Indirektni Coombsov test je pozitivan. Značajke provođenja direktnog Coombsovog testa i interpretacije dobivenih rezultata. Indirektni Coombsov test

Antiglobulinski princip. Antieritrocitna antitijela nepotpunog tipa i molekule komplementa (C) koje se nalaze na površini eritrocita otkrivaju se – direktnim testom – njihovom aglutinacijom u kontaktu sa životinjskim serumom koji sadrži antitijela na humani antiglobulin (antiglobulinski serum). Nepotpuna antitijela slobodna u serumu otkrivaju se - indirektnim testom - pričvršćivanjem na mješavinu normalnih crvenih krvnih zrnaca grupe 0, čiji svi antigeni pripadaju poznatom Rh sistemu, a zatim se aglutiniraju pod utjecajem antiglobulinskog seruma.

Materijali, reagensi za Coombsov antiglobulinski test: epruvete 10/100 ml; graduirane pipete 1,2 ml; Pasteurove pipete; tronošci; nebrušena staklena stakalca; 8,5‰ rastvor NaCl; crvena krvna zrnca. Pacijentova crvena krvna zrnca, kao i ona koja pripadaju grupi 0, dobiće se iz svježe izvađene krvi pomoću sredstva protiv zgrušavanja (EDTA otopina).

Crvena krvna zrnca grupe 0 trebaju biti odabrana na način da potiču od normalnih pojedinaca i da sadrže sve Rh antigeni. Mogu se čuvati do 7 dana u autolognoj plazmi na +4°C. U nedostatku crvenih krvnih zrnaca grupe 0, može se koristiti poznati antigeni mozaik, mješavina crvenih krvnih zrnaca grupe 0, Rh-pozitivnih i Rh-negativnih crvenih krvnih stanica.

Serum pacijent mora biti svježe odabran.

Antiglobulinski serum u produkciji Instituta. I. Cantacuzino, dostupan je u liofilizovanom obliku u ampulama od 1 ml. Nakon rastvaranja, čuvati serum na -20°C.

Tehnika Coombsovog antiglobulinskog testa:
A) Direktan Coombsov test: Isperite pacijentova crvena krvna zrnca 3 puta sa 8,5‰ rastvorom NaCl.
Nanijeti veliku kap razrjeđenja antiglobulinskog seruma na nekoliko staklenih pločica, a pored nje malu kap sedimenta eritrocita pacijenta; pomiješajte kapi sa uglom čaše. Ostavite pripremljeni materijal na stolu 5 minuta, a zatim ispitajte da li ima aglutinata. Ako je rezultat pozitivan, odredite maksimalni titar aglutinacije.

b) Indirektni Coombsov test: eritrociti grupe 0, Rh-pozitivni i Rh-negativni, isprati 3 puta sa 8,5‰ rastvorom NaCl i izložiti pacijentovom serumu brzinom od 2 kapi eritrocita na 8-10 kapi seruma, zatim inkubirati 60 minuta na temperatura od 37°S. Nakon toga ponovo tri puta operite crvena krvna zrnca i tretirajte ih antiglobulinskim serumom, prema uputama za direktni Coombs test.

Kad dođe o hladno aktivnim antitijelima senzibilizirati crvena krvna zrnca grupe 0 na 60 minuta. na temperaturi od +4°C.

Bilješka 1) Nemojte izvoditi direktan Coombsov test na crvenim krvnim zrncima pohranjenim jedan ili nekoliko dana na +4°C ili sobnoj temperaturi, jer rezultati mogu biti lažno pozitivni zbog fiksacije nepotpunih hladno aktivnih antitijela prisutnih u normalnom serumu. 2) U slučajevima teške hiperproteinemije, operite crvena krvna zrnca 4-5 puta i provjerite odsustvo serumskih proteina u posljednjoj tekućini za pranje koristeći sulfosalicilnu kiselinu.

Mogući ostatak od 2 μg IgG/ml u sedimentu eritrocita može neutraliziraju antiglobulinski serum. Coombsov test se može izvesti i korištenjem monospecifičnih anti-IgG, -IgM, -IgA -C3 i -C4 seruma kako bi se razjasnila vrsta stanica koje se nalaze na površini crvenih krvnih zrnaca, na primjer, kod pacijenata koji boluju od autoimune hemolitičke anemija.

