Pentru diagnostic se folosește metoda cercetării serologice. Ce analize de sânge se fac pentru sifilis și cum sunt descifrate. Principalele metode utilizate în diagnosticul serologic

Pentru a stabili un diagnostic precis, pacientul este examinat cuprinzător. Un test general de sânge nu este foarte informativ; nu este utilizat în diagnosticarea unei infecții venerice.

Tipuri de studii și biomateriale pentru analiză

Pentru detectarea bolii sunt folosite diverse metode și biomateriale. În stadiile incipiente, sifilisul este determinat cu ajutorul unui test bacterioscopic. Probele sunt examinate la microscop. Dispozitivul vă permite să detectați tulpini ale agentului patogen. Ulterior, se efectuează teste serologice. Datorită acestora, în probe sunt detectați antigeni și anticorpi împotriva bolii.

Metodele de determinare a infecției sexuale sunt împărțite în 2 categorii:

• Direct, dezvăluind un microorganism patogen. Acestea includ: microscopia în câmp întunecat, analiza RIT (infecția iepurilor cu biomaterial pentru cercetare), metoda PCR - reacția în lanț a polimerazei (cu ajutorul acesteia se găsesc elementele genetice ale agentului patogen).
• Detectarea indirectă (serologică) a anticorpilor la un agent patogen. Sunt produse de sistemul imunitar ca răspuns la infecție.

Metodele serologice sunt împărțite în 2 categorii: treponemale și non-treponemale.

Non-treponemic, inclusiv: test cu roșu toluidină, analiză RSK, test RPR, test de sânge folosind metoda RMP express.

Treponemal, combinând: imunoblot, test RSK, analiză RIT, studiu RIF, test RPGA, analiză ELISA.

Informația testelor pentru infecție este diferită. Mai des fac principalele tipuri de teste pentru sifilis, care includ metode serologice. Pentru pacienții care au nevoie de examinare, medicul prescrie teste individual.

Biomaterial pentru cercetare

Pentru a identifica treponemul palid, un agent patogen care arată ca o spirală și provoacă sifilis, se prelevează probe:

• sânge venos;
• lichior (secreție din canalul spinal);
• conținutul ganglionilor limfatici;
• țesut ulcer.

Dacă este necesar să se efectueze teste pentru detectarea sifilisului, sângele este prelevat nu numai din vena cubitală, ci și de la deget. Alegerea biomaterialului și metoda de cercetare este influențată de severitatea infecției și de echipamentul centrului de diagnostic.

Cercetare directă

Dovada convingătoare a sifilisului este identificarea agenților infecțioși la microscop. In acest fel agentul patogen se gaseste la 8 din 10 pacienti examinati.Un rezultat negativ la restul de 2 pacienti nu inseamna ca nu sunt infectati.

Studiul se face în stadiile (stadiile) primare și secundare ale bolii, care se caracterizează prin apariția erupțiilor cutanate pe piele și sifiloame (ulcerații) pe țesuturile epiteliale sau mucoasele. În scurgerea din leziuni se găsesc agenți patogeni care provoacă o boală venerică.

Mai exact, un test complex, denumit RIF, o reacție de imunofluorescență, face față determinării treponemului. Proba pentru cercetare este pre-tratată cu anticorpi fluorescenți. Compușii capabili să strălucească se lipesc împreună cu bacteriile. Examinând probe la microscop, în caz de infecție, asistentul de laborator vede agenți patogeni strălucitori.

Testul este utilizat pentru diagnosticarea precoce a bolii. Cu cât boala durează mai mult, cu atât sensibilitatea metodelor de cercetare este mai mică. În plus, cade după tratamentul erupțiilor cutanate și ulcerelor cu agenți antiseptici și la pacienții care au urmat tratament. Ocazional, studiul dă rezultate fals-negative și fals-pozitive.

Analiza RIT este o modalitate foarte precisă de a detecta sifilisul. În timpul testului, rezultatele durează mult timp. Până când iepurele infectat prezintă semne de infecție. Testul este folosit foarte rar, în ciuda faptului că este extrem de precis.

Folosind reacția în lanț a polimerazei pentru sifilis, sunt determinate elementele genetice ale agenților patogeni. Singurul dezavantaj al PCR este costul ridicat.

Teste non-treponemice

Astfel de teste de sânge ajută la detectarea anticorpilor care apar ca răspuns la cardiolipină, un compus legat de structura generală a membranelor patogenului.

Reacția Wasserman (РВ sau RW)

Cel mai cunoscut test pentru sifilis este reacția Wasserman. RS este inclus în categoria reacțiilor de fixare a complementului (CFR). Noile metode RSC au diferențe semnificative față de RW tradiționale. Dar ele sunt desemnate, ca și înainte, prin conceptul de „reacție Wasserman”.

Sistemul imunitar sintetizează anticorpi (markeri) ca răspuns la invazia treponemului. Ele sunt detectate într-un test de sânge pentru sifilis prin metoda reacției Wasserman. Un rezultat pozitiv RW confirmă infecția subiectului.

Reacția de hemoliză - indice de analiză PB. Cu el interacționează 2 substanțe: ser hemolitic și eritrocite de oaie. Serul se face prin imunizarea unui iepure cu eritrocite de berbec. Activitatea fluidului biologic este redusă prin încălzire.

Indicatorii VD depind de dacă hemoliza a trecut sau nu. Într-o probă lipsită de markeri, are loc hemoliză. În acest caz, reacția la antigene este imposibilă. Complementul este cheltuit pentru interacțiunea cu eritrocitele de oaie. Când există markeri în probă, complimentul reacționează cu antigenele. În acest caz, nu are loc hemoliza.

Componentele pentru RW sunt măsurate în cantități egale. Proba care conține ser, antigen și compliment este încălzită. La probă se adaugă eritrocite de oaie și ser. Se păstrează la o temperatură de 37 de grade până când apare hemoliza în proba de control, care în loc de antigen conține ser fiziologic.

Pentru conducerea RV se folosesc antigene gata preparate. Titrurile și tehnologia de diluare a acestora sunt indicate pe ambalaje. Un rezultat pozitiv RW este indicat prin încrucișări. Rezultatele testelor gata sunt indicate după cum urmează:

• ++++ - maxim pozitiv (hemoliza întârziată);
• +++ - pozitiv (hemoliza este întârziată semnificativ);
• ++ - slab pozitiv (hemoliza parțial întârziată);
• + - îndoielnic (hemoliza a întârziat puțin).

Cu un RV negativ, hemoliza a fost complet realizată în toate probele. Dar, în unele cazuri, se obțin date fals pozitive. Acest lucru se întâmplă atunci când cardiolipina face parte din celule. Mecanismele de protecție nu produc markeri pentru cardiolipină „nativă”.

Cu toate acestea, există rare excepții. RW pozitiv este detectat la persoanele neinfectate. Acest lucru este posibil dacă pacientul a suferit o boală gravă cauzată de viruși (pneumonie, malarie, tuberculoză, patologii hepatice și sanguine). RV pozitiv apare la femeile însărcinate. Acest lucru se datorează faptului că sistemul imunitar este excesiv de slăbit.

Dacă există suspiciunea că rezultatul testului pentru sifilis este fals pozitiv, pacientul este examinat suplimentar. Problema este că această infecție nu poate fi detectată printr-un singur test clinic de laborator. Unele studii oferă indicatori falși, care sunt atât negativi, cât și pozitivi.

O analiză detaliată pentru sifilis ajută la obținerea de date fiabile. Datorită lui, se stabilește un diagnostic adevărat: ei dovedesc infecția sau o exclud. În plus, un test extins vă permite să opriți dezvoltarea infecției, pentru a exclude terapia inutilă.

RSK și RMP

Când se efectuează un sondaj pentru sifilis, reacția tradițională Wasserman este folosită extrem de rar. În schimb, se folosește metoda RSC. Testul dă un rezultat pozitiv la 2 luni după infectare. În forma secundară a bolii, este pozitivă în aproape 100% din cazuri.

Metoda microprecipitării (RMP) este un studiu cu un mecanism similar cu reacția Wasserman. Tehnica este simplu de realizat. Se realizează rapid. Pentru cercetare, sângele pentru sifilis în acest caz este luat dintr-un deget. Tehnica dă un rezultat pozitiv la 30 de zile de la debutul sifilomului. Erorile din studiu nu sunt excluse. Datele fals pozitive sunt obținute pe fondul: infecții exacerbate, pneumonie, infarct, accident vascular cerebral, intoxicație.

Conduce la teste eronate:

După ce am găsit o analiză dubioasă pentru sifilis, se fac studii treponemale. Ele ajută la clarificarea diagnosticului.

RPR și testul roșu toluidină

Metoda plasma reagin (RPR) este un alt analog al reacției Wasserman. Se folosește atunci când este necesar:

• screening-ul persoanelor asimptomatice;
• confirma sifilisul;
• examina sângele donat.

Testul roșu toluidină, ca și RPR, este efectuat pentru a evalua progresul terapiei medicamentoase. Indicatorii lor scad atunci când boala se retrage și cresc atunci când patologia reapare.

Testele non-treponemice arată cât de mult și-a revenit pacientul. Obținerea rezultatelor negative pentru sifilis indică faptul că boala s-a retras complet. Prima examinare se face la 3 luni după cursul terapiei.

Studii treponemale

Testele de înaltă performanță sunt efectuate folosind antigene treponemale. Sunt realizate atunci când:

• s-a obţinut un rezultat pozitiv cu metoda RMP;
• este necesar să se recunoască datele eronate rezultate din testele de screening;
• suspectează dezvoltarea sifilisului;
• este necesar să se diagnosticheze o infecție latentă;
• trebuie pus un diagnostic retrospectiv.

teste RIF și RIT

La mulți pacienți tratați, testarea treponemică a probelor dă rezultate pozitive pentru o lungă perioadă de timp. Ei nu pot judeca gradul de eficacitate al tratamentului. RIT și RIF sunt teste suprasensibile. Datorită acestora, se obțin date fiabile. Aceste analize necesită timp, necesită un timp decent, disponibilitatea unor echipamente avansate. Acestea pot fi efectuate de personal medical calificat.

Efectuând o analiză RIF pentru sifilis, datele pozitive se obțin la 2 luni de la infectare. Parametrii negativi confirmă faptul că subiectul este sănătos. Pozitiv - sugerează că persoana este infectată.

