Положителна директна реакция на Кумбс. Антиглобулинов тест. Пряка и непряка реакция на Кумбс. Как се извършва анализът?

Тестът на Coombs е кръвен тест, който се прави, за да се установи дали кръвта съдържа определени антитела, които може да са опасни. Тези антитела се придържат към червените кръвни клетки и могат да нахлуят в имунната система и да причинят вреда по други начини. В медицинската терминология това изследване се нарича още антиглобулинов тест (АГТ).

Видове проби на Кумбс

Има два вида тестове на Кумбс - директни и индиректни.

Директен тест на Кумбс, известен също като директен (DAT), открива автоантитела, които се прикрепят към повърхността на червените кръвни клетки. Тези антитела понякога се произвеждат в тялото поради определени заболявания или при приемане на определени лекарства, като прокаинамид, метилдопа или хинидин.

Тези антитела са опасни, защото понякога причиняват анемия, като разрушават червените кръвни клетки.

Този тест понякога се назначава за диагностициране на причината за жълтеница или анемия.

Обикновено реакцията на Coombs е отрицателна.

Положително за:

• хемолитична болест на новородени;
• автоимунна хемолиза;
• хемолитични трансфузионни реакции;
• лекарствено индуцирана имунна хемолитична анемия.

Индиректен тест на Кумбс, известен също като , се използва за откриване на антитела срещу червените кръвни клетки, открити в кръвния серум (серумът е бистра жълта течност от кръвта, която остава след елиминирането на червените кръвни клетки и коагуланта).

Индиректният тест на Кумбс се използва по време на кръвопреливане, за да се определи дали кръвта на донора съвпада с кръвта на реципиента. Това се нарича тест за съвместимост и помага за предотвратяване на нежелана реакция към кръвта на донора. Този тест се препоръчва и за бременни жени. Някои жени имат IgG антитела, които могат да преминат през плацентата в кръвта на плода и да увредят новороденото, причинявайки хемолитична болест, известна като хемолитична анемия.

Процедура

Кръвта се взема с помощта на спринцовка от вена, обикновено от гърба на ръката или сгъвката на лакътя. Преди това мястото на пункцията се дезинфекцира старателно и след вземане на кръвен тест се поставя чиста марля или памучна вата.

Получената кръв се пречиства в лаборатория и червените кръвни клетки се отделят. След това пробата се тества последователно, като се използват различни серум и реактиви на Кумбс, които се контрастират. Ако няма аглутинация (слепване на червени кръвни клетки), това означава положителен резултат.

Ако обаче тестът е отрицателен, това означава, че в кръвта има антитела, които действат срещу червените кръвни клетки. Това може да означава различни заболявания, като анемия (естествена или причинена от лекарства), сифилис или микоплазмена инфекция. След получаване на резултатите лекуващият лекар ще предпише подходящо лечение.

Видео

Нанесете 1 голяма капка серум O(I), A(II), B(III) върху плака или предметно стъкло с помощта на пипети (различни!). След като отбележите времето, използвайте чиста стъклена пръчка или чист ъгъл на предметно стъкло, за да комбинирате капки серум с капки кръв. Определянето продължава 5 минути, разклаща се плаката, след което се добавя 1 капка физиологичен разтвор към всяка смес от капки и се оценяват резултатите. По-добре е серумът да се предлага в 2 различни серии. Резултатите от кръвната група трябва да съвпадат и в двете серумни партиди.

Оценка на резултатите от изохемаглутинацията:

изохемаглутинация. Ако реакцията е положителна, в сместа се появяват малки червени зърна от адхезивни червени кръвни клетки. Зърната се сливат в по-едри зърна, а последните в люспи. Серумът е почти обезцветен;

ако реакцията е отрицателна, сместа остава равномерно розова за 5 минути и не се откриват зърна;

при работа с 3 серума от групи O(I), A(II), B(III) са възможни 4 комбинации от реакции:

1. ако всичките 3 серума са дали отрицателна реакция, т.е. сместа е равномерно оцветена в розово - това е O (I) кръвна група;

   ако само серумът от група A (II) даде отрицателна реакция, а серумите O (I) и B (III) дадоха положителна реакция, т.е. се появиха зърна - това е кръвна група A (II);

   серумът от група B(II) даде отрицателна реакция, а серумите от група O(I) и A(II) дадоха положителна реакция - това е B(III) кръвна група.