Odobreno naredbom Roszdravnadzora

o upotrebi "Seta reagensa za određivanje antigena i antitela rezus sistema u ljudskoj krvi"
(AGS za Coombsov test)

TU 9398-102-51203590-2012

RU br. RZN 2013/1255 od 10.11.2013.

I. UVOD

Standardni serum za Coombsov test sadrži specifična heteroimuna antitijela protiv proteina ljudske krvi i namijenjen je za korištenje u dvije opcije reakcije - direktni i indirektni Coombs test.

Direktan Coombsov test koristi se za određivanje senzibilizacije eritrocita in vivo kod hemolitičke bolesti novorođenčadi i kod pacijenata sa autoimunim oblikom hronične hemolitičke anemije, kao i kod nekih drugih stanja. Izvođenje direktnog Coombsovog testa sastoji se u činjenici da se serum za Coombsov test dodaje crvenim krvnim stanicama koje se proučavaju, prethodno ispranim od proteina vlastite plazme. Ako su crvena krvna zrnca in vivo senzibilizirana, reakcija rezultira njihovom aglutinacijom.

Indirektni Coombsov test koristi se kao test za identifikaciju stanja senzibilizacije tijela, omogućavajući otkrivanje antitijela koja su u slobodnom stanju u krvnom serumu osobe koja se testira; kao test kompatibilnosti transfuzirane krvi, kada se proučava učinak seruma primaoca na crvena krvna zrnca namjeravanog davaoca; i kao test za određivanje antigena različitih grupa u eritrocitima preliminarnim izlaganjem standardnim serumima koji sadrže antitijela poznate specifičnosti. Indirektni Coombs test (sve opcije) proizvedeno u dvije faze, od kojih je prva inkubacija testnog (ili standardnog) seruma sa standardnim (ili test) eritrocitima, odnosno senzibilizacija eritrocita in vitro. Druga faza je stvarna reakcija sa serumom za Coombs test, koji se izvodi na isti način kao i direktni Coombs test.

Konačni rezultat reakcije u direktnim i indirektnim Coombsovim testovima nastaje zbog interakcije standardnog seruma za Coombsov test s antitijelima (protein ljudske krvi) fiksiranim na crvenim krvnim zrncima. Ovaj rezultat se manifestuje kao aglutinacija crvenih krvnih zrnaca. Da biste promatrali aglutinaciju, trebate koristiti bijeli porculan ili bilo koju bijelu ploču s površinom koja se može kvasiti, tako da se kapi nanesene na njega dobro izmiješaju i ne šire se po površini ploče. Pomiješane kapi treba lagano rasporediti po tanjiru, otprilike do veličine novčića od 2 kopejke.
II. PRIPREMA REAKCIJSKIH SASTOJKA

Test serum za određivanje prisutnosti i specifičnosti antitijela u njemu se uzima iz krvi osobe koja se ispituje bez dodavanja konzervansa. Čuvati na temperaturi od +4–8 0 C ne duže od 2 dana ili zamrznuti 1 mjesec.

Serum za ispitivanje kompatibilnosti dobija se na isti način, ali se koristi sa rokom trajanja ne dužim od 2 dana.

Crvena krvna zrnca namijenjena za određivanje određenih izoantigena u njima pripremaju se nekom vrstom konzervansa od osobe čija se krv ispituje. Također možete koristiti sediment crvenih krvnih zrnaca iz krvi uzete bez konzervansa.

Prilikom testiranja kompatibilnosti koristi se krv donora, izvučena kroz iglu iz bočice pripremljene za transfuziju.

U svim slučajevima crvena krvna zrnca se ispiru 3-4 puta u epruvetama iz plazme dodavanjem 8-10 volumena izotonične otopine natrijum hlorida u jednu zapreminu crvenih krvnih zrnaca, nakon čega slijedi miješanje i centrifugiranje na 1500-2000 o/min 5- 10 minuta (do potpune sedimentacije eritrocita). Nakon svakog centrifugiranja, supernatant se odsisava.
III. TEHNIKE REAKCIJE

Test eritrociti se pripremaju u obliku 5% suspenzije, pri čemu se jedna kap četiri puta ispranih eritrocita pomeša u epruveti sa 19 kapi izotoničnog rastvora natrijum hlorida.