RIT se efectuează atunci când reacția de microprecipitare este pozitivă. Un astfel de test de sânge pentru sifilis ajută la infirmarea sau certificarea prezenței unei infecții. Testul este ultra-sensibil, indică cu exactitate dacă un pacient este infectat sau sănătos. Dar studiul oferă date fiabile la numai 3 luni după pătrunderea treponemului în organism.

Metoda Western blot

Testele ultra-precise includ imunoblotting. Un astfel de test de sânge pentru sifilis se face rar. Este utilizat în examinarea nou-născuților. Nu este potrivit pentru testarea expresă. Rezultatele pozitive sunt primite cu întârziere. Sunt mult mai devreme date prin metoda microprecipitării.

ELISA și RPGA

Metodele informative de cercetare ultra-precise includ teste ELISA și RPHA. Sunt utilizate pentru diagnosticare rapidă. Asistenții de laborator fac un număr mare de astfel de analize. Datorită acestora, este posibil să se stabilească un diagnostic precis.

Analiza RPHA pentru sifilis este pozitivă la 30 de zile de la intrarea agentului patogen în organism. Cu ajutorul său, o infecție primară este diagnosticată atunci când apar ulcere și o erupție cutanată.

Datorită lui, este posibilă identificarea formelor de patologie neglijate, actuale în secret, precum și congenitale. Dar se efectuează împreună cu teste non-treponemale și treponemale. Diagnosticarea cuprinzătoare garantează fiabilitatea rezultatelor. Testarea triplă dovedește cu acuratețe prezența sau absența unei infecții venerice.

O reacție pozitivă persistă o perioadă lungă de timp. Din acest motiv, studiul nu este utilizat pentru a evalua eficacitatea tratamentului.

Analiza ELISA este pozitivă la 21 de zile după infectare. Testul dă uneori rezultate eronate. Apar cu patologii sistemice, procese metabolice afectate. Eficacitatea lor este discutabilă la un copil născut dintr-o mamă infectată.

Erorile obţinute cu metodele serologice de cercetare au devenit motivul descoperirii metodelor de diagnostic progresiv. Cromatografia de gaze și spectrometria de masă nu dau rezultate false. Singurul obstacol în calea utilizării lor în masă este costul ridicat.

Algoritm de diagnosticare

• Când sifilisul se află în faza primară (până la 60 de zile de la momentul infecției), agentul patogen este căutat pe un fundal întunecat sau se folosesc anticorpi fluorescenți pentru a le detecta.
• Dacă patologia este în formă primară, secundară sau latentă, se utilizează RMP și ELISA. Un test de sânge RPGA pentru sifilis ajută la confirmarea rezultatelor.
• În cazul reapariției unei infecții secundare, se analizează scurgerea ulcerelor și erupțiilor cutanate. Agenții patogeni sunt îndepărtați din probe, aceștia sunt studiati cu ajutorul microscopiei.
• Când boala intră în faza terțiară, 1/3 dintre pacienți au un cancer de vezică urinară negativ. În același timp, rezultatele ELISA și RPHA sunt pozitive. Cu toate acestea, ele nu indică întotdeauna perioada terțiară, ci confirmă că persoana a avut o infecție mai devreme. Un test slab pozitiv este dovada unei vindecări complete, și nu dezvoltarea unei faze terțiare.
• Confirmând sifilisul congenital, se ia un test de sânge de la mamă și copil. Comparați datele testelor RMP. Luați în considerare faptul că ELISA și RPHA ale bebelușului sunt pozitive. Confirmați diagnosticul folosind tehnica de imunoblot.

Sifilisul, ca orice patologie sistemică, afectează întregul organism. Prin urmare, examinările pentru aceasta sunt efectuate în timpul sarcinii, înainte de avort. Pacienții fac RMP, ELISA, RPHA.

Cum se face o analiză

Un venereolog trimite pacienții pentru analiză. Laboratoarele private fac cercetări anonime asupra sifilisului la solicitarea clientului. Nu necesită trimiterea unui medic pentru a face testul.

Reguli de cercetare:

• Sângele în laborator se ia dimineața pe stomacul gol (se mănâncă după procedură). Înainte de analiză este permis să bei doar apă.
• Cu 2 zile înainte de examinare, este interzis să mănânci alimente grase și să bei alcool.
• Sângele este luat dintr-un deget sau venă.
• Cât durează studiul? De obicei nu mai mult de o zi. O transcriere a testelor pentru sifilis este obținută de la asistenți de laborator sau de la medicul curant.
• Cât timp este valabil testul? După 3 luni, rezultatele testului devin invalide. Se vând din nou.

Dacă interpretarea analizei arată că testul este pozitiv, este necesar să vizitați un venereolog, care va prescrie o examinare suplimentară pentru a confirma cu exactitate diagnosticul și a selecta regimul de tratament necesar.

Testarea conținutului coloanei vertebrale

Diagnosticul de neurosifilis se face după examinarea lichidului cefalorahidian. Aceasta analiza se face:

• persoanele cu o formă latentă de infecție;
• cu simptome de boli ale sistemului nervos;
• neurosifilis asimptomatic, avansat;
• pacienti recuperati cu teste serologice pozitive.

Direcția pentru studiul lichidului cefalorahidian este dată de medic. Din canalul rahidian se face o puncție în 2 eprubete. Puncția este unsă cu iod, acoperită cu un șervețel steril. După procedură, pacientul este în repaus la pat timp de 2 zile.

Într-o probă se determină cantitatea de proteine, celule, urme de meningită. În a doua probă, se calculează anticorpii la agentul cauzal al sifilisului. Pentru aceasta se fac teste: RV, RMP, RIF si RIBT.

În funcție de câte încălcări sunt detectate, se disting 4 tipuri de lichior. Fiecare indică anumite leziuni ale sistemului nervos. Medicul pune diagnosticul:

În plus, rezultatele testelor judecă recuperarea pacientului.

Interpretarea testelor este sarcina medicului. Numai el este capabil să tragă concluziile corecte, dacă este necesar, să prescrie o examinare suplimentară și să facă un diagnostic precis. Nu este necesar să se facă un diagnostic independent în cazul unei patologii sistemice periculoase. Diagnosticul greșit are consecințe grave.

Reacția de fixare a complementului (CFR)

Reacția de fixare a complementului (RCC) se realizează în două faze: în prima fază, antigenul este combinat cu serul de testat, în care se presupune prezența anticorpilor și se adaugă complement, incubat într-un termostat timp de 30 de minute.

A doua fază: se adaugă sistemul hemolitic (eritrocite de oaie + ser hemolitic). După incubarea într-un termostat timp de 30 de minute, rezultatul este luat în considerare.

Cu un RSK pozitiv, anticorpii serici, combinați cu antigenul, formează un complex imun care se leagă de complement și nu va avea loc hemoliza. Dacă reacția este negativă (nu există anticorpi în serul de testat), complementul va rămâne liber și va avea loc hemoliză.

RSK este utilizat pentru diagnosticul serologic al sifilisului, gonoreei, tifosului și a altor boli.

Reacțiile imunității care utilizează antigeni și anticorpi marcați se bazează pe faptul că unul dintre ingredientele implicate în reacție (antigeni sau anticorpi) este combinat cu o etichetă care poate fi ușor detectată. Fluorocromii (RIF), enzimele (ELISA), radioizotopii (RIA), compușii electron-densi (IEM) sunt utilizați ca etichete.

Testul imunosorbent legat de enzime (ELISA), ca și alte reacții imune, este utilizat: 1) pentru a detecta un antigen necunoscut folosind anticorpi cunoscuți sau 2) pentru a detecta anticorpi în serul sanguin folosind un antigen cunoscut. Particularitatea reacției este că ingredientul cunoscut al reacției este combinat cu o enzimă (de exemplu, peroxidază). Prezența enzimei este determinată de substrat, care este colorat de acțiunea enzimei. Cel mai utilizat ELISA în fază solidă.

1) Detectarea antigenului. Prima etapă este adsorbția anticorpilor specifici pe faza solidă, care este utilizată ca suprafețe de polistiren sau clorură de polivinil ale godeurilor panourilor de plastic. A doua etapă este adăugarea materialului de testat, care presupune prezența unui antigen. Antigenul se leagă de anticorpi. Sondele sunt apoi spălate. A treia etapă este adăugarea unui ser specific care conține anticorpi împotriva unui antigen dat marcat cu o enzimă. Anticorpii marcați sunt atașați de antigene, iar excesul lor este îndepărtat prin spălare. Astfel, dacă există antigeni în materialul de testat, pe suprafața fazei solide se formează un complex anticorp-antigen-anticorp, marcat cu o enzimă. Se adaugă un substrat pentru a detecta enzima. Pentru peroxidază, substratul este ortofenilendiamină amestecată cu H2O2 într-o soluție tampon. Sub acțiunea enzimei se formează produse care au o culoare maro.

2) Detectarea anticorpilor. Prima etapă este adsorbția antigenelor specifice pe pereții godeurilor. De obicei, în sistemele comerciale de testare, antigenele sunt deja adsorbite pe suprafața godeurilor. A doua etapă este adăugarea serului studiat. În prezența anticorpilor, se formează un complex antigen-anticorp. A treia etapă - după spălare, în godeuri se adaugă anticorpi antiglobulină (anticorpi împotriva globulinelor umane) marcați cu o enzimă. Rezultatele reacției sunt evaluate așa cum este descris mai sus.

Probele cunoscute pozitive și negative cunoscute, care sunt disponibile în sistemele comerciale, sunt utilizate ca martori.

ELISA este utilizat pentru a diagnostica multe boli infecțioase, în special, infecția cu HIV, hepatita virală.

Imunoblotting este un tip de ELISA (o combinație de electroforeză și ELISA). Biopolimerii, cum ar fi antigenele virusului imunodeficienței umane, sunt separați prin electroforeză pe gel. Moleculele separate sunt apoi transferate pe suprafața nitrocelulozei în aceeași ordine în care au fost în gel. Procesul de transfer se numește blotting, iar imprimarea rezultată se numește blot (în engleză blot - spot). Această amprentă este afectată de serul studiat. Apoi se adaugă ser anti-globulină umană marcat cu peroxidază, urmat de substrat, care devine brun sub acțiunea enzimei. Se formează dungi maronii acolo unde anticorpii s-au combinat cu antigenele. Metoda vă permite să detectați anticorpi la antigenele individuale ale virusului.

