Laboratoriediagnostik av HIV. Metoder för laboratoriediagnostik av HIV. Vad är ett retrovirus

I ett högt specialiserat laboratorium utförs:

A) bestämning av antikroppar, antigener och immunkomplex som cirkulerar i blodet; odling av viruset, detektion av dess genomiska material och enzymer;

B) bedömning av funktionerna hos den cellulära länken i immunsystemet. Huvudrollen tillhör metoderna för serologisk diagnostik som syftar till att bestämma antikroppar, såväl som patogena antigener i blodet och andra biologiska vätskor i kroppen.

Testning av antikroppar mot HIV utförs för att:

A) säkerhet vid blodtransfusioner och transplantationer;

B) övervakning, testning för att övervaka prevalensen av HIV-infektion och studera dynamiken i dess prevalens i en viss population;

C) diagnos av HIV-infektion, dvs frivillig testning av blodserum från praktiskt taget friska personer eller patienter med olika kliniska tecken och symtom som liknar HIV-infektion eller AIDS.

Systemet för laboratoriediagnostik av HIV-infektion bygger på en trestegsprincip. Det första steget är screening, utformad för att utföra primära blodprover för förekomst av antikroppar mot HIV-proteiner. Det andra steget är refererande - det gör det möjligt att använda speciella metodologiska tekniker för att klargöra (bekräfta) det primära positiva resultatet som erhölls vid screeningsteget. Det tredje steget - expert, är avsett för den slutliga verifieringen av närvaron och specificiteten av HIV-infektionsmarkörer som identifierats i de tidigare stadierna av laboratoriediagnostik. Behovet av flera stadier av laboratoriediagnostik beror i första hand på ekonomiska överväganden.

I praktiken används flera tester för att identifiera hiv-smittade personer med tillräcklig grad av säkerhet:

ELISA (ELISA)-test (enzymkopplad immunosorbentanalys) för att detektera den första nivån kännetecknas av hög känslighet, även om mindre specificitet än följande;

Immunblot (Western-blot), ett mycket specifikt och mest använda test för att skilja mellan HIV-1 och HIV-2;

Antigenemi p25-test, effektivt i de inledande stadierna av infektion;

Polymeraskedjereaktion (PCR).

Vid massscreening av blodprov rekommenderas att testa blandningar av sera från en grupp försökspersoner, sammanställda på ett sådant sätt att den slutliga utspädningen av varje prov inte överstiger 1:100. Om blandningen av sera är positiv, analyseras varje serum av den positiva blandningen. Denna metod leder inte till förlust av känslighet i både ELISA och immunoblot, men minskar arbetskostnaderna och kostnaden för den första undersökningen med 60-80%.

Immunologiska metoder

1. antalet T-hjälpare,

2. förhållandet mellan T4 och T8,

3. tillstånd av överkänslighet,

4. T-cellsystemets kompensatoriska funktion.

Det manifesteras av hyperproduktion av immunglobuliner, de har låg affinitet och kroppens material konsumeras ännu mer.

Nackdelar: visas sent, vissa immunologiska indikatorer kan vara med andra infektioner.

Kliniska metoder – kanske. liknar andra sjukdomar, de mest typiska manifestationerna registreras i senare skeden, så klinisk diagnos är inte särskilt effektiv

Huvudmetoden - serologisk - implementeras i 2 steg:

1 - screeningundersökning - provtagning för totala antikroppar mot alla proteiner i immunanalysen. Detta stadium ger 95 % sanna resultat och 5 % falskt positiva.

2 - konfirmationsmetod - alla prover undersöks med en konfirmationsmetod. Denna teknik låter dig upptäcka antikroppar mot virusproteinet. Ett positivt resultat, när antikroppar mot minst 3 virala proteiner detekteras, om till 1 eller 2 är resultatet tveksamt och kräver ytterligare undersökning.

I den primära serodiagnosen av HIV-infektion bestäms totala antikroppar med hjälp av screeningscreening-tester - ELISA och agglutinationsreaktioner. I det andra (arbitration) skedet används ett mer komplext test - en immunoblot, som inte bara gör det möjligt att bekräfta eller avvisa den initiala slutsatsen, utan också att göra detta på nivån för att bestämma antikroppar mot enskilda proteiner av viruset.

Tolkning av testresultat för HIV-antikroppar

Ett ganska stort antal olika faktorer påverkar resultatet av en analys av antikroppar mot hiv, och bland dem är analystiden efter en eventuell infektion viktig.

I de flesta fall kan HIV-antikroppar detekteras 6 till 12 veckor efter infektion. Denna period från virusets inträde i kroppen tills en detekterbar mängd antikroppar uppträder kallas perioden med positiv serokonversion eller "fönsterperioden". Det finns sällsynta fall av antikroppar som uppträder 6 månader efter infektion, och rapporter om upptäckt av antikroppar först efter 1 år har inga bevis. För närvarande använder diagnostjänsten nya generationer av ELISA-metoder som gör det möjligt att detektera antikroppar mot HIV 3–4 veckor efter infektion, och vissa kombinationer av dessa metoder, de så kallade teststrategierna, reducerar ”fönster”-perioden till 2–3 veckor, dvs. göra det möjligt att upptäcka antikroppar mot HIV så snart de börjar produceras i kroppen.

Ett negativt resultat betyder att inga antikroppar mot HIV hittades i blodet hos försökspersonen. Detta tillstånd kallas seronegativitet och innebär vanligtvis att personen inte är smittad.

Ett negativt resultat ger inga garantier för framtiden. Han anger endast tillståndet vid undersökningstillfället. Det finns en liten chans att undersökningen genomfördes under fönsterperioden. Om en person tidigare har varit i riskzonen att smittas av hiv och har testat negativt, bör de testas igen minst 6 månader efter riskhändelsen.

Ett positivt resultat betyder att antikroppar mot HIV hittades i blodet hos försökspersonen. Detta tillstånd kallas seropositivitet - en person är infekterad med HIV. Det är viktigt att förstå att ett positivt resultat endast indikerar HIV-infektion och inte AIDS. Det är dock oerhört viktigt att uppsöka läkare för råd och vid behov medicinsk hjälp för att bibehålla en god livskvalitet under lång tid efter att man fått ett positivt resultat.

Obestämt resultat. Sällan är resultatet av ett HIV-antikroppstest oklart. Laboratoriet kan inte avgöra om personen är seropositiv eller seronegativ. Under sådana omständigheter är det nödvändigt att konsultera en läkare och testa sig igen.



Tidig diagnos av HIV-infektion blir en extremt viktig åtgärd, eftersom tidigare behandling till stor del kan avgöra sjukdomens vidare utveckling och förlänga patientens liv. Under de senaste åren har det skett betydande framsteg inom området för att upptäcka denna fruktansvärda sjukdom: de gamla testsystemen ersätts av mer avancerade, undersökningsmetoderna blir mer tillgängliga och deras noggrannhet ökar avsevärt.

I den här artikeln kommer vi att prata om moderna metoder för att diagnostisera HIV-infektion, som är användbara att veta för snabb behandling av detta problem och upprätthålla patientens normala livskvalitet.

Metoder för att diagnostisera HIV

I Ryssland, för diagnos av HIV-infektion, utförs ett standardförfarande, som inkluderar två nivåer:

• ELISA-testsystem (screeningsanalys);
• immunblotting (IB).

Andra diagnostiska metoder kan också användas:

• uttryckliga tester.