Jedna kap (0,05 ml) 5% suspenzije crvenih krvnih zrnaca prenosi se na bijelu ploču i namaže. Ploča se protrese i posmatra 3 minuta da se vidi da li je došlo do aglutinacije crvenih krvnih zrnaca. Ako nije došlo do aglutinacije, dodajte 1-2 kapi standardnog seruma za Coombsov test, dobro promiješajte kapi, zatim lagano protresite ploču, zatim ostavite jednu ili dvije minute na miru i ponovo protresite. Istovremeno, rezultat se prati 10 minuta, što se izražava u prisustvu ili odsustvu aglutinacije.
Interpretacija rezultata direktnog Coombsovog testa.

Nema aglutinacije – negativan test

Prisustvo aglutinacije – pozitivan test, koji ukazuje na senzibilizaciju crvenih krvnih zrnaca koja se ispituju, odnosno na apsorpciju antitela na njima, koja se dogodila in vivo u ljudskom organizmu (novorođenče, pacijent). Ukoliko dođe do aglutinacije ispitivanih crvenih krvnih zrnaca dogodio prije dodavanja serum za Coombsov test; rezultat direktnog testa se ne uzima u obzir.
2. Indirektni Coombsov test

Dizajniran za otkrivanje izoantitijela u krvnom serumu subjekta

Koristi se u slučajevima kada je potrebno utvrditi da li krv pacijenta, trudnice, donora i dr. sadrži izoimuna antitijela nekompletnog oblika i utvrditi njihovu specifičnost. Za reakciju se koristi krvni serum osobe koja se ispituje i standardna crvena krvna zrnca poznate specifičnosti. Među ovih 8-10 ili više uzoraka crvenih krvnih zrnaca trebalo bi da postoje razlike u faktorima iz drugih sistema i veoma je važno da svaki od ovih faktora bude sadržan u najmanje jednom uzorku crvenih krvnih zrnaca. Panel uključuje i uzorke Rh-negativnih eritrocita sa raznim kombinacijama antigena drugih sistema, tako da među njima ima Duffy-pozitivnih i Duffy-negativnih, koji bi se, pak, podijelili na Kell-pozitivne i Kell-negativne, Kidd-pozitivan i Kidd-negativan itd. Kao negativna kontrola, ako je moguće, u reakciju su uključeni eritrociti osobe čiji se serum testira.

Tehnika reakcije

U postolje se postavlja određeni broj centrifugalnih ili drugih epruveta zapremine 3-10 ml, prema broju uzoraka eritrocita uključenih u reakciju. Epruvete su označene i, prema oznakama, u njih se dodaje 1 mala kap (0,01 ml) ispranih standardnih crvenih krvnih zrnaca. U svaku epruvetu se ukapaju tri kapi test seruma, epruvete se snažno protresu da se crvena krvna zrnca pomiješaju sa serumom i stave u termostat na 37 0 C na 45 minuta. Nakon inkubacije, epruvete se uklanjaju iz termostata, a crvena krvna zrnca se ispiru dodavanjem izotonične otopine natrijum hlorida na vrh epruvete, miješanjem i naknadnim centrifugiranjem. Ispiranje se ponavlja 3-4 puta, svaki put pažljivo isisavajući supernatant, zatim se ispranim crvenim krvnim zrncima dodaju 2 kapi izotonične otopine natrijevog klorida kako bi se dobilo otprilike 5% suspenzije (kada koristite epruvete za centrifugiranje, možete se ograničiti do dva puta pranja).

1 kap 5% suspenzije eritrocita iz svake epruvete prebacuje se na bijelu ploču, tu se doda 1-2 kapi standardnog seruma za Coombsov test i serum se dobro pomiješa sa eritrocitima. Ploča se lagano protrese, zatim ostavi na miru 1-2 minute i opet periodično protrese, dok se istovremeno posmatra rezultat reakcije 20 minuta.

Interpretacija rezultata

Nema znakova aglutinacije (negativan rezultat) u svim uzorcima znači da test serum ne sadrži nekompletna antitijela na grupne antigene koja se nalaze u standardnim crvenim krvnim zrncima uključenim u studiju.

