Diagnosticums. Potvrda, prijava. Diagnosticum od virusa krpeljnog encefalitisa Dijagnostikum od virusa krpeljnog encefalitisa sastava

MINISTARSTVO ZDRAVLJA I MEDICINE
INDUSTRIJA RUSKE FEDERACIJE

O dozvoli za medicinsku upotrebu lijekova
imunobiološki preparati

U skladu sa članom 43. „Osnove građanskog zakonodavstva Ruske Federacije o zaštiti zdravlja građana“,
----------------
*Verovatno je greška u originalu. Trebalo bi da se čita "Član 43. Osnova zakonodavstva Ruske Federacije o zaštiti zdravlja građana." Napomena "KODEKS".

naručujem:

1. Odjel državne kontrole lijekova i medicinske opreme:

1.1. Registrirati medicinske imunobiološke preparate i upisati ih u Državni registar lijekova odobrenih za upotrebu u medicinskoj praksi (Prilozi 1,).

1.2. Odgovarajuću dokumentaciju (potvrde o registraciji, uputstva za medicinsku upotrebu, privremene farmakopejske monografije) za medicinske imunobiološke lijekove navedene u prilozima prenijeti sljedećim organizacijama:

1.2.1. DOO "Gritvak", Moskva (klauzula 1 Priloga 1 i );

1.2.2. LLP MGP "Progres", Moskva (klauzula 2 Dodataka 1 i 2);

1.2.3. MNIIEM nazvan po G.N. Gabričevskom, Moskva (tačka 2 Dodataka 1 i );

1.2.4. Državno jedinstveno preduzeće za proizvodnju bakterijskih preparata nazvano po G.N. Gabričevskom (klauzula 2 Dodataka 1 i );

1.2.5. SE NPO "Virion", Tomsk (klauzula 3 Dodataka 1 i ).

2. Za programere i proizvođače navedene u stavovima 1.2.1. 1.2.5. prenijeti industrijske propise za medicinske imunobiološke preparate Nacionalnoj upravi za kontrolu medicinskih imunobioloških preparata.

3. Kontrolu nad sprovođenjem ove naredbe povjeriti prvom zamjeniku ministra A.M. Moskvičevu.

Ministre
T.B.Dmitrieva

Lista
medicinski imunobiološki preparati,
odobreno za medicinsku upotrebu

1. Vakcina protiv tifusa Vi-polisaharidna tečnost (VIANVAK).

2. Acylact u supozitorijama.

3. Diagnosticum eritrocit za virus krpeljnog encefalitisa, imunoglobulin štakora suvi za RNGA (eritrocitni dijagnostikum za virus krpeljnog encefalitisa).

Šef odjela
državna kontrola
lekovi i
medicinska oprema
R.U. Khabriev

Kratke napomene o medicini
odobreni imunobiološki lijekovi
za medicinsku upotrebu po narudžbi
ministarstvo zdravlja
Ruska Federacija

Vakcina protiv tifusa V-polisaharid
tečnost (VIANVAK)

Privremeni farmakopejski članak VFS 42-2944-97 odobren je naredbom Ministarstva zdravlja Rusije od 16. septembra 1997. N 276.

Registarski broj 97/276/1.

Vakcina protiv tifusa V-polisaharidna tečnost (VIANVAK) je rastvor kapsularnog polisaharida ekstrahovanog iz supernatanta kulture Salmonella typhi, prečišćen enzimskim i fizičko-hemijskim metodama, bezbojna, prozirna, blago opalescentna tečnost sa mirisom fenola.

Vakcina se proizvodi u ampulama od jedne vakcinalne doze ili 5 vakcinalnih doza. Jedna doza (0,5 ml) sadrži 25 mcg Vi-antigena.

Vakcina se primjenjuje jednom subkutano u vanjsku površinu gornje trećine ramena. Doza vakcinacije je 0,5 ml.

Vakcina sadrži konzervans - fenol u konačnoj koncentraciji ne većoj od 0,25%.

Svrha: prevencija trbušnog tifusa kod odraslih.

Vakcina ukazuje na razvoj izraženog imunološkog odgovora, serokonverziju nakon 1-2 sedmice antitijela na V antigen, koji ima ključnu ulogu u nastanku tifusne infekcije; imunitet na infekcije traje 2 godine. Revakcinacija se vrši svake 2 godine.

Lijek se dobro podnosi i nije pirogen. Reakcije na vakcinu su prilično rijetke i smatraju se blagim. Vakcina se čuva na temperaturi od 2 do 8 stepeni C. Rok trajanja lijeka je 2 godine.

Razvojna organizacija i proizvođač je Društvo sa ograničenom odgovornošću "GRITVAK".

Acylact u svijećama

Privremeni farmakopejski članak VFS 42-2941-97 odobren je naredbom Ministarstva zdravlja Rusije od 16. septembra 1997. N 276.

Registarski broj 97/276/2.

Uputstvo za upotrebu odobreno 09.08.97.

Acilakt u supozitorijama je mikrobna masa živih acidofilnih laktobacila, osušena u medijumu za uzgoj uz dodatak medijuma saharoza-želatina-mlijeko.

Supozitorija sadrži najmanje 10_7 živih acidofilnih laktobacila (1 doza).

Lijek je namijenjen liječenju klinički izražene disbioze i upalnih procesa ženskih genitalija: nespecifičnog i hormonski ovisnog kolpita, vaginalne disbakterioze, subakutnih i kroničnih stadijuma upalnih procesa u genitalnom području. Acilact u supozitorijama se propisuje i u pripremi za planirane ginekološke operacije u cilju prevencije postoperativnih infektivnih komplikacija, u periodu prenatalne pripreme rizičnih trudnica, za korekciju normalne mikroflore nakon specifične antimikrobne terapije polno prenosivih bolesti.

Lijek se propisuje kao samostalan lijek ili nakon završetka tečaja antibakterijske terapije.

Za disbakteriozu i senilni vaginitis hormonske prirode, acylact u čepićima se propisuje 1 supozitorija 2 puta dnevno tijekom 5-10 dana. Ako je čistoća vaginalnog sekreta kod trudnica narušena do III-IV stepena, acilakt u čepićima se koristi 1-2 čepića dnevno 5-10 i više dana pod kontrolom vraćanja čistoće vaginalnog sekreta u I-II stepen. Kako bi se spriječile gnojno-septičke komplikacije, lijek se koristi 1 čepić 1-2 puta dnevno 5-10 dana. prije predložene operacije ili isporuke. Rehabilitacijska terapija nakon upotrebe antibiotika - 1-2 čepića 1-2 puta dnevno 10 dana. U potonjem slučaju, kurs se ponavlja 2-4 puta sa intervalom od 10-20 dana.