ELISA testsystem

I det första stadiet av diagnosen används ett screeningtest (ELISA) för att upptäcka HIV-infektion, som är baserat på HIV-proteiner som skapas i laboratorier som fångar upp specifika antikroppar som produceras i kroppen som svar på infektion. Efter deras interaktion med reagenserna (enzymer) i testsystemet ändras färgen på indikatorn. Vidare bearbetas dessa färgförändringar på specialutrustning, som bestämmer resultatet av den utförda analysen.

Sådana ELISA-tester kan visa resultat inom några veckor efter införandet av HIV-infektion. Denna analys bestämmer inte förekomsten av viruset, men detekterar produktionen av antikroppar mot det. Ibland, i människokroppen, börjar produktionen av antikroppar mot HIV efter 2 veckor efter infektion, men hos de flesta produceras de vid ett senare tillfälle, efter 3-6 veckor.

Det finns fyra generationer av ELISA-tester med olika känslighet. På senare år har III- och IV-generationstestsystem använts mer frekvent, som är baserade på syntetiska peptider eller rekombinanta proteiner och har större specificitet och noggrannhet. De kan användas för att diagnostisera HIV-infektion, övervaka HIV-prevalensen och säkerställa säkerhet vid testning av donerat blod. Noggrannheten för III och IV generationens ELISA testsystem är 93-99% (känsligare är de tester som produceras i Västeuropa - 99%).

För att utföra ett ELISA-test tas 5 ml blod från patientens ven. Mellan den sista måltiden och analysen bör vara minst 8 timmar (som regel utförs den på morgonen på fastande mage). Ett sådant test rekommenderas att tas tidigast 3 veckor efter den påstådda infektionen (till exempel efter oskyddat samlag med en ny sexpartner).

Resultaten av ELISA-testet erhålls efter 2-10 dagar:

• negativt resultat: indikerar frånvaron av HIV-infektion och kräver ingen remiss till en specialist;
• falskt negativt resultat: kan observeras i de tidiga stadierna av infektion (upp till 3 veckor), i de senare stadierna av AIDS med allvarlig immundämpning och med felaktig blodförberedelse;
• falskt positivt resultat: det kan observeras i vissa sjukdomar och vid felaktig blodberedning;
• positivt resultat: indikerar infektion med HIV-infektion, kräver IB och patientens remiss till specialist på AIDS-center.

Varför kan ett ELISA-test ge falskt positiva resultat?

Falskt positiva resultat av ett ELISA-test för HIV kan observeras vid felaktig behandling av blod eller hos patienter med sådana tillstånd och sjukdomar:

• multipelt myelom;
• infektionssjukdomar provocerade av Epstein-Barr-viruset;
• ange efter ;
• autoimmuna sjukdomar;
• mot bakgrund av graviditeten;
• tillstånd efter vaccination.

Av de skäl som beskrivits ovan kan icke-specifika korsreagerande antikroppar finnas i blodet, vars produktion inte framkallades av HIV-infektion.

Under de senaste åren har frekvensen av falskt positiva resultat minskat avsevärt på grund av användningen av III- och IV-generationstestsystem, som innehåller mer känsliga peptider och rekombinanta proteiner (de syntetiseras med hjälp av in vitro-genteknik). Efter användning av sådana ELISA-tester har frekvensen av falskt positiva resultat minskat avsevärt och är cirka 0,02-0,5 %.

Ett falskt positivt resultat betyder inte att en person är smittad med hiv. I sådana fall rekommenderar WHO ytterligare ett ELISA-test (obligatorisk IV-generering).

Patientens blod skickas till ett referens- eller skiljelaboratorium märkt "upprepa" och testas på ett IV-generations ELISA-testsystem. Om resultatet av den nya analysen är negativt identifieras det första resultatet som felaktigt (falskt positivt) och IB utförs inte. Om resultatet är positivt eller tveksamt under det andra testet, måste patienten genomgå IB inom 4-6 veckor för att bekräfta eller motbevisa HIV-infektion.

immunblotting

En definitiv diagnos av HIV-infektion kan endast ställas efter att ett positivt resultat av immunblotting (IB) erhållits. För dess implementering används en nitrocellulosaremsa, på vilken virala proteiner appliceras.

Blodprov för IB görs från en ven. Sedan utsätts den för speciell behandling och proteinerna i dess serum separeras i en speciell gel enligt deras laddning och molekylvikt (manipulationen utförs på specialutrustning under inverkan av ett elektriskt fält). En nitrocellulosaremsa appliceras på blodserumgelen och blotting ("blotting") utförs i en speciell kammare. Remsan bearbetas och om materialen som används innehåller antikroppar mot HIV, binder de till de antigena banden på IB och visas som linjer.

IB anses vara positivt om:

• enligt amerikanska CDC-kriterier - det finns två eller tre rader gp41, p24, gp120 / gp160 på remsan;
• enligt amerikanska FDA-kriterier - det finns två rader p24, p31 och en rad gp41 eller gp120 / gp160 på remsan.

I 99,9 % av fallen indikerar ett positivt IB-resultat HIV-infektion.

I avsaknad av rader - IB är negativ.

Vid identifiering av linjer med gp160, gp120 och gp41 är IB tveksam. Ett sådant resultat kan upptäckas när:

• onkologiska sjukdomar;
• graviditet;
• frekventa blodtransfusioner.

I sådana fall rekommenderas det att utföra en andra studie med ett kit från ett annat företag. Om resultatet efter ytterligare IB förblir tveksamt, är uppföljning nödvändig i sex månader (IB utförs var tredje månad).

polymeraskedjereaktion

PCR-testet kan detektera virusets RNA. Dess känslighet är ganska hög och det gör det möjligt att upptäcka HIV-infektion så tidigt som 10 dagar efter infektion. I vissa fall kan PCR ge falskt positiva resultat, eftersom dess höga känslighet också kan reagera på antikroppar mot andra infektioner.

Denna diagnostiska teknik är dyr, kräver specialutrustning och högt kvalificerade specialister. Dessa skäl tillåter inte att det utförs under masstestning av befolkningen.

PCR används i sådana fall:

• att upptäcka HIV hos nyfödda som föddes av HIV-infekterade mödrar;
• att upptäcka HIV i "fönsterperioden" eller vid tveksam IB;
• att kontrollera koncentrationen av HIV i blodet;
• för studier av donatorblod.

Endast genom PCR-testet ställs inte diagnosen HIV, utan utförs som en ytterligare diagnostisk metod för att lösa tvister.

Expressmetoder

En av innovationerna inom HIV-diagnostik har blivit snabba tester, vars resultat kan bedömas på 10-15 minuter. De mest effektiva och exakta resultaten erhålls med immunokromatografiska tester baserade på principen om kapillärflöde. De är speciella remsor på vilka blod eller andra testvätskor (saliv, urin) appliceras. I närvaro av antikroppar mot HIV, efter 10-15 minuter, visas en färgad och kontrollremsa på testet - ett positivt resultat. Om resultatet är negativt visas endast kontrollraden.

Precis som med ELISA-tester bör snabba testresultat bekräftas med IB-analys. Först då kan diagnosen hiv-infektion ställas.

Det finns expresssatser för hemmatestning. OraSure Technologies1 (USA)-testet är FDA-godkänt, tillgängligt utan recept och kan användas för att upptäcka HIV. Efter testet, vid ett positivt resultat, rekommenderas patienten att genomgå en undersökning i ett specialiserat centrum för att bekräfta diagnosen.

De återstående testerna för hemmabruk har ännu inte godkänts av FDA och deras resultat kan vara mycket tveksamma.