всичките 3 серума дадоха положителни реакции - изследваната кръв от АВ (IV) група. В този случай се провежда изследване със серума от група АВ (IV).

Забележка!Капките от изследваната кръв трябва да са 5-10 пъти по-малки от капките серум.

Изохемаглутинационни грешки.

Неизвършване на аглутинация там, където трябва и наличие на аглутинация там, където не трябва. Това може да се дължи на слаб серумен титър плюс лоша аглутинация на червените кръвни клетки.

Наличие на аглутинация там, където не трябва да има- Това е псевдоаглутинация, когато купчини червени кръвни клетки образуват "монетни колони". Разклащането на чинията или добавянето на физиологичен разтвор ги унищожава.

Панаглутинация, когато серумът слепва всички червени кръвни клетки, включително тези от собствената си кръвна група. До 5-та минута признаците на аглутинация изчезват.

Съществува и така наречената студена панаглутинация, когато червените кръвни клетки се слепват поради ниска температура на въздуха (под 15 ° C) в помещението.

Във всички тези случаи се провежда или повторна реакция, или се използват стандартни червени кръвни клетки.

Определяне на Rh-принадлежността на кръвта

За определяне на Rh статуса, т.е. за откриване на наличието или отсъствието на антигени на Rh система в кръвта на хората, се използват стандартни анти-Rh серуми (реагенти), различни по специфичност, т.е. съдържащи антитела към различни антигени на тази система. За определяне на Rh 0 (D) антиген най-често се използва анти-резус серум с добавяне на 10% разтвор на желатин или се използва стандартен анти-резус реагент, приготвен предварително с 33% разтвор на полиглюкин. За получаване на по-точни резултати от изследването, както и за идентифициране на антигени на други серологични системи, се използва тестът на Coombs (той също е много чувствителен при определяне на съвместимостта на прелятата кръв). За изследване се използва нативна кръв или кръв, приготвена с някакъв консервант. В този случай кръвта трябва да се измие от консерванта с десетократен обем изотоничен разтвор на натриев хлорид. При определяне на Rh-принадлежност- Rh 0 (D) трябва да се използват две проби от серум или анти-резус реагент от две различни серии и в същото време стандартни червени кръвни клетки, получени от кръв от Rh-положителен (Rh +) и Rh-отрицателен (Rh -) лицата трябва да се използват за контрол. Когато се определят други изоантигени, трябва да се използват съответно контролни червени кръвни клетки, които съдържат или липсват антигена, срещу който са насочени антителата в стандартния серум.

Частичните топлинни аглутинини са най-често срещаният тип антитела, които могат да причинят развитието на автоимунна хемолитична анемия. Тези антитела принадлежат към IgG, рядко - към IgM, IgA.

ТЕСТ НА КУМБС

Тест на Кумбс: въведение.Тестът на Coombs е лабораторен диагностичен метод, базиран на реакцията на хемаглутинация.

Основният метод за диагностициране на автоимунна хемолитична анемия е тестът на Coombs. Основава се на способността на антитела, специфични за имуноглобулини (особено IgG) или компоненти на комплемента (особено S3) да аглутинират еритроцити, покрити с IgG или S3.

Свързването на IgG и C3b с еритроцитите се наблюдава при автоимунна хемолитична анемия и лекарствено индуцирана имунна хемолитична анемия. Директен тест на Кумбс.Директният тест на Coombs се използва за откриване на антитела или компоненти на комплемента, фиксирани върху повърхността на червените кръвни клетки. Извършва се както следва:

За да се получат антитела срещу човешки имуноглобулини (антиглобулинов серум) или комплемент (антикомплементарен серум), животното се имунизира с човешки серум, имуноглобулини или човешки комплемент. Полученият от животното серум се пречиства от антитела към други протеини.

Червените кръвни клетки на пациента се промиват с физиологичен разтвор, за да се отстрани напълно серумът, който неутрализира антителата срещу имуноглобулините и комплемента и може да причини фалшиво отрицателен резултат.

Ако антитела или компоненти на комплемента са фиксирани върху повърхността на червените кръвни клетки, добавянето на антиглобулин или антикомплементен серум причинява аглутинация на червените кръвни клетки.

Директният тест на Coombs се използва в следните случаи:

Автоимунна хемолиза.

Хемолитична болест на новородени.

Лекарствено индуцирана имунна хемолитична анемия.