Oblik izdavanja: po 10 svijeća, umotanih u voštani papir i upakovanih u kutije, ili 5 svijeća u blister pakovanju.

Acylact u supozitorijama se čuva i transportuje na temperaturi od (5+/-3) stepeni C. Rok trajanja - 1 godina.

Institucija za razvoj je MNIIEM nazvana po Gabričevskom. Proizvođač je MGP-Progress LLP.

Diagnosticum eritrocit za virus koji se prenosi krpeljima
encefalitis imunoglobulin pacov suh
za RNGA

Privremena farmakopejska monografija VFS 42-2874-97 odobrena je naredbom Ministarstva zdravlja Rusije od 16. septembra 1997. godine.

Registarski broj 97/276/3.

Uputstvo za upotrebu odobreno je 25. jula 1995. godine.

Diagnosticum eritrocit za TBE virus imunoglobulina pacova suh za reakciju indirektne hemaglutinacije (IRHA) je skup komponenti od kojih je glavna eritrocitni dijagnostikum (ED). ED je liofilizirana 3% suspenzija ovčijih eritrocita, fiksiranih formalinom ili akroleinom, tretirana taninom i senzibilizirana specifičnim imunoglobulinom.

Svrha - brzo otkrivanje antigena virusa krpeljnog encefalitisa u krvi onih za koje se sumnja da su zaraženi virusom TBE ili bolesnih ljudi, u suspenzijama vektora krpelja i drugim materijalima koji sadrže virus ili potencijalno opasnim.

Obrazac za izdavanje:

1. Diagnosticum CE za RNGA - 5 amp. 1 ml.

2. TBE antigen (KA+) - 1 amp. 1 ml.

3. Normalan antigen (KA-) - 1 amp. 1 ml.

4. Imunoglobulin protiv TBE (IG) 0,01 - 0,1% - 3 amp. 1 ml.

5. Normalni zečji serum (NRS), 10% - 2 amp. 1 ml.

Uslovi skladištenja i transporta: čuvati na suvom, tamnom mestu na temperaturi od (6+/-2) stepeni C. Prevoz se obavlja svim vrstama pokrivenog transporta pod istim uslovima.

Rok trajanja - 2 godine. Programer i proizvođač: NPO Virion.

šef Nacionalne
MIBP kontrolno tijelo,
Direktor GISC-a po imenu L.A. Tarasevich
N.V. Medunjicin

Tekst dokumenta je verifikovan prema:
„Zbirka naredbi Ministarstva zdravlja
Ruska Federacija",
Septembar, 1997

Priprema se iz mozga miševa inficiranih izolovanim virusom koji je prošao 1-2 prolaza kod miševa. Koristi se za postavljanje RSC.

Inaktivirana kultura vakcina protiv krpeljnog encefalitisa

Antigen virusa krpeljnog encefalitisa, specifičan za sterilnu kulturu, inaktiviran formaldehidom. Koristi se za prevenciju encefalitisa kod stanovništva i laboratorijskog osoblja u prirodnim žarištima prema epidemiološkim indikacijama.

Imunoglobulin protiv krpeljnog encefalitisa

Sadrži specifična antivirusna antitijela visokog titra, koja se ekstrahiraju iz krvnog seruma konja hiperimuniziranih virusom krpeljnog encefalitisa. Ovaj imunoglobulin se koristi za liječenje i prevenciju krpeljnog encefalitisa.

Fermi suva vakcina protiv besnila

Napravljen je od mozga mladih ovaca zaraženih fiksnim virusom bjesnila, karakteriziranog smanjenom virulentnošću. Virus u suspenziji mozga se inaktivira 1% otopinom fenola i liofilizira. Nakon takvog tretmana u preparatu ostaje manje od 10LD 50 živog virusa. Vakcina se daje osobama koje su ugrizle životinje koje su bolesne ili se sumnja na bjesnilo. Vakcinacije se provode prema posebnim uputama. Imunitet nakon vakcinacije se razvija nakon 2 sedmice i traje 6 mjeseci.

Imunoglobulin protiv bjesnila

Dobiva se hiperimunizacijom konja sa fiksnim virusom bjesnila. Primjenjuje se najkasnije 72 sata nakon ugriza životinje u kombinaciji s vakcinom protiv bjesnila. Lijek neutralizira virus bjesnila i sprječava postvakcinalni encefalitis.

Dijagnostički imunoenzimski test sistem za određivanje antitijela na HIV

Test sistem uključuje virusni antigen adsorbovan na nosaču čvrste faze (polistirenske ploče sa jamicama); antitijela protiv humanih imunoglobulina konjugiranih s peroksidazom hrena; supstrat sa indikatorom za detekciju aktivnosti peroksidaze. Koristi se za serodijagnostiku AIDS-a.

azidotimidin (retrovirin)

efikasan tretman za pacijente sa HIV infekcijom; sintetički lijek - inhibitor reverzne transkriptaze i sinteze provirusne DNK. To je strukturni analog timidina.

Dijagnostički, preventivni i terapijski lijekovi

Rikecijalni antigeni, suvi korpuskularni

Suspenzija ubijenih rikecija, uzgojena u pilećem embrionu i dobro pročišćena od nečistoća, koristi se za izvođenje aglutinacije, RPHA i RSK reakcija.

Rikecijalni antigeni, suvo rastvorljivi

Dobiva se iz suspenzije rikecija ekstrakcijom i obradom eterom. Koristi se za proizvodnju RSK i RPGA Suva živa kombinovana vakcina protiv tifusa E (ZHKSV-E). Mješavina žive kulture Provatsekove rikecije (vakcinalni soj E), uzgojene u pilećem embrionu, sa rastvorljivim antigenom virulentnog soja Provatsekove rikecije. Koristi se za aktivnu imunizaciju protiv tifusa. Antibiotici: za povratnu groznicu - penicilin, tetraciklin, hloramfenikol; za rikeciozu - tetraciklin, hloramfenikol.