Ako u nekim ili većini kapi, pored kontrole, posmatrano aglutinacija , to znači da test serum sadrži nekompletna antitijela protiv antigena eritrocita. Pitanje specifičnosti ovih antitela rešava se poređenjem pozitivnih i negativnih reakcija sa antigenskom strukturom crvenih krvnih zrnaca uključenih u reakciju. Pitanje aktivnosti ovih antitijela rješava se titracijom.

Primjer 1. Do aglutinacije je došlo kod svih uzoraka eritrocita koji sadrže Rh 0 (D) faktor, bez obzira na prisustvo ili odsustvo drugih faktora ovog sistema i drugih sistema, dok kod svih Rh 0 (D) - negativnih uzoraka aglutinacija nije uočena (tj. bez obzira na prisustvo ili odsustvo drugih faktora) – to znači da test serum sadrži nekompletna anti-Rhesus antitela – Rh 0 (D).

Primjer 2. Do aglutinacije je došlo kod svih uzoraka eritrocita koji sadrže Duffy faktor, bez obzira na prisustvo ili odsustvo antigena Rhesus sistema i drugih sistema, dok kod svih Duffy negativnih uzoraka nije uočena aglutinacija, što znači da test serum sadrži nekompletan anti- -Duffy.

Dodatak. Ukoliko ustanova nema kompletan panel standardnih crvenih krvnih zrnaca, ali postoji potreba za testiranjem seruma na prisustvo antitela, preporučuje se da se uradi studija sa 25-30 nasumičnih uzoraka crvenih krvnih zrnaca od zdravih osoba grupa 0 (I) ili serum istog naziva kao i test serum. To će omogućiti rješavanje pitanja prisutnosti ili odsustva antitijela na većinu antigena sistema Rh-Hr, Duffy, Kell, Kidd.

Ako se dobije pozitivan rezultat, daljnji zaključak o specifičnosti otkrivenih antitijela može se donijeti posebnom studijom s punim panelom standardnih crvenih krvnih zrnaca.

3. Tehnika izvođenja indirektnog Coombs testa kao testa kompatibilnosti transfuzirane krvi

Kako bi se spriječila nekompatibilnost tokom transfuzije krvi, prije transfuzije moraju se izvršiti sljedeći testovi kompatibilnosti:

1. 
   Test kompatibilnosti za ABO krvne grupe, koji se izvodi u avionu na sobnoj temperaturi.
2. 
   Testovi kompatibilnosti za Rh faktor i druge izoantigene.

Inkompatibilnost za Rh faktor i neke druge izoantigene može zavisiti kako od prisustva potpunih antitijela (utvrđenih u fiziološkom okruženju na 37 0 C u epruvetama), tako i najčešće od nekompletnih antitijela, za koje je indirektni Coombsov test najviše osjetljivo.

Jedna mala (0,01 ml) kap ispranih donorskih eritrocita, uzeta kroz iglu iz boce krvi namenjene za transfuziju, prenosi se na dno centrifuge ili druge epruvete zapremine 3-4 ml i 3 kapi pacijentovog u to se dodaje serum. Epruveta se protrese da se eritrociti pomiješaju sa serumom, nakon čega se stavi u termostat na 37 0 C na 45 minuta. Nakon inkubacije, na vrh epruvete se dodaje izotonični rastvor natrijum hlorida, sadržaj epruvete se meša i centrifugira 5-10 minuta. Ovo ispiranje crvenih krvnih zrnaca se ponavlja 3 puta, svaki put pažljivo uklanjajući supernatant. Kada koristite epruvete za centrifugiranje, možete se ograničiti na pranje dva puta. Dodajte 2 kapi izotonične otopine natrijum hlorida ispranim crvenim krvnim zrncima da dobijete približno 5% suspenzije.

1 kap 5% suspenzije crvenih krvnih zrnaca prebacuje se na bijelu ploču, tu se doda 1-2 kapi standardnog seruma za Coombsov test i serum se temeljito miješa sa crvenim krvnim zrncima. Zatim se ploča lagano protrese, ostavi na miru 1-2 minute i periodično ponovo protrese, uz promatranje rezultata 20 minuta.

Bilješka: U slučaju Rh inkompatibilnosti, aglutinacija se obično javlja unutar prve minute, ali s niskim titrom Rh antitijela (ili drugih antitijela), aglutinacija može nastupiti kasnije, ponekad do dvadesetog minuta.
Tumačenje rezultata:

Aglutinati su vidljivi u obliku grudica na očišćenoj ili potpuno izbijeljenoj pozadini - to znači da krv davaoca nekompatibilno sa krvlju primaoca i ne može mu se transfuzirati.