Radioimunotest (RIA). Metoda vă permite să determinați cantitatea de antigen din proba de testat. În primul rând, un material care conţine probabil un antigen este ataşat la serul imun, apoi un antigen cunoscut marcat cu un radioizotop, de exemplu, I125. Ca rezultat, antigenul marcat detectabil (nemarcat) și cunoscut se leagă la un număr limitat de anticorpi. Deoarece antigenul marcat este adăugat într-o anumită doză, este posibil să se determine care parte a acestuia s-a legat de anticorpi și care a rămas liberă din cauza competiției cu antigenul nemarcat și a fost îndepărtată. Cantitatea de antigen marcat legat de anticorpi este determinată folosind un contor. Este invers proporțională cu cantitatea de antigen determinată.

Microscopia imunoelectronică (IEM). Un antigen, de exemplu, un virus gripal, este atașat la un antiser specific marcat cu o substanță densă în electroni. Proteinele care conțin metale (feritină, hemocianina) sau aurul coloidal sunt folosite ca etichetă. Atunci când microscopia într-un microscop electronic, sunt luate fotografii care arată virionii gripei cu puncte întunecate atașate la ei - molecule de anticorpi marcați.

Imunitatea dobândită, diferența sa față de ereditară (specie, înnăscută). Tipuri de imunitate dobândită.

Sarcină.În familie, copilul Valery, în vârstă de trei ani, s-a îmbolnăvit de difterie. Alți membri ai familiei nu s-au îmbolnăvit, iar mama fusese bolnavă de difterie în copilărie, iar tatăl a fost vaccinat cu toxoid difteric. Sora mai mare Natasha, în vârstă de cinci ani, nu a fost vaccinată cu toxoid difteric din cauza contraindicațiilor medicale, așa că a trebuit să se supună profilaxiei de urgență cu ajutorul serului antitoxic antidifteric. Fratele mai mic, Vitaly, nu s-a îmbolnăvit de trei luni, deși nu fusese vaccinat cu nimic. Există o pisică și un câine în casă, nu s-au îmbolnăvit. Numiți pentru fiecare dintre membrii familiei și pentru animale tipul de imunitate din cauza căruia nu s-au îmbolnăvit.

Ce este un antigen? Ce substanțe pot fi antigene? Antigenele și haptenele complete, prin ce diferă între ele? Structura antigenului. Care este numele părții unei molecule de antigen care îi determină specificitatea? Numiți antigenele cunoscute de dvs. Ce sunt autoantigenele? Structura antigenică a unei celule microbiene. Flageli și antigeni somatici; localizarea, denumirea literei, natura chimică, relația cu temperatura, metoda de preparare, aplicarea practică. Anatoxina, proprietățile sale, aplicarea, producția. Ce țesut alcătuiește sistemul imunitar al organismului? Precizați organele centrale și periferice ale sistemului imunitar uman. Descrieți procesul de formare a răspunsului imun umoral și celular. Precizați celulele care captează și digeră antigenul; celule care interacționează în formarea imunității umorale, imunității celulare; celule care se transformă și devin plasmocite producătoare de anticorpi; celule care stimulează acest proces; celule care suprimă răspunsul imun; celule care ucid celulele tumorale și celulele infectate cu virus. Ce sunt anticorpii? Cum să obțineți ser imunitar? Cum să obțineți un ser care să neutralizeze toxina tetanosului? Antitoxinele, aglutininele, hemolizinele se formează împotriva ce antigene? Ce anticorpi se formează atunci când toxoidul difteric este injectat în organism? bacterii difterice? Natura chimică și structura anticorpilor. Care este locul activ al unei imunoglobuline? Enumerați clasele de imunoglobuline, proprietățile lor. Precizați clasa de imunoglobuline care pot traversa placenta. Cărei clase aparțin imunoglobulinele secretoare? Dinamica acumulării de anticorpi. Cum este un răspuns imun secundar diferit de unul primar? Cum sunt utilizate cunoștințele despre dinamica răspunsului imun în medicina practică? Ce sunt reacțiile de imunitate, care este mecanismul lor, fazele de reacție. În ce 2 direcții sunt utilizate reacțiile imune? Enumerați reacțiile sistemului imunitar.

Sarcină.Înlocuiți cuvintele care lipsesc cu „toxoid” sau „antitoxină”: _________ este un antigen, _________ este un anticorp, __________ creează imunitate activă când este introdus în organism, __________ creează imunitate pasivă când este introdus în organism, __________ este obținut prin imunizarea animalelor , ___________ se obține dintr-o toxină atunci când este expus la formol și căldură, ___________ neutralizează toxinele, __________ provoacă formarea de anticorpi în organism.

Reacția de aglutinare: ce este aglutinarea, ce este un antigen, ce este un anticorp; metode de setare, ce comenzi sunt setate și pentru ce; cum ar trebui să arate controalele. Seruri aglutinante, ce conțin, cum se obțin, la ce se folosesc; care este titrul serului aglutinant? Reacția de hemaglutinare indirectă (pasivă): ce servește ca antigen în această reacție, cum se obține, mecanismul de reacție. Ce este un diagnostic de eritrocite? Ce este un anticorp eritrocitar diagnosticum? Reacții de precipitare: ce este precipitarea, ce servește ca antigen; cum se obține serul precipitant? Care este titrul serului precipitant? Metode de afirmare, aplicare practică.

Reacția de fixare a complementului (RCC): principiul CFR; ce se formează atunci când serul imunitar interacționează cu un antigen specific; ce se întâmplă cu complementul dacă este prezent în această interacțiune? Care este soarta complementului dacă nu există o afinitate specifică între antigen și anticorpi? Dacă rezultatul final al RSK este hemoliza, înseamnă asta un rezultat pozitiv sau negativ? Tehnica de setare RSC. De ce ar trebui să fie inactivat serul de testare? Ser hemolitic: ce conține, cum se obține, ce este titrul și cum se determină? Complement: natura chimică, relația cu temperatura ridicată, unde este conținut? Cum poate fi distrus complementul? Ce este folosit practic ca complement?

Sarcină. O pată de sânge a fost găsită pe hainele unui bărbat acuzat de crimă. Ce reacție poate fi folosită pentru a determina dacă este sânge uman; care va fi antigenul în această reacție și care vor fi anticorpii; ce medicament de diagnostic ar trebui să fie în laborator pentru această reacție, cum este preparat?

Sarcină. Cum se determină, folosind reacția de precipitare, dacă este livrat pentru analiză o probă de carne de bovine sau carne de cal; ce preparate diagnostice sunt necesare?

Reacția de precipitare în gel de agar, metode de formulare, aplicare practică.

Ce arată un test de sânge serologic?

Ce arată un test de sânge serologic? Măsurile de diagnostic sunt cea mai importantă etapă în tratamentul oricărei boli. Succesul tratamentului depinde nu numai de medicamentele prescrise, ci și în mare măsură de cât de corect a fost pus diagnosticul.

În plus, diagnosticul poate preveni complicațiile și comorbiditățile. Cu ajutorul unei analize serologice a sângelui pacientului, este detectată prezența anticorpilor și a antigenelor. Studiul ajută la găsirea multor boli, determinarea fazei acestora și controlul cursului tratamentului.

Ce este serologia?

Serologia este ramura imunologiei care studiază reacțiile antigenelor la anticorpi. Această ramură a medicinei se ocupă cu studiul plasmei sanguine și a caracteristicilor sale imunologice.

Astăzi, un test de sânge serologic pentru anticorpi este o modalitate fiabilă de a detecta virusul imunodeficienței umane, hepatita, bruceloza, bolile cu transmitere sexuală și alte boli care pun viața în pericol. Să ne dăm seama în ce cazuri este prescris.

Indicații pentru programare

Un test de sânge serologic este necesar pentru a identifica agentul cauzal al bolii în caz de dificultăți în stabilirea unui diagnostic.

Pentru a efectua această reacție, antigenii agenților patogeni sunt injectați în plasmă, iar apoi asistentul de laborator studiază procesul în curs. Sau efectuează o reacție inversă: anticorpii sunt injectați în sângele infectat pentru a determina apartenența specifică a agentului patogen.

Scopul aplicatiei

Acest studiu este utilizat în diferite ramuri ale medicinei. Cu ajutorul acestei reacții sunt detectate celule și anticorpi specifici produși de organism pentru a lupta împotriva infecțiilor și virușilor.

În plus, folosind metoda serologică, se determină grupa sanguină a unei persoane.

Un test de sânge serologic similar este utilizat în ginecologie pentru a diagnostica bolile cu transmitere sexuală. Această metodă este practicată și pentru examinările cuprinzătoare ale femeilor însărcinate (depistarea toxoplasmozei, HIV, sifilisului etc.). Trecerea acestui test este obligatorie la înregistrarea la clinica prenatală.

La copii, un test serologic este utilizat pentru a confirma diagnosticul bolilor așa-numite „copii” (varicela, rujeola, rubeola etc.) în cazul în care simptomele nu au manifestări pronunțate și este imposibil să se identifice boala prin analiza indicaţiilor clinice.

Detectarea bolilor venerice

Pentru venerologi, această testare este cu adevărat indispensabilă și vă permite să faceți un diagnostic foarte precis.

Cu o imagine clinică neclară, un test de sânge serologic pentru sifilis, giardioză, ureaplasmoză, chlamydia, herpes și alte boli vă permite să identificați rapid prezența anticorpilor.

Boli virale și infecțioase

Analiza serologică este utilizată în mod activ de către gastroenterologi, hepatologi și specialiști în boli infecțioase pentru a diagnostica hepatita virală.

Descifrarea unui test de sânge serologic face posibilă determinarea stadiului evoluției bolii și răspunsul la întrebarea cât de multă spitalizare este necesară în acest moment. Cum să vă pregătiți corect?

Pregătirea pentru livrarea analizei

Testele de sânge serologice se fac atât în ​​clinicile publice, cât și în cele comerciale. Trebuie acordată preferință unui laborator cu echipamente moderne și personal calificat.

Probele biologice pentru cercetare pot fi salivă și fecale, dar în majoritatea cazurilor se folosește sângele venos al pacientului. Sângele pentru un test serologic este prelevat din vena cubitală într-un laborator. Înainte de a face testul, ar trebui să vă consultați cu medicul dumneavoastră despre pregătirea pentru această procedură.

Pentru a vă pregăti pentru livrarea unei analize pentru un studiu serologic, trebuie să urmați câteva reguli simple.

Sângele se ia într-o stare calmă înainte de mese, adică pe stomacul gol. Înainte de aceasta, nu trebuie să faceți alte studii, cum ar fi raze X, ultrasunete etc.