Реакции на хемолитична трансфузия. Индиректен тест на Кумбс.Индиректният тест на Coombs открива антитела срещу червени кръвни клетки в серума. За да направите това, серумът на пациента се инкубира с червени кръвни клетки от донор от група 0 и след това се извършва директен тест на Coombs.

Индиректният тест на Coombs се използва в следните случаи:

Определяне на индивидуалната съвместимост на кръвта на донора и реципиента.

Откриване на алоантитела, включително антитела, които причиняват хемолитични трансфузионни реакции.

Определяне на повърхностни еритроцитни антигени в медицинската генетика и съдебната медицина.

Потвърждаване на еднояйчни близнаци по време на трансплантация на костен мозък.

За провеждане на биологичен тест кръвта започва да се прелива възможно най-бързо (за предпочитане в поток). След преливане на 25 ml кръв, системната тръба се затяга със скоба. След това се прави пауза от 3 минути, през която се следи състоянието на реципиента. За извършване на биологичен тест се инжектират 25 ml кръв три пъти.В края на теста (след преливане на първите 75 ml кръв на дробни дози от 25 ml на интервали от 3 минути) системата се настройва до необходимата скорост на кръвопреливане. При преливане на повече от една бутилка кръв на пациент е необходимо иглата да се извади от вената. В този случай иглата се изважда от епруветката на флакона, в който е изтекла кръвта, и се поставя в следващия флакон. В този момент системната тръба (гумена или пластмасова) се затяга със скоба. Ако по време на кръвопреливане се наложи интравенозно приложение на друго лекарство на реципиента, това става чрез пробиване на гумената тръба на системата. Пробивите на пластмасовата тръба са неприемливи, тъй като те не падат. След всяко кръвопреливане пациентът трябва да бъде наблюдаван, за да се идентифицират и своевременно елиминират възможни усложнения, включително алергични реакции. 2 часа след края на кръвопреливането трябва да се измери телесната температура. Ако се увеличи, измерването трябва да се повтаря на всеки час през следващите 4 часа. Също толкова важно е наблюдението на уринирането и състава на урината, което позволява да се установи наличието на токсична реакция след трансфузия. Появата на олигурия и анурия след кръвопреливане, наличието на кръвни клетки и протеин в урината са пряка индикация за развитието на посттрансфузионна хемолиза.

Хемолитична анемия, причинени от автоимунни тела, които са насочени срещу техните собствени червени кръвни клетки, не са точно разбрани. Въпреки това се предполага, че някои фактори (например вирус, анормален протеин) променят червените кръвни клетки по такъв начин, че тялото ги възприема „като нещо чуждо“ и се бори с тях с помощта на антитела. Според друга теория, антителата, насочени срещу червените кръвни клетки, възникват почти случайно по време на образуването на анормални плазмени протеинови тела при някои заболявания. Такива протеинови тела, също толкова „случайно“, могат да дадат реакции, които могат да се използват за поставяне на диагноза (например, вирусна пневмония, както е известно, дава положителна реакция на Васерман, положителна реакция на Пол-Бънел и реакция на студена аглутинация) .

Има два основни видове автоантителаза хемолитична анемия, а именно: топли антитела (реагират при 37°C) и студени антитела (чиято реактивност нараства, когато температурата се приближи до нулата). Топлите антитела са по-чести от студените антитела. Dacie установи, че топлите хемолизини се срещат 2 пъти по-често от студените. Хемолизините и аглутинините не са коренно различни антитела: те се различават само по естеството на тяхното действие. Аглутинините аглутинират червените кръвни клетки, а хемолизините ги правят по-податливи на сложния процес на хемолиза (комплемент!). Автоантителата, фиксиращи се върху еритроцитите, образуват еритроцитно-глобинов комплекс. Този комплекс се открива с помощта на антиглобиновия тест на Coombs.

Тест на Кумбсизвършва се със серум на Coombs, за получаването на който заекът се сенсибилизира с човешки серум, срещу който се образуват антитела в заешки серум. Когато такъв сенсибилизиран серум действа върху човешки еритроцити, тяхната аглутинация настъпва, ако рецепторите на еритроцитите са заети от блокиращи антитела. Тъй като тези блокиращи антитела са получени от човешки серум, те аглутинират със заешки серум, чувствителен към човешка плазма и съдържащ преципитини. Тази реакция се нарича тест на Кумбс; за хемолитична анемия, дължаща се на автоимунни тела (Lo tit) тя е почти специфична (за подробности вижте Maier).