Gonococcal antigen

Suspenzija usmrćene kulture gonokoka koristi se za stacioniranje RSC.

Gonococcal vaccine

Suspenzija gonokoka ubijenih toplotom koristi se za vakcinalnu terapiju hronične gonoreje, kao i za „provokaciju“ u dijagnostici ove bolesti. Antibiotici: penicilin, tetraciklin, kanamicin itd.

Test sistem za serodijagnostiku hepatitisa B

Standardni HBs antigen i odgovarajući specifični antiserum.

Normalan ljudski imunoglobulin. Dobija se iz ljudske krvi (donora, placente) frakcionisanjem. Koristi se za prevenciju i liječenje virusnih hepatitisa.

Suhi prečišćeni tuberkulin

Dobija se iz filtrata mikobakterijske bujonske kulture dodavanjem hemikalija za taloženje proteina, nakon čega slijedi pročišćavanje i liofilizacija. Koristi se za izvođenje kožnog alergijskog testa.

BCG vakcina

Živ; liofilizirana kultura apatogenog soja Mycobacterium tuberculosis koju su dobili francuski naučnici Calmette i Guerin. Koristi se intradermalno za aktivnu specifičnu prevenciju tuberkuloze. Antibiotici i hemoterapijski lekovi: streptomicin, PAS, derivati ​​GINK (tubazid, ftivazid, metazid i dr.), rifampicin, cikloserin, kanamicin, etionamid itd. Kod lečenja pacijenata, lekovi se obično kombinuju uzimajući u obzir njihovu osetljivost na tuberkulozu. i kliničke karakteristike bolesti.

Sadrži antitijela visokog titra protiv virusa krpeljnog encefalitisa. Dobije se iz krvnog seruma konja hiperimuniziranih virusom krpeljnog encefalitisa. Koristi se za hitnu prevenciju i liječenje pacijenata sa krpeljnim encefalitisom.

FSME-Bulin. Ljudski imunoglobulin protiv krpeljnog encefalitisa (Baxter AG, Austrija)

Sadrži antitijela koja neutraliziraju virus krpeljnog encefalitisa, stabilizator - glicerin, bez konzervansa. Koristi se za hitnu prevenciju i liječenje pacijenata sa krpeljnim encefalitisom.

Dijagnostički lijekovi

Serumi

Serum protiv malih boginja

Sadrži antitijela na virus variole. Koristi se za identifikaciju virusa u reakcijama neutralizacije.

Fluorescentni serum protiv bjesnila

Sadrži antitijela na virus bjesnila, označena fluorohromom. Koristi se za traženje patogena u RIF-u.

Specifičan serum protiv virusa krpeljnog encefalitisa

Sadrži antitijela na virus krpeljnog encefalitisa. Koristi se za identifikaciju virusa u RTGA, RNGA itd.

Diagnosticums

Dijagnostikum malih boginja

Sadrži antigene virusa variola. Koristi se u serološkoj dijagnostičkoj metodi.

Dijagnostikum od virusa krpeljnog encefalitisa

Sadrži virusni antigen, pripremljen iz mozga miševa zaraženih virusom krpeljnog encefalitisa. Koristi se za postavljanje reakcije u serološkoj metodi.

Test sistem za otkrivanje antitela na HIV u ELISA testu

Sadrži specifičan HIV antigen i dodatne sastojke neophodne za ELISA test. Koristi se u prvoj fazi serološke dijagnostike HIV infekcije.

Test sistem za imunoblotiranje za dijagnozu HIV infekcije

Sadrži kompleks HIV frakcija (antigena) razdvojenih elektroforezom: gp41, gp120, p24, p31 itd. Koristi se kao potvrdni test u završnoj fazi serološke dijagnoze HIV infekcije.

Primjeri opisa imunobioloških lijekova:

Precipitirajući serum antraksa

KP: Serum

DN: At

SA: Frakcija krvnog seruma životinja hiperimuniziranih antigenima patogena antraksa koji sadrže precipitine

itd: Ekspresna dijagnostika patogena u ispitivanom materijalu

SPr: Za izvođenje ring-pricipitation reakcije

Luminescentni serum protiv tifusa

KP: Serum

DN: At

SA: Frakcija krvnog seruma životinja hiperimuniziranih antigenima uzročnika tifusne groznice, koja sadrži antitijela označena FITC-om

itd: Ekspresna dijagnoza trbušnog tifusa

SPr: Za postavljanje RIF-a.

Bakteriofag kuge

KP: Bakteriofag

DN: Bakteriofag

SA: Sterilni filtrat fagolizata bujonske kulture uzročnika kuge

itd: Bakteriološka dijagnostička metoda

SPr: Provesti reakciju povećanja titra faga u cilju otkrivanja uzročnika kuge u objektima okoline

Dizenterijski polivalentni bakteriofag u tabletama

Sa premazom otpornim na kiseline

KP: Bakteriofag

DN: Bakteriofag

SA: Sterilni filtrat fagolizata bujonske kulture fagolizata Shigella dysentery Flexner i Sonne

itd: Hitna prevencija i liječenje bakterijske dizenterije

SPr: Oralno

Vakcina protiv bruceloze, terapeutska

KP: Vakcina

C: Ubijen od vrućine Brucella abortus I B. melitensis

itd: Za liječenje bolesnika s akutnom, subakutnom i kroničnom brucelozom

SPr: Parenteralno

monovakcina protiv pertusis

KP: Vakcina

DN: Ag

SA: Oslabljeni sojevi uzročnika velikog kašlja

itd: Za stvaranje aktivnog vještačkog antimikrobnog imuniteta

SPr: Parenteralno prema epidemiološkim indikacijama

Kalendar preventivnih vakcinacija u Rusiji, 2002 1

Dob	Naziv vakcinacije
Novorođenčad po prvi put 12 sati	Prva vakcinacija - hepatitis B
Novorođenčad 3-7 dana	Vakcinacija – tuberkuloza
1 mjesec	Druga vakcinacija – hepatitis B 2
3 mjeseca	Prva vakcinacija – difterija, tetanus, veliki kašalj i dječja paraliza
4,5 mjeseca	Druga vakcinacija – difterija, tetanus, veliki kašalj, dječja paraliza
6 mjeseci	Treća vakcinacija – difterija, tetanus, veliki kašalj, dječja paraliza Treća vakcinacija – hepatitis B
12 mjeseci	Vakcinacija – boginje, zaušnjaci, rubeola
18 mjeseci	Prva revakcinacija – difterija, veliki kašalj, tetanus, dječja paraliza
20 mjeseci	Druga revakcinacija – dječja paraliza
6 godina	Druga vakcinacija – boginje, zaušnjaci, rubeola
7 godina	Druga revakcinacija – difterija i tetanus Prva revakcinacija – tuberkuloza 5
13 godina	Vakcinacija protiv virusnog hepatitisa B Vakcinacija protiv rubeole (djevojčice) 4
14 godina	Treća revakcinacija – difterija i tetanus Revakcinacija – tuberkuloza 6
16 godina	Treća revakcinacija – dječja paraliza
Odrasli	Revakcinacija – difterija i tetanus svakih 10 godina nakon posljednje revakcinacije

napomene:

1 Imunizacija u okviru Nacionalnog kalendara vakcinacije sprovodi se vakcinama domaće i strane proizvodnje, registrovanim i odobrenim za upotrebu na propisan način u skladu sa uputstvima za njihovu upotrebu.

2 Deca rođena od majki koje su nosioci virusa hepatitisa B ili pacijenata obolelih od hepatitisa B u 3. trimestru trudnoće vakcinišu se po rasporedu 0-1-2-12 meseci.

3 Vakcinacija protiv hepatitisa B sa 13 godina života vrši se za one koji prethodno nisu vakcinisani ili su primili samo jednu vakcinu.

4 Vakcinacija protiv rubeole se daje djevojčicama od 13 godina koje ranije nisu bile vakcinisane ili su primile samo jednu vakcinu.

5 Revakcinacija BCG-om u dobi od 7 godina provodi se za tuberkulin negativnu djecu koja nisu inficirana Mycobacterium tuberculosis.

6 Revakcinacija BCG-om u dobi od 14 godina provodi se za tuberkulin negativnu djecu koja nisu zaražena Mycobacterium tuberculosis i koja nisu primila vakcinu sa 7 godina.

7 Preventivne vakcine (osim BCG) koje se koriste u okviru Nacionalnog kalendara mogu se davati istovremeno (ili u razmaku od 1 mjesec) različitim špricevima u različite dijelove tijela.

8 Ako se ne ispuni datum početka cijepljenja, potonje se provode prema shemama predviđenim ovim kalendarom i uputama za upotrebu lijekova.

Bibliografija

1. Vodič za vannastavni rad učenika o imunološkim lijekovima: udžbenik. dodatak / L.A. Levanova, V.A. Gromova, I.E. Filippova, E.V. Surikova, L.P. Osipova, Yu.V. Zakharova, V.P. Kovtun, T.E. Garanina. – Kemerovo: Kemerovska državna medicinska akademija, 2010 – 107 str.

2. Vodič za praktičnu obuku iz medicinske mikrobiologije, virusologije i imunologije” / Uredio akademik Ruske akademije medicinskih nauka O.V. Buharin. M.: Medicina; Uralski ogranak Ruske akademije nauka, 2002 – 340 str.

3. Priručnik o upotrebi bakterijskih i virusnih lijekova (priredili S.G. Dzagurov i F.F. Rezepov). – M.: Medicina, 1975.

4. Borisov, L.B. Vodič za laboratorijsku nastavu iz medicinske mikrobiologije, virologije i imunologije: Udžbenik. dodatak. / L.B. Borisov, B.N. Kozmin-Sokolov, I.S. Freidlin. – M.: Medicina, 1993. – 240 str.

5. Klinička i imunološka efikasnost imunobioloških lijekova: (priručnik) T.I. Abakumov et al., ur. M.P. Kostinova i N.A. Ozeretsky - M.: Miklos, 2008 - 256 str.

DIJAGNOSTIKA(grčki diagnostikos sposoban za prepoznavanje) - suspenzije neutraliziranih mikroorganizama koje se koriste kao antigeni za serološke reakcije. Opasnost rada sa živim kulturama, njihova sposobnost variranja i prisustvo širokih antigenskih veza čine preporučljivom korištenje D. - standardnijih i homogenijih preparata koji sadrže određene antigene komponente.

Uz pomoć D., reakcije aglutinacije, pasivna (indirektna) hemaglutinacija (RPHA) i druge se koriste za identifikaciju specifičnih antitijela u serumima ljudi i životinja u svrhu postavljanja dijagnoze i proučavanja imunološkog stanja organizma.

D. se posebno široko koristi u laboratorijskim studijama za crijevne infekcije. Međutim, zajednička antigena struktura crijevnih bakterija određuje prisustvo unakrsnih reakcija i zahtijeva diferencirano otkrivanje antitijela. U tu svrhu se vrši selektivna supresija pojedinačnih antigena: pomoću fenola ili formalina potiskuje se O-aglutinabilnost, kako sugerišu Felix i Olitzki (A. Felix, L. Olitzki, 1928). Tretiranjem alkoholom po metodi Wien i Sontag ili zagrijavanjem po Kauffmannu dobijaju se O-dijagnostikumi sa inaktiviranim flagelarnim antigenom. Još više obećava upotreba mono dijagnostikuma, čiji je princip razvio F. G. Bernhof (1944). Ovi lijekovi sadrže samo jednu antigenu komponentu i djeluju samo s određenim specifičnim antitijelima.

Pokazana je mogućnost očuvanja svojstava bakterijske D. njihovom liofilizacijom (vidi).

D., koji se koriste za serodijagnostiku različitih infekcija, u osnovi su slični, međutim, određene vrste ovih lijekova imaju određene specifičnosti.

Općenito je prihvaćeno da je RPGA osjetljiviji i specifičniji od bakterijske aglutinacije. Formalizirani eritrociti senzibilizirani antigenima dobivenim Boivinovim i Westphal metodama koriste se kao antigeni u RPGA.

Moguća je i upotreba eritrocita D. za detekciju antigena u tkivima, izlučevinama bolesnika, ekstraktima raznih supstanci i sl. U tim slučajevima se koriste eritrociti senzibilizirani antitijelima - „antibody diagnosticums“.

Virusni D. se uglavnom koriste u reakcijama fiksacije komplementa (CRF), RTGA i reakcijama neutralizacije. Pripremaju se od tečnosti kulture koje sadrže viruse tretirane (inaktivirane) na različite načine.