Este necesar să se excludă utilizarea antibacteriene și a altor medicamente cu câteva săptămâni înainte de a dona sânge. Anumite recomandari in acest caz depind de boala pentru care se face testul. De exemplu, un test de hepatită presupune evitarea alimentelor grase și a alcoolului cu 48 de ore înainte de procedură.

Reacție de fluorescență

Printre varietățile de reacții serologice există o reacție de fluorescență. Această tehnică folosește un reactiv care evidențiază anticorpii din serul sanguin.

Stabilirea unei reacții serologice de tip direct implică marcarea anticorpilor specifici cu o substanță fluorescentă. Această reacție este cea mai rapidă și se realizează într-un singur pas.

O altă opțiune pentru efectuarea unei astfel de analize se numește indirectă sau RNIF. Se realizează în două etape. În prima etapă, anticorpii nu sunt marcați cu etichete fluorescente, iar în a doua etapă, anticorpii marcați corespunzător sunt utilizați pentru a detecta antigenele și anticorpii. Luminescența apare numai după ce apare legarea la un anticorp specific.

Ce arată un test de sânge serologic? Rezultatul întregii proceduri este evaluat de un dispozitiv special care analizează puterea radiației, dezvăluie forma și dimensiunea obiectului studiat. Agenții cauzali ai bolilor infecțioase sunt detectați cu un rezultat, a cărui fiabilitate este%, în funcție de tipul și stadiul patologiei.

Test imunosorbant legat

Aceste tipuri de serologie folosesc reactivi unici, stabili. Substanțele marcate par să se lipească de anticorpii doriti. Ca rezultat, obținem un rezultat calitativ sau cantitativ.

Dacă nu se găsesc markeri exprimați, rezultatul va fi considerat negativ. Dacă în timpul unui studiu calitativ este detectată prezența anticorpilor în probele biologice, atunci rezultatul analizei este considerat pozitiv. La cuantificarea celulelor, analiza dă un rezultat mai precis.

Analizând indicatorii analizei (de exemplu, cantitatea de celule detectate), specialistul stabilește dacă boala se află în stadiul inițial, în stadiul acut sau dacă forma cronică a patologiei s-a agravat. Pentru a pune un diagnostic, medicul ține cont nu numai de datele studiului serologic, ci și de tabloul clinic al bolii.

Caracteristicile acestui test

Efectuarea acestei analize nu este întotdeauna capabilă să ofere o certitudine de 100% că o anumită boală a fost detectată. Se întâmplă că rezultatele pot fi ambigue și sunt necesare alte proceduri.

De exemplu, în timpul unui test pentru bruceloză, serul este testat pentru auto-retenție fără antigen. Acest lucru crește semnificativ fiabilitatea testării. O analiză pentru bruceloză poate fi pozitivă sau negativă și poate provoca dubii.

Dacă primiți rezultate îndoielnice care nu au o interpretare clară, se recomandă să reluați analiza. În plus, bruceloza poate fi detectată prin hemoculturi, examinând măduva osoasă și lichidul cefalorahidian.

Avantajele unui test de sânge serologic

Tehnicile de diagnosticare folosind teste serologice sunt utilizate pe scară largă în practica medicală modernă. Acest lucru se face mai ales atunci când se determină patologii virale și infecțioase.

Aceleași teste sunt utilizate în screening-ul geografic și examenul medical pentru a preveni răspândirea epidemiologică a infecției.

Avantajele metodei includ:

• Nivel ridicat de încredere.
• Răspuns rapid și rezultate. Rezultatele RSC sunt cunoscute în 24 de ore. Într-o situație specială, într-un cadru spitalicesc, analiza va fi gata în câteva ore.
• Monitorizarea evoluției bolii și a eficacității terapiei.
• Cost redus și disponibilitate pentru pacienți.

Contra metodei

Cu toate acestea, studiile serologice au și dezavantajele lor.

Printre acestea se numără faptul că analiza ar trebui să țină cont de perioada de incubație a bolii pentru a obține o imagine mai fiabilă.

De exemplu, determinarea herpesului simplex de primul sau al doilea tip este posibilă numai după 14 zile de la momentul infecției. O analiză pentru prezența virusului imunodeficienței se efectuează după 30 de zile, după 90 de zile și șase luni după contactul cu o persoană infectată.

Desigur, fiabilitatea rezultatelor poate fi influențată și de factorul uman: neglijarea regulilor de pregătire pentru prelevarea de sânge sau o greșeală făcută de asistentul de laborator în timpul reacției.

Conform statisticilor, un rezultat eronat poate fi obținut în 5% din cazuri. Un medic cu experiență, atunci când examinează un pacient, după ce a studiat tabloul clinic, în majoritatea cazurilor poate calcula greșeala făcută.

Ce analize de sânge se fac pentru sifilis: RW, RPHA, ELISA, VDRL, RPR, RIBT, decodificarea rezultatelor testelor

Sifilisul este o boală infecțioasă cauzată de spirocheta Treponema pallidum, predispusă la o evoluție cronică progresivă, cu o periodizare clară a simptomelor clinice.

Predominanța transmiterii sexuale asupra contactului și transplacentară pune această boală într-o serie de boli cu transmitere sexuală (ITS, ITS). Pe lângă aceste metode de transmitere a infecției, calea artificială (din latinescul „artificio” – creat artificial) joacă un rol deosebit.

Este tipic pentru instituțiile medicale, implementat în principal într-un cadru spitalicesc. Infecția apare în timpul transfuziilor de sânge, diferitelor operații chirurgicale, metodelor de diagnostic invazive.

În ciuda carantinei sângelui donatorului, problema detectării sifilisului la donatori în diferite stadii ale bolii este încă relevantă.

Prin urmare, măsurile de diagnosticare pentru sifilis necesită standardizare, introducerea de noi metode sensibile și informative de identificare, precum și reducerea la minimum a erorilor și interpretarea greșită a rezultatelor testelor.

Clasificarea metodelor de diagnostic de laborator

Diagnosticul sifilisului are unele caracteristici și diferă de diagnosticul altor infecții bacteriene. Structura complexă și proprietățile antigenice ale treponemului palid provoacă erori în interpretarea rezultatelor testelor serologice.

Un test de sânge pentru sifilis este oferit la 3 grupuri principale de pacienți:

1. 1 Screening și examinare medicală profilactică a grupurilor de populație (inclusiv sarcina, înregistrarea la clinica prenatală, angajarea și înregistrarea unei cărți medicale etc.).
2. 2 Screening în grupuri de risc (sex neprotejat cu o persoană infectată cu sifilis, persoane după contact sexual forțat, infectată cu HIV și așa mai departe).
3. 3 Persoane cu simptome sau suspectate de a avea o infecție sifilitică.

Toate metodele de laborator sunt împărțite condiționat în directe și indirecte.

Metode directe

1. 1 Identificarea Treponema pallidum în câmp întunecat (microscopie în câmp întunecat).
2. 2 Infectarea animalelor de experiment (cultivarea la animale de laborator).
3. 3 PCR (reacție în lanț a polimerazei).
4. 4 Sondă ADN sau hibridizare a acidului nucleic.

Metode indirecte

Reacțiile serologice sunt metode de diagnostic de laborator bazate pe detectarea anticorpilor (abreviați ca AT) la antigenele treponemului palid (abreviați ca AG). Sunt esențiale pentru confirmarea diagnosticului.

1. 1 Teste non-treponemice:
   • Reacția Wasserman (RSK);
   • Reacția de microprecipitare (MR, RMP) și analogii săi, care sunt dați mai jos;
   • Test rapid de reagină în plasmă (RPR, RPR);
   • Testare cu toluidină roșie și ser (TRUST);
   • Test non-treponemic al Laboratorului pentru Studiul Bolilor cu Transmitere Sexuală - VDRL.
2. 2 teste treponemale:
   • R-tion de imobilizare a Treponema pallidum - RIBT / RIT;
   • R-țiunea imunofluorescenței - RIF, FTA (diluția serurilor RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
   • R-țiunea hemaglutinării pasive (RPHA, TRPGA, TPHA);
   • ELISA (ELISA, EIA);
   • Imunoblotting.

Figura 1 - Algoritm de serodiagnostic sifilis

Metode histomorfologice

Aceste metode se reduc la identificarea caracteristicilor histomorfologiei manifestărilor sifilitice. Se acordă atenție subtilităților structurii șancrului dur. Cu toate acestea, diagnosticul diferențial al infecției folosind histologie este foarte dificil. Histomorfologia este utilizată cu alte teste de laborator și clinice.

Microscopia în câmp întunecat al Treponema pallidum

Această metodă se bazează pe detectarea directă a treponemului palid în materialul studiat folosind un microscop și dispozitive speciale (cel mai adesea descărcarea de eroziuni și ulcere, mai rar lichidul cefalorahidian și alte substraturi).

Cu ajutorul scarificării, răzuirii, stoarcerii din eroziuni și defecte ulcerative, se obține exudat, apoi preparatul preparat este examinat la microscop.

De obicei, treponeamele palide sunt detectate în preparatul obținut din șancru, din focarele de sifilis secundar proaspăt, secundar recurent, precum și punctate ale ganglionilor limfatici, placentă.

Pe baza fenomenului de strălucire a particulelor mici într-un câmp întunecat atunci când este lovit de un fascicul de lumină (fenomenul Tyndall), metoda vă permite perfect să diferențiați agentul cauzal al sifilisului de alte treponeme pe baza diferențelor morfologice și a diferențelor de modalități. bacteria se mișcă.

Pentru microscopie, se folosește un condensator special cu câmp întunecat de rezoluție optică corespunzătoare. Medicamentul este obținut prin metoda picăturii zdrobite (o picătură de material este aplicată pe o lamă de sticlă curată, fără grăsimi și acoperită cu o lamă foarte subțire).

Uleiul de imersie este aruncat pe lamela. Prin rotirea tubului și rotirea lentilei de mărire, se reglează iluminarea dorită.

În câmpul întunecat al microscopului, sunt detectate celule sanguine, celule epiteliale și agentul cauzal al sifilisului. Treponemul palid arată ca o spirală, foarte subțire, radiind o culoare argintie, cu mișcări line.

Figura 2 - Microscopia câmpului întunecat ca modalitate de a vizualiza treponemul palid în materialul studiat. Sursa imaginii - CDC

Treponema pallidum trebuie distins de alte treponeame, inclusiv de Tr. refringens, care poate fi găsit în orofaringe și mucoasa genitală. Această bacterie face mișcări haotice, are bucle largi și asimetrice, destul de grosiere. În plus, Treponema pallidum se distinge de Tr. Microdentium, Tr. Buccalis si Tr. vincenti.