Odsutnost znaci aglutinacije znače da krv pacijenta ne sadrži nepotpuna antitijela na crvena krvna zrnca donora u odnosu na Rh faktor i druge izoantigene na koje bi se mogla formirati nepotpuna antitijela.

Indirektni Coombsov test je osjetljiv samo na nepotpuna antitijela.
4. Tehnika indirektnog Coombsovog testa za određivanje antigenske strukture eritrocita

Ovaj test se koristi za određivanje prisutnosti ili odsustva bilo kojeg antigena grupe crvenih krvnih zrnaca koristeći standardni serum koji sadrži odgovarajuća antitijela u nekompletnom obliku.

Najčešće se indirektni Coombsov test koristi za određivanje antigena Kell (K), Duffy (Fy), Kidd (Jk), kao i za određivanje slabog antigena Rh sistema (Du).

Pre nego što se nastavi sa određivanjem antigena, crvena krvna zrnca koja se proučavaju treba da se testiraju direktnim Coombsovim testom. Ako je rezultat direktnog testa pozitivan, određivanje antigena indirektnim Coombsovim testom ne može se provesti i u tu svrhu se moraju koristiti druge reakcije.

Za reakciju se koristi centrifuga ili druge epruvete zapremine 3-4 ml u količini od tri: jedna za uzorak eritrocita i dve za 1 malu (0,01 ml) kap tri puta ispranih ispitivanih eritrocita u na dnu prve epruvete, kontrolni eritrociti se dodaju u drugu epruvetu koja sadrži željeni antigen (na primjer, Duffy-pozitivan) iu treću epruvetu - negativnu kontrolu (Duffy-negativna). Dodajte 2-3 kapi standardnog seruma (u ovom primjeru anti-Duffy) u sve epruvete. Epruvete se protresu da se sadržaj pomiješa i stavi u termostat na 37 0 C na 45 minuta. Nakon takve inkubacije, epruvete se vade iz termostata, na vrh se dodaje izotonični rastvor natrijum hlorida, sadržaj se dobro promeša i centrifugira na 1500-2000 hiljada obrtaja u minuti 5-10 minuta. Nakon centrifugiranja, supernatant se pažljivo isiše i ovo ispiranje crvenih krvnih zrnaca se ponavlja 4 puta. (Kada koristite epruvete za centrifugiranje, možete se ograničiti na pranje dva puta).

Dodajte 2 kapi izotonične otopine natrijum hlorida ispranim crvenim krvnim zrncima da dobijete približno 5% suspenzije. 1 kap 5% suspenzije eritrocita iz svake epruvete prenese se na bijelu ploču, u svaku kap eritrocita se doda 1-2 kapi standardnog seruma za Coombsov test i pomiješa. Ploča se lagano protrese, zatim ostavi na miru 1-2 minute i opet periodično protrese, uz istovremeno praćenje 20 minuta odvijanja reakcije.
Interpretacija rezultata

Prisustvo aglutinacije crvena krvna zrnca (pozitivan rezultat) znači da krv sadrži željeni antigen (u ovom primjeru, Duffy-pozitivna krv).

Nema aglutinacije (negativan rezultat) znači da testirana krv ne sadrži željeni antigen (Duffy negativan).

Rezultat se uzima u obzir kao tačan nakon provjere kontrolnih uzoraka, odnosno u primjeru, ako je rezultat pozitivan s Duffy-pozitivnim uzorkom i negativan s Duffy-negativnim uzorkom.

5. Obrazac za oslobađanje

Reagens je dostupan u tečnom obliku u bočicama od 5 ili 10 ml (1 ml sadrži 10 doza). Natrijum-azid se koristi kao konzervans u konačnoj koncentraciji od 0,1%.

6.Skladištenje

Rok trajanja: dvije godine u frižideru na 2-8°C. Otvorena boca je pogodna za upotrebu kada se čuva u frižideru, hermetički zatvorena, tokom celog roka trajanja.