По принцип за хемолитични анемиис първично нарушение на еритроцитите, тестът на Coombs е отрицателен, а с придобити - положителен. Има обаче някои изключения от това правило: фалшиво положителен тест на Coombs е открит по време на кризи на конституционална хемолитична анемия и в слаба степен, също понякога след спленектомия, с ревматичен артрит, саркоидоза, след чести кръвопреливания и със системен лупус еритематозус. Естествено, при придобита хемолитична анемия без образуване на автоимунни тела, той е отрицателен.

Хемолитична анемияпричинени от автоимунни тела могат да бъдат разделени на:
а) остри, подостри и хронични форми, както и
б) идиопатичен с неизвестна етиология и в) симптоматичен [вирусна пневмония (само студови аглутинини), хронична лимфна левкемия, ретикулосаркома, лимфосаркома, системен лупус еритематозус (главно топли, по-рядко студови аглутинини), сифилис (студови аглутинини), тумори на яйчниците (Miescher) със служители)).
в) симптоматична [вирусна пневмония (само студови аглутинини), хронична лимфна левкемия, ретикулосаркома, лимфосаркома, системен лупус еритематозус (предимно топли, по-рядко студени аглутинини), сифилис (студови аглутинини), тумори на яйчниците (Miescher и сътрудници)).

Клиника на хемолитична анемия, развиващи се под влияние на автоимунни тела, са много разнообразни и затова едва ли е възможно да се начертае общата им клинична картина. Хора от всички възрасти и от двата пола са еднакво засегнати. Все пак идиопатичните форми изглежда по-често се наблюдават при жените (Sacks и Workman).

Клинична картина на идиопатичната формаварира в зависимост от тежестта на заболяването. При хронични случаи началото е постепенно, заболяването се проточва дълги години с чести обостряния. Тежестта на анемията варира в зависимост от степента на хемолиза. Наблюдават се спадове на хемоглобина до 10%, в други случаи хемоглобинът остава 50-60% за дълго време. Интензивността на ретикулоцитозата и иктеричното оцветяване на кожата и серума съответства на степента на хемолиза. Билирубинът се открива много рядко в урината, тъй като не преминава през бъбреците, но се наблюдава хемоглобинурия. При хронични случаи далакът често е увеличен и дори може да достигне много значителни размери, но в други случаи все още може да се усети. Черният дроб рядко не е увеличен.

В кръвта в повечето случаинаблюдава се макроцитоза, в острите стадии има и много микроцити, нормобластоза и полихромазия рядко липсват, левкоцитозата може да достигне 30 000, тромбоцитите са нормални. В някои случаи обаче има тежка тромбоцитопения. Evans обяснява тези случаи с едновременното присъствие на антитела срещу тромбоцитите, така че има както хемолитична анемия, така и тромбоцитопения поради действието на автоимунни тела - синдром на Evans. Осмотичната резистентност е леко намалена, но не в същата степен и не толкова трайно, както при конституционалната глобуларна клетъчна анемия. Тестът за устойчивост на топлина (Hegglin-Maier) след 6 часа също може да даде лека хемолиза (собствено наблюдение), но в по-малка степен, отколкото при анемията на Marchiafava. Хемосидерин се намира и в урината (собствени наблюдения).

Антитела, разположени на повърхността на еритроцитите, могат да бъдат както в статично, така и в свободно състояние кръвна плазма. В зависимост от състоянието на антителата се извършва директна или индиректна реакция на Кумбс. Ако има причина да се смята, че антителата са фиксирани на повърхността на червените кръвни клетки, се извършва директен тест на Coombs. В този случай тестът протича на един етап - добавяне антиглобулинов серум. Ако на повърхността на червените кръвни клетки има непълни антитела, аглутинациячервени кръвни телца

Непряка реакция

Индиректната реакция на Кумбс протича на 2 етапа. Първо трябва да внедрите изкуствено сенсибилизациячервени кръвни телца За да направите това, червените кръвни клетки и кръвният серум, които се тестват, се инкубират, което кара антителата да се фиксират върху повърхността на червените кръвни клетки. След това се извършва вторият етап от теста на Coombs - добавяне на антиглобулинов серум.