Vizualizarea bacteriilor într-un câmp întunecat este uneori completată de o reacție de fluorescență. Pentru aceasta, la materialul nativ se adaugă anticorpi antitreponemici marcați cu un colorant fluorescent. Aceasta formează un complex numit antigen-anticorp (abreviat AG-AT), care este obiectul de studiu folosind un microscop fluorescent.

Metoda reacției în lanț a polimerazei (PCR).

PCR, dezvoltată în 1991 pentru a detecta molecula de acid dezoxiribonucleic (ADN) din treponema pallidum, este foarte sensibilă și specifică, permițând detectarea fragmentelor de ADN ale agentului patogen.

Această analiză se bazează pe copierea unor secțiuni scurte de ADN de spirochete pallidum, care satisface parametrii specificați și este prezent în probă. Toate acestea se fac în condiții artificiale (in vitro). Reacția se realizează într-un dispozitiv - un amplificator, care asigură periodizarea ciclurilor de temperatură. Are loc răcirea, urmată de încălzirea eprubetelor cu o eroare de 0,1˚С.

Șablonul ADN este încălzit timp de 2 minute la o temperatură de 92-98°C (se folosește temperatura maximă dacă polimeraza este termostabilă). Când sunt încălzite, firele de ADN diverg din cauza ruperii legăturilor de hidrogen dintre ele. în etapa de recoacere, temperatura de reacţie este coborâtă pentru a lega primerul de matriţa monocatenară.

Coacerea durează aproximativ 30 de secunde, timp în care sunt sintetizate sute de nucleotide. Moleculele nou sintetizate sunt copiate de polimerază, ca urmare, fragmentele specifice de acid dezoxiribonucleic cresc de multe ori. Detectarea ulterioară a fragmentelor se realizează folosind electroforeza pe gel de agar.

Diagnosticul PCR al sifilisului este încă de natură experimentală, dar este justificat atunci când este detectată o infecție congenitală, în cazuri dificile de diagnostic, sau cu un conținut minim de treponem palid în materialul de testat.

Hibridarea ADN-ului

Hibridizarea ADN-ului se realizează in vitro și se bazează pe conectarea completă sau parțială a două molecule de ADN monocatenar într-o moleculă. În cazul unei potriviri complete de fragmente complementare, unirea este ușoară. Dacă potrivirea complementară este parțială, atunci asocierea lanțurilor de ADN are loc lent. Pe baza timpului fuziunii în lanț, se poate estima gradul de complementaritate.

Când ADN-ul este încălzit într-o soluție tampon, legăturile de hidrogen sunt rupte de baze azotate care sunt complementare, ca urmare, lanțurile de ADN diverg. În continuare, se obține un preparat din doi acizi dezoxiribonucleici denaturați. La răcire, regiunile monocatenare se refac. Se formează un așa-numit hibrid ADN.

Metoda face posibilă estimarea și analiza vitezei de recoacere, ținând cont de caracteristicile (asemănări și diferențe) ale ADN-ului între specii sau în cadrul unei specii.

Utilizarea unei sonde ADN constă în hibridizarea unui fragment de ADN marcat cu o regiune ADN specifică pentru a identifica secvențe de nucleotide complementare. Un grup de atomi nesaturați (cromofori) sau izotopi radioactivi este utilizat pentru a marca sonda.

Sonda ADN este utilizată pentru detectarea heterogenă și omogenă a acizilor nucleici. Rolul sondei este de a determina zonele în care a avut loc fuziunea țintă-sondă. Detectarea într-un sistem omogen are avantajul de a putea urmări hibridizarea moleculelor de ADN în timp real.

Esența metodei se reduce la denaturarea și renaturarea ADN-ului (reunificarea lanțurilor de ADN). Procesul de renaturare a acidului nucleic și a sondei ADN se încheie cu formarea unui „hibrid”.

Secvențele specifice de acid nucleic hibridizează cu o sondă ADN și astfel sunt detectate și permit estimarea cantității de ADN din materialul de testat.

Infecția animalelor de laborator

Sensibilitatea ridicată a iepurilor la Treponema pallidum (aproximativ 99,9%) le permite să fie utilizate în diagnosticul infecției sifilitice.

Infectarea iepurilor se realizează în centrele de cercetare și reprezintă „standardul de aur” pentru evaluarea sensibilității altor metode.

Să revenim la testele treponemale și non-treponemale, deoarece sunt folosite cel mai des. Luați în considerare avantajele și dezavantajele acestora, precum și erorile în interpretarea rezultatelor.

Teste non-treponemice

Acestea sunt teste pentru determinarea anticorpilor IgG și IgM la un antigen cardiolipin standardizat. Dezavantajul lor semnificativ este specificitatea lor relativ scăzută.

Costul redus și ușurința de implementare fac posibilă clasificarea acestor teste ca teste diagnostice de screening necesare pentru stabilirea unui diagnostic preliminar și screening în rândul populației.

Este vorba despre teste non-treponemice care se dau la înregistrarea unei cărți medicale, aplicarea pentru un loc de muncă, înregistrarea într-o clinică prenatală.

1. 1 Sensibilitate minimă în stadiul de sifilis primar - 70%;
2. 2 Sensibilitate minimă în stadiul de sifilis tardiv - 30%;
3. 3 Posibilitatea rezultatelor fals-negative și fals-pozitive;
4. 4 Complexitatea implementării RSC.

1. 1 Cost relativ scăzut al producției de testare;
2. 2 Obțineți un răspuns rapid;
3. 3 Posibilitatea de aplicare a acestora pentru screening.

Obținerea de probe fals pozitive sau slab pozitive este posibilă în următoarele cazuri:

1. 1 Încălcarea tehnologiei de execuție, la blocarea complexului AG-AT.
2. 2 Pacientul are boli autoimune (artrita reumatoidă, reumatism, sclerodermie, lupus eritematos sistemic, sarcoidoză etc.).
3. 3 Neoplasme maligne.
4. 4 Infecții virale și bacteriene.
5. 5 Boli endocrine (tiroidită autoimună, diabet zaharat).
6. 6 Sarcina.
7. 7 Consumul de alcool.
8. 8 Consumul de alimente grase.
9. 9 bătrânețe.

După cum puteți vedea din listă, există suficiente motive pentru un rezultat incorect. Prin urmare, trebuie tratat cu mare prudență. Să luăm în considerare încă două mostre împreună cu RSC. Aceasta este o reacție de microprecipitare și VDLR (modificarea sa).

Reacția de fixare a complementului (RSK, Wasserman, RW)

Acesta este un test bazat pe capacitatea complementului de a se lega de complecși AG-AT. Complexul rezultat este identificat folosind un sistem hemolitic. Antigenul cardiolipin crește semnificativ sensibilitatea probei.

Sensibilă este reacția Colmer, care constă în efectuarea la diferite condiții de temperatură. Astfel, prima fază a reacției Colmer are loc la o temperatură de 20˚С timp de o jumătate de oră, a doua fază la o temperatură de 4-8˚С timp de 20 de ore. În acest timp, are loc legarea complementului.

Când se efectuează RSK, este posibil să se obțină rezultate puternic pozitive. Motivul este probabil un titru mare de anticorpi în serul nediluat. În acest caz, probele sunt plasate cu doze descrescătoare.

Pentru a diferenția etapele sifilisului și a evalua eficacitatea tratamentului antisifilitic, se determină cantitatea de anticorpi din ser.

Pozitivitatea probei este evaluată folosind încrucișări, iar diluția serului este indicată și în reacțiile Wasserman, Colmer și Cann.

Reacția de microprecipitare

Întrucât complexitatea efectuării testelor de mai sus este mare, a fost dezvoltată o metodă accelerată pentru serodiagnosticul sifilisului, așa-numita metodă expresă, reacția de microprecipitare (abreviată MR, RMP), pentru largimea de acoperire a examinărilor medicale ale diferitelor grupuri de populație. .

Se efectuează cu antigen cardiolipin și excipienți. Avantajul său este colectarea de sânge periferic pentru cercetare. Acest lucru accelerează semnificativ atât tehnica în sine, cât și munca asistenților de laborator.

Figura 2 - Reacția de microprecipitare (schemă)

RM necesită plasmă sau ser inactivat al pacientului (acestea conțin anticorpi). Apoi, plasma este plasată în godeurile marcate. Apoi, se adaugă o picătură de antigen cardiolipină la materialul de testat, se amestecă și se agită. Ca urmare, în serul persoanei infectate apar fulgi caracteristici, cu intensitate variabilă.

Acesta este un test de calitate. Cuantificarea folosește 10 diluții de ser plasate în 10 godeuri marcate corespunzător. Cu MR calitativă, răspunsul este indicat sub formă de încrucișări (plus) sau minus, cu MR cantitativă, se indică titrul de anticorpi (1:2, 1:4 și așa mai departe).

Prezența fulgilor este privită ca un răspuns pozitiv sau slab pozitiv. Apariția unui floculat este posibilă și în absența unei boli, prin urmare, evaluarea finală a rezultatului obținut se efectuează după un studiu de control sau alte reacții (RIBT, RIF, ELISA, RPHA).

Metoda recomandată de Organizația Mondială a Sănătății pentru stabilirea unei reacții cu un antigen de natură lipoid (AH) este pe bună dreptate considerată cea mai bună dintre celelalte teste standard non-treponemale. Dezvoltat în SUA, Georgia în laboratorul de boli venerice (Veneral Diseases Research Laboratories).

Abrevierea instituției a servit drept nume pentru eșantion - VDRL. VDRL este o modificare a MP. Serul de la un pacient cu sifilis este inactivat și plasat pe o lamă de sticlă. Antigenul folosit este format din cardiolipină, colesterol și lecitină în diferite procente. Răspunsul este înregistrat aproape imediat.

Flocularea distinctă are loc în prezența anticorpilor în ser. Serul devine reactiv la 4 săptămâni după infecție. Pentru a evalua cantitatea de anticorpi, serul este prediluat exponențial.

1. 1 sensibilitate relativ mare;
2. 2 specificitate relativ mare;
3. 3 ușurința de implementare;
4. 4 cost redus de reactivi;
5. 5 obțineți un răspuns rapid.

Dezavantajul VDRL este rata relativ mare de fals pozitive.

Cauzele lor sunt toate aceleași boli enumerate mai sus.