Trots det faktum att snabbtester är sämre i noggrannhet än IV-generations ELISA-tester, används de i stor utsträckning för ytterligare testning av befolkningen.

Du kan testas för HIV-infektion på vilken poliklinik som helst, Centralregionssjukhuset eller på specialiserade AIDS-center. På Rysslands territorium hålls de absolut konfidentiellt eller anonymt. Varje patient kan förvänta sig att få medicinsk eller psykologisk rådgivning före eller efter analysen. Du kommer att behöva betala för HIV-tester endast i kommersiella medicinska institutioner, och på offentliga kliniker och sjukhus utförs de gratis.

För information om hur du kan bli HIV-smittad och vilka myter som finns om möjligheterna att bli smittad, läs

För närvarande gör nya diagnostiska tekniker det möjligt att identifiera de etiologiska och patogenetiska orsakerna till många sjukdomar och radikalt påverka resultaten av behandlingen. De kanske mest imponerande resultaten av införandet av dessa teknologier i klinisk praxis har uppnåtts inom området immunologi och diagnostik av infektionssjukdomar.

Testsystem baserade på enzymkopplade immunosorbent- och immunokemiluminiscenta analyser gör det möjligt att detektera antikroppar av olika klasser, vilket avsevärt ökar informationsinnehållet i metoder för klinisk, analytisk känslighet och specificitet för att diagnostisera infektionssjukdomar. Det bör noteras att de mest betydande framstegen i diagnostiken av infektioner är förknippade med införandet i laboratoriepraxis av polymeraskedjereaktionsmetoden, som anses vara "guldstandarden" vid diagnos och utvärdering av effektiviteten av behandlingen av en antal infektionssjukdomar.

För studien kan olika biologiskt material användas: serum, blodplasma, skrapning, biopsi, pleural eller cerebrospinalvätska (CSF). Först och främst är metoderna för laboratoriediagnostik av infektioner inriktade på att identifiera sådana sjukdomar som viral hepatit B, C, D, cytomegalovirusinfektion, sexuellt överförbara infektioner (gonorré, klamydia, mykoplasma, ureaplasma), tuberkulos, HIV-infektion, etc.

HIV-infektion är en sjukdom som orsakas av humant immunbristvirus (HIV), som kvarstår under lång tid i lymfocyter, makrofager, celler i nervvävnaden, vilket resulterar i en långsamt progressiv skada på kroppens immun- och nervsystem, manifesterad av sekundära infektioner, tumörer, subakut encefalit och andra patologiska förändringar.

De orsakande medlen för infektion - humana immunbristvirus av den första och andra typen (HIV-1, HIV-2) - tillhör familjen retrovirus, en underfamilj av långsamma virus. Virioner är sfäriska partiklar med en diameter på 100-140 nm. Viruspartikeln har ett yttre fosfolipidskal, vilket inkluderar glykoproteiner (strukturella proteiner) med en viss molekylvikt, mätt i kilodalton. I HIV-1 är dessa gpl60, gpl20, gp41. Virusets inre skal, som täcker kärnan, representeras också av proteiner med en känd molekylvikt - p17, p24, p55 (HIV-2 innehåller gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).

HIV-genomet innehåller RNA och enzymet omvänt transkriptas (revertas). För att retrovirusgenomet ska kunna kopplas till värdcellens genom, syntetiseras DNA först på den virala RNA-mallen med användning av reversetas. Provirus-DNA:t integreras sedan i värdcellens genom. HIV har en uttalad antigen variabilitet som avsevärt överstiger influensavirusets.

I människokroppen är det huvudsakliga målet för HIV T-lymfocyter, som bär det största antalet CD4-receptorer på sin yta. Efter att HIV kommit in i cellen med hjälp av reversetas, syntetiserar viruset DNA enligt mönstret av dess RNA, som är integrerat i värdcellens genetiska apparat (CD4-lymfocyter) och förblir där livet ut i tillståndet av ett provirus . Förutom T-lymfocythjälpare påverkas makrofager, B-lymfocyter, neurogliaceller, tarmslemhinnan och några andra celler. Orsaken till minskningen av antalet T-lymfocyter (CD4-celler) är inte bara den direkta cytopatiska effekten av viruset, utan också deras fusion med oinfekterade celler. Tillsammans med nederlaget för T-lymfocyter hos patienter med HIV-infektion noteras polyklonal aktivering av B-lymfocyter med en ökning av syntesen av immunglobuliner av alla klasser, särskilt IgG och IgA, och efterföljande utarmning av denna del av immunsystemet. Dysreglering av immunprocesser manifesteras också av en ökning av nivån av α-interferon, β2-mikroglobulin och en minskning av nivån av IL-2. Som ett resultat av dysfunktion i immunsystemet, särskilt med en minskning av antalet T-lymfocyter (CD4) till 400 celler per 1 μl blod eller mindre, uppstår tillstånd för okontrollerad HIV-replikation med en signifikant ökning av antalet virioner i olika kroppsmiljöer. Som ett resultat av nederlaget för många delar av immunsystemet blir en person som är infekterad med HIV försvarslös mot patogener av olika infektioner.

Mot bakgrund av ökande immunsuppression utvecklas allvarliga progressiva sjukdomar som inte förekommer hos en person med ett normalt fungerande immunsystem. Det är sjukdomar som Världshälsoorganisationen (WHO) har definierat som AIDS-markör eller AIDS-definierande sjukdomar.

AIDS-definierande sjukdomar

Den första gruppen - sjukdomar som är inneboende endast i allvarlig immunbrist (CD4-nivå<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

Den andra gruppen - sjukdomar som kan utvecklas både mot bakgrund av allvarlig immunbrist, och i vissa fall utan det.

Därför, i dessa fall, är laboratoriebekräftelse av diagnosen nödvändig.

Första gruppen:

• candidiasis i matstrupen, luftstrupen, bronkierna;
• extrapulmonell kryptokokkos;
• kryptosporidios med diarré i mer än 1 månad;
• cytomegaloviruslesioner av olika organ andra än levern, mjälten eller lymfkörtlarna hos en patient över en månads ålder;
• en infektion orsakad av herpes simplex-virus, manifesterad av sår på huden och slemhinnorna som kvarstår i mer än 1 månad, såväl som bronkit, lunginflammation eller esofagit av vilken varaktighet som helst, som påverkar en patient över 1 månads ålder;
• generaliserat Kaposis sarkom hos patienter under 60 år;
• hjärnlymfom (primärt) hos patienter under 60 år;
• lymfocytisk interstitiell pneumoni och/eller pulmonell lymfoid dysplasi hos barn under 12 år;
• spridd infektion orsakad av atypiska mykobakterier (mykobakteriekomplex M. avium intracellulare) med extrapulmonell lokalisering eller lokalisering (utöver lungorna) i huden, cervikala lymfkörtlar, lymfkörtlar i lungrötterna;
• pneumocystis pneumoni;
• progressiv multifokal leukoencefalopati;
• toxoplasmos i hjärnan hos patienter över 1 månad.