Razlozi za reklamaciju su: neaktivnost, nespecifičnost, narušavanje integriteta boce, prisustvo pahuljica, reagens istekao. Prilikom reklamacije navedite datum prijema, dobavljača (ako ste dobili proizvod ne od proizvođača), broj serije i razloge zbog kojih je reagens neprikladan. Molimo priložite protokol sa rezultatima testiranja reagensa i 2-3 neotvorene boce sa reagensom
Reklamaciju uputiti proizvođaču DOO "MEDICLON": 127276

Na površini crvenih krvnih zrnaca nalazi se veliki broj antigena. U zavisnosti od vrste ovih antigena razlikuju se krvne grupe, a najviše proučavane grupe su ABO, Rh, Kell, Duffy i mnoge druge...

Prosječna cijena u vašoj regiji: 2645 od 2645 ... do 2645

1 laboratorija obavlja ovu analizu u vašem regionu

Opis studije

Priprema za studij: Krv se vadi iz vene, a zatim se serum (krvna plazma bez fibrinogena) dobija prirodnim zgrušavanjem ili precipitacijom fibrinogena. Ispitni materijal: Uzimanje krvi

Na površini crvenih krvnih zrnaca nalazi se veliki broj antigena. U zavisnosti od vrste ovih antigena razlikuju se krvne grupe, a najviše proučavane grupe su ABO, Rh, Kell, Duffy i mnogi drugi sistemi. Normalno u krvi postoje antitela na antigene druge grupe, ali tokom transfuzije krvi, trudnoće, autoimunih bolesti itd. otkrivaju se antitela na sopstvene antigene. Nepotpuna antitela na crvena krvna zrnca

Metoda

Indirektna Coombsova reakcija bazira se na detekciji aglutinacije (grupanja) crvenih krvnih zrnaca koja imaju nepotpuna antitijela na površini, koja se javlja kada se doda antiglobulinski serum.

U prvoj fazi, crvena krvna zrnca donora (O(I) grupa, Rh+) ​​i test serum se dodaju u jednu epruvetu. Ako su u test serumu prisutna nepotpuna antitijela na crvena krvna zrnca, ona se fiksiraju na površini crvenih krvnih stanica donora.

U drugoj fazi, na staklo se nanose crvena krvna zrnca donora s antitijelima (ako ih ima) i standardni antiglobulinski serum sa antitijelima na humane imunoglobuline. Ako se u prvoj fazi antitijela na crvena krvna zrnca fiksiraju na površini crvenih krvnih stanica, onda kada se doda standardni serum, crvena krvna zrnca se lijepe zbog interakcije antitijela.

Referentne vrijednosti - norma
(Indirektni Coombsov test (antiglobulinski test, otkrivanje nepotpunih anti-eritrocitnih antitijela), krv)

Podaci o referentnim vrijednostima indikatora, kao i sastav indikatora uključenih u analizu, mogu se neznatno razlikovati u zavisnosti od laboratorija!

norma:

Normalno, ne bi trebalo postojati antitijela na vlastita crvena krvna zrnca; kada se radi Coombsov test, ne dolazi do agregacije crvenih krvnih zrnaca.

Indikacije

Studija humoralnog specifičnog imuniteta kod sumnje na autoimune reakcije u organizmu, Rh konflikt između majke i fetusa, utvrđivanje kompatibilnosti krvi između davaoca i primaoca

Povećanje vrijednosti (pozitivan rezultat)

Antitijela na crvena krvna zrnca se otkrivaju kada:

1. Autoimuna hemolitička anemija

2. Hemolitička bolest novorođenčeta

3. Sistemske bolesti vezivnog tkiva

4. Hronični aktivni hepatitis itd.

Coombsova reakcija

Coombsova reakcija- antiglobulinski test za određivanje nepotpunih anti-eritrocitnih antitijela. Coombsov test se koristi za otkrivanje antitijela na Rh faktor kod trudnica i za određivanje hemolitičke anemije kod novorođenčadi sa Rh inkompatibilnošću, što dovodi do uništavanja crvenih krvnih stanica. Ovu metodu je predložio engleski liječnik Robert Coombs 1945. godine, pa je kasnije nazvana “Coombsova reakcija”.