Testele treponemale se efectuează cu antigene specifice Treponema pallidum. Sunt necesare si obligatorii pentru stabilirea diagnosticului final. Aceasta este o reacție de imunofluorescență (RIF), reacție de hemaglutinare indirectă (IPHA), imunotest enzimatic (ELISA) etc.

După un rezultat pozitiv al unui test non-treponemic (RPR, MP, VDRL), trebuie efectuate întotdeauna teste treponemice (mai des o combinație - RPHA, ELISA, RIF).

Testele treponemale sunt mai dificil de efectuat decât testele rapide și costă mai mulți bani.

Această reacție (abreviată ca RIF) este utilizată pentru a diagnostica sifilisul, inclusiv formele latente, și pentru a verifica din nou probele pozitive și fals pozitive.

RIF se bazează pe strălucirea anticorpilor marcați atunci când sunt combinate cu un complex antigen-anticorp sub o lampă de cuarț. Metoda a început să fie utilizată în anii 60 și s-a remarcat prin ușurința sa de implementare și specificitatea ridicată (care este ușor inferioară RIBT).

Are mai multe modificări: RIF-10, RIF-200 și RIF-abs.

Cel mai sensibil RIF în diluție este de 10 ori, iar restul sunt mai specifice. RIF se realizează în două etape. Serul sanguin al pacientului este adăugat la AG. Se formează un complex AG-AT, care este investigat în faza următoare. Complexul marcat cu fluorocrom este apoi identificat prin microscopie. Dacă nu se observă strălucire, aceasta indică absența anticorpilor specifici în serul sanguin.

RIF-200 este cea mai valoroasă dintre toate diluțiile. Metoda este concepută pentru a diagnostica diferite forme de sifilis, în special sifilisul latent, și pentru a verifica din nou probele pozitive.

Reacția de imobilizare a Treponema pallidum (abreviat RIBT, RIT) este unul dintre testele serologice complexe care necesită efort și costuri financiare semnificative. RIBT este folosit din ce în ce mai puțin, dar relevanța sa rămâne în diagnosticul sifilisului latent.

Are o mare importanță în recunoașterea rezultatelor fals pozitive la gravide și se bazează pe imobilizarea bacteriilor în prezența imobilizinelor - anticorpi tardivi.

Rezultatul este evaluat pe procentul (%) de treponem imobilizat folosind un tabel special:

1. 1 De la 0 la 20 - test negativ.
2. 2 De la 21 la 50 - test slab pozitiv.
3. 3 Din 50 reacție prepozitivă.

Rezultate fals pozitive sunt posibile și cu RIBT. Astfel, un răspuns incorect este posibil cu infecția cu trepanematoză tropicală, precum și cu tuberculoza, ciroza hepatică, sarcoidoza și pacienții senili.

Acest test de sânge pentru sifilis se numește test de hemaglutinare pasivă (abreviat ca sânge pentru TPHA, TPHA).

Antigenul pentru TPHA este preparat din eritrocite de berbec acoperite cu fragmente de treponeme palide (obținute de la iepuri infectați (vezi Figura 4)). Pentru analiză se utilizează sânge venos (plasmă sau ser inactivat) al pacientului.

Când antigenul este adăugat în serul unui pacient cu sifilis, se formează un complex AG-AT, care duce la aglutinarea globulelor roșii. aglutinarea este determinată subiectiv de un asistent de laborator.

Figura 3 - Schema RPHA (reacție de hemaglutinare pasivă)

Proba este evaluată ca pozitivă atunci când apar aglutinate de culoare roz uniformă. Culoarea precipitatului în roșu indică depunerea eritrocitelor. RPHA este foarte sensibil și foarte specific.

Reacția de microhemaglutinare

Este o versiune simplificată a RPGA. Diferă de proba descrisă mai sus prin faptul că are mai puțin antigen, diluant și ser de sânge pentru a efectua reacția. Proba poate fi evaluată la 4 ore după incubarea serului. Este utilizat în depistarea și examenele de masă pentru sifilis.

Test imunosorbant legat

Testul imunosorbent legat de enzime (abreviat ELISA) se bazează pe o reacție specifică antigen-anticorp. Material biologic (ser sanguin al pacientului, lichid cefalorahidian) este introdus în godeuri, pe suprafața solidă a cărora sunt fixați antigenele treponemului palid. Materialul de testat este incubat, apoi anticorpii care nu s-au legat de antigeni sunt spălați (vezi Figura 5).

Identificarea complexului rezultat se realizează în stadiul de fermentație folosind ser imun marcat cu enzima. În timpul unei reacții chimice, enzima colorează complexele rezultate. Intensitatea colorării depinde de cantitatea de anticorpi specifici din sângele pacientului și este înregistrată de un spectrofotometru.

Figura 4 - Schema ELISA (imunotest enzimatic)

Sensibilitatea ELISA este mai mare de 95%. Metoda este utilizată într-un mod automat pentru studierea grupelor de populație decretate: donatori, gravide și altele, pentru a clarifica diagnosticul în cazul testelor netreponemice pozitive și fals pozitive.

Imunoblotting

Imunoblotting este o metodă extrem de sensibilă, o modificare a unui ELISA simplu. Reacția se bazează pe electroforeză cu separarea antigenelor treponeme palide.

Imunodeterminanții separați sunt transferați pe hârtie de nitroceluloză și prezentați în ELISA. Serul este apoi incubat și anticorpii nelegați sunt spălați. Materialul rezultat este tratat cu imunoglobuline marcate cu enzime (IgM sau IgG).

Evaluarea clinică a rezultatelor diagnosticului de laborator al sifilisului

În tabelul 1 de mai jos am prezentat rezultatele posibile ale analizelor și interpretarea acestora. După cum puteți vedea în tabel, principala valoare în descifrare este evaluarea cuprinzătoare a testelor.

Tabelul 1 - Descifrarea rezultatelor reacțiilor serologice (analize de sânge pentru sifilis). Faceți clic pe tabel pentru a vizualiza

Reactivitatea testelor este evaluată și prin „încrucișări”:

1. 1 Răspunsul maxim (test puternic pozitiv) este indicat prin 4 încrucișări.
2. 2 O probă pozitivă este indicată prin 3 încrucișări.
3. 3 O reacție slab pozitivă este indicată de două încrucișări.
4. 4 O cruce indică un rezultat dubios și negativ.
5. 5 Un răspuns negativ este marcat cu semnul minus.

Problema optimizării diagnosticului de laborator al sifilisului nu și-a pierdut actualitatea până în prezent. Metodele moderne de diagnosticare, în ciuda dorinței oamenilor de știință de a aduce diagnosticul la cea mai mare sensibilitate și specificitate posibile, necesită o verificare de control și o abordare individuală.

O caracteristică a infecției sifilitice este fenomenul de serorerezistență, care nu a primit o explicație științifică. Diagnosticul se pune după o examinare completă a pacientului prin metode epidemiologice, clinice, de laborator.

Pe fondul dezvoltării economice și tehnice a medicinei, există progrese și în dezvoltarea de noi criterii de diagnosticare a sifilisului. Toate acestea vă vor permite să tratați rapid, cu succes și cu acuratețe pacienții.

Metoda serologică este un set de reactii bazate pe interacțiunea antigen-anticorp (Ag-Ab)și vizează detectarea în serul sanguin și alte fluide corporale a anticorpilor la antigenele agenților patogeni ai bolilor infecțioase, sau de fapt antigene microbiene. Metoda serologică se caracterizează prin sensibilitate și specificitate ridicate. Cele mai multe dintre reacțiile acestei metode sunt ușor de realizat și de luat în considerare, sunt disponibile pentru o gamă largă de laboratoare, de regulă, sunt sigure, economice și susceptibile de standardizare. LA neajunsuri Metoda serologică poate fi atribuită: 1) naturii indirecte a rezultatului, când etiologia bolii este judecată nu după izolarea agentului patogen, ci după răspunsul (imun) al organismului la agentul patogen; 2) necesitatea intervenţiei parenterale în corpul pacientului; 3) în majoritatea cazurilor, diagnostic tardiv, care se explică prin dinamica naturală a răspunsului imun umoral; 4) capacitatea de a lua Abs anamnestic (ca urmare a unei boli sau vaccinări anterioare) pentru Abs la infecția curentă. La determinarea antigenelor microbiene, deficiențele a treia și a patra sunt absente, dar este necesar să se țină seama de particularitățile circulației antigenelor diferiților microbi și să se coreleze aceste caracteristici cu posibilitatea de a lua material pentru cercetare.

Etapele metodei serologice:

1) luarea materiale de cercetare. În cele mai multe cazuri, materialul este ser de sânge. Se obține după formarea unui cheag de sânge, sângele trebuie luat în condiții strict aseptice conform metodei standard,

2) alegerea unui test serologic pentru un caz dat depinde de scopul studiului, boala suspectată, faza bolii, materialul pentru studiu, sensibilitatea reacției și capacitățile unui anumit laborator. Reacțiile de aglutinare sunt utilizate pentru a detecta Abs și Ags ( RA), hemaglutinare pasiva ( RPGA)), imunofluorescență (RECIF), inhibarea hemaglutinării ( RTGA), precipitare, floculare, reacția de fixare a complementului (RCC) etc.

3) stabilirea unei reacții serologice,

4) înregistrarea unei reacții serologice pentru a determina prezența markerilor serologici de infecție.

O varietate de reacții serologice se caracterizează prin mai multe caracteristici generale:

1) întrucât orice reacții serologice sunt reacții ale interacțiunii dintre Ab și Ag, în toate cazurile, pentru a stabili prezența Ab în substratul de testare, un set de Ag corpuscular sau solubil standard cunoscut, numit diagnostice. La rândul său, pentru a stabili prezența Ag, un set seruri de diagnostic imun,

2) interacțiunea Ag și Ab se realizează numai în prezența unui electrolit, care este de obicei utilizat ca soluție izotonică de clorură de sodiu sau amestecuri tampon, pH-ul sistemului ar trebui să fie de aproximativ 7,

3) pentru formarea complexului Ag-At, este necesară o perioadă de incubație în condiții speciale de temperatură (de la +4 °C la 37 °C). Formarea unui complex imun specific are loc rapid; un fenomen vizibil cu ochiul liber (aglutinare, liză etc.) - încet, după câteva ore sau chiar zile,

4) ambele componente ale reacției serologice (antigen și anticorpi) trebuie să fie prezente într-un raport echivalent. Un exces de oricare dintre componente blochează formarea complexului Ag-Ab și contribuie la rezultate fals negative.