Реакция на утаяване - RP (от лат. praecipilo утаявам) е образуването и утаяването на комплекс от разтворим молекулярен антиген с антитела под формата на облаци, т.нар. утайка. Образува се чрез смесване на антигени и антитела в еквивалентни количества; излишъкът на едно от тях намалява нивото на образуване на имунния комплекс. Реакцията на утаяване се провежда в епруветки (реакция на пръстеновидно утаяване), в гелове, хранителни среди и др. Разновидности на реакцията на утаяване в полутечен агар или агарозен гел, двойна имунодифузия чрез Ouchterlony, лъчева имунодифузия, имуноепектрофорезаи т.н.

HLA типизиране- изследване на човешкия основен комплекс за хистосъвместимост - HLA комплекс. Тази формация включва област от гени на хромозома 6, които кодират HLA антигени, участващи в различни имунни отговори.

Задачи при HLA типизиранемогат да бъдат много различни - биологична идентификация (HLA типът се наследява заедно с родителските гени), определяне на предразположеността към различни заболявания, подбор на донори за трансплантация на органи - в този случай се сравняват резултатите от HLA типизирането на донорни и реципиентни тъкани. С помощта на HLA типизиране се определя колко сходни или различни са съпрузите по отношение на антигени на хистосъвместимост, за да се диагностицират случаи на безплодие.

HLA типизиране предполага Анализ на HLA полиморфизъми се осъществява по два метода - серологичен и молекулярно-генетичен. Класическият серологичен метод за HLA типизиране се основава на микролимфоцитотоксичен тест, а молекулярният метод използва PCR (полимеразна верижна реакция).

Серологични HLA типизиранепроведено върху изолирани клетъчни популации. Антигените на основния комплекс на хистосъвместимост се пренасят главно от лимфоцити. Следователно суспензия от Т-лимфоцити се използва като основни носители на антигени от клас I и суспензия от В-лимфоцити за определяне на HLA антигени от клас II. За изолиране на необходимите клетъчни популации от цяла кръв се използва центрофугиране или имуномагнитно разделяне. Смята се, че първият метод може да доведе до фалшиво положителни данни, тъй като това води до смъртта на някои клетки. Вторият метод е признат за по-специфичен - повече от 95% от клетките остават жизнеспособни.

Но основата за извършване на лимфоцитотоксичен тест HLA типизиранее специфичен серум, съдържащ антитела срещу различни алелни варианти на HLA клас I и II антигени. Серологичният тест може да определи типа HLA чрез изследване кои серуми реагират с лимфоцитите и кои не.

Ако възникне реакция между клетките и серума, резултатът е образуването на комплекс антиген-антитяло на повърхността на клетката. След добавяне на разтвор, съдържащ комплемент, настъпва клетъчен лизис и смърт. Серологичният HLA типизиращ тест се оценява с помощта на флуоресцентна микроскопия за оценка на положителните (червена флуоресценция) и отрицателните (зелена флуоресценция) реакции или фазово-контрастна микроскопия за оцветяване на ядрата на мъртвите клетки. Резултатът от HLA типизирането се извлича, като се вземат предвид спецификата на реагиралите серуми и кръстосано реагиращите групи от антигени, както и интензивността на реакцията на цитотоксичност.

Недостатъци на серологичните HLA типизиранеса наличие на кръстосани реакции, слаб афинитет на антитела или ниска експресия на HLA антигени, липса на протеинови продукти в редица HLA гени.

По-модерни, молекулярни методи HLA типизиранете използват вече стандартизирани синтетични проби, които реагират не с антигени на повърхността на левкоцитите, а с ДНК и директно показват кои антигени присъстват в пробата. Молекулярните методи не изискват живи бели кръвни клетки, всяка човешка клетка може да бъде изследвана и няколко микролитра кръв са достатъчни, за да работят, или можете да се ограничите до изстъргване от устната лигавица.

Молекулярна генетика HLA типизиранеизползва PCR метода, чиято първа стъпка е получаването на чиста геномна ДНК (от цяла кръв, левкоцитна суспензия, тъкани).

След това ДНК пробата се копира - амплифицира in vitro с помощта на праймери (къса едноверижна ДНК), специфични за специфичен HLA локус. Краищата на всяка двойка праймери трябва да са стриктно комплементарни на уникалната последователност, съответстваща на специфичен алел, в противен случай няма да настъпи амплификация.

