Лабораторна диагностика на ХИВ. Методи за лабораторна диагностика на HIV. Какво е ретровирус

Във високоспециализирана лаборатория се извършват:

А) определяне на антитела, антигени и имунни комплекси, циркулиращи в кръвта; култивиране на вируса, откриване на неговия геномен материал и ензими;

Б) оценка на функциите на клетъчната връзка на имунната система. Основната роля принадлежи на методите за серологична диагностика, насочени към определяне на антитела, както и антигени на патогени в кръвта и други телесни течности.

Тестването за антитела срещу HIV се извършва, за да:

А) безопасност на кръвопреливания и трансплантации;

Б) наблюдение, тестване за проследяване на разпространението на ХИВ инфекцията и изследване на динамиката на нейното разпространение в определена популация;

В) диагностика на HIV инфекция, т.е. доброволно изследване на кръвен серум на практически здрави хора или пациенти с различни клинични признаци и симптоми, подобни на HIV инфекция или СПИН.

Системата за лабораторна диагностика на HIV инфекцията е базирана на тристепенен принцип. Първият етап е скрининг, предназначен за извършване на първични кръвни тестове за наличие на антитела срещу HIV протеини. Вторият етап е референтен - позволява използването на специални методологични техники за изясняване (потвърждаване) на първичния положителен резултат, получен на етапа на скрининга. Третият етап - експертен, е предназначен за окончателна проверка на наличието и специфичността на маркерите за ХИВ инфекция, идентифицирани на предишните етапи на лабораторната диагностика. Необходимостта от няколко етапа на лабораторна диагностика се дължи преди всичко на икономически съображения.

На практика се използват няколко теста за идентифициране на заразени с ХИВ хора с достатъчна степен на сигурност:

ELISA (ELISA) тест (ензимно-свързан имуносорбентен анализ) за откриване на първо ниво се характеризира с висока чувствителност, макар и с по-малка специфичност от следващите;

Имунен блот (Western-blot), много специфичен и най-използван тест за разграничаване между HIV-1 и HIV-2;

Антигенемичен p25-тест, ефективен в началните стадии на инфекцията;

Полимеразна верижна реакция (PCR).

В случаите на масов скрининг на кръвни проби се препоръчва да се тестват смеси от серуми от група субекти, съставени по такъв начин, че крайното разреждане на всяка проба да не надвишава 1:100. Ако сместа от серуми е положителна, всеки серум от положителната смес се анализира. Този метод не води до загуба на чувствителност както при ELISA, така и при имуноблот, но намалява разходите за труд и цената на първоначалния преглед с 60-80%.

Имунологични методи

1. броя на T помощниците,

2. съотношението на Т4 и Т8,

3. състояние на свръхчувствителност,

4. компенсаторна функция на Т-клетъчната система.

Проявява се чрез хиперпродукция на имуноглобулини, те имат нисък афинитет и материалът на тялото се изразходва още повече.

Недостатъци: появяват се късно, някои имунологични показатели могат да бъдат с други инфекции.

Клинични методи - може. подобно на други заболявания, най-типичните прояви се записват в по-късните етапи, така че клиничната диагноза не е много ефективна

Основният метод - серологичен - се прилага на 2 етапа:

1 - скринингово изследване - вземане на проби за общи антитела към всички протеини на имунния анализ. Този етап дава 95% верни резултати и 5% фалшиви положителни резултати.

2 - потвърдителен метод - всички проби се изследват по потвърдителен метод. Тази техника ви позволява да откриете антитела срещу вирусния протеин. Положителен резултат, когато се открият антитела към поне 3 вирусни протеина, ако към 1 или 2 резултатът е съмнителен и изисква допълнително изследване.

При първичната серодиагностика на HIV инфекцията общите антитела се определят с помощта на скринингови скринингови тестове - ELISA и реакции на аглутинация. На втория (арбитражен) етап се използва по-сложен тест - имуноблот, който позволява не само да се потвърди или отхвърли първоначалното заключение, но и да се направи това на ниво определяне на антитела към отделни протеини на вируса.

Тълкуване на резултатите от теста за антитела срещу HIV

Доста голям брой различни фактори влияят на резултата от анализа за антитела срещу ХИВ, като сред тях е важно времето на анализа след възможна инфекция.

В повечето случаи HIV антителата могат да бъдат открити 6 до 12 седмици след заразяването. Този период от навлизането на вируса в тялото до появата на откриваемо количество антитела се нарича период на положителна сероконверсия или период на „прозорец“. Има редки случаи на антитела, появяващи се 6 месеца след заразяването, а съобщенията за откриване на антитела едва след 1 година нямат доказателства. Понастоящем диагностичната услуга използва нови поколения методи ELISA, които могат да открият антитела срещу HIV 3-4 седмици след заразяването, а някои комбинации от тези методи, така наречените стратегии за тестване, намаляват периода на „прозореца“ до 2-3 седмици, т.е. правят възможно откриването на антитела срещу ХИВ веднага щом започнат да се произвеждат в тялото.

Отрицателен резултат означава, че в кръвта на субекта не са открити антитела срещу HIV. Това състояние се нарича серонегативност и обикновено означава, че лицето не е заразено.

Отрицателният резултат не дава никакви гаранции за бъдещето. Посочва само състоянието към момента на прегледа. Има малка вероятност проучването да е проведено през периода на прозореца. Следователно, ако дадено лице преди това е било изложено на риск от заразяване с ХИВ и тестът му е бил отрицателен, той трябва да се тества отново поне 6 месеца след рисковото събитие.

Положителен резултат означава, че в кръвта на субекта са открити антитела срещу HIV. Това състояние се нарича серопозитивност - човек е заразен с ХИВ. Важно е да се разбере, че положителният резултат показва само HIV инфекция, а не СПИН. Въпреки това е изключително важно да посетите лекар за съвет и, ако е необходимо, медицинска помощ, за да поддържате добро качество на живот дълго време след получаване на положителен резултат.

Неопределен резултат. Рядко резултатът от тест за ХИВ антитела е неясен. Лабораторията не може да каже дали лицето е серопозитивно или серонегативно. При такива обстоятелства е необходимо да се консултирате с лекар и да се подложите на повторно изследване.



Навременната диагностика на ХИВ инфекцията става изключително важна мярка, тъй като по-ранното лечение може до голяма степен да определи по-нататъшното развитие на заболяването и да удължи живота на пациента. През последните години се наблюдава значителен напредък в областта на откриването на това ужасно заболяване: старите тестови системи се заменят с по-модерни, методите за изследване стават по-достъпни и тяхната точност се повишава значително.

В тази статия ще говорим за съвременните методи за диагностициране на ХИВ инфекцията, които са полезни за навременното лечение на този проблем и поддържането на нормалното качество на живот на пациента.

Методи за диагностициране на ХИВ

В Русия за диагностика на ХИВ инфекцията се провежда стандартна процедура, която включва две нива:

• ELISA тест система (скрининг анализ);
• имунно блотиране (IB).

Могат да се използват и други диагностични методи:

• експресни тестове.

ELISA тест системи

На първия етап от диагностицирането се използва скринингов тест (ELISA) за откриване на HIV инфекция, който се основава на HIV протеини, създадени в лаборатории, които улавят специфични антитела, произведени в тялото в отговор на инфекция. След взаимодействието им с реагентите (ензимите) на тест системата цветът на индикатора се променя. Освен това тези промени в цвета се обработват на специално оборудване, което определя резултата от направения анализ.