Andra gruppen:

• bakteriella infektioner, kombinerade eller återkommande, hos barn under 13 år (mer än två fall under 2 års observation): sepsis, lunginflammation, meningit, skador på ben eller leder, bölder orsakade av Haemophilus influenzae, streptokocker;
• disseminerad coccidioidomycosis (extrapulmonell lokalisering);
• HIV-encefalopati (HIV-demens, AIDS-demens);
• histoplasmos med diarré som kvarstår i mer än 1 månad;
• isosporiasis med diarré som kvarstår i mer än 1 månad;
• Kaposis sarkom i alla åldrar;
• hjärnlymfom (primärt) hos personer i alla åldrar;
• andra B-cellslymfom (med undantag för Hodgkins sjukdom) eller lymfom av en okänd immunfenotyp: småcelliga lymfom (såsom Burkitts lymfom, etc.); immunoblastiska sarkom (immunoblastiska, storcelliga, diffusa histiocytiska, diffusa odifferentierade lymfom);
• spridd mykobakterios (ej tuberkulos) med lesioner utöver hudens lungor, cervikala eller basala lymfkörtlar;
• extrapulmonell tuberkulos (med skador på inre organ, förutom lungorna);
• salmonella septikemi, återkommande;
• HIV-dystrofi (utmattning, plötslig viktminskning).

Tabell 1 (se referens ovan) listar AIDS-definierande sjukdomar och deras etiologiska agens.

Det finns många klassificeringar av AIDS.

Enligt den nya klassificeringen som föreslagits av US Centers for Disease Control (tabell 2 - se länken till källan ovan) är diagnosen AIDS fastställd för personer med en CD4-lymfocytnivå på mindre än 200/μL, även i frånvaro av AIDS-definierande sjukdomar.

Kategori B inkluderar olika syndrom, varav de viktigaste är bacillär angiomatos, orofaryngeal candidiasis, återkommande vulvovaginal candidiasis, svår att behandla, cervikal dysplasi, cervikal karcinom, idiopatisk trombocytopen purpura, listerios, perifer neuropati.

Antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 i blodet

Antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 saknas normalt i blodserumet.

Bestämning av antikroppar mot HIV är den huvudsakliga metoden för laboratoriediagnostik av HIV-infektion. Metoden är baserad på enzymimmunanalys (ELISA) - sensitiviteten är mer än 99,5%, specificiteten är mer än 99,8%. Antikroppar mot HIV uppträder hos 90-95% av de smittade inom 1 månad efter infektion, hos 5-9% - efter 6 månader, hos 0,5-1% - vid ett senare tillfälle. I AIDS-stadiet kan antalet antikroppar minska tills det försvinner helt.

Resultatet av studien uttrycks kvalitativt: positivt eller negativt.

Ett negativt testresultat indikerar frånvaron av antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 i blodserumet. Laboratoriet ger ett negativt resultat så fort det är klart. Vid mottagande av ett positivt resultat - upptäckt av antikroppar mot HIV - för att undvika falskt positiva resultat i laboratoriet, upprepas analysen ytterligare 2 gånger.

Immunblotting för antikroppar mot HIV-virusproteiner i blodserum

Antikroppar mot HIV-virusproteiner saknas normalt i blodserumet.

ELISA-metoden för bestämning av antikroppar mot HIV är en screeningsmetod. Vid mottagande av ett positivt resultat, för att bekräfta dess specificitet, används Western-blot-metoden - motfällning i gelen av antikroppar i patientens blodserum med olika virala proteiner som utsätts för separation med molekylvikt med hjälp av elektrofores och appliceras på nitrocellulosa. Antikroppar mot virala proteiner gp41, gpl20, gpl60, p24, pi8, p17, etc. bestäms.

Enligt rekommendationerna från det ryska centret för förebyggande och kontroll av AIDS bör detektering av antikroppar mot ett av glykoproteinerna gp41, gpl20, gpl60 betraktas som ett positivt resultat. Om antikroppar mot andra proteiner av viruset detekteras anses resultatet vara tveksamt, en sådan patient bör undersökas två gånger - efter 3 och 6 månader.

Frånvaron av antikroppar mot specifika HIV-proteiner gör att enzymimmunoanalysen gav ett falskt positivt resultat. Samtidigt, i praktiskt arbete, när man utvärderar resultaten av immunoblottingmetoden, är det nödvändigt att vägledas av instruktionerna som tillhandahålls av företaget till "Immunoblotting-kit" som används.

Metoden för immunoblotting används för laboratoriediagnostik av HIV-infektion.

p24-antigen i blodserum

P24-antigenet saknas normalt i blodserumet.

p24-antigenet är HIV-nukleotidväggsproteinet. Stadiet av primära manifestationer efter infektion med HIV är en konsekvens av början av den replikativa processen. P24-antigenet uppträder i blodet 2 veckor efter infektion och kan detekteras med ELISA under perioden från 2 till 8 veckor. Efter 2 månader från infektionsögonblicket försvinner p24-antigenet från blodet. I framtiden, i det kliniska förloppet av HIV-infektion, noteras en andra ökning av innehållet av p24-proteinet i blodet. Det faller på perioden för bildandet av AIDS. Befintliga ELISA-testsystem för att detektera p24-antigenet används för tidig upptäckt av HIV hos blodgivare och barn, för att bestämma prognosen för förloppet av AIDS och övervaka pågående behandling hos AIDS-patienter. ELISA har en hög analytisk känslighet, vilket gör det möjligt att detektera p24-antigenet av HIV-1 i blodserum vid en koncentration av 5-10 pg/ml och HIV-2 - mindre än 0,5 ng/ml, och specificitet. Det bör dock noteras att nivån av p24-antigen i blodet är föremål för individuella variationer, vilket innebär att endast 20-30% av patienterna kan detekteras med denna studie i den tidiga perioden efter infektion (Rose N.R. et al., 1997).

Antikroppar mot p24-antigenet i IgM- och IgG-klasserna uppträder i blodet från och med 2:a veckan, når en topp inom 2-4 veckor och förblir på denna nivå under olika tider: IgM-klassantikroppar - i flera månader, försvinner inom ett år efter infektion och IgG-antikroppar kan kvarstå i åratal.

Algoritmen för att diagnostisera HIV-infektion beror på sjukdomsfasen och kännetecknas av en förändring i dynamiken för detektionsantikroppar av olika klasser (Fig. 1, 2 - se länken till källan ovan).

Resultatet av studien uttrycks kvalitativt - positivt eller negativt. Ett negativt testresultat indikerar frånvaron av antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 och p24-antigenet i blodserumet.

Laboratoriet ger ett negativt resultat så fort det är klart. Vid mottagande av ett positivt resultat - upptäckt av antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 och / eller p24-antigen - för att undvika falskt positiva resultat i laboratoriet, upprepas analysen ytterligare 2 gånger.

Oavsett vilka testresultat som erhållits skickas patientens blodprov och resultaten av 3 tester av laboratoriet till det regionala AIDS-centret för att bekräfta ett positivt resultat eller verifiera ett obestämt resultat. I sådana fall utfärdar det regionala AIDS-centret det slutliga svaret för denna studie.

HIV-detektering genom polymeraskedjereaktion (kvalitativt)

Detektion av HIV genom polymeraskedjereaktion - PCR (kvalitativt) utförs för att:

• upplösning av tvivelaktiga immunoblotresultat;
• för tidig diagnos av HIV-infektion;
• övervakning av effektiviteten av antiviral behandling;
• bestämma stadiet av AIDS-sjukdom (övergången av infektion till en sjukdom).

Vid primär infektion med hiv gör PCR-metoden det möjligt att upptäcka hiv-RNA i blodet redan 10-14 dagar efter infektion.

Resultatet av studien uttrycks kvalitativt: positivt eller negativt. Ett negativt testresultat indikerar frånvaron av HIV-RNA i blodet.

Ett positivt resultat - upptäckten av HIV RNA - indikerar infektion av patienten.

HIV-detektering genom polymeraskedjereaktion (kvantitativ)

HIV saknas normalt i blodet.

Direkt kvantitativ bestämning av HIV-RNA med hjälp av PCR tillåter mer exakt än bestämning av innehållet i CD4-celler att förutsäga utvecklingshastigheten av AIDS hos personer som är infekterade med HIV, därför att mer exakt bedöma deras överlevnad. Ett högt innehåll av viruspartiklar korrelerar vanligtvis med en uttalad kränkning av immunstatusen och ett lågt innehåll av CD4-celler. Ett lågt antal viruspartiklar korrelerar i allmänhet med en bättre immunstatus och ett högre antal CD4-celler. Innehållet av viralt RNA i blodet gör det möjligt att förutsäga övergången av sjukdomen till det kliniska stadiet. När innehållet av HIV RNA-1 > 74 100 kopior/ml utvecklar nästan alla patienter den kliniska bilden av AIDS (Senior D., Holden E., 1996).

Personer med blodnivåer av HIV-1 >10 000 kopior/ml löper 10,8 gånger större risk att utveckla AIDS än personer med HIV-1-nivåer i blodet<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

En panel av amerikanska experter har tagit fram indikationer för behandling av patienter med HIV. Behandling är indicerad för patienter med CD4-tal i blodet<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20 000 kopior/ml (PCR). Bedömning av resultaten av antiretroviral terapi hos personer som är infekterade med HIV utförs genom att minska nivån av serum HIV RNA.

Med effektiv behandling bör nivån av viremi minska med 10 gånger under de första 8 veckorna och ligga under metodens detektionsgräns (PCR) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.

Sålunda har många forskningsmetoder hittills introducerats och använts i klinisk praxis för diagnos av HIV-infektion, liksom för alla andra virusinfektioner. Bland dem ges den ledande rollen till serologiska studier. De huvudsakliga metoderna för att diagnostisera hiv-infektioner presenteras i tabell 3 (se länken till källan ovan), där de är indelade beroende på vikten av varje metod för att upptäcka virus i fyra nivåer:

• A - testet används vanligtvis för att bekräfta diagnosen;
• B - testet är användbart under vissa omständigheter för diagnos av vissa former av infektion;
• C - test används sällan i diagnostiska syften, men är av stor betydelse för epidemiologiska undersökningar;
• D - test används vanligtvis inte av laboratorier för diagnostiska ändamål.

Eftersom det för diagnos av virusinfektioner, förutom att välja den optimala analysmetoden, är lika viktigt att korrekt bestämma och ta biomaterialet för forskning, ger tabell 4 (se länken till källan ovan) rekommendationer för att välja det optimala biomaterialet för studier av HIV-infektion.

För att övervaka HIV-infekterade personer bör man använda möjligheterna till en omfattande studie av immunstatus - kvantitativ och funktionell bestämning av alla dess länkar: humoral, cellulär immunitet och ospecifik resistens i allmänhet.

I moderna laboratorieförhållanden inkluderar flerstegsprincipen för att bedöma den immunologiska statusen bestämning av en subpopulation av lymfocyter, blodimmunoglobuliner. Vid utvärdering av indikatorer bör det beaktas att HIV-infektion kännetecknas av en minskning av förhållandet mellan CD4 / CD8 T-celler mindre än 1. CD4 / CD8 index 1,5-2,5 - indikerar ett normergiskt tillstånd, mer än 2,5 - indikerar hyperaktivitet , mindre 1,0 - indikerar immunbrist. Dessutom kan CD4/CD8-förhållandet vara mindre än 1 vid svår inflammation.

Detta förhållande är av grundläggande betydelse för att bedöma immunsystemet hos AIDS-patienter, eftersom HIV selektivt infekterar och förstör CD4-lymfocyter, som ett resultat av vilket CD4 / CD8-förhållandet sjunker till värden betydligt mindre än 1.

Bedömning av den immunologiska statusen är också baserad på identifieringen av allmänna eller "grova" defekter i systemet för cellulär och humoral immunitet: hypergammaglobulinemi (ökad koncentration av IgA, IgM, IgG) eller hypogammaglobulinemi i terminalstadiet; ökning av koncentrationen av cirkulerande immunkomplex; minskad produktion av cytokiner; försvagning av lymfocyternas respons på antigener och mitogener.

Brott mot förhållandet mellan populationer i den totala poolen av B-lymfocyter är karakteristiskt för otillräcklig humoral immunitet. Dessa förändringar är dock inte specifika för HIV-infektion och kan förekomma vid andra sjukdomar. Vid en omfattande bedömning av ett antal andra laboratorieparametrar bör det beaktas att HIV-infektion också kännetecknas av: anemi, lymfopeni och leukopeni, trombocytopeni, en ökning av nivån av β2-mikroglobulin och C-reaktivt protein, en ökning av aktiviteten av transaminaser i blodserumet.

Förvärvat immunbristsyndrom har varit ett av huvudproblemen i det moderna samhället i mer än fyrtio år. Därför väcker hiv-diagnos nu mycket uppmärksamhet och resurser. När allt kommer omkring, ju tidigare ett virus som förstör kroppens immunförsvar upptäcks, desto större är chanserna att undvika ett dödligt utfall.

Kärnan i problemet

Under förkortningen HIV ligger definitionen - en av de farligaste bland de befintliga. Under dess inflytande finns det en djup hämning av alla kroppens skyddande egenskaper. Detta leder i sin tur till uppkomsten av olika maligna tumörer och sekundära infektioner.

HIV-infektion kan utvecklas på olika sätt. Ibland förstör sjukdomen en person på 3-4 år, i vissa fall kan den vara mer än 20 år. Det är värt att veta att detta virus är instabilt och snabbt dör om det är utanför värdens kropp.

HIV kan överföras artificiellt, genom blodkontakt och genom biokontaktmekanismen.

Om det fanns en enda kontakt med en bärare av viruset, kommer risken för infektion att vara låg, men med konstant interaktion ökar den avsevärt. Diagnos av HIV-infektion är något som inte kan försummas, särskilt när man byter sexpartner

Var uppmärksam på den parenterala infektionsvägen. Det kan uppstå under blodtransfusioner av kontaminerat blod, injektioner med nålar som är kontaminerade med blodet från HIV-infekterade personer, såväl som under icke-sterila medicinska manipulationer (tatueringar, piercingar, tandingrepp med instrument som inte har behandlats korrekt) .

Samtidigt är det värt att veta att det inte finns något behov av att vara rädd för kontakt-hushållsöverföring av viruset. Men faktum kvarstår: en person har en hög mottaglighet för HIV-infektion. Och om en person över 35 år blir infekterad, sker utvecklingen av AIDS betydligt snabbare än hos dem som ännu inte har övervunnit den trettioåriga milstolpen.

Huvudsakliga symtom

Naturligtvis är det bästa sättet att identifiera ett problem, eller brist på det, att diagnostisera HIV-infektion. Men vilka skäl kan en person som leder en hälsosam livsstil ha att gå och kontrollera sig själv för infektion? Naturligtvis borde ett sådant initiativ motiveras av något. Därför är det viktigt att veta vilka symtom som kan tyda på destruktiva processer som hämmar immunförsvaret.

Stadiet för inkubation av viruset utan ett blodprov kommer sannolikt inte att upptäckas, eftersom kroppen vid denna tidpunkt fortfarande inte reagerar på fientliga element på något sätt.

Det andra stadiet (primära manifestationer) utan hjälp av en läkare kan också gå obemärkt förbi. Men ibland finns det en aktiv replikering av viruset, och kroppen börjar reagera på detta - feber, olika polymorfa utslag, lienalt syndrom och faryngit noteras. I det andra steget är det möjligt att fästa sådana sekundära sjukdomar som herpes, svampinfektioner, lunginflammation etc.

Den tredje kännetecknas av en gradvis ökning av immunbrist. På grund av det faktum att cellerna i försvarssystemet dör, ökar dynamiken i deras produktion, och detta gör det möjligt att kompensera för påtagliga förluster. I detta skede kan flera lymfkörtlar som tillhör olika system bli inflammerade. Men starka smärtsamma förnimmelser observeras inte. I genomsnitt varar den latenta perioden från 6 till 7 år, men kan försenas upp till 20.

Under stadium av sekundära sjukdomar, som är den fjärde, finns det samtidiga infektioner av svamp, bakteriell protozoal, viralt ursprung, såväl som maligna tumörer. Allt detta sker mot bakgrund av allvarlig immunbrist.

Metoder för att diagnostisera HIV-infektion

På tal om den djupa hämningen av kroppens försvarsmekanismer på grund av exponering för viruset, är det värt att notera att patientens framtid i detta fall direkt beror på snabb och korrekt diagnos.

För att göra detta, i modern medicin, används olika testsystem, som är baserade på immunokemiluminescerande, såväl som enzymimmunoanalys. Dessa tekniker gör det möjligt att fastställa förekomsten av antikroppar som tillhör olika klasser. Detta resultat bidrar till att avsevärt öka informationsinnehållet i metoder för analytisk, klinisk specificitet och känslighet när man arbetar med infektionssjukdomar.

Det är också intressant att det var polymeraskedjereaktionsmetoden som gjorde det möjligt att föra HIV-diagnostik till en fundamentalt ny nivå. En mängd olika biologiska material är lämpliga som material för forskning: blodplasma, biopsi, skrapning, serum, cerebrospinal- eller pleuravätska.

Om vi ​​talar om laboratorieforskningsmetoder är de främst inriktade på att identifiera flera nyckelsjukdomar. Vi pratar om HIV-infektion, tuberkulos, alla sexuellt överförbara infektioner och viral hepatit.

Molekylärgenetiska och serologiska tester används också för att identifiera immunbristviruset. I det första fallet bestäms virusets RNA och provirusets DNA, i det andra fallet analyseras antikroppar mot HIV och P24-antigenet detekteras.

På kliniker som använder så att säga klassiska diagnostiska metoder används övervägande ett standardprotokoll för serologisk testning.

Tidig HIV-diagnos

Denna typ av bestämning av infektionsfaktumet är nödvändig för att identifiera hotet om skada på immunsystemet så tidigt som möjligt. Detta, för det första, undviker spridning av infektion, och för det andra för att påverka sjukdomen i det inledande skedet.

Om vi ​​betraktar exemplet med Ryssland, introducerades den kliniska klassificeringen av HIV-infektion i Ryska federationens armé och flotta. Detta har gett positiva resultat: processen med tidig klinisk diagnos har blivit mycket lättare.

Huvudvärk, nattliga svettningar och omotiverad trötthet kan identifieras som vanliga symtom som indikerar en möjlig skada på immunsystemet. Det är också möjligt utvecklingen av feber, åtföljd av tecken på tonsillit. Det innebär att temperaturen stiger till 38 grader och uppåt, samtidigt som palatinmandlarna ökar, och smärta uppstår även vid sväljning. Allt detta kompletteras med snabb viktminskning. Dessa symtom är dock ofta komplexa.

I vissa fall kan hiv-infektion i tidiga skeden yttra sig i form av olika förändringar i hudtillståndet. Vi pratar om prickar, roseola, pustler, furunkulos etc. I tidig HIV-diagnostik ingår även att arbeta med symtom som generaliserad eller begränsad förstoring av perifera lymfkörtlar.

Om det finns en samtidig tillväxt av flera lymfkörtlar, som varar i tre månader eller mer, och i olika grupper, med undantag för inguinalområdet, finns det all anledning att misstänka ett virus från det mänskliga immunsystemet.

När du talar om diagnosen i en senare period måste du vara uppmärksam på manifestationen av sekundär immunbrist, som ofta uppstår under täckmantel av olika kliniska symtom. Det här är följande manifestationer:

• omotiverad generaliserad perifer lymfadenopati;
• artralgi av okänd etiologi, som har ett böljande förlopp;
• SARS (ARVI), inflammatoriska lesioner i lungorna och luftvägarna, som gör sig påtagliga ganska ofta;
• feber av okänt ursprung och långvarigt subfebrilt tillstånd;
• allmän berusning, som yttrar sig genom omotiverad svaghet, trötthet, slöhet m.m.

Hiv-diagnos i sent skede inkluderar screening för en sjukdom som Kaposis sarkom, som manifesteras av uppkomsten av flera neoplasmer, ofta i överkroppen hos unga, följt av dynamisk utveckling och metastaser.

polymeraskedjereaktion

Med tanke på de olika metoderna för att diagnostisera HIV-infektion bör detta ägnas särskild uppmärksamhet. Det bör omedelbart noteras att detta blodprov kan syfta till kvantitativa och kvalitativa egenskaper.

Följande uppgifter kan definieras som målet för denna metod för att upptäcka ett virus:

• tidig diagnos av HIV-infektion;
• klargörande i närvaro av tvivelaktiga resultat som ett resultat av immunblottingstudier;
• identifiering av ett specifikt stadium av sjukdomen;
• övervakning av effektiviteten av behandling som syftar till att undertrycka viruset.

Om vi ​​talar om primär infektion, bör det noteras att denna teknik låter dig bestämma HIV-RNA i patientens blod efter 14 dagar från infektionsögonblicket. Detta är ett mycket bra resultat. I det här fallet kommer resultatet av själva studien att ha ett kvalitativt uttryck: antingen positivt (viruset är närvarande) eller negativt.

Kvantifiering genom PCR

Denna typ används för att bestämma den möjliga utvecklingshastigheten för AIDS och för att förutsäga patientens förväntade livslängd.

Kvantifiering av HIV RNA-celler i blodet gör det möjligt att förstå när sjukdomen går in i det kliniska skedet.

Det är värt att uppmärksamma det faktum att metoderna för laboratoriediagnostik av HIV ger ett mer exakt resultat om det biomaterial som krävs för analys bestäms korrekt och dess provtagning utförs korrekt.

För att utföra kvalitativ övervakning av de infekterade är det nödvändigt (om möjligt) att använda ett integrerat tillvägagångssätt för att studera patientens immunstatus. Vi talar om den kvantitativa och funktionella bestämningen av alla delar av försvarssystemet: cellulär, humoral immunitet och ospecifik resistens som sådan.

Laboratoriediagnostik

I allt högre grad, i moderna laboratorieförhållanden, används en flerstegsmetod för att bedöma immunsystemets tillstånd. Denna teknik involverar ofta bestämning av en subpopulation av immunglobuliner, lymfocyter i blodet. Detta innebär att förhållandet beaktas.Om resultatet visar mindre än 1,0 så finns det anledning att misstänka immunbrist.

Laboratoriediagnos av HIV-infektion bör inkludera detta test utan att misslyckas, eftersom detta virus kännetecknas av selektiv skada på CD4-lymfocyter, vilket leder till en märkbar kränkning av förhållandet som nämns ovan (mindre än 1,0).