Kratak opis glavnih D. i opseg njihove primjene prikazan je u tabeli.

Postoje i eksperimentalni lijekovi koji se koriste u naučnom radu: eritrocitni kolidijagnostikumi, eritrocit difterije D., hemaglutinirajući antigeni virusa zaušnjaka, hemaglutinirajući antigen morbila itd.

Table. Kratak opis glavnih dijagnostikuma i svrhe njihove upotrebe

Diagnosticums	kratak opis	Svrha upotrebe (koristi se serum subjekta)
Bakterijski dijagnostici
Dijagnostikumi iz bakterija crijevne porodice: Shigella Flexner, Sonne, Newcastle; Salmonella tifus (OH, O), paratifus A i B, kolera su is, typhimurium, enteritidis	Mikrobna suspenzija (3 milijarde mikrobnih tijela u 1 ml), inaktivirana 0,4-0,5% otopinom formaldehida	Izjava o reakciji aglutinacije za razjašnjavanje klina, dijagnoza bolesti
Salmonella O-diagnosticums (2, 4, 7, 8, 9 i 3, 10)	Mikrobna suspenzija koja sadrži djelomični O-antigen (3 milijarde mikrobnih tijela u 1 ml), dobivena od odabranih sojeva, inaktivirana 15% otopinom glicerola	Postavljanje reakcije aglutinacije za otkrivanje O-antitijela za salmonelozu
Salmonella H-monodiagnosticums (a, b, c, d, eh, c, k, lv, gm, p, st i antigeni druge faze - 1, 2, 5, 6, 7)	Mikrobna suspenzija koja sadrži komponente flagelarnog antigena 1. i 2. faze (3 milijarde mikrobnih tijela u 1 ml), dobijena od odabranih sojeva, inaktivirana 0,5% otopinom formalina	Izvođenje reakcije aglutinacije radi otkrivanja H-antitijela u dijagnostičke svrhe i utvrđivanja istorije bolesti
Vi-diagnosticum	Mikrobna suspenzija (3 milijarde mikrobnih tijela u 1 ml) od sojeva koji sadrže Vi-faktor, tretirana 0,4% otopinom formalina i 0,6% otopinom kalcijum hlorida	Postavljanje reakcije aglutinacije za otkrivanje prijenosa bakterija tifusa
Objedinjeni dijagnostikum bruceloze	Suspenzija Brucella u 12% rastvoru natrijum hlorida, obojena plavo i inaktivirana sa 0,5% rastvorom fenola	Pokretanje reakcije aglutinacije (Wrightova reakcija i Huddlesonova reakcija za identifikaciju zaraženih ljudi i životinja - vidi Bruceloza, metode istraživanja)
Tularemia diagnosticum	Mikrobna suspenzija (25 milijardi mikrobnih tijela u 1 ml) soja vakcine, inaktivirana 0,5% otopinom formaldehida	Postavljanje volumetrijske reakcije aglutinacije kapljica na staklu za serodijagnostiku i proučavanje imunološkog stanja vakcinisanih osoba
Dijagnostikumi leptospiroze	Liofilizirana mikrobna suspenzija 11 sojeva najčešćih serotipova	Izjava RSC-a za potvrdu klina, dijagnoza bolesti
Rickettsial diagnosticums	Korpuskularni antigeni - suspenzija rikecija uzgojenih u žumančanim vrećama pilećih embrija ili plućnog rikecija od zaraženih glodavaca, tretirana etrom, celitom ili diferencijalnim centrifugiranjem	Postavljanje reakcije aglutinacije za diferencijalnu dijagnozu rikecijalnih infekcija
Erythrocyte diagnosticums
Dijagnostikumi eritrocita iz Shigella Flexner - Sonne	Formalizirani eritrociti senzibilizirani antigenima Boivina, Westphala itd.	Izjava RPGA za pojašnjavanje kliničke dijagnoze dizenterije
Erythrocyte Salmonella Vi-diagnosticum	Formalizirani eritrociti senzibilizirani pročišćenim Vi antigenom	Izjava RPGA za otkrivanje prijenosa bakterija tifusa
Erythrocyte Salmonella O-diagnosticums (1, 2, 12; 1, 4, 12; 6, 7; 6, 8; 1, 9, 12; 3, 10 i kompleks)	1% suspenzija formaliniziranih eritrocita senzibiliziranih antigenima Boivin, Westphal itd.	Izjava RPGA za pojašnjavanje kliničke dijagnoze bolesti
Dijagnostikum liofiliziranog eritrocita tularemije	Formalizirana liofilizirana crvena krvna zrnca senzibilizirana antigenom tularemije	Izjava RPGA radi razjašnjavanja kliničke dijagnoze tularemije, kao i reakcije neutralizacije antitijela za otkrivanje: antigena
Virusna dijagnostika
Antigen virusa vakcinije	Suhi pripravak živog virusa vakcinije uzgojenog na horion-alantoičnoj membrani pilećih embriona	Izjava RPGA za detekciju antihemaglutinina kod pacijenata i vakcinisanih osoba
Adenovirusni specifični antigen	Pripremljen kultivacijom virusa tipa 6 u kulturi kontinuiranih A-1 ćelija (antigen zajednički za sve adenoviruse)	Testiranje RSC-a za otkrivanje antitijela koja fiksiraju komplement u serumu pacijenta
Dijagnostika krpeljnog encefalitisa i etiološki sličnih bolesti		Izjava RSC i RTG za razjašnjenje klina, dijagnoza bolesti
Antigen ornitoze	Suhi pripravak iz kuhanih žumančanih vrećica pilećih embriona koji sadrže virus, ekstrahiran etrom, precipitiran acetonom i inaktiviran mertiolatom	Izjava RSC-a za dijagnozu ornitoze kod ljudi, ptica i životinja
Diagnostikum suve gripe	Alantoična tečnost pilećih embriona u razvoju inficiranih jednim od sojeva virusa influence tipa A, B ili C, inaktiviranih formalinom, mertiolatom. Zbog varijabilnosti antigenske strukture virusa gripe, omogućene su česte promjene proizvodnih sojeva	Rendgenski snimak radi razjašnjenja kliničke dijagnoze bolesti
Parainfluenza diagnosticum tip 1, 2, 3 za RTGA, suv	Kulturna tečnost (ljudski embrionalni bubrezi) koja sadrži jedan od sojeva virusa parainfluence, tretirana Tween-80, eterom i mertiolatom	Izjava rendgenskog snimka za razjašnjavanje klina, dijagnoza bolesti