Contabilitatea reacțiilor serologice se efectuează vizual, uneori cu o lupă. Esența luării în considerare a reacției serologice se reduce la determinarea fenomenului de legare Ag și Ab prin formarea complexului Ag-Ab. Din punct de vedere vizual, formarea complexului Ag-At este însoțită de două fenomene principale - aglutinarea și precipitarea. Diferențele dintre ele sunt determinate de caracteristicile antigenelor și anticorpilor specifici acestora. Totodata, printre antigenele microbiene se numara si cele care induc sinteza celor neprecipitanti, formarea complexului Ag-Ab in acest caz nu este insotita nici de fenomenul de aglutinare, nici de fenomenul de precipitare, iar depistarea a faptului formării complexului Ag-Ab necesită marcarea componentei diagnostice a reacției cu etichete speciale, sau transferul antigenului de diagnostic într-o altă stare de agregare.

La evaluarea reacţiei se folosesc 3 criterii principale: 1) prezenţa şi intensitatea reacţiei (în plusuri etc.); 2) titrul diagnostic, 3) creșterea titrului de anticorpi în cursul bolii de 4 ori sau mai mult. Prezența unei reacții se stabilește prin fenomene vizuale sau prin legarea unui marker imunochimic. Pentru a evalua intensitatea reacției serologice folosind principiul 4 „+” (tabelul 7).

Tabelul 7

Sistemul de evaluare a reacțiilor serologice cu 4 „+” pentru reacțiile de aglutinare și precipitare

Pentru a cuantifica rezultatele unei reacții serologice, se utilizează conceptul de titru de anticorpi sau antigen. Pentru a determina titrul At (sau titrul Ag), este necesar să se pună o reacție serologică prin prepararea unei serii de diluții de ser sanguin sau alt material (titru). La prepararea diluțiilor de ser sanguin, se folosește o soluție de electrolit (cel mai adesea soluție izotonică de clorură de sodiu). Etapa de diluare (titrare) este stabilită de raportul dintre volumul soluției de electrolit și volumul de ser sanguin. De exemplu, în diluții în serie cu o etapă de două ori, volume egale de soluție de electrolit și ser de sânge sunt amestecate în prima eprubetă, la o etapă de 5 ori, se adaugă 1 volum de ser la 4 părți de volum din soluția de electrolit. , la un pas de 10 ori - la 9 volume de soluție de electrolit adăugați 1 volum de ser sanguin (tabelul 8).

Serologie(din latină ser - „ser”, logos – „știință”) este o ramură a imunologiei care studiază specificul interacțiunii anticorpilor serici cu antigenele.

Baza diagnosticului este detectarea anticorpilor specifici care se formează ca reacție la infecția organismului cu un anumit antigen. În funcție de ce anticorpi se găsesc în sânge, se face o concluzie despre natura infecției, iar cantitatea acestor anticorpi indică gradul de activitate al bolii infecțioase.

Materialul luat pentru cercetare în cadrul unui test de sânge serologic este studiat pentru alte boli periculoase - herpes, infecții intestinale, rubeolă, toxoplasmoză, chlamydia, rujeolă, chlamydia. În plus, acest studiu vă permite să aprobați tipul de sânge, să determinați specificul proteinelor.

Deci, se efectuează studii serologice:

• dacă s-a pus un diagnostic preliminar și acum este necesară confirmarea acestuia. Studiul se bazează pe adăugarea antigenului adecvat în serul sanguin. Răspunsul vă permite să faceți o concluzie despre prezența sau absența bolii;
• dacă nu se poate pune un diagnostic. Ca parte a studiului, se adaugă anticorpi în sânge și se determină tipul de antigene, ceea ce face posibilă determinarea unei anumite boli;
• daca este nevoie.

Astfel, un test de sânge serologic ajută la stabilirea unui diagnostic sau la prescrierea celui mai eficient tratament – ​​cu timp și costuri financiare minime.

Avantajele studiilor serologice includ:

• posibilitatea de a detecta microorganisme patologice în stadiile incipiente ale infecției;
• controlul dezvoltării bolii și al nivelului de eficacitate al terapiei;
• nu este nevoie de o pregătire specială înainte de a lua biomaterialul;
• eficienţă. Rezultatul va fi disponibil în două-trei ore, ceea ce este foarte important în tratamentul în spital;
• accesibilitatea reactivului, care permite prelevarea de probe ori de câte ori este necesar;
• fara contraindicatii.

Cum se efectuează un test serologic?

Prelevarea de sânge se efectuează din vena cubitală. Un punct important - sângele nu este luat cu o seringă, ci prin gravitație - un ac este introdus în venă fără o seringă și până la cinci ml de sânge sunt colectați într-o eprubetă. Procedura se efectuează dimineața.

În funcție de reacțiile care stau la baza studiului, există mai multe tipuri de proceduri:

1. reacție de neutralizare. Se bazează pe proprietatea anticorpilor serici imunitari de a reacționa ca agent de neutralizare la microorganisme sau toxine, prevenind efectele negative ale acestora asupra organismului;
2. reacție de aglutinare. Poate fi direct sau indirect. În primul caz, vorbim despre studiul serului de sânge pentru prezența anticorpilor (microbii uciși sunt injectați în material, iar reacția este evaluată - dacă există un precipitat sub formă de fulgi, reacția este pozitivă) , o reacție indirectă se bazează pe introducerea în material a eritrocitelor cu antigene adsorbite pe acestea (sedimentul festonat indică o reacție pozitivă);
3. reacție de precipitare. Soluția de antigen este stratificată pe serul imunitar (acționează ca un mediu lichid). Se folosește antigenul solubil. Dacă complexul antigen-anticorp precipită, reacția este considerată pozitivă;
4. reacție de complement. Domeniul de aplicare — detectarea bolilor infecțioase. Se activează complementul și se examinează reacțiile;
5. reacție cu antigeni și anticorpi marcați. Se bazează pe faptul că antigenele tisulare sau microbii, prelucrați într-un mod special, încep să emită lumină sub influența razelor UV. Metoda este utilizată pe scară largă nu numai în diagnosticarea antigenelor, ci și pentru determinarea hormonilor, enzimelor și medicamentelor.

Este necesar să vă pregătiți pentru test: în patru zile pacientul trebuie să refuze să ia medicamente pentru inimă, trebuie, de asemenea, să excludeți alcoolul în oricare dintre manifestările sale, alimentele picante și grase, dulciurile, să limitați efortul fizic și să evitați stresul.

Dacă nu respectați aceste reguli, crește riscul unui rezultat fals pozitiv. Înainte de a prescrie un al doilea test, medicul trebuie să afle ce a făcut pacientul cu o zi înainte de procedură și să ofere recomandări cu privire la modul de pregătire adecvată pentru examinare.

Analiza serologică: transcriere

Test de sânge serologic - o analiză care vă permite să determinați / confirmați tipul de agent infecțios, ajută specialistul să pună un diagnostic. Acesta este un ajutor indispensabil dacă medicul nu poate alege o terapie medicamentoasă, deoarece agenții cauzali ai diferitelor boli diferă în sensibilitatea lor la acțiunea anumitor medicamente și antibiotice.

După finalizarea procedurii de colectare a materialului, asistenții de laborator trec la următoarea etapă - descifrează indicatorii. Deci, dacă nu se găsesc anticorpi în sângele pacientului, se poate concluziona că nu există infecții în organism - rezultatul analizei în acest caz este pozitiv.

Dar această stare de fapt este mai degrabă o excepție de la regulă: dacă există simptome ale bolii, studiile serologice dezvăluie și dovedesc prezența unei patologii grave în organism.

În primul rând, agenții patogeni sunt găsiți în organism folosind o analiză, apoi se estimează cantitatea de anticorpi, pe baza cărora se face o concluzie despre cât de serios este dezvoltată infecția.

Testarea serologică pentru hepatită, HIV, sifilis: caracteristici

Sifilis . Atunci când efectuează o analiză pentru sifilis, experții caută proteine ​​care sunt responsabile pentru intrarea unui agent infecțios în corpul uman - vorbim despre treponemul palid. În acest caz, serul de sânge acționează ca un material biologic.

. Hepatita virală este o boală infecțioasă gravă, al cărei pericol constă în faptul că pot trăi în organism destul de mult timp fără a se manifesta. Este posibil să se identifice boala în faza incipientă, când este mai tratabilă, prin analiza pentru markeri - markeri apar în sânge după îmbolnăvire sau introducerea vaccinului.

Trebuie să înțelegi că identificarea agentului patogen este posibilă la numai 1,5-2 luni de la infectare. Dacă analiza este efectuată de o femeie însărcinată, este posibil un rezultat fals pozitiv.

Vă recomandăm să vizualizați site-ul medical https://tabletix.ru/. Pe site veti gasi informatii utile, pareri medicale.
Dacă observați unul sau mai multe dintre simptomele enumerate mai jos, ar trebui să luați în considerare efectuarea unui test serologic:

• vărsături;
• pofta de mancare sau lipsa acestuia;
• impotenta fara cauza a organismului, surmenaj;
• ten gălbui;
• decolorarea fecalelor și a urinei.

HIV. Dacă a arătat un rezultat pozitiv, aceasta nu înseamnă că pacientul este infectat cu SIDA. Dacă infecția a avut loc recent (nu mai mult de două luni în urmă), prezența anticorpilor nu permite determinarea faptului de dezvoltare a bolii. Este programată un nou studiu.

Test de sânge serologic- cea mai importantă metodă de cercetare, al cărei scop principal este detectarea rapidă a virușilor, infecțiilor, microbilor din organism.

Acest „instrument” unic de laborator vă permite să identificați orice boală care este o consecință a suprimării imune, așa că nu fi leneș, ci faceți în mod regulat o analiză pentru a putea identifica boala la timp și a scăpa rapid de ea.

8 057

Site-ul oferă informații de referință doar în scop informativ. Diagnosticul și tratamentul bolilor trebuie efectuate sub supravegherea unui specialist. Toate medicamentele au contraindicații. Este necesar un sfat de specialitate!

Serologic analize de sânge este o metodă de testare de laborator a anumitor antigeni sau anticorpi ( proteine ​​specifice) în serul pacientului pe baza răspunsurilor imune ale organismului. Această metodă se aplică atunci când diagnostice boli infecțioase pentru a detecta prezența anticorpilor în sângele pacientului la un anumit tip de virus sau bacterii, precum și pentru a determina grupa de sânge.