След PCR при многократно копиране се получават голям брой ДНК фрагменти, които могат да бъдат оценени визуално. За целта реакционните смеси се подлагат на електролиза или хибридизация и дали е настъпило специфично усилване се определя с помощта на програма или таблица. Резултатът от HLA типизирането се представя под формата на изчерпателен доклад на генно и алелно ниво. Поради стандартизацията на използваните проби, молекулярната HLA типизиранепо-точно серологично. В допълнение, той предоставя повече информация (повече нови ДНК алели) и по-високо ниво на детайлност, тъй като ви позволява да идентифицирате не само антигени, но и самите алели, които определят кой антиген присъства в клетката.

Реакция на имунен лизис.Реакцията се основава на способността на специфични антитела да образуват имунни комплекси с клетки, включително еритроцити и бактерии, което води до активиране на системата на комплемента по класическия път и клетъчен лизис. От реакциите на имунния лизис най-често се използва реакцията на хемолиза и рядко реакцията на бактериолиза (главно при диференциация на холера и холероподобни вибриони).

Реакция на хемолиза.Под въздействието на реакцията с антитела в присъствието на комплемент, мътната суспензия на еритроцитите се превръща в яркочервена прозрачна течност - „лакова кръв“ поради освобождаването на хемоглобин. При установяване на диагностична реакция на фиксиране на комплемента (RCC), реакцията на хемолиза се използва като индикатор: за тестване на наличието или отсъствието (свързване) на свободен комплемент.

Реакция на локална хемолиза в гел(реакция на Jerne) е един от вариантите на реакцията на хемолиза. Тя ви позволява да определите броя на клетките, образуващи антитела. Броят на клетките, секретиращи антитела - хемолизини, се определя от броя на хемолизните плаки, които се появяват в агар гел, съдържащ еритроцити, клетъчна суспензия от изследваната лимфоидна тъкан и комплемент.

Имунофлуоресцентен метод

(RIF, имунофлуоресцентна реакция) - метод за откриване на специфични Ag (Ab) с помощта на Ab (Ag), конюгиран с флуорохром. Има висока чувствителност и специфичност. Използва се при експресни д-ки инфекции. заболявания (идентифициране на причинителя в изследователския материал), както и за определяне на антитела и повърхностни рецептори и маркери на левкоцити (иммунофенотипизиране) и други клетки. Директен I. m.се състои в обработката на тъканна секция или намазка от патологичен материал или микробен то-ри с-кой, съдържащ специфични антитела, конюгирани с флуорохром; лекарството се промива за отстраняване на несвързаните антитела и се изследва под флуоресцентен микроскоп. В положителни случаи светещ имунен комплекс се появява около периферията на обекта. Необходим е контрол, за да се изключи неспецифична луминесценция. При непряк. тях.на първия етап тъканен срез или намазка се третира с нефлуоресцентно специфично средство, на втория етап с луминисцентно средство срещу -глобулини на това животно, което е приложено на първия етап. В положителния случай се образува светещ комплекс, състоящ се от Ar, At към него и At срещу At (сандвич метод). В допълнение към флуоресцентния микроскоп, RIF се взема предвид при фенотипизиране на клетки. лазерен сортировач на клетки .

Поточна цитометрия- метод за оптично измерване на параметрите на клетката, нейните органели и процесите, протичащи в нея.

Техниката включва откриване на разсейването на светлината от лазерен лъч, когато клетката преминава през него в поток от течност, а степента на дисперсия на светлината позволява да се получи представа за размера и структурата на клетката. В допълнение, анализът взема предвид нивото на флуоресценция на химически съединения, които са част от клетката (автофлуоресценция) или са добавени към пробата преди поточна цитометрия.

Клетъчната суспензия, предварително белязана с флуоресцентни моноклонални антитела или флуоресцентни багрила, навлиза в потока течност, преминаващ през проточната клетка. Условията са подбрани така, че клетките да се нареждат една след друга поради т.нар. хидродинамично фокусиране на струя в струя. В момента, в който клетката пресече лазерния лъч, детекторите записват:

разсейване на светлината под малки ъгли (от 1° до 10°) (тази характеристика се използва за определяне на размера на клетките).

разсейване на светлината под ъгъл от 90° (позволява ни да преценим съотношението ядро/цитоплазма, както и хетерогенността и грануларността на клетките).

интензитет на флуоресценция през няколко флуоресцентни канала (от 2 до 18-20) - ви позволява да определите състава на субпопулацията на клетъчната суспензия и др.

- изследване, което помага да се определи съдържанието на непълни антиеритроцитни антитела в кръвта. Този антиглобулинов тест ви позволява да откриете антитела при бременни жени.