För att bedöma den immunologiska statusen kan läkare genomföra ett test för förekomsten av "grova" eller allmänna defekter i systemet med humoral och cellulär immunitet. Vi talar om hypogammaglobulinemi eller hypergammaglobulinemi i såväl som en minskning av produktionen av cytokiner, en ökning av koncentrationen av cirkulerande immunkomplex, en försvagning av lymfocyternas svar på mitogener och antigener.

Det är värt att uppmärksamma det faktum att laboratoriediagnosen av HIV har två nyckelstadier:

1. Screeninglaboratorium. Om ett positivt resultat erhölls i ELISA (enzymatisk immunanalys), upprepas det ytterligare två gånger i samma system och utan att serumet ändras. I det fall två av de tre undersökningarna leder till att virusets påverkan upptäcks skickas serumet för vidare analys till referenslaboratoriet.
2. Det andra steget, som inkluderar metoderna för laboratoriediagnos av HIV-infektion, är bestämningen av immunsystemets tillstånd. Den utförs i referenslaboratoriet som nämns ovan. Här undersöks det positiva serumet igen i ELISA, men med ett annat testsystem, som skiljer sig från den tidigare sammansättningen av antigener, antikroppar eller själva testformatet. Vid fastställande av ett negativt resultat utförs en andra studie i det tredje testsystemet. Om effekten av viruset inte upptäcktes till slut, registreras frånvaron av HIV-infektion. Men med ett positivt resultat undersöks serumet i en linjär eller immunblot.

I slutändan leder en sådan algoritm till positiva, neutrala eller negativa resultat.

Varje medborgare bör veta att HIV-diagnostik är tillgänglig för honom. AIDS kan identifieras i privata, kommunala eller folkhälsomiljöer.

Behandling

Naturligtvis skulle identifieringen av viruset vara till liten nytta i frånvaro av olika metoder för att påverka infektionen. Och även om det för tillfället fortfarande inte finns något vaccin som helt kan neutralisera viruset, kan kompetent diagnos, HIV-behandling och efterföljande förebyggande förbättra patientens tillstånd avsevärt och därmed förlänga hans liv. Denna avhandling bekräftar det faktum att medellivslängden för män som påbörjade hiv-behandling i rätt tid är 38 år. Kvinnor som börjar kampen mot immunbristviruset lever i genomsnitt 41 år.

När diagnosen väl har ställts reduceras HIV-behandlingen till användning av flera tekniker. Aktiv antiretroviral terapi, även känd som HAART, kan identifieras som en av de vanligaste. Om denna typ av behandling tillämpas i tid och korrekt, är det möjligt att avsevärt bromsa utvecklingen av AIDS eller stoppa den helt.

Kärnan i HAART är att flera farmaceutiska preparat används samtidigt, vars syfte är att påverka olika mekanismer för utvecklingen av immunbristviruset.

Efter att olika metoder för att diagnostisera HIV har fastställt infektionsfaktumet, kan läkemedel användas som har följande typer av effekter:

• Immunologiska. Immunförsvaret stabiliseras, nivån av T-lymfocyter stiger och skyddet mot olika infektioner återställs.
• Klinisk. Utvecklingen av AIDS och alla dess manifestationer förhindras, patienternas livslängd förlängs med bevarandet av alla kroppsfunktioner.
• Virologisk. Det finns en blockering av reproduktionen av viruset, som ett resultat av vilket det minskar och därefter fixeras på en låg nivå.

Det är svårt att överskatta betydelsen av sådana åtgärder för att påverka sjukdomen som diagnos, behandling och förebyggande av HIV-infektion. Därför är det bästa som kan göras efter ett positivt resultat av studien för infektion att omedelbart börja bekämpa sjukdomen. Som en annan metod som hjälper till att göra detta kan virologisk behandling identifieras.

I det här fallet talar vi om användningen av läkemedel som inte tillåter viruset att fästa vid T-lymfocyten och komma in i kroppen. Dessa läkemedel kallas penetrationshämmare. Ett specifikt exempel är Cellzentry.

Virala proteashämmare kan användas för att undertrycka HIV. Syftet med denna grupp av läkemedel är att förhindra infektion av nya lymfocyter. Dessa är läkemedel som Viracept, Reyataz, Kaletra, etc.

Den tredje gruppen av topikala läkemedel är omvänt transkriptashämmare. De behövs för att blockera enzymet som gör att virusets RNA kan föröka sig i lymfocytens kärna. Sådana metoder kan avsevärt påverka ett problem som HIV-infektion. Diagnos, behandling och förebyggande av AIDS är kvalificerade läkares verksamhet, så algoritmen för användning av droger bör göras av dem.

Vid behov kan även immunologiska och kliniska effekter användas.

Förebyggande

Världshälsoorganisationen föreslår följande metoder för att bekämpa HIV-infektion:

• Förebyggande av sexuell överföring. Dessa är skyddat sex, kondomdistribution, STD-behandling och utbildningsprogram.
• För gravida kvinnor som har diagnostiserats med HIV, diagnostik, profylax med användning av lämpliga kemikalier, samt professionell rådgivning och behandling.
• Organisation av förebyggande genom blodprodukter. I det här fallet talar vi om antiviral bearbetning och verifiering av donatorer.
• Social och medicinsk hjälp till patienter och deras familjer.

För att HIV-diagnostik inte ska avslöja närvaron av viruset måste du följa enkla säkerhetsregler:

• om blodet från en smittad person kommer på huden, ska det omedelbart tvättas av med tvål och vatten och sedan behandlas med alkohol;
• om skada mottogs av ett föremål med inslag av viruset, måste såret komprimeras, blod pressas ut, denna plats ska behandlas med väteperoxid och kanterna ska brännas med jod;
• använd aldrig sprutor vars sterilitet har kränkts;
• använd kondom vid samlag, men det är bättre att först kontrollera partnern för infektion.

Resultat

Tack vare att hiv-diagnosen inte står stilla får tusentals människor möjlighet att påbörja behandling i tid och öka livslängden avsevärt. Det viktigaste är att inte ignorera de uppenbara symtomen och inte vara rädd för att gå till doktorn.

Tillverkad på flera olika sätt. Det verkar som om ingenting är lättare än att identifiera denna sjukdom genom blodprov, nej. Men det är inte så. Diagnosen hiv kan visserligen upptäckas på detta sätt, men ytterligare forskning bedrivs med olika metoder. Det beror till stor del på dem vilken behandling som kommer att ordineras till patienten och vilka åtgärder som kommer att vidtas därefter. Bland de vanligaste och mest effektiva metoderna är det vanligt att peka ut screeninganalys och immunblotting. Var och en av dem bör övervägas mer detaljerat.

AIDS-diagnos: screeninganalys

Screeninganalys eller ELISA-forskningsmetod används i det inledande skedet av diagnostisering av HIV-infektion. Under utvecklingen av denna metod skapades virusproteiner artificiellt i laboratoriet. De reagerar på ett speciellt sätt på antikroppar. De senare produceras i kroppen när celler infekterade med en fruktansvärd sjukdom dyker upp i den. Laboratoriediagnos av HIV i detta fall utförs med hjälp av konstgjorda enzymer. Interagerar med antikroppar, de färgas i en viss färg. En remsa med en indikator, efter att ha fått blod på den, placeras under en speciell apparat, med hjälp av vilken det är möjligt att avgöra om en person har denna sjukdom eller inte. Moderna metoder för att diagnostisera HIV, inklusive ELISA, gör det möjligt att bestämma infektionens faktum eller dess frånvaro med hög noggrannhet. Men som all teknik har apparaten för screeninganalys ett fel. Det är därför, vid behov, analysen tas om av patienten.