Такива тестове ELISA са в състояние да покажат резултати в рамките на няколко седмици след въвеждането на HIV инфекцията. Този анализ не определя наличието на вируса, но открива производството на антитела към него. Понякога в човешкото тяло производството на антитела срещу ХИВ започва след 2 седмици след инфекцията, но при повечето хора те се произвеждат на по-късна дата, след 3-6 седмици.

Има четири поколения ELISA тестове с различна чувствителност. През последните години все по-често се използват тест системи от III и IV поколение, които са базирани на синтетични пептиди или рекомбинантни протеини и имат по-голяма специфичност и точност. Те могат да се използват за диагностициране на ХИВ инфекция, наблюдение на разпространението на ХИВ и осигуряване на безопасност при тестване на дарена кръв. Точността на тест системите III и IV поколение ELISA е 93-99% (по-чувствителни са тестовете, които се произвеждат в Западна Европа - 99%).

За провеждане на ELISA тест се вземат 5 ml кръв от вената на пациента. Между последното хранене и анализа трябва да са най-малко 8 часа (като правило се извършва сутрин на празен стомах). Такъв тест се препоръчва да се направи не по-рано от 3 седмици след предполагаемата инфекция (например след незащитен полов акт с нов сексуален партньор).

Резултатите от теста ELISA се получават след 2-10 дни:

• отрицателен резултат: показва липсата на HIV инфекция и не изисква насочване към специалист;
• фалшиво отрицателен резултат: може да се наблюдава в ранните стадии на инфекцията (до 3 седмици), в по-късните стадии на СПИН при тежко потискане на имунната система и при неправилна подготовка на кръвта;
• фалшив положителен резултат: може да се наблюдава при някои заболявания и при неправилна подготовка на кръвта;
• положителен резултат: показва инфекция с HIV инфекция, изисква IB и насочване на пациента към специалист в център за СПИН.

Защо тестът ELISA може да даде фалшиво положителни резултати?

Фалшиво положителни резултати от ELISA тест за ХИВ могат да се наблюдават при неправилна обработка на кръвта или при пациенти с такива състояния и заболявания:

• множествена миелома;
• инфекциозни заболявания, провокирани от вируса на Epstein-Barr;
• състояние след ;
• автоимунни заболявания;
• на фона на бременност;
• състояние след ваксинация.

Поради описаните по-горе причини в кръвта могат да присъстват неспецифични кръстосано реагиращи антитела, чието производство не е провокирано от HIV инфекция.

През последните години честотата на фалшивите положителни резултати значително намаля поради използването на тестови системи от III и IV поколение, които съдържат по-чувствителни пептидни и рекомбинантни протеини (те се синтезират чрез in vitro генно инженерство). След използването на такива ELISA тестове, честотата на фалшиво положителни резултати значително намалява и е около 0,02-0,5%.

Фалшиво положителен резултат не означава, че човек е заразен с ХИВ. В такива случаи СЗО препоръчва друг тест ELISA (задължително IV поколение).

Кръвта на пациента се изпраща в референтна или арбитражна лаборатория с надпис „повтаряне“ и се изследва на IV поколение тест система ELISA. Ако резултатът от новия анализ е отрицателен, тогава първият резултат се признава за грешен (фалшиво положителен) и IB не се извършва. Ако резултатът е положителен или съмнителен по време на втория тест, пациентът трябва да се подложи на IB след 4-6 седмици, за да потвърди или отхвърли HIV инфекцията.

имунно блотиране

Окончателна диагноза на ХИВ инфекция може да бъде направена само след получаване на положителен резултат от имуноблотинг (IB). За изпълнението му се използва нитроцелулозна лента, върху която се нанасят вирусни протеини.

Вземането на кръв за IB се извършва от вена. След това се подлага на специална обработка и съдържащите се в серума му протеини се разделят в специален гел според техния заряд и молекулно тегло (манипулацията се извършва на специално оборудване под въздействието на електрическо поле). Нитроцелулозна лента се нанася върху гела от кръвен серум и се извършва блотинг („блотинг“) в специална камера. Лентата се обработва и ако използваните материали съдържат антитела срещу HIV, те се свързват с антигенните ивици на IB и се появяват като линии.

IB се счита за положителен, ако:

• според американските критерии на CDC - на лентата има две или три линии gp41, p24, gp120 / gp160;
• според американските критерии на FDA - има две линии p24, p31 и линия gp41 или gp120 / gp160 на лентата.

В 99,9% от случаите положителният IB резултат показва HIV инфекция.

При липса на линии - IB е отрицателен.

При идентифициране на линии с gp160, gp120 и gp41, IB е съмнително. Такъв резултат може да бъде открит, когато:

• онкологични заболявания;
• бременност;
• чести кръвопреливания.

В такива случаи се препоръчва да се направи второ изследване с помощта на комплект от друга фирма. Ако след допълнително IB резултатът остане съмнителен, тогава е необходимо проследяване в продължение на шест месеца (IB се извършва на всеки 3 месеца).

полимеразна верижна реакция

PCR тестът може да открие РНК на вируса. Неговата чувствителност е доста висока и позволява откриване на HIV инфекция още 10 дни след заразяването. В някои случаи PCR може да даде фалшиво положителни резултати, тъй като високата му чувствителност може да реагира и на антитела към други инфекции.

Тази диагностична техника е скъпа, изисква специално оборудване и висококвалифицирани специалисти. Тези причини не позволяват то да се извършва при масово тестване на населението.

PCR се използва в такива случаи:

• за откриване на ХИВ при новородени, родени от инфектирани с ХИВ майки;
• за откриване на ХИВ в "периода на прозореца" или при съмнителна ИБ;
• за контрол на концентрацията на ХИВ в кръвта;
• за изследване на донорска кръв.

Само чрез PCR теста диагнозата ХИВ не се поставя, а се извършва като допълнителен диагностичен метод за разрешаване на спорове.

Експресни методи

Една от иновациите в диагностиката на ХИВ се превърна в бързи тестове, резултатите от които могат да бъдат оценени след 10-15 минути. Най-ефективни и точни резултати се получават с имунохроматографски тестове, базирани на принципа на капилярния поток. Те представляват специални ленти, върху които се нанася кръв или други тестови течности (слюнка, урина). При наличие на антитела срещу HIV, след 10-15 минути върху теста се появява цветна и контролна лента - положителен резултат. Ако резултатът е отрицателен, се появява само контролната линия.

Както при ELISA тестовете, резултатите от бързия тест трябва да бъдат потвърдени от IB анализ. Само тогава може да се постави диагноза ХИВ инфекция.

Има експресни комплекти за домашно тестване. Тестът OraSure Technologies1 (САЩ) е одобрен от FDA, предлага се без рецепта и може да се използва за откриване на ХИВ. След теста, в случай на положителен резултат, на пациента се препоръчва да се подложи на преглед в специализиран център за потвърждаване на диагнозата.

Останалите тестове за домашна употреба все още не са одобрени от FDA и техните резултати могат да бъдат много съмнителни.

Въпреки факта, че бързите тестове са по-ниски по точност от тестовете ELISA от IV поколение, те се използват широко за допълнително изследване на населението.

Можете да се изследвате за ХИВ инфекция във всяка поликлиника, ЦРБ или в специализирани центрове за СПИН. На територията на Русия те се провеждат абсолютно поверително или анонимно. Всеки пациент може да очаква да получи медицински или психологически съвети преди или след анализа. Ще трябва да плащате за тестове за ХИВ само в търговските медицински институции, а в държавните клиники и болници те се извършват безплатно.

За информация как можете да се заразите с ХИВ и какви митове съществуват относно възможностите за заразяване, прочетете

В момента новите диагностични технологии позволяват да се идентифицират етиологичните и патогенетичните причини за много заболявания и радикално да повлияят на резултатите от лечението. Може би най-впечатляващите резултати от въвеждането на тези технологии в клиничната практика са постигнати в областта на имунологията и диагностиката на инфекциозните заболявания.

Тестовите системи, базирани на ензимно-свързани имуносорбентни и имунохемилуминесцентни анализи, позволяват откриването на антитела от различни класове, което значително увеличава информационното съдържание на методите за клинична, аналитична чувствителност и специфичност за диагностициране на инфекциозни заболявания. Трябва да се отбележи, че най-значимият напредък в диагностиката на инфекциите е свързан с въвеждането в лабораторната практика на метода на полимеразна верижна реакция, който се счита за "златен стандарт" в диагностиката и оценката на ефективността на лечението на брой инфекциозни заболявания.

За изследването може да се използва различен биологичен материал: серум, кръвна плазма, изстъргване, биопсия, плеврална или цереброспинална течност (CSF). На първо място, методите за лабораторна диагностика на инфекциите са насочени към идентифициране на такива заболявания като вирусен хепатит B, C, D, цитомегаловирусна инфекция, полово предавани инфекции (гонорея, хламидия, микоплазма, уреаплазма), туберкулоза, HIV инфекция и др.

HIV инфекцията е заболяване, причинено от вируса на човешката имунна недостатъчност (HIV), който персистира дълго време в лимфоцитите, макрофагите, клетките на нервната тъкан, което води до бавно прогресиращо увреждане на имунната и нервната система на организма, изразяващо се в вторични инфекции, тумори, подостър енцефалит и други патологични промени.

Причинителите на инфекцията - човешки имунодефицитни вируси от 1-ви и 2-ри тип (HIV-1, HIV-2) - принадлежат към семейството на ретровирусите, подсемейство на бавни вируси. Вирионите са сферични частици с диаметър 100-140 nm. Вирусната частица има външна фосфолипидна обвивка, която включва гликопротеини (структурни протеини) с определено молекулно тегло, измерено в килодалтони. При HIV-1 това са gpl60, gpl20, gp41. Вътрешната обвивка на вируса, покриваща ядрото, също е представена от протеини с известно молекулно тегло - p17, p24, p55 (HIV-2 съдържа gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).

ХИВ геномът съдържа РНК и ензима обратна транскриптаза (ревертаза). За да може ретровирусният геном да се свърже с генома на клетката гостоприемник, ДНК първо се синтезира върху шаблона на вирусна РНК с помощта на реверсетаза. След това провирусната ДНК се интегрира в генома на клетката гостоприемник. HIV има изразена антигенна вариабилност, значително надвишаваща тази на грипния вирус.

В човешкото тяло основната цел на ХИВ са Т-лимфоцитите, които носят най-голям брой CD4 рецептори на повърхността си. След като HIV навлезе в клетката с помощта на реверсетаза, вирусът синтезира ДНК според модела на своята РНК, която се интегрира в генетичния апарат на клетката гостоприемник (CD4-лимфоцити) и остава там за цял живот в състояние на провирус . В допълнение към хелперите на Т-лимфоцитите, макрофагите, В-лимфоцитите, невроглиалните клетки, чревната лигавица и някои други клетки са засегнати. Причината за намаляването на броя на Т-лимфоцитите (CD4 клетки) е не само директният цитопатичен ефект на вируса, но и тяхното сливане с неинфектирани клетки. Заедно с поражението на Т-лимфоцитите при пациенти с HIV инфекция се отбелязва поликлонално активиране на В-лимфоцити с увеличаване на синтеза на имуноглобулини от всички класове, особено IgG и IgA, и последващо изчерпване на тази част от имунната система. Дисрегулацията на имунните процеси се проявява и чрез повишаване на нивото на α-интерферон, β2-микроглобулин и намаляване на нивото на IL-2. В резултат на дисфункция на имунната система, особено при намаляване на броя на Т-лимфоцитите (CD4) до 400 клетки на 1 μl кръв или по-малко, възникват условия за неконтролирана репликация на HIV със значително увеличаване на броя на вирионите. в различни телесни среди. В резултат на поражението на много звена на имунната система, човек, заразен с ХИВ, става беззащитен срещу патогени на различни инфекции.

На фона на нарастващата имуносупресия се развиват тежки прогресивни заболявания, които не се срещат при човек с нормално функционираща имунна система. Това са заболявания, които Световната здравна организация (СЗО) определи като СПИН маркер или СПИН-определящи болести.

Болести, определящи СПИН

Първата група - заболявания, присъщи само на тежък имунен дефицит (ниво на CD4<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

Втората група - заболявания, които могат да се развият както на фона на тежък имунен дефицит, така и в някои случаи без него.

Ето защо в тези случаи е необходимо лабораторно потвърждение на диагнозата.

Първа група:

• кандидоза на хранопровода, трахеята, бронхите;
• извънбелодробна криптококоза;
• криптоспоридиоза с диария за повече от 1 месец;
• цитомегаловирусни лезии на различни органи, различни от черния дроб, далака или лимфните възли при пациент на възраст над 1 месец;
• инфекция, причинена от вируса на херпес симплекс, проявяваща се с язви по кожата и лигавиците, които продължават повече от 1 месец, както и бронхит, пневмония или езофагит с всякаква продължителност, засягащи пациент на възраст над 1 месец;
• генерализиран сарком на Капоши при пациенти на възраст под 60 години;
• мозъчен лимфом (първичен) при пациенти на възраст под 60 години;
• лимфоцитна интерстициална пневмония и/или белодробна лимфоидна дисплазия при деца под 12-годишна възраст;
• дисеминирана инфекция, причинена от атипични микобактерии (микобактериен комплекс M. avium intracellulare) с извънбелодробна локализация или локализация (в допълнение към белите дробове) в кожата, цервикалните лимфни възли, лимфните възли на корените на белите дробове;
• пневмоцистна пневмония;
• прогресивна мултифокална левкоенцефалопатия;
• токсоплазмоза на мозъка при пациенти на възраст над 1 месец.

Втора група:

• бактериални инфекции, комбинирани или рецидивиращи, при деца под 13 години (повече от два случая за 2 години наблюдение): сепсис, пневмония, менингит, увреждане на костите или ставите, абсцеси, причинени от Haemophilus influenzae, стрептококи;
• дисеминирана кокцидиоидомикоза (извънбелодробна локализация);
• HIV енцефалопатия (HIV деменция, СПИН деменция);
• хистоплазмоза с персистираща диария повече от 1 месец;
• изоспориаза с диария, продължаваща повече от 1 месец;
• Сарком на Капоши във всяка възраст;
• мозъчен лимфом (първичен) при хора на всяка възраст;
• други В-клетъчни лимфоми (с изключение на болестта на Ходжкин) или лимфоми с неизвестен имунофенотип: дребноклетъчни лимфоми (като лимфом на Бъркит и др.); имунобластни саркоми (имунобластни, едроклетъчни, дифузни хистиоцитни, дифузни недиференцирани лимфоми);
• дисеминирана микобактериоза (не туберкулоза) с лезии в допълнение към белите дробове на кожата, цервикалните или базалните лимфни възли;
• извънбелодробна туберкулоза (с увреждане на вътрешните органи, в допълнение към белите дробове);
• салмонелна септицемия, повтаряща се;
• HIV-дистрофия (изтощение, внезапна загуба на тегло).

Таблица 1 (виж справката по-горе) изброява заболяванията, определящи СПИН, и техните етиологични агенти.

Има много класификации на СПИН.

Според новата класификация, предложена от Центъра за контрол на заболяванията на САЩ (Таблица 2 - вижте връзката към източника по-горе), диагнозата СПИН се установява при хора с ниво на CD4-лимфоцити под 200/μL, дори и в липса на болести, определящи СПИН.

Категория B включва различни синдроми, най-важните от които са бациларна ангиоматоза, орофарингеална кандидоза, рецидивираща вулвовагинална кандидоза, трудна за лечение, цервикална дисплазия, цервикален карцином, идиопатична тромбоцитопенична пурпура, листериоза, периферна невропатия.

Антитела срещу HIV-1 и HIV-2 в кръвта

Антителата срещу HIV-1 и HIV-2 обикновено отсъстват в кръвния серум.

Определянето на антитела срещу HIV е основният метод за лабораторна диагностика на HIV инфекцията. Методът се основава на имуноензимен анализ (ELISA) - чувствителността е повече от 99,5%, специфичността е повече от 99,8%. Антителата срещу ХИВ се появяват при 90-95% от заразените в рамките на 1 месец след инфекцията, при 5-9% - след 6 месеца, при 0,5-1% - на по-късна дата. В стадия на СПИН броят на антителата може да намалее, докато изчезне напълно.

Резултатът от изследването се изразява качествено: положителен или отрицателен.

Отрицателният резултат от теста показва липсата на антитела срещу HIV-1 и HIV-2 в кръвния серум. Лабораторията издава отрицателен резултат веднага щом е готов. При получаване на положителен резултат - откриване на антитела срещу HIV - за да се избегнат фалшиви положителни резултати в лабораторията, анализът се повтаря още 2 пъти.

Имуноблотинг за антитела срещу HIV вирусни протеини в кръвния серум

Антителата срещу HIV вирусните протеини обикновено отсъстват в кръвния серум.

Методът ELISA за определяне на антитела срещу HIV е метод за скрининг. При получаване на положителен резултат, за потвърждаване на неговата специфичност, се използва методът Western-blot - противоутаяване в гела на антитела в кръвния серум на пациента с различни вирусни протеини, подложени на разделяне по молекулно тегло с помощта на електрофореза и приложени към нитроцелулоза. Определят се антитела към вирусни протеини gp41, gpl20, gpl60, p24, pi8, p17 и др.

Според препоръките на Руския център за превенция и контрол на СПИН, откриването на антитела към един от гликопротеините gp41, gpl20, gpl60 трябва да се счита за положителен резултат. Ако се открият антитела към други протеини на вируса, резултатът се счита за съмнителен, такъв пациент трябва да бъде изследван два пъти - след 3 и 6 месеца.

Липсата на антитела срещу специфични HIV протеини означава, че ензимният имуноанализ е дал фалшив положителен резултат. В същото време, в практическата работа, когато се оценяват резултатите от метода за имуноблотинг, е необходимо да се ръководи от инструкциите, предоставени от компанията към използвания „комплект за имуноблотинг“.

Методът на имуноблотинг се използва за лабораторна диагностика на HIV инфекция.

р24 антиген в кръвен серум

Антигенът р24 обикновено отсъства в кръвния серум.

Антигенът р24 е протеин на нуклеотидната стена на HIV. Етапът на първични прояви след инфекция с ХИВ е следствие от началото на репликативния процес. Антигенът p24 се появява в кръвта 2 седмици след инфекцията и може да бъде открит чрез ELISA в периода от 2 до 8 седмици. След 2 месеца от момента на инфекцията антигенът p24 изчезва от кръвта. В бъдеще, в клиничния ход на HIV инфекцията, се отбелязва второ повишаване на съдържанието на протеина p24 в кръвта. Той пада върху периода на формиране на СПИН. Съществуващите тестови системи ELISA за откриване на антиген p24 се използват за ранно откриване на ХИВ при кръводарители и деца, определяне на прогнозата за хода на СПИН и наблюдение на текущата терапия при пациенти със СПИН. ELISA има висока аналитична чувствителност, което прави възможно откриването на p24 антигена на HIV-1 в кръвния серум при концентрация 5-10 pg / ml и HIV-2 - по-малко от 0,5 ng / ml, и специфичност. Все пак трябва да се отбележи, че нивото на антиген p24 в кръвта е обект на индивидуални вариации, което означава, че само 20-30% от пациентите могат да бъдат открити с помощта на това изследване в ранния период след инфекцията (Rose N.R. et al., 1997).

Антителата към антигена p24 от класовете IgM и IgG се появяват в кръвта от 2-та седмица, достигат пик в рамките на 2-4 седмици и остават на това ниво за различно време: антитела от клас IgM - за няколко месеца, изчезват в рамките на една година след това инфекция и IgG антителата могат да персистират с години.

Алгоритъмът за диагностициране на HIV инфекция зависи от фазата на заболяването и се характеризира с промяна в динамиката на откриване на антитела от различни класове (фиг. 1, 2 - вижте връзката към източника по-горе).

Резултатът от изследването се изразява качествено - положителен или отрицателен. Отрицателният резултат от теста показва липсата на антитела срещу HIV-1 и HIV-2 и антигена p24 в кръвния серум.

Лабораторията издава отрицателен резултат веднага щом е готов. При получаване на положителен резултат - откриване на антитела срещу HIV-1 и HIV-2 и / или антиген p24 - за да се избегнат фалшиви положителни резултати в лабораторията, анализът се повтаря още 2 пъти.

Независимо от получените резултати, кръвната проба на пациента и резултатите от 3 изследвания се изпращат от лабораторията в регионалния СПИН център за потвърждаване на положителен резултат или проверка на неопределен резултат. В такива случаи регионалният СПИН център издава окончателния отговор за това изследване.

Откриване на ХИВ чрез полимеразна верижна реакция (качествено)

Откриването на ХИВ чрез полимеразна верижна реакция - PCR (качествено) се извършва с цел:

• разрешаване на съмнителни резултати от имуноблот;
• за ранна диагностика на HIV инфекция;
• наблюдение на ефективността на антивирусното лечение;
• определяне на стадия на заболяването СПИН (преходът на инфекцията в болест).

В случай на първична инфекция с HIV, PCR методът позволява да се открие HIV RNA в кръвта още 10-14 дни след заразяването.

Резултатът от изследването се изразява качествено: положителен или отрицателен. Отрицателният резултат от теста показва липсата на ХИВ РНК в кръвта.

Положителният резултат - откриването на ХИВ РНК - показва инфекция на пациента.

Откриване на ХИВ чрез полимеразна верижна реакция (количествено)

ХИВ обикновено отсъства в кръвта.

Директното количествено определяне на ХИВ РНК с помощта на PCR позволява по-точно от определянето на съдържанието на CD4 клетки да се предвиди скоростта на развитие на СПИН при хора, заразени с ХИВ, следователно, да се оцени по-точно тяхното оцеляване. Високото съдържание на вирусни частици обикновено корелира с изразено нарушение на имунния статус и ниско съдържание на CD4 клетки. Ниският брой на вирусните частици обикновено корелира с по-добър имунен статус и по-висок брой CD4 клетки. Съдържанието на вирусна РНК в кръвта позволява да се предвиди преходът на заболяването към клиничния стадий. Когато съдържанието на HIV RNA-1> 74 100 копия/ml, почти всички пациенти развиват клиничната картина на СПИН (Senior D., Holden E., 1996).

Хората с кръвни нива на ХИВ-1 >10 000 копия/мл са 10,8 пъти по-склонни да развият СПИН, отколкото хората с нива на ХИВ-1 в кръвта<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

Панел от американски експерти разработи индикации за лечение на пациенти с ХИВ. Лечението е показано при пациенти с брой на CD4 в кръвта<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20 000 копия/ml (PCR). Оценката на резултатите от антиретровирусната терапия при хора, заразени с HIV, се извършва чрез намаляване на нивото на серумната HIV РНК.

При ефективно лечение нивото на виремия трябва да намалее 10 пъти през първите 8 седмици и да бъде под границата на откриване на метода (PCR) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.

По този начин към днешна дата са въведени и използвани в клиничната практика много изследователски методи за диагностика на ХИВ инфекцията, както и за всички други вирусни инфекции. Сред тях водеща роля заемат серологичните изследвания. Основните методи за диагностициране на HIV инфекции са представени в таблица 3 (вижте връзката към източника по-горе), където те са разделени в зависимост от важността на всеки метод за откриване на вируси на четири нива:

• А - тестът обикновено се използва за потвърждаване на диагнозата;
• B - тестът е полезен при определени обстоятелства за диагностика на определени форми на инфекция;
• C - тестът рядко се използва за диагностични цели, но е от голямо значение за епидемиологични проучвания;
• D - тестът обикновено не се използва от лабораториите за диагностични цели.

Тъй като за диагностицирането на вирусни инфекции, в допълнение към избора на оптималния метод за анализ, е също толкова важно правилно да се определи и вземе биоматериалът за изследване, Таблица 4 (вижте връзката към източника по-горе) предоставя препоръки за избор на оптимален биоматериал за изследване на HIV инфекцията.

За наблюдение на заразени с ХИВ хора трябва да се използват възможностите за цялостно изследване на имунния статус - количествено и функционално определяне на всички негови връзки: хуморален, клетъчен имунитет и неспецифична резистентност като цяло.

В съвременните лабораторни условия многоетапният принцип за оценка на имунологичния статус включва определяне на субпопулация от лимфоцити, кръвни имуноглобулини. При оценката на показателите трябва да се има предвид, че ХИВ инфекцията се характеризира с намаляване на съотношението CD4 / CD8 Т клетки по-малко от 1. CD4 / CD8 индекс 1,5-2,5 - показва нормергично състояние, повече от 2,5 - показва хиперактивност , по-малко от 1,0 - показва имунодефицит. Също така съотношението CD4/CD8 може да бъде по-малко от 1 при тежко възпаление.

Това съотношение е от фундаментално значение при оценката на имунната система при пациенти със СПИН, тъй като ХИВ селективно инфектира и унищожава CD4 лимфоцитите, в резултат на което съотношението CD4 / CD8 пада до стойности, значително по-ниски от 1.

Оценката на имунологичния статус също се основава на идентифицирането на общи или "груби" дефекти в системата на клетъчния и хуморален имунитет: хипергамаглобулинемия (повишена концентрация на IgA, IgM, IgG) или хипогамаглобулинемия в терминалния стадий; повишаване на концентрацията на циркулиращи имунни комплекси; намалено производство на цитокини; отслабване на отговора на лимфоцитите към антигени и митогени.

Нарушаването на съотношението на популациите в общия пул от В-лимфоцити е характерно за недостатъчност на хуморалния имунитет. Тези промени обаче не са специфични за ХИВ инфекцията и могат да възникнат при други заболявания. При цялостна оценка на редица други лабораторни показатели трябва да се има предвид, че ХИВ инфекцията се характеризира и с: анемия, лимфопения и левкопения, тромбоцитопения, повишаване на нивото на β2-микроглобулин и С-реактивен протеин, повишаване на активността на трансаминазите в кръвния серум.

Синдромът на придобитата имунна недостатъчност е един от основните проблеми на съвременното общество повече от четиридесет години. Следователно диагностицирането на ХИВ сега привлича много внимание и ресурси. В края на краищата, колкото по-скоро се открие вирус, който разрушава имунната система на тялото, толкова по-големи са шансовете за избягване на фатален изход.

Същността на проблема

Под съкращението ХИВ се крие определението – едно от най-опасните сред съществуващите. Под негово влияние има дълбоко инхибиране на всички защитни свойства на тялото. Това от своя страна води до появата на различни злокачествени тумори и вторични инфекции.

HIV инфекцията може да прогресира по различни начини. Понякога болестта унищожава човек за 3-4 години, в някои случаи може да продължи повече от 20 години. Струва си да знаете, че този вирус е нестабилен и бързо умира, ако е извън тялото на гостоприемника.

ХИВ може да се предава изкуствено, чрез кръвен контакт и чрез биоконтактния механизъм.

Ако е имало единичен контакт с носител на вируса, тогава рискът от инфекция ще бъде нисък, но при постоянно взаимодействие той значително се увеличава. Диагнозата на HIV инфекцията е нещо, което не може да бъде пренебрегнато, особено при смяна на сексуални партньори

Обърнете внимание на парентералния път на заразяване. Може да възникне при кръвопреливане на замърсена кръв, инжекции с игли, които са замърсени с кръвта на заразени с ХИВ хора, както и при нестерилни медицински манипулации (татуировки, пиърсинг, стоматологични процедури с инструменти, които не са обработени правилно) .

В същото време си струва да знаете, че няма нужда да се страхувате от контактно-битово предаване на вируса. Но фактът остава: човек има висока чувствителност към ХИВ инфекция. И ако субект на възраст над 35 години се зарази, тогава развитието на СПИН се случва значително по-бързо, отколкото при тези, които все още не са преодолели тридесетгодишния етап.

Основни симптоми

Разбира се, най-добрият начин да идентифицирате проблем или липсата му е да диагностицирате ХИВ инфекцията. Но какви причини може да има човек, който води здравословен начин на живот, за да отиде и да се прегледа за факта на инфекция? Естествено, подобна инициатива трябва да бъде оправдана с нещо. Ето защо е важно да знаете какви симптоми могат да показват разрушителни процеси, които потискат имунната система.

Етапът на инкубация на вируса без кръвен тест е малко вероятно да бъде открит, тъй като тялото по това време все още не реагира на враждебни елементи по никакъв начин.

Вторият етап (първични прояви) без помощта на лекар също може да остане незабелязан. Но понякога има активно размножаване на вируса и тялото започва да реагира на това - отбелязват се треска, различни полиморфни обриви, лиенален синдром и фарингит. На втория етап е възможно да се присъединят вторични заболявания като херпес, гъбични инфекции, пневмония и др.

Третият се характеризира с постепенно нарастване на имунодефицита. Поради факта, че клетките на защитната система умират, динамиката на тяхното производство се увеличава и това прави възможно компенсирането на осезаеми загуби. На този етап могат да се възпалят няколко лимфни възли, принадлежащи към различни системи. Но силни болезнени усещания не се наблюдават. Средно латентният период продължава от 6 до 7 години, но може да се забави до 20.

В етапа на вторичните заболявания, който е четвъртият, има съпътстващи инфекции от гъбичен, бактериален протозоен, вирусен произход, както и злокачествени тумори. Всичко това се случва на фона на тежък имунен дефицит.

Методи за диагностициране на HIV инфекция

Говорейки за дълбокото инхибиране на защитните механизми на организма поради излагане на вируса, заслужава да се отбележи, че бъдещето на пациента в този случай пряко зависи от навременната и точна диагноза.

За да направите това, в съвременната медицина се използват различни тестови системи, които се основават на имунохемилуминесцентен, както и ензимен имуноанализ. Тези техники позволяват да се определи наличието на антитела, принадлежащи към различни класове. Този резултат спомага за значително повишаване на информационното съдържание на методите за анализ, клинична специфичност и чувствителност при работа с инфекциозни заболявания.

Интересно е също, че методът на полимеразната верижна реакция направи възможно извеждането на диагностиката на ХИВ на фундаментално ново ниво. Като материал за изследване са подходящи различни биологични материали: кръвна плазма, биопсия, изстъргване, серум, цереброспинална или плеврална течност.

Ако говорим за лабораторни методи на изследване, те са насочени предимно към идентифициране на няколко ключови заболявания. Става дума за ХИВ инфекцията, туберкулозата, всички полово предавани инфекции и вирусния хепатит.

Молекулярно-генетични и серологични тестове също се използват за идентифициране на вируса на имунната недостатъчност. В първия случай се определят РНК на вируса и ДНК на провируса, във втория случай се анализират антитела срещу HIV и се открива антиген Р24.

В клиники, които използват, така да се каже, класически диагностични методи, се използва предимно стандартен протокол за серологично изследване.

Ранна диагностика на ХИВ

Този тип определяне на факта на инфекция е необходимо, за да се идентифицира заплахата от увреждане на имунната система възможно най-рано. Това, първо, избягва разпространението на инфекцията, и второ, за да повлияе на заболяването в началния етап.

Ако разгледаме примера на Русия, тогава клиничната класификация на ХИВ инфекцията е въведена в армията и флота на Руската федерация. Това даде положителни резултати: процесът на ранна клинична диагностика стана много по-лесен.

Главоболие, нощно изпотяване и немотивирана умора могат да бъдат определени като общи симптоми, показващи възможно увреждане на имунната система. Възможно е и развитие на треска, придружена от признаци на тонзилит. Това означава, че температурата се повишава до 38 градуса и повече, а в същото време палатинните сливици се увеличават и се появява болка при преглъщане. Всичко това се допълва от бърза загуба на тегло. Тези симптоми обаче често са комплексни.

В някои случаи HIV инфекцията в ранните етапи може да се прояви под формата на различни промени в състоянието на кожата. Става дума за петна, розеоли, пустули, фурункулоза и др. Ранната диагностика на ХИВ включва и работа със симптоми като генерализирано или ограничено увеличение на периферните лимфни възли.

Ако има едновременен растеж на няколко лимфни възли, който продължава три месеца или повече и в различни групи, с изключение на ингвиналната област, тогава има всички основания да се подозира вирус на човешката имунна система.

Говорейки за диагнозата в по-късен период, трябва да обърнете внимание на проявата на вторичен имунодефицит, който често се проявява под прикритието на различни клинични симптоми. Това са следните прояви:

• немотивирана генерализирана периферна лимфаденопатия;
• артралгия с неизвестна етиология, която има вълнообразен ход;
• SARS (ARVI), възпалителни лезии на белите дробове и дихателните пътища, които се усещат доста често;
• треска с неизвестен произход и продължително субфебрилно състояние;
• обща интоксикация, която се проявява чрез немотивирана слабост, умора, летаргия и др.

Късната диагностика на ХИВ включва скрининг за заболяване като саркома на Капоши, което се проявява с появата на множество неоплазми, често в горната част на тялото при млади хора, последвано от динамично развитие и метастази.

полимеразна верижна реакция

Като се имат предвид различните методи за диагностициране на HIV инфекцията, това трябва да се обърне специално внимание. Веднага трябва да се отбележи, че този кръвен тест може да бъде насочен към количествени и качествени характеристики.

Като цел на този метод за откриване на вируси могат да се определят следните задачи:

• ранна диагностика на HIV инфекция;
• изясняване при наличие на съмнителни резултати в резултат на имуноблотинг изследвания;
• идентифициране на конкретен стадий на заболяването;
• наблюдение на ефективността на лечението, насочено към потискане на вируса.

Ако говорим за първична инфекция, трябва да се отбележи, че тази техника ви позволява да определите ХИВ РНК в кръвта на пациента след 14 дни от момента на заразяването. Това е много добър резултат. В този случай резултатът от самото изследване ще има качествен израз: положителен (има вирус) или отрицателен.

Количествено определяне чрез PCR

Този тип се използва за определяне на възможната скорост на развитие на СПИН и за прогнозиране на продължителността на живота на пациента.

Количественото определяне на ХИВ РНК клетките в кръвта позволява да се разбере кога заболяването преминава в клиничен стадий.

Струва си да се обърне внимание на факта, че методите за лабораторна диагностика на ХИВ дават по-точен резултат, ако биоматериалът, необходим за анализ, е определен правилно и вземането на проби се извършва правилно.

За да се извърши качествен мониторинг на заразените, е необходимо (ако е възможно) да се използва интегриран подход за изследване на имунния статус на пациента. Говорим за количествено и функционално определяне на всички части на защитната система: клетъчен, хуморален имунитет и неспецифична резистентност като такава.

Лабораторна диагностика

Все по-често в съвременните лабораторни условия се използва многоетапен метод за оценка на състоянието на имунната система. Тази техника често включва определяне на субпопулация от имуноглобулини, лимфоцити в кръвта. Това означава, че съотношението се взема предвид.Ако резултатът показва по-малко от 1,0, тогава има причина да се подозира имунодефицит.

Лабораторната диагностика на HIV инфекцията трябва да включва този тест непременно, тъй като този вирус се характеризира със селективно увреждане на CD4 лимфоцитите, което води до забележимо нарушение на съотношението, посочено по-горе (по-малко от 1,0).

За оценка на имунологичния статус лекарите могат да проведат тест за наличие на "груби" или общи дефекти в системата на хуморалния и клетъчния имунитет. Говорим за хипогамаглобулинемия или хипергамаглобулинемия, както и за намаляване на производството на цитокини, повишаване на концентрацията на циркулиращи имунни комплекси, отслабване на отговора на лимфоцитите към митогени и антигени.

Струва си да се обърне внимание на факта, че лабораторната диагностика на ХИВ има два ключови етапа:

1. Скрининг лаборатория. Ако се получи положителен резултат при ELISA (ензимен имуноанализ), той се повтаря още два пъти в същата система и без промяна на серума. В случай, че две от трите изследвания доведат до откриване на влиянието на вируса, серумът се изпраща за допълнителен анализ в референтната лаборатория.
2. Вторият етап, който включва методите за лабораторна диагностика на HIV инфекцията, е определянето на състоянието на имунната система. Извършва се в горепосочената референтна лаборатория. Тук положителният серум отново се изследва в ELISA, но с друга тестова система, която се различава от предишния състав на антигени, антитела или формата на самите тестове. При определяне на отрицателен резултат се провежда второ изследване в третата тестова система. Ако въздействието на вируса не е открито в крайна сметка, тогава се записва липсата на ХИВ инфекция. Но при положителен резултат серумът се изследва в линеен или имунен блот.

В крайна сметка такъв алгоритъм води до положителни, неутрални или отрицателни резултати.

Всеки гражданин трябва да знае, че диагностиката на ХИВ е достъпна за него. СПИН може да бъде идентифициран в частни, общински или обществени здравни заведения.

Лечение

Естествено, идентифицирането на вируса би било от малка полза при липсата на различни методи за въздействие върху инфекцията. И въпреки че в момента все още няма ваксина, която да неутрализира напълно вируса, компетентната диагноза, лечението на ХИВ и последващата профилактика могат значително да подобрят състоянието на пациента, като по този начин удължат живота му. Тази теза потвърждава факта, че средната продължителност на живота на мъжете, започнали своевременно лечение на ХИВ, е 38 години. Жените, които започват борба с вируса на имунната недостатъчност, живеят средно 41 години.

След като диагнозата е поставена, лечението на ХИВ се свежда до използването на няколко техники. Активната антиретровирусна терапия, известна още като HAART, може да се определи като една от най-разпространените. Ако този вид лечение се приложи навреме и правилно, тогава е възможно значително да се забави развитието на СПИН или да се спре напълно.

Същността на HAART е, че се използват едновременно няколко фармацевтични препарата, чиято цел е да повлияят на различни механизми на развитие на вируса на имунната недостатъчност.

След като различни методи за диагностициране на ХИВ са установили факта на инфекция, могат да се използват лекарства, които имат следните видове ефекти:

• Имунологични.Имунната система се стабилизира, нивото на Т-лимфоцитите се повишава и защитата срещу различни инфекции се възстановява.
• Клинични.Предотвратява се развитието на СПИН и всяка негова проява, удължава се продължителността на живота на болните със запазване на всички функции на организма.
• Вирусологичен.Има блокиране на възпроизвеждането на вируса, в резултат на което той намалява и впоследствие се фиксира на ниско ниво.

Трудно е да се надценява значението на такива мерки за повлияване на заболяването като диагностика, лечение и профилактика на ХИВ инфекцията. Ето защо най-доброто нещо, което може да се направи след положителен резултат от изследването за инфекция, е незабавно да се започне борба с болестта. Като друг метод, който ще помогне за това, може да се определи вирусологично лечение.

В този случай говорим за употребата на лекарства, които не позволяват на вируса да се прикрепи към Т-лимфоцита и да влезе в тялото. Тези лекарства се наричат ​​инхибитори на проникването. Конкретен пример е Cellzentry.

Вирусните протеазни инхибитори могат да се използват за потискане на HIV. Целта на тази група лекарства е да предотврати инфекцията на нови лимфоцити. Това са лекарства като Viracept, Reyataz, Kaletra и др.

Третата група лекарства за локално приложение са инхибитори на обратната транскриптаза. Те са необходими за блокиране на ензима, който позволява на РНК на вируса да се размножава в ядрото на лимфоцита. Такива методи могат значително да повлияят на проблем като HIV инфекцията. Диагностиката, лечението и профилактиката на СПИН е работа на квалифицирани лекари, така че алгоритъмът за употреба на лекарства трябва да бъде направен от тях.

При необходимост могат да се използват и имунологични и клинични ефекти.

Предотвратяване

Световната здравна организация предлага следните методи за борба с ХИВ инфекцията:

• Предотвратяване на предаване по полов път. Това са защитен секс, разпространение на презервативи, лечение на полово предавани болести и образователни програми.
• За бременни жени, диагностицирани с ХИВ, диагностика, профилактика с използване на подходящи химикали, както и професионално консултиране и лечение.
• Организация на профилактиката чрез кръвни продукти. В този случай говорим за антивирусна обработка и проверка на донорите.
• Социална и медицинска помощ на пациенти и техните семейства.

За да не може диагностиката на ХИВ да разкрие наличието на вируса, трябва да следвате прости правила за безопасност:

• ако кръвта на заразен човек попадне върху кожата, тя трябва незабавно да се измие с вода и сапун и след това да се третира с алкохол;
• ако е нанесено увреждане от предмет с елементи на вируса, тогава раната трябва да се компресира, да се изцеди кръвта, това място да се третира с водороден прекис и краищата да се изгорят с йод;
• никога не използвайте спринцовки, чиято стерилност е нарушена;
• използвайте презерватив по време на полов акт, но е по-добре първоначално да проверите партньора за инфекция.

Резултати

Благодарение на факта, че диагностиката на ХИВ не стои неподвижна, хиляди хора получават възможност да започнат лечение навреме и значително да увеличат продължителността на живота. Основното нещо е да не пренебрегвате очевидните симптоми и да не се страхувате да отидете на лекар.

Произвежда се по няколко различни начина. Изглежда, че нищо не е по-лесно от това да се идентифицира това заболяване чрез кръвни проби, не. Но не е така. Диагнозата ХИВ наистина може да бъде открита по този начин, но по-нататъшните изследвания се извършват с различни методи. От тях до голяма степен зависи какво лечение ще бъде предписано на пациента и какви мерки ще бъдат предприети впоследствие. Сред най-често срещаните и високоефективни методи е обичайно да се отделят скрининг анализ и имунен блот. Всеки от тях трябва да бъде разгледан по-подробно.

Диагноза СПИН: скрининг анализ

В началния етап на диагностициране на ХИВ инфекцията се използва скринингов анализ или изследователски метод ELISA. По време на разработването на този метод вирусните протеини са изкуствено създадени в лабораторията. Те реагират по специален начин на антителата. Последните се произвеждат в тялото, когато в него се появят клетки, заразени с ужасна болест. Лабораторната диагностика на ХИВ в този случай се извършва с помощта на изкуствени ензими. Взаимодействайки с антителата, те се оцветяват в определен цвят. Лента с индикатор, след като върху нея попадне кръв, се поставя под специален апарат, с който може да се определи дали човек има това заболяване или не. Съвременните методи за диагностициране на ХИВ, включително ELISA, позволяват да се определи фактът на инфекцията или нейното отсъствие с висока точност. Но, както всяка технология, апаратът за скрининг анализ има грешка. Ето защо, ако е необходимо, анализът се прави повторно от пациента.

Важно е да знаете, че ELISA тестът е един от най-ранните методи за определяне наличието на вирус на имунна недостатъчност в организма. HIV инфекцията е диагноза, която може да бъде открита само няколко седмици след заразяването. Когато заразените клетки навлязат в кръвта, имунната система на тялото започва активно да се съпротивлява. Произвеждат се антитела, които се откриват лабораторно след две-три седмици. Ранната диагностика на ХИВ инфекцията чрез тест ELISA позволява откриването на антитела срещу вируса на имунната недостатъчност в човешката кръв. Това е основната му разлика от другите съвременни методи.

Струва си да се отбележи, че при някои хора антителата срещу това заболяване започват да се произвеждат на по-късна дата. От момента на заразяване до началото на този процес може да отнеме от три до шест седмици. Ето защо медицинските експерти препоръчват скрининг четири до пет седмици след незащитен секс или друга причина за съмнение за случайна инфекция.

Методите за лабораторна диагностика на HIV инфекция чрез ELISA са разработени в продължение на дълъг период от време. Към днешна дата има четири поколения тестове. Най-точните и ефективни от тях са тези, които са разработени последно. Лабораторната диагностика на ХИВ инфекция и СПИН с помощта на ELISA тестове от трето и четвърто поколение се извършва с помощта на рекомбинантни протеини и пептиди. Чувствителността на тези тестове към антитела, произведени от тялото, е 92 - 93%. Говорим за руски методи на изследване. Европейците са се научили да правят подобни тестове с чувствителност от 99%.

Съвременните методи за лабораторна диагностика на HIV инфекцията, базирани на ELISA, се използват не само за откриване на наличието на болестта. С помощта на скрининг анализ е възможно да се следи разпространението на вируса на имунната недостатъчност, както и да се събере материал за изследване преди вземане на кръв от донори.

ELISA е стандартен метод за диагностициране на HIV инфекция: как се провежда, защо дава фалшив резултат?

Диагностиката на ХИВ и СПИН чрез ELISA е стандартна процедура. Кръвта на пациента се взема от вената. Пет милилитра материал са достатъчни за анализ. Клинични Диагнозата на ХИВ тип 2 и 1 се прави най-малко осем часа след хранене. Лекарите препоръчват да го правите сутрин на празен стомах. Резултатите от пълното изследване са известни след два-три дни. Експресният скрининг се извършва за по-кратко време. Обикновено това отнема само няколко часа. Грешката обаче в този случай се увеличава. Експресната диагностика на ХИВ е необходима в спешни случаи, например когато пациентът се нуждае от спешна операция. Такъв анализ задължително се извършва преди непланирани хирургични интервенции, тъй като ако пациентът има вирус на имунна недостатъчност, лекарите спазват повишени мерки за сигурност. Клиничната диагностика на ХИВ инфекцията за кратък период от време е необходима и в случай, че трябва бързо да се вземе донорска кръв, за да се спаси друг пациент.

Има случаи, когато човек е диагностициран със СПИН или ХИВ и в резултат на това не е потвърден, или обратното. Защо това се случва в случая с теста ELISA? Фалшиво отрицателен резултат може да се дължи на факта, че кръвта не е била правилно подготвена за изследването. Понякога причината за това е неправилното изпълнение на оградата му. Фалшиво-отрицателен резултат при проверката на диагнозата ХИВ инфекция не се потвърждава, дори ако материалите за изследването са взети твърде рано. В края на краищата след инфекцията трябва да са минали поне три седмици. Има случаи, когато резултатът от откриването на вируса на имунната недостатъчност е фалшиво положителен. Това се дължи на общото състояние на имунната и хормоналната система на човешкото тяло. В повечето случаи пациентът има заболявания, които са резултат от фалшив положителен резултат. Говорим за алкохолен хепатит, при който черният дроб произвежда специални ензими, което може да доведе до неправилна диагноза ХИВ. Бременността и някои автоимунни заболявания, заедно с множествената миелома, също могат да причинят фалшив положителен резултат. Този списък може да включва пациенти на диализа и лица, които са били ваксинирани малко преди диференциалната диагноза на ХИВ.

Говорейки за скрининг анализ, важно е да се отбележи, че този метод на изследване изисква потвърждение. Лекарите, преди да поставят диагноза ХИВ въз основа на него, винаги изпращат пациента за имунен блот.

Основните методи за лабораторна диагностика на ХИВ инфекцията: имунно блотиране

СПИН, чиято диагноза и лечение са тясно свързани, се открива по няколко начина наведнъж. Както бе споменато по-горе, един тест ELISA не е достатъчен, за да се определи окончателно диагнозата. Диференциалната диагноза на ХИВ инфекцията в този случай се допълва от имуноблотинг. В съвременната медицина се нарича окончателен потвърдителен метод за диагностика. За изследване в този случай се използват протеини, съдържащи се в кръвта на пациента. Те се отделят в специален гел, след което лаборантите имат възможност да изследват молекулярния състав на кръвта.

Времето за диагностициране на ХИВ с този метод е от един до три дни. За изследване се взема кръв от вената на субекта, която се поставя върху тестер с гел. Резултатът, който се поставя под въпрос, може да възникне по време на бременност, наличие на онкологични процеси, туберкулоза. Фалшиво отрицателна реакция на теста може да възникне, ако изследването е проведено неправилно и ако е извършено твърде рано. От момента на заразяването трябва да минат поне три седмици. В крайна сметка, след колко време се диагностицира ХИВ, това пряко зависи от състоянието на имунитета.

Други методи за диагностициране на СПИН и ХИВ

Методите за радиационна диагностика при СПИН се използват, като правило, в терминални или вторични стадии. С тяхна помощ е възможно да се установят промени, които настъпват в тялото поради вторични заболявания или опортюнистични инфекции.

Биорезонансната диагностика на ХИВ, която също се нарича нелинейно сканиране, се използва главно в частни клиники за откриване на вируса на имунната недостатъчност. Официалната медицина смята този метод за недостатъчно точен и ефективен. Може би подобряването на нелинейната диагностика в бъдеще ще направи възможно идентифицирането на тази ужасна диагноза още в инкубационния период.

Диагностика на HIV инфекция: серологичен метод и неговите характеристики

Това е сравнително нова техника, при която лабораторните критерии за диагностициране на HIV инфекцията се основават на принципа антиген-антитяло. В случай на вируса на имунната недостатъчност, има търсене на антитела срещу вируса в човешкото тяло. За това се използва изкуствено получен антиген, на който антителата трябва да реагират. Специфичните серологични маркери на HIV инфекцията причиняват специфични промени в състава на кръвта. Трябва да се отбележи, че този метод на изследване е най-ефективен в острия стадий, който завършва със сероконверсия. Следва асимптоматичен латентен период, през който не е лесно да се открие антигенът.

Референтна диагностика на HIV инфекция: описание и характеристики

Референтните стойности на ХИВ се считат за най-точни при идентифициране на диагнозата. Този метод на изследване съчетава теста ELISA и имунен блотинг. Референтната лаборатория за диагностика на ХИВ позволява вземане на проби и последваща обработка едновременно по два начина. Това ви позволява да получите най-точния резултат в рамките на един ден. Повторна проверка на анализа, получен в референтната лаборатория, е необходима само ако данните от теста ELISA и имунния блот си противоречат. Това е доста рядко явление, което най-често се среща при хора с гореописаните съпътстващи заболявания.