В допълнение, той дава възможност да се диагностицира хемолитична анемия при новородени с Rh конфликт в началните етапи. Това помага да се предотврати разрушаването на червените кръвни клетки, необходими за нормалното образуване на кръв. Този тест е създаден през 1945 г. от Робърт Кумбс, поради което е получил името си.

Тестът на Coombs е универсален тест, който позволява навременна диагностика на хемопоетични нарушения както при възрастни, така и при деца.

Има следните видове такива тестове:

1. Директен тест на Кумбс– ви позволява да определите антитела, разположени на повърхността на червените кръвни клетки. Обикновено такова изследване се предписва при съмнение за хемолиза, автоимунна хемолитична анемия или други автоимунни заболявания. Освен това се провежда след лекарствена терапия с лекарства на базата на хинин, пеницилин или метилдопа или след кръвопреливане. За да получите по-точни резултати, трябва напълно да спрете приема на лекарства поне 1 седмица преди изследването.
2. Индиректен тест на Кумбс– тест, който може да се използва за откриване на антиеритроцитни антитела в плазмата. Обикновено се извършва по време на бременност и преди кръвопреливане. Анти-еритроцитните антитела се появяват в кръвта на човек по време на реактивна имунна система или като реакция на определени лекарства. За по-точно изследване се извършват няколко проби наведнъж с интервал от 2 часа.

Показания за употреба

Тестът на Coombs се извършва само ако има сериозни индикации. Това е скъпо и отнемащо време изследване, което е специфичен тест.

Обикновено следните ситуации се считат за индикации за прилагането му:

1. По време на кръвопреливане. Тестът ви позволява да определите дали кръвта на реципиента ще се вкорени в човешкото тяло, както и дали е възможно даряване. В този случай е необходимо да се изследва материалът както от донора, така и от реципиента. Важно е да се определи естеството на антителата, защото ако те са несъвместими в тялото на фона на Rh конфликт, имунната система се разрушава. Това води до развитие на сериозни заболявания, а в редки случаи дори до смърт.
2. Преди операция, когато има риск от загуба на кръв. Това се прави, за да може лекарят веднага да инжектира подходяща кръв за възстановяване на тялото.
3. За откриване на Rh сенсибилизация.Резусът е специфичен антиген, който се среща в тялото на всяка жена по време на бременност. Ако майката има положителен Rh, а бащата е отрицателен или обратното, няма зависимост за детето, той може да наследи всеки. Ако детето получи противоположния Rh на майката, рискът от сенсибилизация е висок. Това явление се характеризира със смесване на кръвта на майката и детето. Това може да се случи както по време на бременността, така и по време на раждането.

Ако в тялото на бременна жена възникне резус конфликт, тогава имунитетът на майката започва да възприема нейния плод като чуждо тяло. Поради това има голям риск той да започне да го атакува.

В резултат на такива действия бебето може да развие сериозни патологии. Най-често възниква еритробластоза - явление, при което тялото на детето не може да произведе достатъчен брой червени кръвни клетки.

В допълнение, поради Rh конфликт, смъртта на плода може да настъпи в утробата или веднага след раждането. С правилния подход към лечението такива сериозни последствия могат лесно да бъдат избегнати.

Отклонения от нормата

Ако тестът на Coombs е положителен, лекарят заключава, че има антитела срещу червените кръвни клетки в кръвния серум. Това предполага, че кръвта на донора може да не е съвместима с кръвта на пациента.

Ако в тялото на бременна жена с Rh-отрицателна кръв се диагностицира положителен резултат, тогава тялото й съдържа антитела към кръвта на плода.

Това показва Rh конфликт, който изисква изключително внимателен подход към управлението на бременността от страна на лекаря, както и спазване на всички инструкции и препоръки от жената.

Ако в кръвта на детето има антитела, се диагностицира хемолитична болест на новороденото. В този случай се провежда повторно изследване, за да се определи дали се повишават нивата на антитела в кръвта на бъдещата майка или не.

Възможни усложнения от теста на Coombs

Тестът на Coombs е доста безопасен тест, който ви позволява да диагностицирате редица автоимунни заболявания в ранните етапи. Рядко причинява усложнения, обикновено отрицателните последици са свързани с вземането на кръвни проби.

Те са:

• Кървене дали кръвоизливи под кожата
• Замаяност и припадък
• Инфекциозна инфекция

7 295