Det är viktigt att veta att ELISA-testet är en av de tidigaste metoderna för att fastställa förekomsten av ett immunbristvirus i kroppen. HIV-infektion är en diagnos som kan upptäckas bara några veckor efter infektion. När infekterade celler kommer in i blodomloppet börjar kroppens immunförsvar att aktivt göra motstånd. Antikroppar produceras, som upptäcks genom ett laboratorietest efter två eller tre veckor. Tidig diagnos av HIV-infektion med hjälp av ett ELISA-test gör det möjligt att upptäcka antikroppar mot immunbristviruset i humant blod. Detta är dess huvudsakliga skillnad från andra moderna metoder.

Det är värt att notera att hos vissa människor börjar antikroppar mot denna sjukdom att produceras vid ett senare tillfälle. Från infektionsögonblicket till början av denna process kan det ta från tre till sex veckor. Det är därför medicinska experter rekommenderar screening fyra till fem veckor efter oskyddat sex eller annan anledning till misstanke om oavsiktlig infektion.

Metoder för laboratoriediagnostik av HIV-infektion med ELISA har utvecklats under lång tid. Hittills finns det fyra generationer av tester. De mest exakta och effektiva av dem är de som utvecklades senast. Laboratoriediagnostik av HIV-infektion och AIDS med hjälp av tredje och fjärde generationens ELISA-tester utförs med användning av rekombinanta proteiner och peptider. Känsligheten för dessa tester för antikroppar som produceras av kroppen är 92 - 93%. Vi talar om ryska forskningsmetoder. Européer har lärt sig att göra liknande tester med en känslighet på 99 %.

Moderna metoder för laboratoriediagnostik av HIV-infektion baserad på ELISA används inte bara för att upptäcka förekomsten av sjukdomen. Med hjälp av screeninganalys är det möjligt att övervaka spridningen av immunbristviruset, samt att samla in testmaterial innan man tar blod från donatorer.

ELISA är en standardmetod för att diagnostisera HIV-infektion: hur går den till, varför ger den ett falskt resultat?

Diagnos av HIV och AIDS med ELISA är ett standardförfarande. Patientens blod tas från en ven. Fem milliliter material räcker för analys. Klinisk Diagnos av HIV typ 2 och 1 ställs minst åtta timmar efter en måltid. Läkare rekommenderar att du gör det på morgonen på fastande mage. Resultaten av hela studien är kända inom två eller tre dagar. Expressscreening görs på kortare tid. Vanligtvis tar detta bara några timmar. Däremot ökar felet i detta fall. Uttrycklig diagnos av hiv är nödvändig i akuta fall, till exempel när en patient behöver akut operation. En sådan analys utförs nödvändigtvis före oplanerade kirurgiska ingrepp, för om en patient har ett immunbristvirus, observerar läkare ökade säkerhetsåtgärder. Klinisk diagnos av HIV-infektion på kort tid är också nödvändig i de fall då donatorblod måste tas snabbt för att rädda en annan patient.

Det finns fall när en person fick diagnosen AIDS eller HIV, och som ett resultat av det inte bekräftades, eller vice versa. Varför händer detta i fallet med ELISA-testet? Ett falskt negativt resultat kan bero på att blodet inte var ordentligt förberett för studien. Ibland är orsaken till detta det felaktiga utförandet av sitt stängsel. Ett falskt negativt resultat i verifieringen av diagnosen HIV-infektion bekräftas inte även om materialet för studien togs för tidigt. Efter infektion bör ju ha gått minst tre veckor. Det finns fall när resultatet av upptäckten av immunbristviruset är falskt positivt. Detta beror på det allmänna tillståndet hos människokroppens immun- och hormonsystem. I de flesta fall har patienten sjukdomar som är resultatet av ett falskt positivt resultat. Vi talar om alkoholisk hepatit, där levern producerar speciella enzymer, vilket kan leda till en felaktig diagnos av HIV. Graviditet och vissa autoimmuna sjukdomar, tillsammans med multipelt myelom, kan också orsaka ett falskt positivt resultat. Denna lista kan inkludera patienter i dialys och individer som vaccinerades kort innan differentialdiagnos av HIV.

På tal om screeninganalys är det viktigt att notera att denna forskningsmetod kräver bekräftelse. Innan läkare ställer en diagnos av hiv på grundval av detta, skicka alltid patienten för immunblotting.

De viktigaste metoderna för laboratoriediagnostik av HIV-infektion: immunblotting

AIDS, vars diagnos och behandling är nära förknippade med varandra, upptäcks på flera sätt samtidigt. Som nämnts ovan räcker det inte med ett ELISA-test för att slutgiltigt fastställa diagnosen. Differentialdiagnos av HIV-infektion i detta fall kompletteras med immunblotting. Inom modern medicin kallas det den slutliga bekräftande metoden för diagnos. För forskning i detta fall används proteiner som finns i patientens blod. De separeras i en speciell gel, varefter laboratoriearbetare har möjlighet att studera blodets molekylära sammansättning.

Tidpunkten för hiv-diagnos med denna metod är från en till tre dagar. För forskning tas blod från försökspersonens ven, som placeras på en testare med en gel. Resultatet, som ifrågasätts, kan uppstå under graviditeten, närvaron av onkologiska processer, tuberkulos. En falsk negativ reaktion på testet kan uppstå om studien utförs felaktigt och om den utförs för tidigt. Minst tre veckor måste gå från infektionsögonblicket. När allt kommer omkring, efter vilken tid HIV diagnostiseras, beror det direkt på immunitetstillståndet.

Andra metoder för att diagnostisera aids och hiv

Metoder för strålningsdiagnostik vid AIDS används som regel i de terminala eller sekundära stadierna. Med deras hjälp är det möjligt att fastställa förändringar som uppstår i kroppen på grund av sekundära sjukdomar eller opportunistiska infektioner.

Bioresonansdiagnostik av HIV, som även kallas icke-linjär skanning, används främst på privata kliniker för att upptäcka immunbristviruset. Officiell medicin anser att denna metod är otillräckligt exakt och effektiv. Kanske kommer förbättringen av olinjär diagnostik i framtiden att göra det möjligt att identifiera denna fruktansvärda diagnos redan under inkubationsperioden.

Diagnos av HIV-infektion: serologisk metod och dess egenskaper

Detta är en relativt ny teknik där laboratoriekriterierna för att diagnostisera HIV-infektion bygger på antigen-antikroppsprincipen. När det gäller immunbristviruset söker man efter antikroppar mot viruset i människokroppen. För detta används ett artificiellt härlett antigen, som antikroppar måste reagera mot. Specifika serologiska markörer för HIV-infektion orsakar specifika förändringar i blodets sammansättning. Det bör noteras att denna forskningsmetod är mest effektiv i det akuta skedet, som slutar med serokonversion. Den följs av en asymtomatisk latent period, under vilken det inte är lätt att hitta antigenet.

Referensdiagnostik av HIV-infektion: beskrivning och funktioner

HIV-referensvärden anses vara de mest korrekta för att identifiera diagnosen. Denna forskningsmetod kombinerar ELISA-testet och immunblotting. Referenslaboratoriet för HIV-diagnostik tillåter provtagning och efterföljande bearbetning på två sätt samtidigt. Detta gör att du kan få det mest exakta resultatet inom en dag. En ny kontroll av analysen som erhållits i referenslaboratoriet är endast nödvändig om data från ELISA-testet och immunblottingen motsäger varandra. Detta är en ganska sällsynt händelse, som oftast förekommer hos personer med de ovan beskrivna komorbiditeterna.