Material în studiu

În primul rând, pentru analiza serologică, se utilizează material biologic colectat de la pacient:

• ser de sânge
• salivă
• materii fecale

În unele cazuri, materialul izolat de anumite obiecte din mediu este examinat:

• pamantul

Metoda de analiză sau prelevarea de probe de sânge

Această analiză nu necesită pregătire specială a pacientului. Prelevarea de sânge se efectuează dimineața pe stomacul gol și se efectuează în sălile de tratament ale instituțiilor medicale, conform metodelor hematologice general acceptate. Pentru testarea serologică, prelevarea de sânge se efectuează prin două metode: sângele venos este prelevat din vena cubitală a pacientului, iar sângele capilar este prelevat de la degetul inelar. Sângele este plasat în eprubete sterile sigilate.

Caracteristici ale transportului sângelui și depozitării serului

Imediat după prelevarea de sânge, acesta este transportat la un laborator special, unde serul este preparat în aceeași zi. Pastrarea serului este permisa nu mai mult de 4-6 zile la frigider la o temperatura de 2-4 grade. Dacă este necesară o păstrare mai lungă, serul este înghețat. Pentru a evita încălcarea calității serului, este permis să-l înghețe o dată și, în consecință, să-l dezgheți. În timpul depozitării pe termen lung, anticorpii își pierd proprietățile și devin parțial inactivi, cele mai sensibile la îngheț sunt imunoglobulinele din clasă M. După decongelarea serului, este necesar să-l amestecați bine până la o masă omogenă, ceea ce ajută la restabilirea concentrației de anticorpi conținute în acest ser.

La ce se folosește serologia?

Metodele de diagnostic de laborator serologic sunt utilizate pentru a detecta boli precum echinococoză, trichineloză, toxocarioză, opistorhiază, cisticercoză, toxoplasmoză, amebiază, giardioză, pentru a determina eficacitatea cursului tratamentului și, în final, pentru a detecta o recidivă a bolii după ce pacientul s-a recuperat complet.

Metode de bază de diagnostic serologic

Reacția de imunofluorescență (RIF)

Această reacție este o versiune indirectă a unui studiu serologic, adică se realizează în două etape. În prima etapă, anticorpul necesar este detectat în complexul antigen-anticorp circulant folosind antiglobulină, care este similară ca structură cu proteinele serice imune. Identificarea anticorpului dorit este posibilă și atunci când se studiază un preparat antigenic pre-preparat la microscop fluorescent, fără utilizarea antiglobulinelor.

Reacția imunofluorescentă este un proces care consumă foarte mult timp și necesită mult timp și responsabilitate din partea unui specialist. Reacția începe cu prepararea soluțiilor, apoi serurile și probele lor de control sunt supuse titrarii ( un proces care permite determinarea conținutului unei anumite substanțe prin amestecarea treptată a unei soluții de testare cu o cantitate controlată de reactiv). Diluțiile pregătite anterior și probele lor de control sunt aplicate cu atenție pe lamele cu antigen. Apoi preparatele sunt supuse incubarii, urmata de spalarea si uscarea lor la aer. Pe lamelele care conțin antigen se aplică un strat subțire de antiser, după care preparatele se reincubează și se repetă întregul lanț de acțiuni anterior, terminându-se cu uscarea preparatului. Ca rezultat, preparatul pe o lamă de sticlă este tratat cu glicerol și examinat la microscop fluorescent.

Rezultatele reacției sunt evaluate pe o scară în patru puncte, care se caracterizează prin intensitatea strălucirii de suprafață galben-verde a celulelor antigene:
+ strălucire foarte slabă a celulei, vizibilă doar la periferie
++ strălucire slabă a periferiei celulei, dar cu o nuanță verde clar vizibilă
+++/++++ strălucire verde strălucitoare a periferiei celulei
Titrul de reacție este considerat a fi o astfel de diluție a serului în care cel puțin 50% din celulele antigenului prezintă o strălucire clară la suprafață, adică rezultatul reacției. +++ sau ++++ . Valoarea intervalului de reacție este de la 1/80 la 1/100.

Intensitatea reacției depinde de numărul de eritrocite precipitate la fundul godeurilor formate:
– o reacție negativă, care se caracterizează prin depunerea de eritrocite pe fundul godeurilor sub forma unui inel mic cu margini netede sau „butoane”
+ de intensitate scăzută, această reacție se caracterizează prin mici depozite unice la fundul găurii. Eritrocitele neaglutinate formează un „mic inel” în centrul puțului
++ de intensitate medie, se caracterizează prin formarea unui „inel larg dens” de eritrocite neaglutinate în fundul găurii
+++ reacție intensă, eritrocitele aglutinate formează așa-numitele „umbrele”, în centrul cărora sunt vizibile clar inelele formate din eritrocite neaglutinate depuse.
++++ o reacție puternic intensă în care toate eritrocitele sunt aglutinate și, formând „umbrele”, căptușesc fundul găurilor.
Titrul acestei reacții este considerată ultima diluție a serului, în care se detectează cel puțin aglutinarea evidentă a eritrocitelor. +++ , adică cu o reacție intensă sau puternic intensă.

Fiabilitatea și calitatea metodelor de diagnostic serologic depind de organizarea controlului de laborator intern și extern, constând din mai multe proceduri independente menite să evalueze calitatea rezultatelor analizei.

Bolile infecțioase inițiază producția de anticorpi corespunzători în sângele unei persoane bolnave. Așa funcționează sistemul imunitar al organismului.

Determinarea prezenței anticorpilor la un anumit virus sau bacterie face posibilă aflarea despre debutul bolii înainte de apariția simptomelor sale principale. Astăzi serologic și oferă cea mai completă imagine. Prin urmare, vom vorbi în acest articol despre analiza pentru un studiu serologic.

Ce este testarea serologică

Metodele de studiu a materialelor biologice ale oamenilor și animalelor care pot detecta în ele anticorpi sau antigene pe care organismul le produce sub forma unei reacții de protecție în lupta împotriva infecțiilor se numesc studii serologice. Astfel de metode sunt utilizate pentru a determina agentul cauzal al infecției, precum și în scopul:

• determinarea grupei sanguine,
• studierea imunității prin determinarea nivelului legăturii sale umorale,
• determinarea antigenelor tisulare.

Cui i se atribuie

De ce să o faci

Metoda este apreciată de experți ca o modalitate de a face un diagnostic de înaltă calitate al bolii.

• Dacă pacientul este în stadiul bolii, atunci se recomandă studii repetate la intervale de aproximativ o săptămână pentru a monitoriza eficacitatea tratamentului utilizat.
• Adesea, studiile serologice sunt folosite pentru a determina ce agent patogen a cauzat boala după ce pacientul a suferit-o.

Tipuri de proceduri

Metodele de cercetare serologică se bazează pe diferite reacții:

• Reacția de neutralizare se bazează pe proprietatea anticorpilor serici imunitari de a acționa ca un agent de neutralizare a toxinelor sau microorganismelor în sine, prevenind efectul lor dăunător.
• Reacția de aglutinare, care, la rândul său, este subdivizată în următoarele subspecii:
  • reacții directe - sunt utilizate în studiul serului sanguin pentru prezența anticorpilor. Microbii uciși sunt aruncați în compoziția studiată, iar dacă se formează un precipitat sub formă de fulgi, înseamnă că reacția la acest tip de microbi este pozitivă;
  • reacția de hemaglutinare indirectă este produsă prin introducerea eritrocitelor în serul sanguin, pe care sunt adsorbite antigenele; acești agenți interacționează cu același tip de antigene prezenți în serul sanguin, rezultând un precipitat festonat.
• Reacția de complement folosit pentru depistarea bolilor infectioase. Metoda este implementată prin activarea complementului și observarea reacțiilor în curs în mediul studiat.
• reacție de precipitare efectuată prin stratificarea soluției de antigen pe un mediu lichid - ser imun. Antigenul utilizat pentru această metodă este solubil. Reacția este că complexul antigen-anticorp suferă precipitare; precipitatul rezultat se numește precipitat.
• Reacție folosind antigene și anticorpi marcați Se bazează pe faptul că microbii sau antigenele tisulare, procesate într-un anumit mod, dobândesc capacitatea de a emite lumină sub acțiunea razelor ultraviolete. Metoda este utilizată nu numai pentru diagnosticarea antigenelor, ci și pentru determinarea substanțelor medicinale, enzimelor, hormonilor.

Contraindicații pentru ținere

Datorită faptului că metoda constă în studierea materialului biologic al pacientului, nu poate afecta negativ o persoană. Prin urmare, nu există contraindicații pentru utilizare.

Studiul este complet sigur.

Cum se efectuează un studiu serologic, vom descrie mai jos.

Indicații pentru deținere

Metoda este utilizată pentru a determina agentul cauzal al infecției, inclusiv în astfel de boli:

• infectie cu HIV,
• toxoplasmoza,
• boli infecțioase cu transmitere sexuală;
• difterie,
• Disponibilitate;
• bruceloză,
• infecții cu stafilococ,
• hepatită.

Metoda este, de asemenea, utilizată pentru a detecta astfel de boli:

• opistorhiază,
• amibiaza,
• cisticercoza,
• giardioza,
• pneumonie.

Pregătirea pentru procedură

Nu sunt necesare pregătiri speciale pentru procedură. Trebuie respectată o condiție: prelevarea de sânge se face pe stomacul gol.

Algoritmul de prelevare (prelevare) de sânge (material) pentru testarea serologică este descris mai jos.

Efectuarea unei analize

Prelevarea de sânge se face din vena cubitală. Pentru ca studiul să funcționeze, sângele este extras nu cu o seringă, ci prin gravitație. Se introduce într-o venă un ac fără seringă și se colectează până la 5 ml de sânge într-o eprubetă.

În timpul procedurii, pacientul experimentează un ușor disconfort în timpul introducerii acului în venă. Următorii pași nu sunt de ce să vă faceți griji.

Interpretarea rezultatelor unui test de sânge serologic este descrisă mai jos.

Descifrarea rezultatelor

Rezultatele obținute trebuie luate în considerare împreună cu tabloul clinic al bolii, verificarea diagnosticului propus folosind mai multe teste. Acest lucru se datorează faptului că studiile sunt specifice și uneori nu au sensibilitate absolută la bolile infecțioase.

Prețul pentru un test de sânge serologic complet este descris mai jos.

Costul mediu al procedurii

Care este prețul procedurii va depinde de tipul de studiu. Constă în costul efectuării unei analize și costul anticorpilor la un anumit agent patogen. Costul mediu al procedurii este de 700 de ruble.

Reacțiile serologice sunt descrise în videoclipul de mai jos: