Procedura de determinare a grupelor de sânge cu ajutorul sistemului ABO constă în identificarea antigenelor A și B din eritrocite folosind anticorpi standard și utilizarea aglutininelor în plasma sau serul sângelui analizat cu eritrocite standard. Tehnica a fost dezvoltată la începutul secolului al XX-lea și este încă folosită activ în medicină. Determinarea antigenelor A și B se realizează datorită ciclonilor anti-A și anti-B.

Noțiuni de bază

La donatori nu se determină întotdeauna antigenele din eritrocite, ci și aglutininele din ser (plasmă) folosind eritrocite standard. Sângele venos este folosit ca biomaterial. Înainte de test, trebuie să renunți la alimentele grase cu o zi înainte de test și să nu fumezi cu o jumătate de oră înainte de a face testul. Grupele de sânge sunt determinate de două ori: mai întâi în departamentul medical, unde este pregătit materialul, apoi confirmate prin cercetări în laborator.

Determinarea grupelor sanguine folosind sistemul ABO este principalul test utilizat în transfuziologie. De asemenea, unele animale au un sistem similar de grupe sanguine, cum ar fi cimpanzeii, gorilele și bonoboi.

Istoria descoperirii

Există o opinie general acceptată în știință că metoda de determinare a grupelor de sânge folosind sistemul ABO a fost identificată pentru prima dată de Karl Landsteiner, un om de știință austriac, în 1900. Apoi a descris în lucrarea sa trei tipuri de antigene. Pentru aceasta, treizeci de ani mai târziu a primit Premiul Nobel pentru Medicină și Fiziologie. Datorită faptului că înainte nu existau legături strânse între oamenii de știință, s-a stabilit ulterior că serologul ceh Jan Jansky, indiferent de cercetările lui K. Landsteiner, a fost primul care a descris cele patru grupe sanguine umane, dar cercetările sale nu au fost cunoscut unui public larg. În prezent, clasificarea elaborată de J. Jansky este folosită în Rusia și în republicile fostei URSS. În SUA, W. L. Moss și-a creat lucrarea similară în 1910.

Metodă de determinare a grupelor sanguine conform sistemului ABO folosind zoliclone

Grupa de sânge trebuie determinată într-o cameră cu iluminare bună, menținând un interval de temperatură de la 15 la 25 de grade Celsius, deoarece abaterile de la această normă pot afecta rezultatele studiului. Inițialele și numele pacientului sunt scrise pe placă sau farfurie. De la stânga la dreapta sau într-un cerc, sunt aplicate denumirile de grup standard (O(I), A(II), B(III)). Serurile corespunzătoare sunt plasate picătură cu picătură sub ele folosind pipete separate pentru fiecare tip. Sângele pacientului este apoi adăugat la ele. Materialul pentru studiu este luat de pe lobul urechii sau de pe deget. Acest lucru este cerut de tehnica de determinare a grupei sanguine folosind sistemul ABO.

De asemenea, este legal să folosiți celule roșii din sânge care se află într-o eprubetă după ce s-a format un cheag. Este necesar ca cantitatea de ser să fie de zece ori mai mare decât cantitatea de sânge adăugată. După aceasta, picăturile sunt amestecate cu baghete de sticlă (separat pentru fiecare). Timp de cinci minute, scuturând ușor farfuria, urmăriți apariția unei reacții de hemaglutinare. Se dezvăluie prin apariția unor mici bulgări roșii, care apoi se contopesc în altele mai mari. Serul își pierde aproape complet culoarea în acest moment.

Pentru a elimina hemaglutinarea falsă a simplei aderențe a globulelor roșii, trebuie să adăugați o picătură de ser fiziologic după trei minute și să verificați dacă aglutinarea persistă. Dacă da, atunci este adevărat. Gata, determinarea grupelor de sânge conform sistemului ABO este completă.

Interpretarea rezultatelor

Ca urmare, pot fi observate patru reacții:

• aglutinarea nu are loc cu niciunul dintre seruri - primul grup O(I);
• reacția a apărut cu serurile I(ab) și III(a) - al doilea grup A(II);
• aglutinarea are loc cu serurile I(ab) și II(b) - a treia grupă B(III);
• dacă reacția are loc cu trei seruri, trebuie să efectuați o procedură suplimentară cu reactivi din grupa AB (IV), care sunt standard; dacă nu există aglutinare într-o astfel de picătură, putem presupune că aceasta este a 4-a grupă de sânge AB (IV).

Metoda expresă pentru factorul Rh

Metoda de determinare a grupelor de sânge folosind sistemul ABO presupune detectarea simultană a factorului Rh (Rh).

Suprafața plăcii este pre-umedată și pe ea sunt scrise „ser de control” și „ser anti-rhesus”. Apoi, una sau două picături din reactivii necesari sunt plasate sub inscripții și materialul analizat este adăugat la acestea. Pentru aceasta, puteți folosi și sânge de la un deget (în aceeași cantitate cu volumul de ser) sau globule roșii rămase în partea inferioară a tubului după apariția cheagului (jumătate din volumul de ser). Alegerea materialului nu afectează rezultatul final. Apoi sângele și serul sunt amestecate cu o baghetă de sticlă uscată, după care reacția este așteptată timp de cinci minute. Pentru a elimina citirile false, se adaugă o soluție izotonică de clorură de sodiu (doar câteva picături) după trei până la patru minute. Determinarea grupei sanguine în funcție de sistemele ABO și Rh se efectuează foarte des.

Dacă are loc aglutinarea globulelor roșii într-o picătură de ser, aceasta indică sânge Rh pozitiv. Potrivit statisticilor, Rh+ apare la 85% din populația lumii. Absența lui ne permite să vorbim despre afilierea Rh negativ. Dacă în serul de control apare aglutinarea, înseamnă că a devenit inutilizabilă. Din păcate, algoritmul pentru determinarea grupei sanguine folosind sistemul ABO nu funcționează întotdeauna perfect.

Ce greșeli se pot face cu această tehnică?

Inexactitățile în a determina dacă sângele aparține unui anumit grup depind de următoarele motive:

• Tehnic.
• Specificitatea biologică a sângelui testat.
• Inferioritatea serurilor standard și a eritrocitelor.

Erori tehnice

Posibile erori la determinarea grupei sanguine ABO folosind metoda încrucișată:

Erori de specificitate biologică

Erorile asociate cu specificitatea biologică a sângelui analizat sunt împărțite în două tipuri.

• În funcție de caracteristicile globulelor roșii.
• Erori cauzate de caracteristicile biologice ale serului.

Să ne uităm la fiecare tip mai detaliat.

În funcție de caracteristicile globulelor roșii

• Aglutinare târzie, explicată prin forme „slabe” de globule roșii și antigene. Pentru a evita erorile, este necesar să se determine grupa sanguină a donatorilor și a primitorilor folosind globule roșii standard. Aglutinogenul A2 trebuie identificat prin repetarea studiului cu alte tipuri de reactivi și alte articole din sticlă, mărind timpul de înregistrare a reacției.
• „Panaglutinarea” („autoaglutinarea”) este capacitatea sângelui de a prezenta aceeași reacție de natură nespecifică cu toate serurile, inclusiv cu ale sale. După cinci minute, severitatea unei astfel de aglutinari slăbește, deși ar trebui să crească. Cazuri similare sunt observate la bolnavii de cancer, bolnavii de arsuri etc. Ca control, este necesar să se evalueze manifestarea aglutinarii eritrocitelor analizate în ser standard al grupului al patrulea și soluție salină. Cu „panaglutinare”, grupa sanguină este determinată ca urmare a spălării triple a globulelor roșii. Dacă nu dă rezultatul dorit, merită să reluați o probă de sânge într-o eprubetă încălzită înainte de procedură și să puneți proba într-un recipient termic pentru a ajuta la menținerea unei temperaturi de 37 de grade Celsius sau mai mare. Apoi trebuie dus la laborator, unde se menține temperatura de mai sus și se utilizează soluție salină încălzită, placă și reactivi.

• Uneori, globulele roșii din sângele analizat sunt aranjate ca „coloane de monede” și pot fi confundate cu aglutinați. Dacă adăugați două picături dintr-o soluție izotonă și balansați ușor placa, globulele roșii se vor muta în poziția corectă.
• Aglutinare incompletă sau mixtă, care apare la pacienții cu grupa a doua, a treia și a patra ca urmare a transplantului de măduvă osoasă sau în primele trei luni după transfuzia de sânge 0(I).

Datorită caracteristicilor biologice ale serului

Erori asociate cu utilizarea globulelor roșii standard defecte și a serurilor

Serurile slabe care au depășit data de expirare sau au un titru mai mic de 1:32 sunt capabile să genereze aglutinare slabă și târzie. Utilizarea unor astfel de reactivi este inacceptabilă.

Utilizarea de eritrocite sau seruri standard inutilizabile, preparate în condiții sterile și insuficient conservate, duce la apariția aglutinarii „bacteriene”, care este de natură nespecifică.

Există multe presupuneri populare despre grupele de sânge ABO care au apărut imediat după descoperirea sa în diferite culturi ale lumii. De exemplu, în anii 30 ai secolului trecut, în Japonia și în alte țări, o teorie care leagă tipul de sânge cu unul sau altul tip de personalitate a câștigat popularitate. Teorii similare sunt încă populare astăzi.

Există, de asemenea, o părere că o persoană cu grupa A este predispusă la mahmureală severă, O este asociat cu dinți buni, iar grupul A2 este asociat cu cel mai înalt nivel de IQ. Dar astfel de afirmații nu au fost dovedite științific.

Am examinat determinarea grupelor de sânge conform sistemului ABO folosind seruri standard.

În zilele noastre, medicina a atins cote mari. Medicii sunt capabili să efectueze operații lungi și să salveze oamenii chiar și din situațiile cele mai aparent fără speranță în ceea ce privește supraviețuirea. Cu toate acestea, în astfel de cazuri trebuie să se confrunte cu problema nevoii de transfuzie de sânge. Multă vreme acest lucru nu a fost fezabil din cauza faptului că pacienții au murit foarte repede. Dar această problemă a fost rezolvată prin descoperirea conceptului de grupe sanguine, sau mai degrabă detectarea antigenelor pe eritrocite și, la rândul lor, a anticorpilor în plasma sanguină.

La începutul secolului al XX-lea, medicul australian și om de știință cu normă parțială K. Landsteiner a descoperit prezența antigenelor și anticorpilor în sânge. Antigenele se găsesc pe suprafața globulelor roșii. Există 2 tipuri de ele. Pentru simplitate, biologii le-au desemnat ca A și B. La rândul lor, anticorpii sunt conținuti în plasma sanguină și se numesc α și β. Dacă A este conectat la α și B la β, procesul de coagulare a sângelui va începe. Această reacție se numește hemaglutinare.

Astfel, din seturile disponibile de antigeni și anticorpi, este posibil să se creeze 4 tipuri de sânge, prezentate în tabelul de mai jos:

Important!În funcție de tipul de sânge de la donator este furnizat pentru transfuzie, sângele pacientului fie se coagulează, fie nu. Primul caz este fatal.

Seruri pentru reacție

În prezent, există un număr destul de mare de moduri de a determina grupa de sânge. Dar cele mai multe dintre ele sunt concepute pentru analize în laboratoare mari. Cu toate acestea, chiar dacă vă aflați într-un sat mic sau într-un loc în care nu există nicio modalitate de a contacta astfel de instituții, rămâne în continuare posibilitatea de a vă identifica numărul grupei de sânge.

Determinarea grupei sanguine se realizează folosind patru seruri standard speciale, care vor fi făcute din sânge uman. Sunt disponibile fie în sticle, fie în fiole de 2-5 ml și corespund diferitelor grupe de sânge:

1. 0. Vine cu o etichetă albă și este transparent la culoare.
2. A. Lichid albastru. Două dungi albastre sunt aplicate pe sticlă.
3. B. Lichid roz pal. Pe sticlă sunt trei dungi de aceeași culoare.
4. AB. Lichid galben. Sticla are 4 dungi de aceeași culoare.

Important! De fapt, acești reactivi sunt incolori atunci când sunt fabricați. Sunt vopsite special, astfel încât să fie imposibil să le confundați atunci când le folosiți.

De asemenea, pe etichete sunt:

• titrul;
• data fabricatiei;
• cel mai bun înainte de data;
• informații despre producător;
• număr de serie.

Cum se determină grupa de sânge?

Pentru a vă determina grupa de sânge veți avea nevoie de:

• placă plană cu 8 adâncituri;
• tije de sticlă sau pipete - 8 bucăți;
• 2 seturi de seruri de diferite serii pentru a elimina posibilitatea erorilor;
• obișnuit sau clepsidră.

Serurile se pun pe 2 rânduri pe o farfurie plată, după care se iau baghete de sticlă. Cu ajutorul lor, sângele testat este introdus în rânduri. Ea se amestecă cu aceste bețișoare, după care farfuria începe să se legănească. Dacă aveți noroc, procesul poate fi monitorizat în 10-30 de secunde, dar este mai bine să faceți acest lucru timp de până la 5 minute pentru a elimina posibilitatea unei reacții lente. Apoi rezultatele obținute sunt studiate și descifrate.

Atenţie!În primul rând, ar trebui să acordați atenție cănilor în care a fost turnat serul grupelor II și III de sânge. Interesantă este prezența unor fulgi mici care apar ca urmare a aglutinarii - aglomerarea globulelor roșii.

1. Dacă nu există fulgi nici în II, nici în III, iar în timpul unei verificări suplimentare, nimic nu s-a coagulat nici în I, nici în IV, atunci există o primă grupă de sânge.
2. Dacă, ca urmare, coagularea este observată peste tot, cu excepția serului din grupa II, atunci sângele testat aparține celui de-al doilea grup.
3. Dacă se observă coagulare în toate probele, cu excepția serului din grupa III, atunci sângele testat aparține grupului cu același nume.
4. Dacă coagularea a avut loc în toate probele, cu excepția serului din grupa IV, atunci a fost analizată grupa sanguină cu același nume.

Important! Strict vorbind, grupa sanguină poate fi determinată având doar seruri din grupele de sânge 2 și 3. Cu toate acestea, după cum se poate concluziona din esența metodei, există o mare influență a factorului uman. Din acest motiv, serurile din grupele sanguine I și IV sunt folosite ca test suplimentar.

După procedură, ustensilele folosite trebuie clătite bine cu apă caldă și uscate. Apoi poate fi folosit pentru cercetări ulterioare.

Rezultate inexacte și motivele acestora

Uneori se întâmplă ca cheaguri de globule roșii lipite împreună să nu fie foarte vizibile. O soluție izotonică de clorură de sodiu poate fi adesea adăugată în timpul testării. Elimină posibilitatea unei false aglutinari, determinând fulgii care nu au rezultat din procesul de coagulare să se prăbușească înapoi.

Important! Dacă rezultatul analizei nu este foarte clar vizibil, acesta trebuie refăcut și se folosește un microscop pentru a examina aglutinarea fină.

În cazul unui rezultat clar identificat, puteți spune imediat pacientului cu exactitate grupa lui de sânge. În caz contrar, ar trebui să apelați la alte metode de analiză.

Nu ar trebui să uităm de posibilitatea apariției erorilor, care apar de obicei din următoarele motive:

• utilizarea de zer expirat sau slab;
• utilizarea prea mult sânge de testare în raport cu volumul ser;
• reacția durează mult mai mult decât este cerut de reglementări;
• temperatura ambientală nu corespunde normalului, rezultând aglutinarea la rece a globulelor roșii.

În plus, este de remarcat faptul că, în timpul procesului de uscare, se pot forma zone granulare de-a lungul marginilor amestecului de ser și sânge de testare, care nu pot servi ca indicatori ai unei reacții.

Folosind rezultatul în practică

După cum sa menționat deja, determinarea grupei de sânge este efectuată pentru a exclude decesul în timpul transfuziei de sânge. În mod ideal, pacientul care primește sânge - primitorul - ar trebui să primească o transfuzie de sânge de același tip cu al său. Cu toate acestea, acest lucru nu este întotdeauna cazul. Numai pentru că numărul copleșitor de oameni cu prima grupă de sânge este de 50%. În același timp, sunt donatori universali, deoarece le lipsesc aglutinogenii care stimulează procesul de coagulare a sângelui.

Atenţie!În ceea ce privește pacienții cu grupa de sânge IV, aceștia pot fi numiți destinatari universali, deoarece corpul lor este capabil să accepte sânge din orice grup. În același timp, sângele lor nu poate fi transfuzat reprezentanților altui grup.

Pentru a ilustra compatibilitatea donatorilor și beneficiarilor, prezentăm un tabel:

Număr de grup	Pentru ce grupuri devine donator?	Pentru ce grupuri devine destinatar?
eu	I, II, III, IV	eu
II	II, IV	I, II
III	III, IV	I, III
IV	IV	I, II, III, IV

În lumea modernă, cunoașterea grupului de sânge este vitală. Din punctul de vedere al medicilor, de asta va depinde rata de supraviețuire a pacienților. Din punctul de vedere al oamenilor obișnuiți, aceasta este o șansă de a-și salva viața în caz de urgență. În acest sens, nu va fi de prisos să vă cunoașteți grupa de sânge și, dacă este posibil, să o introduceți în pașaport sau în alte documente, deoarece în orice moment poate apărea un risc pentru sănătate și viață.

Video - Determinarea grupei sanguine

Video - Determinarea tipului de sânge și a factorului Rh

Grupele sanguine AB0

Grupele sanguine ale sistemului AB0 au fost descoperite în 1900 de K. Landsteiner, care, prin amestecarea globulelor roșii ale unor indivizi cu serul sanguin al altor indivizi, a descoperit că la unele combinații sângele se coagulează, formând fulgi (reacție de aglutinare) , dar cu altele nu. Pe baza acestor studii, Landsteiner a împărțit sângele tuturor oamenilor în trei grupe: A, B și C. În 1907, a fost descoperită o altă grupă de sânge.

S-a constatat că reacția de aglutinare are loc atunci când antigenele unei grupe de sânge (se numesc aglutinogeni), care se găsesc în celulele roșii din sânge - eritrocite, se lipesc împreună cu anticorpii dintr-un alt grup (se numesc aglutinine) care se găsesc în plasmă - partea lichidă a sângelui. Împărțirea sângelui conform sistemului AB0 în patru grupe se bazează pe faptul că sângele poate conține sau nu antigene (aglutinogeni) A și B, precum și anticorpi (aglutinine) α (alfa sau anti-A) și β (beta sau anti-B).

Prima grupă sanguină - 0 (I)

Grupa I - nu conține aglutinogeni (antigeni), dar conține aglutinine (anticorpi) α și β. Este desemnat 0 (I). Deoarece acest grup nu conține particule străine (antigene), poate fi transfuzat tuturor oamenilor. O persoană cu această grupă de sânge este un donator universal.

A doua grupă sanguină A β (II)

Grupa II conține aglutinogen (antigen) A și aglutinină β (anticorpi la aglutinogenul B). Prin urmare, poate fi transfuzat numai acelor grupări care nu conțin antigenul B - acestea sunt grupele I și II.

A treia grupă sanguină Bα (III)

Grupa III conține aglutinogen (antigen) B și aglutinină α (anticorpi la aglutinogenul A). Prin urmare, poate fi transfuzat numai la acele grupări care nu conțin antigenul A - acestea sunt grupele I și III.

A patra grupă de sânge AB0 (IV)

Grupa sanguină IV conține aglutinogeni (antigeni) A și B, dar conține aglutinine (anticorpi). Prin urmare, poate fi transfuzat doar celor care au aceeași grupă de sânge, a patra. Dar, deoarece în sângele unor astfel de persoane nu există anticorpi care să se lipească împreună cu anticorpii introduși din exterior, aceștia pot fi transfuzați cu sânge de orice grup. Persoanele cu grupa de sânge IV sunt primitori universali.

Grupele sanguine conform sistemului ABO

Metoda de determinare a grupelor sanguine

Grupa sanguină conform sistemului ABO se determină folosind reacția de aglutinare. În prezent, există trei moduri de a determina grupele de sânge folosind sistemul ABO:

Conform serurilor izohemaglutinante standard;

Folosind anticorpi monoclonali (colicloni anti-A și anti-B).

Determinarea grupelor sanguine folosind seruri izohemaglutinante standard

Esența metodei este detectarea antigenelor de grup A și B în sângele testat folosind seruri standard. În aceste scopuri se utilizează reacția de aglutinare. Testul trebuie făcut într-o cameră cu iluminare bună la o temperatură de 15-25 ° C.

Pentru a efectua testul aveți nevoie de: - Seruri izohemaglutinante standard din grupele O (I), A (II), B (III) și AB (IV) din două serii diferite. Serurile pentru determinarea grupelor de sânge sunt preparate din sângele donatorului în laboratoare speciale. Serurile se pastreaza la frigider la o temperatura de 4 - 8° C. Data de expirare a serului este indicata pe eticheta. Eticheta indică și titrul (diluția maximă a serului la care poate apărea o reacție de aglutinare), care nu trebuie să fie mai mic de 1: 32 (pentru serul B (III) - nu mai mic de 1:16 / 32). Zerul trebuie să fie transparent, fără semne de putrezire. Pentru comoditate, serurile standard sunt colorate într-o anumită culoare: O (I) - incolor (gri), A (II) - albastru, B (III) - roșu, AB (IV) - galben strălucitor. Aceste culori însoțesc toate etichetele de pe produsele din sânge care au o afiliere de grup (sânge, globule roșii, plasmă etc.).

Farfurii albe de portelan sau email sau alte farfurii cu suprafata umezibila, marcate in functie de grupele sanguine.

Soluție izotonică de clorură de sodiu.

Ace, pipete, baghete de sticlă (lame).

Tehnica reacției.

1. Sub denumirile corespunzătoare ale grupului de sânge, serul grupelor I, II, III este aplicat pe o placă (placă) într-un volum de 0,1 ml (o picătură mare cu un diametru de aproximativ 1 cm). Pentru a evita greșelile, se aplică două serii de seruri, deoarece una dintre serii poate avea activitate scăzută și să nu dea o aglutinare clară. Astfel, se obțin 6 picături, formând două rânduri de trei picături în următoarea ordine de la stânga la dreapta: 0 (I), A (II), B (III).

2. Sângele pentru cercetare este luat dintr-un deget sau dintr-o venă. Folosind o baghetă de sticlă uscată, 6 picături de sânge de testat, de dimensiunea aproximativă a unui cap de ac de 0,01 ml (picătură mică), sunt transferate succesiv pe placă în 6 puncte, fiecare lângă o picătură de ser standard. Mai mult, cantitatea de ser ar trebui să fie de 10 ori mai mare decât cantitatea de sânge testată. Apoi se amestecă cu grijă împreună folosind baghete de sticlă cu margini rotunjite.

Este posibilă și o tehnică mai simplă: pe o farfurie se aplică o picătură mare de sânge, apoi se ia de acolo cu colțul unei lame de sticlă și se transferă fiecare picătură de ser, amestecând-o cu grijă cu ultima. În acest caz, sângele se ia de fiecare dată cu un colț curat al paharului, având grijă ca picăturile să nu se amestece.

3. După ce amestecați picăturile, agitați periodic farfuria. Aglutinarea începe în primele 10-30 de secunde. Dar observația trebuie efectuată timp de cel puțin 5 minute, deoarece este posibilă aglutinarea ulterioară, de exemplu cu celule roșii din grupa A 2 (II).

4. Se adaugă o picătură de soluție izotonică de clorură de sodiu la acele picături în care a avut loc reacția, după care se evaluează rezultatele reacției.

Reacția de aglutinare poate fi pozitivă sau negativă

Dacă reacția este pozitivă, în primele 10-30 de secunde, în amestec se observă boabe mici roșii (aglutinate), formate din globule roșii lipite, vizibile cu ochiul liber. Boabele mici se contopesc treptat în boabe mai mari sau chiar în fulgi de formă neregulată. Într-o reacție negativă, picătura rămâne uniform colorată în roșu.

Rezultatele reacțiilor a două serii în picături cu ser din aceeași grupă trebuie să coincidă.

Apartenența sângelui testat la grupul corespunzător este determinată de prezența sau absența aglutinarii la reacția cu serurile corespunzătoare.

Dacă toate serurile au dat o reacție pozitivă, atunci sângele testat conține ambii aglutinogeni - A și B. Dar în astfel de cazuri, pentru a exclude o reacție de aglutinare nespecifică, trebuie efectuat un test suplimentar de control al sângelui testat cu ser standard. din grupa AB (IV).

Determinarea grupelor sanguine cu ajutorul anticorpilor monoclonali

Pentru a determina grupele de sânge folosind această metodă, se folosesc anticorpi monoclonali, care sunt obținuți folosind biotehnologia hibridomului.

Hibridomul este un hibrid celular format prin fuziunea unei celule de măduvă osoasă (mielom) cu un limfocit imunitar care sintetizează anticorpi monoclonali specifici. Hibridomul are capacitatea de a crește nelimitat, este caracteristic unei celule tumorale și are capacitatea inerentă a unui limfocit de a sintetiza anticorpi.

Au fost dezvoltați reactivi standard: anticorpi monoclonali (mAbs): coliclone anti-A și anti-B, utilizate pentru determinarea aglutinogenilor eritrocitari. Zoliclonele sunt pulbere liofilizată de culoare roșie (anti-A) și albastră (anti-B), care este diluată cu soluție izotonică de clorură de sodiu imediat înainte de probă.

Tehnică.

Zoliclonele anti-A și anti-B se aplică pe o tabletă albă, o picătură mare (0,1 ml) sub inscripțiile corespunzătoare: anti-A sau anti-B. O picătură mică de sânge de testat trebuie aplicată lângă picăturile de anticorpi. După amestecarea componentelor, se observă reacția de aglutinare timp de 2-3 minute. Evaluarea rezultatelor este foarte simplă.

Determinarea grupei sanguine poate fi însoțită de erori care duc la interpretarea incorectă a rezultatelor. Se pot distinge trei grupe principale de erori: erori asociate cu reactivi de calitate scăzută; erori tehnice; erori asociate caracteristicilor Schema de evaluare a rezultatelor determinării grupelor sanguine cu ajutorul anticorpilor monoclonali (colicloni anti-A și anti-B) ai sângelui testat. Primele două pot fi evitate respectând cu strictețe cerințele descrise mai sus pentru ser, condiții de reacție etc. Al treilea grup este asociat cu fenomenul de panaglutinare nespecifică (fenomenul Thomsen), a cărui esență este că serul la temperatura camerei aglutinează cu toate globulele roșii, chiar și cu propriile lor (autoaglutinare), și eritrocitele în același timp dau aglutinare cu toate serurile, chiar și cu ser din grupa AB. Un fenomen similar a fost descris într-o serie de boli: boli de sânge, splenomegalie, ciroză hepatică, boli infecțioase etc. Panaglutinarea și autoaglutinarea la oameni sănătoși au fost, de asemenea, descrise.

Fenomenul de panaglutinare si autoaglutinare se observa doar la temperatura camerei. Dacă determinarea apartenenței la grup se efectuează la o temperatură de 37 ° C, acestea dispar.

Trebuie amintit cu strictețe că în toate cazurile de rezultate neclare sau îndoielnice, grupele de sânge ar trebui să fie redeterminate folosind seruri standard din alte serii, precum și într-o manieră transversală.

Numeroase studii au arătat că sângele poate conține diverse proteine ​​(aglutinogeni și aglutinine), a căror combinație (prezență sau absență) formează patru grupe sanguine.
Fiecare grup are un simbol: 0 ( eu), A (II),ÎN (III),AB(IV).
S-a stabilit că numai sânge de același tip poate fi transfuzat. În cazuri excepționale, când nu există sânge din același grup și transfuzia este vitală, este permisă transfuzia de sânge dintr-un grup diferit.În aceste condiții, sângele este 0 ( eu) poate fi transfuzat la pacienții cu orice grupă de sânge și la pacienții cu sânge AB(IV) grup, sângele donatorului din orice grup poate fi transfuzat.

Prin urmare, înainte de a începe o transfuzie de sânge, este necesar să se determine cu exactitate grupa de sânge a pacientului și tipul de sânge care este transfuzat.

Determinarea grupei sanguine.

Pentru determinarea grupei sanguine se folosesc seruri standard de grup 0 ( eu), A (II),ÎN (III), care sunt special pregătite în laboratoarele staţiilor de transfuzie de sânge.
Numerele sunt așezate pe o farfurie albă la o distanță de 3-4 cm de la stânga la dreapta. eu, II, III, desemnând seruri standard. O picătură de ser standard 0( eu) se aplică cu o pipetă grupele pe sectorul plăcii indicat prin număr eu; apoi se aplică o picătură de ser cu o a doua pipetă A (II) grupuri după număr II; iau si zer ÎN (III) grup și a treia pipetă - aplicată sub număr III.

Apoi persoana examinată este înțepată de deget și, cu o baghetă de sticlă, sângele care curge este transferat într-o picătură de ser situată pe o farfurie și amestecată până când culoarea este uniformă. Un nou stick este transferat în fiecare ser de sânge. După 5 minute de la momentul colorării (după ceas!) grupa sanguină este determinată de modificarea amestecului. În serul în care are loc aglutinarea (lipirea globulelor roșii) apar boabe și aglomerări roșii clar vizibile; in ser, unde nu are loc aglutinarea, picatura de sange va ramane omogena, uniform colorata roz.

În funcție de tipul de sânge al persoanei examinate, aglutinarea va avea loc în anumite probe. Dacă subiectul are 0 ( eu) grupa sanguină, atunci globulele roșii nu se vor lipi împreună cu niciun ser.
Dacă subiectul are A (II) grupa sanguină, atunci aglutinarea nu va avea loc numai cu serul grupului A (II), iar dacă subiectul are B (III) grup, atunci nu va exista aglutinare cu serul B (III). Aglutinarea se observă cu toate serurile dacă sângele testat este AB(IV) grupuri.

Factorul Rh.

Uneori, chiar și cu o transfuzie de sânge din același grup, se observă reacții severe. Studiile au stabilit că aproximativ 15% dintre oameni nu au o proteină specială în sânge, așa-numitul factor Rh.

Dacă acestor persoane li se administrează o transfuzie repetată de sânge care conține acest factor, va apărea o complicație severă numită conflict Rh și se va dezvolta șoc. Prin urmare, în prezent, tuturor pacienților li se cere să li se determine factorul Rh, deoarece un primitor cu un factor Rh negativ poate fi transfuzat doar cu sânge Rh negativ.

O metodă accelerată pentru determinarea stării Rh.Aplicați 5 picături de ser anti-Rh din același grup ca și recipientul pe o cutie Petri de sticlă. O picătură din sângele subiectului este adăugată în ser și amestecată bine. Vasul Petri se pune într-o baie de apă la o temperatură de 42-45°C. Rezultatele reacției sunt evaluate după 10 minute. Dacă are loc aglutinarea sângelui, atunci subiectul are sânge Rh pozitiv (Rh+); dacă nu există aglutinare, atunci sângele testat este Rh negativ (Rh-).
Au fost dezvoltate o serie de alte metode pentru determinarea factorului Rh, în special folosind reactivul universal anti-Rhesus D.

Este obligatoriu să se determine grupa sanguină și statusul Rh al tuturor pacienților din spital. Rezultatele studiului trebuie incluse în pașaportul pacientului.

În medicina modernă, o grupă sanguină caracterizează un set de antigeni localizați pe suprafața globulelor roșii, care determină specificitatea acestora. Există un număr mare de astfel de antigeni (de obicei se folosește un tabel de grupe de sânge cu diverși antigeni), dar determinarea grupului de sânge se realizează peste tot folosind clasificarea în funcție de factorul Rh și sistemul AB0.

Determinarea unui grup este o procedură obligatorie atunci când vă pregătiți pentru orice operațiune. O astfel de analiză este necesară și la intrarea în serviciu în anumite contingente, inclusiv în armată, angajați ai organelor de afaceri interne și agenții de aplicare a legii. Acest eveniment se desfășoară din cauza riscului crescut de apariție a unei afecțiuni care pune viața în pericol pentru a reduce timpul necesar pentru acordarea asistenței sub formă de transfuzie de sânge.

Compoziția sângelui din diferite grupe de sânge

Esența sistemului AB0 este prezența structurilor antigenelor pe globulele roșii. Nu există anticorpi tipici corespunzători (gamma globuline) în plasmă. Prin urmare, reacția „antigen + anticorp” poate fi folosită pentru a testa sângele.

Celulele roșii din sânge se lipesc împreună atunci când antigenul și anticorpul se întâlnesc. Această reacție se numește hemaglutinare. Reacția apare ca fulgi mici atunci când este testată. Studiul se bazează pe obținerea de imagini de aglutinare cu ser.

Antigenele globulelor roșii „A” se leagă de anticorpii „ά”, precum și „B” de „β”.

Următoarele grupe de sânge se disting după compoziție:

• I (0) – ά, β - suprafața eritrocitelor nu conține deloc antigene;
• II (A) – β - există antigen A și anticorp β la suprafață;
• III (B) – ά - suprafața conține B cu un anticorp de tip ά;
• IV (AB) – 00 - suprafața conține ambii antigeni, dar nu are anticorpi.

Fătul are deja antigene în stare embrionară, iar aglutininele (anticorpii) apar în prima lună de viață.

Metode de determinare

Metoda standard

Există multe tehnici, dar testele de laborator folosesc de obicei seruri standard.

Metoda serică standard este utilizată pentru a determina tipurile de antigene AB0. Compoziția serului izohemaglutinant standard conține un set de anticorpi la moleculele de celule roșii din sânge.În prezența unui antigen care este susceptibil la acțiunea anticorpilor, se formează un complex antigen-anticorp, care declanșează o cascadă de reacții imune.

Rezultatul acestei reacții este aglutinarea celulelor roșii din sânge; pe baza naturii aglutinării care are loc, este posibil să se determine dacă proba aparține vreunui grup.

Pentru a prepara serul standard, se utilizează sânge donator și un anumit sistem - prin izolarea plasmei, inclusiv a anticorpilor, și diluarea ulterioară a acestuia. Diluarea se realizează folosind soluție izotonică de clorură de sodiu.

Creșterea se face după cum urmează:

Cercetarea în sine se desfășoară după cum urmează:

1. O picătură din fiecare ser (cu un volum total de aproximativ 0,1 mililitri) se pune pe o tabletă specială pe zona în care există un semn corespunzător (se folosesc 2 probe, una dintre ele este un control, a doua este destinată cercetării) .
2. Apoi, lângă fiecare picătură de ser, se pune o probă de test în volum de 0,01 mililitri, după care se amestecă separat cu fiecare diagnosticum.

Reguli pentru decodarea rezultatelor

După cinci minute, puteți evalua rezultatele studiului. În picături mari de ser, are loc limpezirea; în unele se observă o reacție de aglutinare (se formează fulgi mici), în altele - nu.

Video: Determinarea grupei sanguine și a factorului Rh

Iată opțiunile posibile:

• Dacă nu există reacție de aglutinare în ambele probe cu serul II și III (+ control 1 și IV) - determinarea primului grup;
• Dacă se observă coagulare în toate probele cu excepția II, se determină a doua;
• În absența unei reacții de aglutinare numai într-o probă din grupa III - determinarea III;
• Dacă se observă coagulare în toate probele, inclusiv în controlul IV, determinați IV.

Când serurile sunt aranjate în ordinea corectă și etichetate pe farfurie, este ușor de navigat: grupul corespunde unor locuri fără aglutinare.

În unele cazuri, legătura nu este clar vizibilă. Apoi analiza trebuie refăcută; se observă o aglutinare fină la microscop.

Metoda reacției încrucișate

Esența acestei tehnici este de a determina aglutinogeni folosind seruri standard sau coliclone cu determinarea paralelă a aglutininelor folosind eritrocite standard.

Tehnica analizei transversale nu este practic diferită de studiul cu ser, dar există câteva completări.

Este necesar să adăugați o picătură de globule roșii standard în placa de sub ser. Apoi, dintr-o eprubetă cu sângele pacientului, care a trecut printr-o centrifugă, plasma este extrasă cu o pipetă, care este plasată cu globule roșii standard, care sunt situate în partea de jos - adăugată la serul standard.

La fel ca în tehnica standard, rezultatele studiului sunt evaluate la câteva minute după începerea reacției. In cazul unei reactii de aglutinare se poate vorbi de prezenta aglutininelor AB0; in cazul unei reactii plasmatice se poate vorbi de aglutinogeni.

Rezultatele analizelor de sânge utilizând celule roșii și seruri standard:

Aglutinare;

– nu există aglutinare;

- reacția nu este efectuată.

Metoda crossover a devenit larg răspândită datorită faptului că previne erorile de diagnosticare care apar la utilizarea tehnicilor standard.

Determinarea grupei sanguine prin zoliclone

Zoliclonele sunt înlocuitori de ser sintetici care conțin înlocuitori artificiali pentru aglutininele de tipurile ά și β. Ele sunt numite erythrotests „Tsoliklon anti-A” (culoare roz), precum și „anti-B” (culoare albastră). Aglutinarea așteptată se observă între aglutininele coliclonelor și globulele roșii.

Această tehnică nu necesită două serii; este mai fiabilă și mai precisă. Efectuarea studiului și evaluarea rezultatelor acestuia se desfășoară în același mod ca și în metoda standard.

Grupa IV (AB) este confirmată în mod necesar prin aglutinarea cu coliclonă anti-AB, precum și prin absența aderenței eritrocitelor într-o soluție izotonă de clorură de sodiu.

Metoda Express folosind kitul „Erythrotest-group card”.

Deși metodele general acceptate pentru a determina dacă sângele aparține unui anumit grup sunt larg răspândite, în medicina modernă sunt introduse metode expres, dintre care cea mai comună este „Erythrotest”.

La determinarea unui grup folosind tehnica „card de grup Erythrotest”, este necesar un set de instrumente, inclusiv următoarele dispozitive:

• O tabletă cu cinci găuri pentru determinarea grupului în funcție de apartenența sa Rh și de sistemul AB0;
• Scarificator conceput pentru a obține o probă necesară cercetării;
• Tije de sticlă pentru amestecarea probelor;
• Curățați pipeta pentru colectarea soluțiilor.

Toate instrumentele enumerate sunt necesare pentru diagnosticare fără erori.

Trusa de analiză de sânge „Erythrotest-Groupcard” vă permite să studiați factorul Rh și să vă determinați grupa de sânge în orice condiții; este mai ales eficient atunci când nu este posibil să utilizați metode general acceptate.

În godeurile de pe tabletă există tsoliclone la antigene (acestea sunt tsoliclone anti-A, -B, -AB) și la antigenul principal, care determină moștenirea factorului Rh (aceasta este tsoliclonă anti-D). A cincea gaură conține un reactiv de control, care vă permite să preveniți posibile erori și să vă determinați corect grupa de sânge.

Video: Determinarea grupelor sanguine folosind zoliclone