Bibliografija: Zuev A. S. Bakterijski vi-dijagnostikum za identifikaciju kroničnih nositelja tifusnih bakterija, Zhurn, mikr., epid, i imun., br. 2, str. 51, 1959, bibliogr.; Zuev A. S., Novoselova A. I. i Likina I. V. Razvoj metode za proizvodnju O-dijagnostikuma i N-monodijagnostikuma i njihova upotreba u serodijagnostici salmoneloze, ibid., br. 3, str. 42, 1956; Imunologija i prevencija crijevnih infekcija, ur. S. I. Didenko, str. 180, M., 1962; Karalnik B.V. Erythrocyte diagnosticums, M., 1976; Vodič za mikrobiološku dijagnostiku zaraznih bolesti, ur. K. I. Matveeva, str. 172, M., 1973; Subbotina Yu. L. i dr. Serološka dijagnoza salmoneloze i antigenske veze u reakcijama sa eritrocitnim i bakterijskim O-dijagnosticima, Zhurn, mikr., epid, i imm., br. 3, str. 19, 1970, bibliogr.

L. B. Bogojavlenskaja.

Pronalazak se odnosi na oblast medicine i veterine. Metoda uključuje ultrazvučnu obradu suspenzije koja sadrži virus iz različitih, uključujući avid, sojeva virusa krpeljnog encefalitisa. U tom slučaju se tretiraju ultrazvukom na frekvenciji od 22 kHz u trajanju od 1 minute, ponavljajući ovaj postupak tri puta u intervalu od 2 minute, koristeći aparat UZDN-1 ili UZDN-A. Metoda omogućava povećanje dijagnostičke efikasnosti dobivenog lijeka, što se izražava u porastu titara antitijela otkrivenih u krvnim serumima pacijenata, dijagnostičkog povećanja titra antitijela u reakciji inhibicije hemaglutinacije i pouzdanosti frekvencije. potvrde kliničke dijagnoze “krpeljni encefalitis” do 33%. Pronalazak se može koristiti u proizvodnji dijagnostičkih lijekova i za poboljšanje efikasnosti serološke dijagnostike krpeljnog encefalitisa. 1 plata datoteke, 4 tabele.

Pronalazak se odnosi na medicinu i veterinu, odnosno na virusologiju, i može se koristiti u proizvodnji dijagnostičkih lijekova i za povećanje efikasnosti serološke dijagnostike virusnih infekcija, posebno krpeljnog encefalitisa (TBE).

Poznata je metoda za proizvodnju TBE dijagnostikuma, koja se odlikuje time da se radi povećanja specifične aktivnosti dijagnostikuma koristi strastveni soj virusa TBE 4072, a za inaktivaciju virusa u nastali virus se dodaje betapropiolakton- koji sadrži suspenziju do koncentracije 0,1% i čuva se 24 sata na temperaturi od 4°C, a nakon centrifugiranja nastavlja se inaktivacija još 3 dana (vidi A.S. br. 1378112 A1, A61K 39/12, G01N 33/53, 1987. / Kokorev V.S., Mansurov P.G., Zlobin V.I., Subbotina L.S., Gaidamovič S.Ya., Melnikova E.E. / Prijava br. 4044449/28-13, od 02.11.1986.).

Nedostatak ove metode dobivanja antigena je uključivanje u tehnološki proces visoko aktivnog kemijskog reagensa betapropiolaktona, koji negativno utječe na antigenske determinante virusa kada inaktivira infektivnu aktivnost. S tim u vezi, kvaliteta antigenskih preparata, čak i kada se koriste strastvene varijante virusa, opada.

Poznata je i metoda, koja se sastoji u korištenju strastvenih varijanti virusa - sojeva 4072 ili 3745 - kao izvora antigena virusa TBE, a inaktivacija infektivne aktivnosti se provodi metilglioksalom u koncentraciji od 0,1-0,05% na 4 -8°C 24 -72 sata (vidi A.C. br. 1169219 A, A61K 39/12, C12R 1/91, 1985 / Gizatullina N.K., Ravilov A.E., Kolotvinov S.V., Kokorev V.S. od 05.11.1982.).

Nedostatak ove metode je sličan gore navedenom. Osim toga, u oba slučaja se povećavaju vrijeme za dobivanje antigenskog lijeka i troškovi njegove proizvodnje, pri čemu je efikasnost i osjetljivost lijekova nedovoljno visoka.

Poznata je i metoda za proizvodnju vakcine, pri čijoj proizvodnji se zračenjem vrši inaktivacija virusa u tečnosti kulture, dok se kao izvor gama emitera koristi kobalt-60 u dozi od 15-20 kGy tokom 2 sata na temperaturi od 19-21 °C (Vidi patent RF br. 2181295, A61K 39/12, 39/245. Objavljeno 20. aprila 2002. Bilten br. 11).

Glavni nedostatak ove metode su posebni uvjeti obrade koji zahtijevaju zaštitu od zračenja i posebno obučeno visokokvalifikovano osoblje.

Poznata je i metoda povećanja antigenosti i imunogenosti biomaterijala izlaganjem laserskom zračenju talasne dužine od 9 do 11 mikrona i gustine snage od 0,1-1,0 kW/cm 2, sprovedena na mlazu suspenzije biomaterijala sa prečnika 0,5-15 mm, pri brzini izlaza mlaza od 0,05 m/s do 10 m/s (videti RF Patent br. 2209085, A61K 41/00, 39/00. Publ. 27.7.2003. Bilten br. 21) .

Uz dobre rezultate takve obrade, određena složenost procesa laserske obrade je potreba za laserskim instalacijama, koje zahtijevaju posebne prostorije i dodatne mjere zaštite operativnog osoblja, što povećava troškove nabavke lijekova.

Cilj izuma je isključiti toksične hemijske reagense iz tehnološkog ciklusa za dobijanje dijagnostikuma za krpeljni encefalitis i istovremeno povećati senzitivnost i specifičnost dijagnostikuma uz smanjenje troškova vremena i novca za dobijanje lijek s proširenjem spektra dijagnostikuma, posebno krpeljni encefalitis, preosjetljivost.

Problem je riješen činjenicom da se, kada se priprema lijek za obradu suspenzije koja sadrži virus, izlaže ultrazvučnom zračenju (US) na frekvenciji od 22 kHz u trajanju od 1 minute, ponavljajući ovaj postupak tri puta u intervalu od 2 minute. , dok se ultrazvučni tretman provodi na uređajima tipa UZDN-1 ili UZDN-A pomoću univerzalnog emitera na 22 kHz, a uzorci krvnog seruma pacijenata sa krpeljnim encefalitisom podvrgavaju se antiinhibitornom tretmanu kaolinom na pH 7.4, a poželjno se koriste sljedeći sojevi virusa krpeljnog encefalitisa: referentni soj Sofin, avidni sojevi 4072 i 3445, neavidni soj 80, a obrada se vrši na temperaturi okoline 25-30°C.

Metoda se provodi na sljedeći način.

Priprema antigena:

Upotreba: 1. Autorski soj virusa TBE 4072 / Kokorev B.C. Melnikova E.E., Kolotvinov S.V. i dr./, deponovana u GKV pod brojem 633. Soj 4072 izolovan je 1966. godine iz krvi pacijenta, veoma osetljiv na neutralizujući efekat specifičnih antitela (prema rezultatima unakrsne kinetičke RTGA), avid, koji razlikuje se od referentnog soja Sofin;

2. Autorski soj virusa TBE 3745 /Kolotvinov S.V., Kokorev V.S., Melnikova E.E., itd./, deponovan u Državni registar pod brojem 636. Soj je izolovan iz krvi osobe bez kliničkih manifestacija bolesti. , prethodno napadnut od krpelja, vrlo osjetljiv na neutralizirajuće djelovanje specifičnih antitijela, aviden;

3. Autorski soj virusa TBE 80 / Kokorev V.S., Melnikova E.E., Kolotvinov S.V. i dr./, deponovana u Državnom zakonu pod brojem 634. Soj je izolovan od krpelja Ixodes persulcatus, malo je osetljiv na neutralizujući efekat specifičnih antitela i nije avidan;

4. Referentni soj Sofiin virusa TBE, dobijen od GKV Instituta za virusologiju im. D.I. Ivanovsky RAMS.

Hemaglutinirajući antigeni ovih virusa dobijaju se ekstrakcijom boratom soli uz tretman protamin sulfatom. Da biste to učinili, pripremite 10 ili 20% suspenziju iz mozga novorođenih bijelih miševa u otopini boratnog pufera pH 9,0-9,3 na hladnom, centrifugirajte na hladnom 1 sat pri 10.000 o/min. U tečnost supernatanta dodaje se rastvor protamin sulfata odgovarajuće koncentracije u količini od 0,1 zapremine, tj. na 10 ml dodati 1 ml rastvora protamin sulfata. Otopina protamin sulfata priprema se u fiziološkom rastvoru u koncentraciji od 50 mg/ml ili 25 mg/ml za 20% odnosno 10% suspenziju mozga. Smjesa se stavi u ledeno kupatilo 30 minuta, povremeno miješajući, a zatim centrifugira 15 minuta na 2500 o/min na hladnom. Prozirni supernatant je antigen.

Priprema uzoraka krvnog seruma.

Uklanjanje serumskih inhibitora kaolinom pri pH 9,0 i uklanjanje normalnih serumskih aglutinina vrši se prema opšteprihvaćenim metodama. Tretman uzoraka krvnog seruma suspenzijom kaolina na pH 7,4 provodi se na sljedeći način. U 0,2 ml uzorka za ispitivanje dodati 0,8 ml rastvora boratnog pufera pH 7,4 i 1 ml 25% suspenzije kaolina pripremljene u rastvoru boratnog pufera pH 7,4. Dobivena smjesa se mućka 25 minuta, a zatim centrifugira na 1000 o/min 30 minuta. Dodajte 2 kapi (0,05 ml) ispranih crvenih krvnih zrnaca guske u supernatant (da biste uklonili normalne serumske aglutinine) i periodično protresite 25 minuta. Supernatant dobiven nakon ponovljenog centrifugiranja je podešen na pH 9,0 otopinom NaOH.

Predložena nova operacija - Tretman antigenskim preparatom - dijagnostikum ultrazvukom.

Ultrazvučna obrada preparata antigena vrši se pomoću aparata UZDN-1 ili UZDN-A (izlazna snaga 400 W) na frekvenciji od 22 kHz u trajanju od 1 minute, ponavljajući ovaj postupak tri puta u intervalu od 2 minute, na ambijentalnoj temperaturi. temperatura od 25-30°C. Tretirani materijal se centrifugira na 12.000 o/min 15 minuta.

Tehnološki parametri predložene metode ultrazvučnog tretmana: ultrazvučna frekvencija 22 kHz; vrijeme obrade ultrazvukom - unutar 1 minute; ponovljivost ultrazvučnog tretmana - 3 ciklusa, srednja temperatura i režim centrifugiranja nakon ultrazvuka - utvrđena je i opravdana praktično u laboratoriji na osnovu rezultata brojnih studija, uzimajući u obzir analizu i pregled dostupnih izvora, sprovedenih u laboratoriji vektorske virusne infekcije i krpeljni encefalitis Ekaterinburškog naučno-istraživačkog instituta Institut za virusne infekcije" i laboratorije Odsjeka za mikrobiologiju i virusologiju Federalne državne obrazovne ustanove visokog stručnog obrazovanja "Uralska državna poljoprivredna akademija" Jekaterinburg.

Primjer 1. Predloženom metodom dobijeni su hemaglutinirajući antigeni iz referentnog soja Sofiin i avid soja 4072, koji se koriste u proučavanju uparenih uzoraka seruma krvi pacijenata sa krpeljnim encefalitisom.

Ultrazvučna obrada suspenzija koje sadrže virus mijenja ne samo njihovu hemaglutinirajuću aktivnost (titri hemaglutinina se u pravilu povećavaju 2 puta), već i aktivnost u reakciji inhibicije hemaglutinacije (HAI): broj tzv. seronegativni uzorci su smanjeni, povećanje titra antitela je veće nego kod upotrebe leka koji nije tretiran ultrazvukom (tabela 1 i tabela 2), što je neočigledan efekat predložene metode sa ultrazvučnim tretmanom leka umesto uvođenja hemijskih konzervansa - stabilizatori.

Dakle, iz tabela 1 i 2 jasno je da se pri korištenju ultrazvučnih antigena povećava dijagnostička vrijednost RTGA, odnosno: učestalost potvrde kliničke dijagnoze “krpeljnog encefalitisa” raste do 33% za 2-4 - puta povećanje titra antitela u odnosu na reakciju, isporučenu neobrađenim ultrazvučnim dijagnostikom.

Tabela 1
Ispitivanje uzoraka krvnog seruma pacijenata sa TBE u RTGA sa dijagnostikumom iz referentnog soja Sofin, tretiranih ultrazvukom
	Titri antihemaglutinina u RTGA sa ultrazvučnom dijagnostikom iz soja Sofiin
Neprerađena droga	Preparat tretiran ultrazvukom
4501	1	1:20	1:320
2	1:20	1:1280
X-ov	1	1:160	1:320
2	1:160	1:640
I-ev	1	1:80	1:160
2	1:80	1:320
4512	1	1:20	1:40
2	1:40	1:80
4271	1	1:160	1:320
2	1:320	1:1280

tabela 2
Studija uzoraka krvnog seruma pacijenata sa EK u RTGA sa dijagnostikumom iz avid soja 4072, liječenih ultrazvukom
Upareni uzorci seruma krvi pacijenta	Titar antihemaglutinina u RTGA sa ultrazvučnom dijagnostikom soja 4072
Neprerađena droga	Preparat tretiran ultrazvukom
4501	1	1:320	1:320
2	1:640	1:1280
X-ov	1	1:640	1:640
2	1:640	1:1280

Primjer 2. Dijagnostikumi pripremljeni na sličan način koriste se u RTGA pri proučavanju uzoraka krvnog seruma koji su prethodno tretirani anti-inhibitornim tretmanom kaolinom na pH 7,4. Dijagnostički porast titra antitijela povećava se 8-32 puta (Tabela 3).

Lijekovi i metode koje se razvijaju i koriste u dijagnostičkoj praksi omogućavaju da se klinička dijagnoza “krpeljnog encefalitisa” potvrdi na vrijeme iu gotovo svakom konkretnom slučaju bez upotrebe skupih i oskudnih seroloških testova.

Tabela 3
Ovisnost rezultata RTGA o metodi antiinhibitornog tretmana krvnog seruma pacijenta i ultrazvučnog tretmana hemaglutinirajućeg antigena TBE virusa (soj Sofin)
Br. uparenog uzorka krvnog seruma	pH okoline tokom antiinhibitornog tretmana seruma	Titar antihemaglutinina u reakciji sa dijagnostikumom
Neobrađeno	Ultrasonicated
4968	1		1:40	1:80
2	9,0	1:40	1:80
1		1:20	1:40
2	7,4	1:320	1:1280
4569	1		0	1:20
2	9,0	1:40	1:40
1		1:10	1:20
2	74	1:40	1:160

Primjer 3. Prema predloženoj metodi, ultrazvučnim tretmanom, hemaglutinirajući antigen virusa TBE iz neavidnog soja 80 obrađen je u navedenim parametrima. Prema podacima poprečnog presjeka RTGA konstatovano je da je avidnost neavidni soj se povećava do nivoa avidnog soja (tabela 4). Ovaj fenomen (neočigledan efekat) otkriven je prvi put u istoriji proučavanja avidnosti virusnih i bakterijskih antigena u praksi i iz dostupnih izvora.

Predložena metoda s ultrazvučnom obradom lijeka u navedenim parametrima omogućava korištenje gotovo bilo kojeg soja TBE virusa u dijagnostičke svrhe bez napornog traženja prirodnih avidnih varijanti patogena, što je novost metode.

Tabela 4
Utjecaj ultrazvučnog tretmana na djelovanje antigenskog preparata iz avidnih i neavidnih varijanti virusa krpeljnog encefalitisa u reakciji s antitijelima
Soj virusa TBE	3745 /avidny/	80 /nevidljivo/
Antigenski lijek	sirovo	sonicated	sirovo	sonicated
Rezultat RTGA sa imunološkim zečjim serumom na sofiin soj	1:1280	1:2560	1:320	1:2560

Kada ultrazvuk utiče na viruse u navedenim parametrima, otkidaju se ili oslobađaju veliki makromolekularni kompleksi, koji se daljim sondiranjem „olabavljuju“ izlaganjem većeg broja aktivnih antigenskih grupa (demaskiranje ili deskriniranje antigenskih determinanti). Moguće je da ultrazvučna obrada supstrata koji sadrže virus može povećati efikasnost preparata vakcine ako je imunogeno i preventivno dejstvo potonjih determinisano aktivnošću istih antigenskih determinanti kao u pripremi dijagnostikuma krpeljnog encefalitisa.

Predložena metoda za dobijanje dijagnostikuma za krpeljni encefalitis može naći široku praktičnu i naučnu primenu u medicini i veterini, proširujući spektar neophodnih efikasnih dijagnostikuma za krpeljni encefalitis uz minimalne troškove rada i korišćenje uobičajene opreme.

TVRDITI

1. Metoda za dobijanje dijagnostikuma krpeljnog encefalitisa, uključujući pripremu suspenzije koja sadrži virus u puferskom rastvoru na hladnom, antiinhibitorni tretman kaolinom, centrifugiranje i odvajanje supernatanta sa naknadnim fizičkim uticajem na njega za aktivaciju, naznačen time što se suspenzija koja sadrži virus iz sojeva virusa krpeljnog encefalitisa tretira ultrazvukom na frekvenciji od 22 kHz u trajanju od 1 minute, ponavljajući postupak tri puta u intervalu od 2 minute, dok se ultrazvučni tretman suspenzija koja sadrži virus provodi se na UZDN-1 ili UZDN-A uređajima pomoću univerzalnog emitera na temperaturi suspenzije od 25-30 ° C.

2. Postupak za dobijanje dijagnostikuma krpeljnog encefalitisa prema zahtjevu 1, naznačen time što se koriste sljedeći sojevi virusa krpeljnog encefalitisa: referentni soj Sofin, avid sojevi 4072 i 3445, neavidni soj 80 .