Direktna Coombsova reakcija

Antitijela koja se nalaze na površini crvenih krvnih stanica mogu biti statična ili slobodna u krvnoj plazmi. U zavisnosti od stanja antitijela, izvodi se direktna ili indirektna Coombsova reakcija. Ako postoji razlog za vjerovanje da su antitijela fiksirana na površini crvenih krvnih zrnaca, izvodi se direktan Coombsov test. U ovom slučaju, test se odvija u jednoj fazi - dodaje se antiglobulinski serum. Ako su nepotpuna antitijela prisutna na površini crvenih krvnih stanica, dolazi do aglutinacije crvenih krvnih stanica.

Indirektna reakcija

Indirektna Coombsova reakcija se javlja u 2 faze. Prvo, potrebno je umjetno senzibilizirati crvena krvna zrnca. Da bi se to postiglo, crvena krvna zrnca i krvni serum koji se testira se inkubiraju, što uzrokuje fiksiranje antitijela na površini crvenih krvnih stanica. Nakon čega se provodi druga faza Coombsovog testa - dodavanje antiglobulinskog seruma.

Bilješke

Wikimedia Foundation. 2010.

Pogledajte kakva je “Coombsova reakcija” u drugim rječnicima:

COMBES REACTION- (Coombsov test) metoda za određivanje resusantitijela na površini eritrocita koja izazivaju taloženje globulina u krvnom serumu. Ovaj test se koristi za dijagnosticiranje hemolitičke anemije kod novorođenčadi sa Rh inkompatibilnošću koja ... ... Eksplanatorni rječnik medicine

Metoda za određivanje resusantitijela na površini eritrocita, koja izazivaju taloženje globulina u krvnom serumu. Ovaj test se koristi za dijagnosticiranje hemolitičke anemije kod novorođenčadi sa Rh inkompatibilnošću koja imaju ... ... Medicinski termini

- (antiglobulinski test) metoda za otkrivanje nekompletnih trbušnjaka prirodno ili umjetno povezanih sa stanicama (obično eritrocitima) korištenjem antiglobulinskog ki (A.s.). A. s., precipitirajući nepotpune Abs, uključuje ćelije nosače u ovaj proces, ... ... Mikrobiološki rječnik

COMBES REACTION- (nazvan po britanskom imunologu R. R. A. Coombsu, rođenom 1921., sinonim - antiglobulinski test) - serološka reakcija bazirana na aglutinaciji eritrocita nepotpunim auto- i izoantitijelima u prisustvu antiglobulinskog seruma. U… … Enciklopedijski rečnik psihologije i pedagogije

TRANSFUZIJSKA HEMOLITIČKA REAKCIJA- dušo Transfuzijska hemolitička reakcija (THR) je hemoliza crvenih krvnih zrnaca primaoca ili donora (rijetko), koja se javlja tokom transfuzije krvi i njenih komponenti. Reakcije mogu biti imune ili neimune prirode. Etiologija i patogeneza Imune reakcije ... ... Imenik bolesti

- (R. R. A. Coombs, rođen 1921, engleski imunolog) serološka reakcija zasnovana na aglutinaciji eritrocita nepotpunim auto i izoantitelima u prisustvu antiglobulinskog seruma; koristi se u transfuziologiji, sudskoj medicini, a takođe ... ... Veliki medicinski rječnik

COMBES REACTION- Coombsova reakcija, serološka reakcija koja omogućava otkrivanje nepotpunih antitijela fiksiranih na površini crvenih krvnih stanica ili sadržanih u krvnoj plazmi. K.r. zasniva se na upotrebi antiglobulinskog seruma dobijenog hiperimunizacijom... Veterinarski enciklopedijski rječnik

COMBES REACTION- Koristi se za detekciju monovalentnih ili tzv. parcijalnih antitela, posebno za analizu krvnih grupa svinja i nekih drugih životinja... Termini i definicije koji se koriste u uzgoju, genetici i reprodukciji domaćih životinja

Vidi Coombsovu reakciju. (

Coombsov test je laboratorijski test koji se radi utjecajem na hemaglutinaciju. Zasniva se na osjetljivosti antitijela na imunoglobuline i enzimske elemente, kao i na njihovoj sposobnosti da aglutiniraju eritrocite obložene C3 ili Lg.

Direktna Coombsova dijagnoza

Koristi se za otkrivanje antitijela ili komponenti komplementa instaliranih na vanjskoj strani stanica. Direktni Coombsov test se izvodi na sljedeći način.

Upotreba takvog uzorka

Direktna Coombsova dijagnoza se koristi u određenim slučajevima, kao što su:

• efekti transfuzije;
• autoimuna hemoliza;
• hemolitička anemija uzrokovana lijekovima.

Indirektni Coombsov test

Ova dijagnoza omogućava otkrivanje antitijela na stanice u serumu, koji se u pravilu inkubira s donorskim crvenim krvnim zrncima tipa 0, a zatim se provodi direktan test. Indirektna Coombsova dijagnoza se koristi u sljedećim slučajevima:

Kako se pripremiti za analizu

Postoje neka pravila za pripremu ispita.

1. Ako je pacijent novorođenče, roditelji moraju biti svjesni da će test pomoći u dijagnosticiranju hemolitičke bolesti novorođenčeta.
2. Ukoliko pacijent sumnja na hemolitičku anemiju, treba mu objasniti da će mu analiza omogućiti da se utvrdi da li je uzrokovana zaštitnim poremećajima, lijekovima ili drugim faktorima.
3. Coombsov test, direktan i indirektan, ne postavlja nikakva ograničenja u ishrani ili prehrani.
4. Potrebno je obavijestiti pacijenta da će pregled zahtijevati vađenje krvi iz vene, te mu reći kada će se tačno izvršiti venepunkcija.
5. Također biste trebali upozoriti na vjerojatnost neugodnih senzacija tokom perioda nanošenja zavoja na ruku i samog postupka.
6. Lijekove koji mogu utjecati na rezultate uzorka treba prekinuti.

Ovi lijekovi uključuju:

• "Streptomicin";
• "Metildopa";
• "Prokainamid";
• sulfonamidi;
• "Melphalan";
• "Kinidin";
• "Rifampin";
• "Izoniazid";
• cefalosporini;
• "Hydralazine";
• "Klorpromazin";
• "Levodopa";
• "Tetraciklin";
• "Difenilhidantoin";
• "Etosuksimid";
• "Penicilin";
• mefenaminska kiselina.

Uzimanje krvi se radi ujutro na prazan želudac.

Kako se događaj održava

Coombsov test se provodi sljedećim redoslijedom:

1. Prilikom dijagnostike kod odraslog pacijenta, nakon punkcije vene, krv se uzima u epruvete sa EDTA (etilendiamintetraacetat).
2. Krv novorođenčeta se vadi iz pupčane vrpce u čašu koja sadrži EDTA.
3. Područje uboda se pritisne pamučnim štapićem dok krvarenje ne prestane.
4. Ako se na mjestu uboda vene pojavi modrica, propisuju se topli oblozi.
5. Nakon uzimanja krvi, pacijentu je dozvoljeno da se vrati uzimanju lijekova.
6. Potrebno je obavijestiti roditelje novorođenčeta da može biti potrebna sekundarna analiza za praćenje dinamike anemije.

Prednosti Coombsovog testa

Takvo istraživanje ima neke prednosti, a to su:

Nedostaci analize

Pozitivan Coombsov test je prilično radno intenzivna metoda ispitivanja koja zahtijeva karakterističnu točnost izvođenja. Prilikom njegove upotrebe možete naići na određene poteškoće, posebno u vezi sa tumačenjem slabo pozitivnih efekata.

Utvrđeno je da pogrešne negativne ili slabo pozitivne reakcije pri izradi Coombsovih testova mogu biti posljedica nezadovoljavajuće aktivnog ispiranja stanica, slabljenja antiglobulinskog reagensa serumskim ostacima, kao i veze sa nemasnim površinama, na kojima antiglobulin može. biti fiksiran, čime gubi svoju efikasnost.

Coombsov test ima još jedan nedostatak - nisku stabilnost antiglobulinskog reagensa, čije stjecanje i očuvanje imaju individualne karakteristike, što na sličan način otežava numeričku procjenu učinka antiglobulinskog seruma na hemaglutinaciju.

Bolesti koje se mogu otkriti tokom istraživanja

Coombsova dijagnostika omogućava otkrivanje određenih vrsta bolesti, kao što su:

• hemolitička slabost novorođenčeta;
• razne transfuzijske reakcije;
• autoimuna hemoliza;
• hemolitička anemija uzrokovana lijekovima.

Danas se Coombsov test smatra prilično popularnim sistemom za testiranje krvi i za odrasle i za novorođenčad. Omogućava prepoznavanje mnogih različitih bolesti.