jegyzet 1) Ne végezzen közvetlen Coombs-tesztet egy vagy több napig + 4°C-on vagy szobahőmérsékleten tárolt vörösvértesteken, mivel az eredmények hamis pozitívak lehetnek a normál szérumban jelenlévő hiányos hidegaktív antitestek rögzítése miatt. 2) Súlyos hiperproteinémia esetén 4-5 alkalommal mossa le a vörösvértesteket, és szulfosalicilsavval ellenőrizze, hogy az utolsó mosófolyadékban nincs-e szérumfehérje.

2 μg IgG/ml esetleges maradvány az eritrocita üledékben semlegesíti az antiglobulin szérumot. A Coombs-teszt monospecifikus anti-IgG, -IgM, -IgA -C3 és -C4 szérummal is elvégezhető, hogy tisztázza a vörösvértestek felszínén található sejtek típusát, például autoimmun hemolitikus betegségben szenvedő betegeknél. anémia.

Roszdravnadzor rendeletével jóváhagyva

A „Reagenskészlet a Rhesus-rendszer antigének és antitesteinek meghatározására emberi vérben” alkalmazásáról
(AGS for Coombs teszt)

TU 9398-102-51203590-2012

RU No. RZN 2013/1255, 2013.10.11.

I. BEVEZETÉS

A Coombs-teszthez használt standard szérum specifikus heteroimmun antitesteket tartalmaz emberi vérfehérjék ellen, és kétféle reakcióban használható – a közvetlen és közvetett Coombs-tesztben.

Közvetlen Coombs-teszt Az eritrociták in vivo szenzibilizációjának meghatározására használják újszülöttek hemolitikus betegségében és krónikus hemolitikus anémia autoimmun formájában, valamint néhány egyéb állapotban. Közvetlen Coombs-teszt elvégzése abból áll, hogy a Coombs-teszthez szérumot adnak a vizsgált vörösvérsejtekhez, amelyeket előzőleg kimostak saját plazma fehérjéiből. Ha a vörösvérsejteket in vivo szenzitizálták, a reakció agglutinációt eredményez.

Közvetett Coombs-teszt tesztként használják a szervezet szenzibilizációs állapotának azonosítására, lehetővé téve a vizsgált személy vérszérumában szabad állapotban lévő antitestek kimutatását; a transzfundált vér kompatibilitásának vizsgálataként, amikor a recipiens szérumának a szándékolt donor vörösvértesteire gyakorolt ​​hatását vizsgálják; és tesztként különböző csoportantigének meghatározására eritrocitákban, ismert specifitású antitesteket tartalmazó standard szérumokkal való előzetes expozíció alkalmazásával. Közvetett Coombs-teszt (minden lehetőség) előállított két szakaszban, amelyek közül az első a teszt (vagy standard) szérum standard (vagy teszt) eritrocitákkal történő inkubálása, azaz az eritrociták in vitro szenzitizálása. A második szakasz a tényleges reakció a szérummal a Coombs-teszthez, amelyet ugyanúgy hajtanak végre, mint a közvetlen Coombs-teszt.

A reakció végeredménye mind a közvetlen, mind a közvetett Coombs-tesztben a Coombs-teszthez használt standard szérum és a vörösvértesteken rögzített antitestek (humán vérfehérje) kölcsönhatása miatt következik be. Ez az eredmény a vörösvértestek agglutinációjában nyilvánul meg. Az agglutináció megfigyeléséhez használjon fehér porcelánt vagy bármilyen nedvesíthető felületű fehér tányért, hogy a rávitt cseppek jól elkeveredjenek és ne terüljenek szét a tányér felületén. Az összekevert cseppeket enyhén eloszlatjuk a tányéron, körülbelül egy 2 kopejkás érme méretűre.
II. A REAKCIÓ ÖSSZETEVŐK ELŐKÉSZÍTÉSE

A benne lévő antitestek jelenlétének és specificitásának meghatározására szolgáló tesztszérumot a vizsgált személy véréből nyerik, tartósítószer hozzáadása nélkül. + 4-8 0 C hőmérsékleten legfeljebb 2 napig, vagy fagyasztva 1 hónapig tárolandó.

A kompatibilitási vizsgálathoz használt szérumot ugyanúgy kapják meg, de legfeljebb 2 nap eltarthatósággal használják.

A bennük lévő bizonyos izoantigének meghatározására szolgáló vörösvértesteket valamilyen tartósítószerrel állítják elő attól a személytől, akinek a vérét vizsgálják. A vörösvértest-üledéket is felhasználhatja tartósítószer nélkül vett vérből.

A kompatibilitás vizsgálatakor donorvért használnak, amelyet egy tűn keresztül szívnak át a transzfúzióra előkészített injekciós üvegből.

Minden esetben a vörösvértesteket kémcsövekben 3-4 alkalommal mossák ki a plazmából úgy, hogy 8-10 térfogat izotóniás nátrium-klorid oldatot adnak egy térfogat vörösvértesthez, majd keverik és centrifugálják 1500-2000 fordulat/perc sebességgel 5 percig. 10 percig (a vörösvértestek teljes ülepedéséig). Minden centrifugálás után a felülúszót leszívjuk.
III. REAKCIÓTECHNIKÁK

A vizsgált eritrocitákat 5%-os szuszpenzió formájában állítjuk elő, amelyhez egy csepp négyszer mosott eritrocitát kémcsőben 19 csepp izotóniás nátrium-klorid oldattal keverünk össze.

Egy csepp (0,05 ml) 5%-os vörösvérsejt-szuszpenziót egy fehér lemezre viszünk, és megkenjük. A lemezt megrázzuk, és 3 percig megfigyeljük, hogy meglássuk, nem történt-e vörösvértest-agglutináció. Ha agglutináció nem történt, adjon hozzá 1-2 csepp standard szérumot a Coombs-teszthez, alaposan keverje össze a cseppeket, majd enyhén rázza fel a tányért, majd hagyja békén egy-két percig, és újra rázza fel. Ugyanakkor az eredményt 10 percig figyeljük, ami agglutináció jelenlétében vagy hiányában fejeződik ki.
A közvetlen Coombs-teszt eredményeinek értelmezése.

Nincs agglutináció - negatív teszt

Agglutináció jelenléte – pozitív teszt, amely a vizsgált vörösvértestek szenzibilizációját, azaz a rajtuk lévő antitestek felszívódását jelzi, ami in vivo történt az emberi szervezetben (újszülött, beteg). Ha a vizsgált vörösvértestek agglutinációja hozzáadása előtt történt szérum a Coombs-teszthez; a közvetlen teszt eredményét nem veszik figyelembe.
2. Közvetett Coombs-teszt

A vizsgált személy vérszérumában lévő izoantitestek kimutatására szolgál

Olyan esetekben alkalmazzák, amikor ki kell deríteni, hogy egy beteg, terhes nő, donor stb. vére tartalmaz-e hiányos formájú izoimmun antitesteket, és meg kell állapítani ezek specifitását. A reakcióhoz a vizsgált személy vérszérumát és ismert specifitású standard vörösvértesteket használnak. A 8-10 vagy több vörösvérsejt-minta között különbségek lehetnek a többi rendszerhez képest, és nagyon fontos, hogy ezen faktorok mindegyike szerepeljen legalább egy vörösvérsejt-mintában. A panel Rh-negatív eritrociták mintáit is tartalmazza más rendszerek antigénjeinek különféle kombinációival, így köztük van Duffy-pozitív és Duffy-negatív is, amelyek viszont Kell-pozitívra és Kell-negatívra oszlanak, Kidd-pozitív és Kidd-negatív stb. Negatív kontrollként, ha lehetséges, annak a személynek a vörösvértesteit is bevonják a reakcióba, akinek szérumát vizsgálják.

Reakció technika

Állványon több, 3-10 ml térfogatú centrifuga vagy egyéb cső van elhelyezve, a reakcióba bevont eritrocita minták számának megfelelően. A csöveket felcímkézzük, és a jelölésnek megfelelően 1 kis csepp (0,01 ml) mosott standard vörösvértestet adunk hozzájuk. Minden kémcsőbe három csepp tesztszérumot csepegtetünk, a kémcsöveket erőteljesen összerázzuk, hogy a vörösvértestek összekeveredjenek a szérummal, és 45 percre 37 0 C-os termosztátba helyezzük. Az inkubálás után a csöveket eltávolítjuk a termosztátról, és a vörösvértesteket mossuk úgy, hogy izotóniás nátrium-klorid oldatot adunk a cső tetejére, keverjük, majd centrifugáljuk. A mosást 3-4 alkalommal megismételjük, minden alkalommal óvatosan kiszívva a felülúszót, majd 2 csepp izotóniás nátrium-klorid oldatot adunk a megmosott vörösvértestekhez, hogy a szuszpenzió kb. 5%-át kapjuk (centrifugacsövek használatakor korlátozhatja magát kétszeri mosáshoz).

Minden kémcsőből 1 csepp 5%-os vörösvérsejt-szuszpenziót viszünk át egy fehér lemezre, 1-2 csepp standard szérumot adunk a Coombs-teszthez, és a szérumot alaposan összekeverjük az eritrocitákkal. A lemezt enyhén megrázzuk, majd 1-2 percig magára hagyjuk, és ismételten ismételten felrázzuk, miközben egyidejűleg 20 percig figyeljük a reakció eredményét.

Az eredmények értelmezése

Nincsenek agglutináció jelei (negatív eredmény) minden mintában azt jelenti, hogy a vizsgálati szérum nem tartalmaz hiányos antitesteket a vizsgálatba bevont standard vörösvértestekben található csoportantigénekkel szemben.

Ha néhány vagy a legtöbb cseppben a kontrollon kívül, megfigyelt agglutináció , ez azt jelenti, hogy a tesztszérum hiányos vörösvértest-antigének elleni antitesteket tartalmaz. Ezen antitestek specifitásának kérdését a pozitív és negatív reakciók és a reakcióba bevont vörösvértestek antigén szerkezetének összehasonlítása határozza meg. Ezen antitestek aktivitásának kérdését titrálással oldjuk meg.

1. példa Agglutináció minden Rh 0 (D) faktort tartalmazó eritrocita mintánál előfordult, függetlenül a rendszer és más rendszerek egyéb faktorainak meglététől vagy hiányától, míg az összes Rh 0 (D) - negatív mintánál agglutináció nem volt megfigyelhető (tehát függetlenül más tényezők jelenlététől vagy hiányától) - ez azt jelenti, hogy a tesztszérum hiányos Rhesus elleni antitesteket tartalmaz - Rh 0 (D).

2. példa. Agglutináció minden Duffy-faktort tartalmazó vörösvértest-mintánál előfordult, függetlenül a Rhesus-rendszer és más rendszerek antigénjeinek jelenlététől vagy hiányától, míg az összes Duffy-negatív mintánál nem volt megfigyelhető agglutináció, ami azt jelenti, hogy a tesztszérum hiányos anti- antitestek... -Duffy.

Kiegészítés. Ha az intézmény nem rendelkezik teljes standard vörösvértest-panellel, de szükség van a szérum vizsgálatára az antitestek jelenlétére vonatkozóan, akkor javasolt egy vizsgálatot végezni egészséges egyénektől származó, véletlenszerűen kiválasztott vörösvértestek 25-30 mintájával. 0. csoport (I) vagy a tesztszérummal azonos nevű szérum. Ez lehetővé teszi az Rh-Hr, Duffy, Kell, Kidd rendszer legtöbb antigénjével szembeni antitestek jelenlétének vagy hiányának a kérdésének megoldását.

Ha pozitív eredményt kapunk, a kimutatott antitestek specifitására vonatkozó további következtetéseket egy speciális, standard vörösvértestek teljes paneljével végzett vizsgálat döntheti el.

3. A közvetett Coombs-teszt elvégzésének technikája a transzfundált vér kompatibilitásának vizsgálatára

A vérátömlesztés közbeni inkompatibilitás elkerülése érdekében a következő kompatibilitási teszteket kell elvégezni a transzfúzió előtt:

1. 
   Az ABO vércsoportok kompatibilitási tesztje, amelyet szobahőmérsékleten, síkon végeznek.
2. 
   Rh faktor és egyéb izoantigének kompatibilitási tesztjei.

Az Rh-faktorral és néhány más izoantigénnel való összeférhetetlenség a teljes antitestek jelenlététől függhet (sós környezetben, kémcsövekben 37 0 C-on meghatározva), és leggyakrabban a nem komplett antitestektől, amelyekre az indirekt Coombs-teszt a legjobb. érzékeny.

Egy kis (0,01 ml) csepp mosott donor eritrocitát, amelyet a transzfúzióra szánt vérpalackból tűn keresztül vettünk, egy 3-4 ml térfogatú centrifuga vagy más cső aljára csepegtetünk, és 3 csepp a páciensből. szérumot adnak hozzá. A kémcsövet megrázzuk, hogy az eritrociták összekeveredjenek a szérummal, majd termosztátba helyezzük 37 0 C-on 45 percre. Inkubálás után izotóniás nátrium-klorid oldatot adunk a kémcső tetejére, a kémcső tartalmát összekeverjük és 5-10 percig centrifugáljuk. A vörösvértestek mosását háromszor megismételjük, minden alkalommal óvatosan eltávolítva a felülúszót. Centrifugacsövek használatakor korlátozhatja magát a kétszeri mosásra. Adjunk hozzá 2 csepp izotóniás nátrium-klorid oldatot a mosott vörösvértestekhez, hogy körülbelül 5%-os szuszpenziót kapjunk.

1 csepp 5%-os vörösvértest-szuszpenziót egy fehér tányérra viszünk, 1-2 csepp Coombs-teszthez használt standard szérumot adunk oda, és a szérumot alaposan összekeverjük a vörösvértestekkel. Ezután a tányért enyhén megrázzuk, 1-2 percig magára hagyjuk, majd ismételten rendszeresen megrázzuk, miközben 20 percig figyeljük az eredményt.

Jegyzet: Rh-inkompatibilitás esetén az agglutináció általában az első percben megtörténik, de alacsony Rh-antitest (vagy más antitest) titer esetén később, esetenként a huszadik percben előfordulhat agglutináció.
Az eredmény értelmezése:

Agglutinátumok láthatók csomók formájában tiszta vagy teljesen kifehéredett alapon - ez azt jelenti, hogy a donor vére összeegyeztethetetlen a recipiens vérével, és nem transzfundálható neki.

Hiány az agglutináció jelei azt jelentik, hogy a páciens vére nem tartalmaz hiányos antitesteket a donor vörösvérsejtjeivel szemben az Rh-faktorral és más izoantigénekkel szemben, amelyek ellen inkomplett antitestek képződhetnek.

A közvetett Coombs-teszt csak a hiányos antitestekre érzékeny.
4. Indirekt Coombs-teszt technika az eritrociták antigénszerkezetének meghatározására

Ezt a tesztet bármely vörösvérsejt-csoport antigén jelenlétének vagy hiányának meghatározására használják standard szérum felhasználásával, amely a megfelelő antitesteket nem teljes formában tartalmazza.

Leggyakrabban az indirekt Coombs-tesztet a Kell (K), Duffy (Fy), Kidd (Jk) antigének meghatározására, valamint az Rh rendszer gyenge antigénjének (Du) meghatározására használják.

Mielőtt folytatná az antigének meghatározását, a vizsgált vörösvértesteket közvetlen Coombs-teszttel kell tesztelni. Ha a közvetlen teszt eredménye pozitív, az antigének közvetett Coombs-teszttel történő meghatározása nem végezhető el, és erre a célra más reakciókat kell alkalmazni.

A reakcióhoz 3-4 ml térfogatú centrifugát vagy egyéb csöveket használunk három mennyiségben: egyet a vörösvértestek vizsgálati mintájára, kettőt pedig 1 kis (0,01 ml) csepp háromszor mosott vörösvértesthez adunk. az első cső alján a kontroll eritrocitákat a második csőbe, amely tartalmazza a kívánt antigént (például Duffy-pozitív), és a harmadik csőbe - negatív kontroll (Duffy-negatív). Adjon 2-3 csepp standard szérumot (ebben a példában anti-Duffy) minden kémcsőhöz. A kémcsöveket összerázzuk, hogy a tartalom összekeveredjen, és 45 percre 37 0 C-os termosztátba helyezzük. Az ilyen inkubálás után a kémcsöveket kivesszük a termosztátból, a tetejére izotóniás nátrium-klorid-oldatot adunk, a tartalmat alaposan összekeverjük és 1500-2000 ezer fordulat/perc sebességgel 5-10 percig centrifugáljuk. Centrifugálás után a felülúszót óvatosan leszívjuk, és ezt a vörösvértest-mosást négyszer megismételjük. (Centrifugacsövek használatakor korlátozódhat a kétszeri mosásra).

Adjunk hozzá 2 csepp izotóniás nátrium-klorid oldatot a mosott vörösvértestekhez, hogy körülbelül 5%-os szuszpenziót kapjunk. Minden kémcsőből 1 csepp 5%-os eritrocita-szuszpenziót viszünk át egy fehér lemezre, minden egyes csepp vörösvértesthez 1-2 csepp standard szérumot adunk a Coombs-teszthez, és összekeverjük. A lemezt enyhén megrázzuk, majd 1-2 percig magára hagyjuk, és ismételten ismételten megrázzuk, miközben egyidejűleg 20 percig figyeljük a reakció előrehaladását.
Az eredmények értelmezése

Agglutináció jelenléte vörösvértestek (pozitív eredmény) azt jelenti, hogy a vér tartalmazza a kívánt antigént (ebben a példában Duffy-pozitív vér).

Nincs agglutináció (negatív eredmény) azt jelenti, hogy a vizsgált vér nem tartalmazza a kívánt antigént (Duffy negatív).

Az eredményt a rendszer igaznak tekinti a kontrollminták ellenőrzése után, azaz a példában, ha az eredmény pozitív a Duffy-pozitív mintával és negatív a Duffy-negatív mintával.

5. Kiadási űrlap

A reagens folyékony formában, 5 vagy 10 ml-es palackokban kapható (1 ml 10 adagot tartalmaz). A nátrium-azidot tartósítószerként 0,1%-os végső koncentrációban használják.

6. Tárolás

Felhasználhatósági idő: két év hűtőszekrényben 2-8°C-on. A felbontott palack a lejárati időn át hűtőszekrényben, hermetikusan lezárva használható.

A reklamáció okai: aktivitás hiánya, nem specifikusság, a palack sértetlenségének megsértése, pelyhek jelenléte, lejárt reagens. Reklamációnál kérjük feltüntetni az átvétel dátumát, a szállítót (ha a terméket nem a gyártótól kapta), a tételszámot, valamint a reagens alkalmatlanságának okát. Kérjük, csatoljon egy jegyzőkönyvet a reagens tesztelésének eredményeivel és 2-3 bontatlan palackkal a reagenssel
A panaszt a gyártó LLC "MEDICLON" címére kell elküldeni: 127276

A vörösvértestek felületén nagyszámú antigén található. Az antigének típusától függően vércsoportokat különböztetnek meg, a legtöbbet vizsgált csoportok az ABO, Rh, Kell, Duffy és még sokan mások...

Átlagár az Ön régiójában: 2645 2645-től 2645-ig

Az Ön régiójában 1 laboratórium végzi ezt az elemzést

A tanulmány leírása

Felkészülés a tanulmányra: A vénából vért vesznek, majd természetes alvadással vagy fibrinogén kicsapással szérumot (fibrinogén nélküli vérplazmát) nyernek. Vizsgálati anyag: Vérvétel

A vörösvértestek felületén nagyszámú antigén található. Az antigének típusától függően vércsoportokat különböztetnek meg, a legtöbbet vizsgált csoport az ABO, Rh, Kell, Duffy és sok más rendszer. Normális esetben más csoport antigénjei ellen is vannak antitestek a vérben, de vérátömlesztés, terhesség, autoimmun betegségek stb. során kimutathatóak a saját antigénjeik elleni antitestek Hiányos vörösvértestek elleni antitestek

Módszer

A közvetett Coombs-reakció azon vörösvértestek agglutinációjának (csomósodásának) kimutatásán alapul, amelyek felületén hiányos antitestek vannak, ami antiglobulin szérum hozzáadásakor jelenik meg.

Az első szakaszban a donor vörösvértesteket (O(I) csoport, Rh+) ​​és a tesztszérumot egy kémcsőbe adják. Ha a vizsgált szérumban hiányos vörösvérsejtek elleni antitestek vannak jelen, akkor azok a donor vörösvértestek felületén rögzülnek.

A második szakaszban a donor vörösvértesteket antitestekkel (ha van ilyen) és a standard antiglobulin szérumot humán immunglobulinok elleni antitestekkel az üvegre visszük. Ha az első szakaszban a vörösvértestek elleni antitestek rögzítve vannak a vörösvértestek felületén, akkor standard szérum hozzáadásakor a vörösvértestek az antitestek kölcsönhatása miatt összetapadnak.

Referenciaértékek - norma
(Indirekt Coombs-teszt (antiglobulin teszt, hiányos vörösvértest-ellenes antitestek kimutatása), vér)

Az indikátorok referenciaértékeire vonatkozó információk, valamint az elemzésben szereplő indikátorok összetétele laboratóriumonként kissé eltérhet!

Norma:

Normális esetben nem szabad ellenanyagnak lennie a saját vörösvértestek ellen; a Coombs-teszt elvégzésekor nem történik vörösvérsejt-aggregáció.

Javallatok

Humorális specifikus immunitás vizsgálata autoimmun reakciók gyanúja esetén a szervezetben, Rh-konfliktus anya és magzat között, vérkompatibilitás meghatározása donor és recipiens között

Növekvő értékek (pozitív eredmény)

A vörösvértestek elleni antitesteket a következő esetekben észlelik:

1. Autoimmun hemolitikus vérszegénység

2. Az újszülött hemolitikus betegsége

3. Szisztémás kötőszöveti betegségek

4. Krónikus aktív hepatitis stb.

Coombs reakciója

Coombs reakciója- antiglobulin teszt a hiányos vörösvértest-ellenes antitestek meghatározására. A Coombs-teszt az Rh-faktor elleni antitestek kimutatására szolgál terhes nőknél, valamint az Rh-inkompatibilitással rendelkező újszülöttek hemolitikus anémiájának meghatározására, amely a vörösvértestek pusztulásához vezet. Ezt a módszert Robert Coombs angol orvos javasolta 1945-ben, ezért később „Coombs-reakciónak” nevezték el.

Közvetlen Coombs reakció

A vörösvértestek felszínén található antitestek lehetnek statikusak vagy szabadok a vérplazmában. Az antitestek állapotától függően közvetlen vagy közvetett Coombs-reakciót hajtanak végre. Ha okkal feltételezhető, hogy antitestek rögzülnek a vörösvértestek felületén, közvetlen Coombs-tesztet kell végezni. Ebben az esetben a vizsgálat egy szakaszban történik - antiglobulin szérumot adnak hozzá. Ha a vörösvértestek felületén hiányos antitestek vannak jelen, vörösvértest-agglutináció lép fel.

Közvetett reakció

A közvetett Coombs-reakció 2 szakaszban megy végbe. Először is szükséges a vörösvérsejtek mesterséges érzékenyítése. Ennek érdekében a vörösvértesteket és a vizsgált vérszérumot inkubálják, aminek hatására az antitestek a vörösvértestek felületén fixálódnak. Ezt követően a Coombs-teszt második szakaszát hajtják végre - antiglobulin szérum hozzáadása.

Megjegyzések

Wikimédia Alapítvány. 2010.

Nézze meg, mi a „Coombs-reakció” más szótárakban:

FÉSÜLŐ REAKCIÓ- (Coombs-teszt) a vörösvértestek felszínén lévő reszusantitestek meghatározására szolgáló módszer, amelyek globulinok kicsapódását okozzák a vérszérumban. Ezt a tesztet hemolitikus vérszegénység diagnosztizálására használják Rh-inkompatibilitásban szenvedő csecsemőknél, akik... Orvostudományi magyarázó szótár

Módszer az eritrociták felszínén lévő reszusantitestek meghatározására, amelyek globulinok kicsapódását okozzák a vérszérumban. Ezt a tesztet hemolitikus vérszegénység diagnosztizálására használják Rh-inkompatibilitásban szenvedő csecsemőknél, akiknek... Orvosi kifejezések

- (antiglobulin teszt) a sejtekhez (általában eritrocitákhoz) természetesen vagy mesterségesen kapcsolódó hiányos Abs kimutatására szolgáló módszer antiglobulin ki (A.s.) segítségével. A. s., amely hiányos Abs-t csap ki, hordozó sejteket is bevon ebbe a folyamatba,... ... Mikrobiológiai szótár

FÉSÜLŐ REAKCIÓ- (a brit immunológus, R. R. A. Coombs, 1921-ben született, szinonimája - antiglobulin teszt) - szerológiai reakció, amely az eritrociták hiányos auto- és izoantitestek általi agglutinációján alapul antiglobulin szérum jelenlétében. Nál nél… … Pszichológiai és pedagógiai enciklopédikus szótár

TRANSZFÚZIÓS HEMOLITIKUS REAKCIÓ- édesem A transzfúziós hemolitikus reakció (THR) a recipiens vagy donor (ritkán) vörösvértesteinek hemolízise, ​​amely a vér és annak összetevőinek transzfúziója során következik be. A reakciók lehetnek immunrendszerűek vagy nem immunrendszerűek. Etiológia és patogenezis Immunreakciók...... Betegségek jegyzéke

- (R. R. A. Coombs, 1921-ben született, angol immunológus) szerológiai reakció, amely a vörösvérsejtek hiányos auto- és izoantitestek általi agglutinációján alapul antiglobulin szérum jelenlétében; használják a transzfuziológiában, az igazságügyi orvostanban és... ... Nagy orvosi szótár

FÉSÜLŐ REAKCIÓ- Coombs-reakció, egy szerológiai reakció, amely lehetővé teszi a vörösvértestek felületén rögzült vagy a vérplazmában lévő hiányos antitestek kimutatását. K.r. hiperimmunizálással nyert antiglobulin szérum felhasználásán alapul... Állatorvosi enciklopédikus szótár

FÉSÜLŐ REAKCIÓ- Monovalens vagy úgynevezett részleges antitestek kimutatására, különösen sertések és más állatok vércsoportjainak elemzésére... A haszonállatok tenyésztésében, genetikájában és szaporításában használt fogalmak és meghatározások

Lásd Coombs reakcióját. (

A Coombs-teszt egy laboratóriumi vizsgálat, amelyet a hemagglutináció befolyásolásával végeznek. Az antitestek immunglobulinokkal és enzimelemekkel szembeni érzékenységén, valamint a C3-mal vagy Lg-vel bevont eritrociták agglutináló képességén alapul.

Közvetlen Coombs diagnózis

A sejtek külső felületére telepített antitestek vagy komplement komponensek kimutatására szolgál. A közvetlen Coombs-tesztet a következőképpen hajtjuk végre.

Egy ilyen minta használata

A közvetlen Coombs-diagnózist bizonyos esetekben alkalmazzák, például:

• transzfúziós hatások;
• autoimmun hemolízis;
• gyógyszer okozta hemolitikus anémia.

Közvetett Coombs-teszt

Ez a diagnózis lehetővé teszi a sejtek elleni antitestek kimutatását a szérumban, amelyet általában 0-s típusú donor vörösvértestekkel inkubálnak, majd közvetlen tesztet végeznek. A közvetett Coombs-diagnózist a következő esetekben alkalmazzák:

Hogyan készüljünk fel az elemzésre

A vizsgára való felkészülésnek van néhány szabálya.

1. Ha a beteg újszülött, a szülőknek tisztában kell lenniük azzal, hogy a teszt segít diagnosztizálni az újszülött hemolitikus betegségét.
2. Ha a betegnek hemolitikus vérszegénység gyanúja merül fel, el kell magyarázni neki, hogy az elemzés lehetővé teszi számára, hogy megtudja, hogy ezt védőzavarok, gyógyszerek vagy egyéb tényezők okozzák-e.
3. A Coombs-teszt, akár közvetlen, akár közvetett, nem korlátozza a táplálkozást vagy az étrendet.
4. Értesíteni kell a beteget, hogy a vizsgálathoz vénából kell vért venni, és pontosan meg kell mondani a vénapunkció elvégzésének időpontját.
5. Figyelmeztetnie kell a kellemetlen érzések valószínűségére is a kötés karra történő felhelyezése és maga az eljárás során.
6. Azokat a gyógyszereket, amelyek befolyásolhatják a minta eredményét, abba kell hagyni.

Ezek a gyógyszerek a következők:

• "Sztreptomicin";
• "metildopa";
• "Prokainamid";
• szulfonamidok;
• "Melphalan";
• "Kinidin";
• "Rifampin";
• "Izoniazid";
• cefalosporinok;
• "Hidralazin";
• "Klórpromazin";
• "Levodopa";
• "Tetraciklin";
• "difenilhidantoin";
• "Ethosuximid";
• "Penicillin";
• mefenaminsav.

A vérvétel reggel, éhgyomorra történik.

Hogyan zajlik az esemény

A Coombs-tesztet a következő sorrendben hajtják végre:

1. Felnőtt betegeknél végzett diagnosztika során a vénapunkciót követően vért vesznek EDTA-val (etilén-diamin-tetraacetát) tartalmazó csövekbe.
2. Az újszülött vérét a köldökzsinórból egy EDTA-t tartalmazó főzőpohárba szívják.
3. A szúrt területet vattacsomóval addig nyomják, amíg a vérzés el nem áll.
4. Ha zúzódás jelenik meg a vénapunkció helyén, meleg borogatást írnak elő.
5. A vérvétel után a beteg visszatérhet a gyógyszerek szedéséhez.
6. Tájékoztatni kell az újszülött szüleit, hogy másodlagos elemzésre lehet szükség a vérszegénység dinamikájának nyomon követéséhez.

A Coombs-teszt előnyei

Az ilyen kutatásnak van néhány előnye, nevezetesen:

Az elemzés hátrányai

A pozitív Coombs-teszt meglehetősen munkaigényes vizsgálati módszer, amely jellegzetes végrehajtási pontosságot igényel. Használata során bizonyos nehézségekbe ütközhet, különösen a gyengén pozitív hatások értelmezésével kapcsolatban.

Megállapítást nyert, hogy a Coombs tesztek készítése során fellépő hibás negatív vagy gyengén pozitív reakciók következményei lehetnek a nem kielégítően aktív sejtmosásnak, az antiglobulin reagens szérummaradványok általi gyengülésének, valamint a nem zsíros felületekkel való kapcsolatnak, amelyen az antiglobulin felléphet. rögzíteni kell, ezáltal elveszíti hatékonyságát.

A Coombs-tesztnek van egy másik hátránya - az antiglobulin reagens alacsony stabilitása, amelynek beszerzése és megőrzése egyedi jellemzőkkel rendelkezik, ami hasonlóképpen megnehezíti az antiglobulin szérum hemagglutinációra gyakorolt ​​hatásának számszerű értékelését.

A kutatás során kimutatható betegségek

A Coombs-diagnosztika lehetővé teszi bizonyos típusú betegségek kimutatását, mint például:

• az újszülött hemolitikus rossz közérzete;
• különböző transzfúziós reakciók;
• autoimmun hemolízis;
• gyógyszer okozta hemolitikus anémia.

Ma a Coombs-teszt meglehetősen népszerű vérvizsgálati rendszernek számít mind a felnőttek, mind az újszülöttek számára. Lehetővé teszi számos különböző betegség azonosítását.